脾虚模型脑内神经肽Y水平和基因表达变化及归脾汤的影响

目的研究脾虚模型脑内神经肽Y基因表达变化及归脾汤的影响作用。方法采用苦降泻下、饮食失节加劳倦过度法建立脾虚大鼠模型,检测下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层神经肽Y水平和基因表达变化。结果模型组NPY免疫阳性反应物在下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层明显降低;给予归脾汤的治疗组上述脑区的NPY免疫阳性反应物明显增加。模型组NPYmRNA表达在下丘脑腹侧核、前额叶皮层明显降低;治疗组上述脑区的NPY mRNA表达明显增加。结论脾虚模型学习记忆下降与脑内学习记忆有促进影响作用的神经肽Y水平和基因表达有变化,归脾汤对其有调节作用。     

脾虚模型脑内C-fos水平与C-JUNmRNA表达变化及归脾汤的影响

目的:研究脾虚模型脑内即早基因C-fos水平与C-JUNmRNA表达变化及归脾汤的影响。方法:采用苦降泻下、饮食失节加劳倦过度法建立脾虚大鼠模型,免疫组化法、原位杂交法检测下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层C-fos水平与C-JUNmRNA表达变化及归脾汤的治疗作用。结果:模型组C-fos免疫阳性反应物与C-JUNmRNA表达在下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层明显降低;治疗组上述脑区的C-fos免疫阳性反应物C-JUNmRNA表达明显增加。结论:脾虚模型脑内C-fos水平与C-JUNmRNA表达有变化,提示归脾汤可能通过影响C-fos水平与C-JUNmRNA表达而调节学习记忆功能。     

损毁海马CA3区多巴胺能系统对大鼠条件性恐惧记忆的影响

目的 研究大鼠海马CA3区多巴胺(DA)能系统在条件性恐惧记忆形成与保持中的作用.方法 条件性恐惧训练前2周向双侧海马CA3区注入6-羟基多巴胺(6-OHDA)进行损毁,训练后用Western blotting检测前额叶皮层、CA1、杏仁体GluR1及NR2B的表达变化.结果 (1)与生理盐水组[(66.44±16.58)％,(73.43±23.57)％,(55.27±20.57)％]比较,6-OHDA损毁组恐惧记忆获得的僵住反应[ (65.58±5.33)％]差异无统计学意义(P＞0.05),短时恐惧记忆的僵住反应[(39.24±12.83)％]与长时恐惧记忆的僵住反应[(31.15±6.51)％]明显减少(P＜0.05).(2)与生理盐水组比较,6-OHDA损毁组大鼠前额叶皮层,海马CA1区的GluR1蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05),杏仁体BLA区的GluR1蛋白表达升高(P＜0.01).与生理盐水组比较,6-OHDA损毁组大鼠前额叶皮层的NR2B蛋白表达升高(P＜0.01),海马CA1区的NR2B蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05),杏仁体BLA区的NR2B蛋白表达降低(P＜0.01).结论 大鼠海马CA3区多巴胺能系统功能下调能损害恐惧记忆的巩固但不影响其获得,还可以调节其他脑区记忆相关蛋白的表达.     

补脾益气对脾虚证小鼠学习记忆的影响

目的:观察补脾益气中药对脾虚症小鼠学习记忆的影响,并探讨其作用机制。方法:采用利血平皮下注射建立脾虚小鼠模型,补脾益气中药治疗后观察小鼠的行为学改变,采用免疫组化法检测小鼠脑内神经元型一氧化氮合酶(nNOS)蛋白表达的变化。结果:脾虚证小鼠学习能力、记忆能力均下降;海马CA1区nNOS表达减少而大脑皮层表达增加。补脾益气中药能改善脾虚小鼠的学习能力,但对记忆能力影响不大;中药能调节小鼠海马CA1区及大脑皮层nNOS蛋白表达阳性细胞数(P<0.05,P<0.01)。结论:补脾益气中药可能通过调节nNOS蛋白来改善学习记忆能力。     

脑灵汤对阿尔茨海默病模型大鼠行为学 及海马CA3区域淀粉样前体蛋白表达的影响

目的：探讨脑灵汤对阿尔茨海默病（AD）模型大鼠海马CA3区APP蛋白表达的影响,并揭示AD发病的部分机制和脑灵汤可能的作用机制。方法：选取40只SPF清洁级SD大鼠,随机分为正常对照组、假手术组、AD组、脑灵汤组和脑复康组,每组8只,喂养1周后,采用Aβ1 42注射大鼠海马法制成大鼠模型,再喂养28 d,治疗后用Morris水迷宫实验检测大鼠学习记忆行为能力, HE染色检测大鼠海马组织形态学变化,免疫组织化学法观察APP蛋白在大鼠海马CA3区中的表达。结果：Morris水迷宫实验结显示：AD大鼠组的隐匿平台逃避潜伏期延长（P＜0.05）,在探索实验中,AD大鼠存在记忆障碍（P＜0.05）,而脑灵汤治疗后可使AD大鼠的逃避潜伏期缩短（P＜0.05）,大鼠平均探索次数明显增多（P＜0.05）。AD组大鼠海马CA3区锥体细胞排列紊乱,有细胞缺失的现象,APP蛋白表达增多,脑灵汤治疗后可改善CA3区椎体细胞的病理改变以及降低APP蛋白的表达。结论：脑灵汤能明显改善AD模型大鼠低下的空间学习记忆能力,降低模型大鼠海马CA3区APP表达,对老年性痴呆大鼠学习记忆能力可能有提高作用。     

脑灵汤对AD模型大鼠行为学及海马内APP mRNA表达的影响

目的：观察脑灵汤对Alzheimer病（AD）模型大鼠行为学及脑内海马部位β-淀粉样前体蛋白（APP）mRNA影响。方法：以D-半乳糖腹部注射合并铝盐皮下注射制作AD大鼠模型，行γ电迷宫实验检测学习记忆能力及RT-PCR法观察大鼠脑内海马APP mRNA的变化。结果：脑灵汤治疗30d后大鼠学习记忆能力较模型组和对照组明显增强（P〈0．05）；大鼠脑内海马部位APP基因mRNA表达的水平亦较模型组和对照组明显降低（P〈0．05）。结论：脑灵汤抑制和下调APP mRNA表达的水平，减少海马结构中β-淀粉样蛋白的沉积，是改善模型大鼠学习记忆的作用机制之一。     

抑郁模型大鼠海马内环境的研究

目的 研究海马内环境稳态在抑郁症中的作用.方法 20只雌性Wistar大鼠分为对照组、模型组.ELISA法检测血清皮质醇、雌二醇,光镜和电镜观察海马CA3区形态学变化,免疫组化法检测海马脑源性神经生长因子和血管内皮生长因子表达.结果 与对照组比较,模型组皮质醇水平显著升高,雌二醇水平明显下降,海马CA3区神经元损伤严重,脑源性神经生长因子和血管内皮生长因子表达明显降低.结论 抑郁状态下,海马内环境稳态被破坏.     

穹隆-海马伞切断对大鼠脑内不同部位胆碱乙酰化转移酶表达的影响

①目的　观察穹隆 海马伞切断对大鼠脑内不同部位胆碱乙酰化转移酶 (ChAT)表达的影响 ,探讨与学习、记忆相关的机制。②方法　成年健康雌性Wistar大鼠 ,随机分为穹隆 海马伞切断模型组和假手术组 ,各 5只。在脑立体定位仪上切断双侧穹窿 海马伞 ,建立动物模型。假手术组除不切断海马伞外 ,其余步骤同模型组。ChAT免疫细胞化学染色。观察海马CA1区、皮质区、杏仁复合体区、基底前脑Meynert核等部位ChAT阳性细胞表达变化。③结果　假手术组大脑各观察区有基础水平的ChAT表达。模型组大脑海马CA1区皮质、大脑皮质区、杏仁复合体区以及Meynert核区ChAT阳性细胞数明显减少 ,与假手术组比较差异有显著性 (t =7.713～17.16 6 ,P <0 .0 1)。④结论　穹隆 海马伞切断大鼠脑内多部位ChAT表达减少可能是学习、记忆障碍原因之一。     

脾虚大鼠脑内IL-18蛋白及基因表达变化和益气扶正中药的干预研究

目的研究脾虚模型脑内白细胞介素18(IL-18)蛋白及基因表达变化和益气扶正中药的干预作用。方法 40只大鼠随机分成4组,正常组、模型组、治疗1组(四君子汤)、治疗2组(玉屏风散),每组各10只。采用苦降泻下、饮食失节加劳倦过度法建立脾虚大鼠模型,采用称重法检测免疫器官指数,采用免疫组化法与原位杂交法检测下丘脑腹侧核、海马CA1区的IL-18蛋白表达与IL-18mRNA表达变化及四君子汤、玉屏风散的治疗作用。结果模型组胸腺及脾脏指数明显下降,模型组IL-18蛋白与IL-18mRNA表达在下丘脑腹侧核、海马CA1区明显降低;治疗组胸腺及脾脏指数增加,上述脑区的IL-18蛋白与IL-18mRNA表达明显增加。结论益气扶正中药四君子汤、玉屏风散可能通过影响免疫器官,调控细胞因子IL-18蛋白及基因表达而调节机体免疫功能。     

全身麻醉下盲肠切除术后小鼠空间学习记忆能力下降的中枢炎症机制

目的 对脑内小胶质细胞及TAK1基因的表达上调对空间记忆的影响进行初步探索,为围手术期神经认知障碍（perioperative neurocognitive disorders, PND）中空间学习记忆能力的减退提供神经炎症机制证据。方法 采用8~9月龄C57BL/6J小鼠,异氟醚吸入下行剖腹盲肠切除术建立PND模型与普通型C57BL/6J小鼠作对比。分别在不同时间点利用水迷宫实验检测小鼠的空间记忆。并通过免疫组化技术检测术后小鼠不同脑区小胶质细胞改变及TAK1蛋白表达变化。Western印迹法检测术后小鼠脑内TAK1的表达水平。结果 术后3d前额叶皮层,海马CA2/3、DG区,纹状体区域小胶质细胞胞体增大,数量增多（P＜0.05）。术后7d各脑区小胶质细胞数量逐渐下降（P＜0.05）,至术后15d恢复至术前水平。Western印迹法实验提示术后3d TAK1蛋白在前额叶皮层和海马的表达均增高。术后2d小鼠出现空间学习能力受损,7d出现空间记忆能力受损（P＜0.05）。结论 吸入麻醉下盲肠切除术后早期,包括海马区域在内的多个与学习记忆功能相关的脑区,均有明显的小胶质细胞活化和TAK1蛋白表达上调,提示中枢炎症的发生。同时,术后早期,小鼠出现空间学习记忆能力受损,提示腹部手术后PND的发生发展或与记忆相关脑区中枢炎症的发生相关。     

水疗对缺氧缺血新生鼠学习记忆的干预效应

目的探讨水疗对缺氧缺血性脑损伤（hypoxia-ischemia brain damage,HIBD）新生大鼠学习记忆的干预效应及可能的机制。方法7日龄SD大鼠随机分为水疗组、非干预组与假手术对照组,水疗组在HIBD后24h予相应干预治疗．持续28d。以免疫组织化学法检测不同时点海马CA1区N-甲基-D-天门冬氨酸（N-methyl-D-aspartate．NMDA）受体NR1亚单位的表达,并于干预结束后利用Morris水迷宫测定各组学习记忆能力,透射电镜观察海马突触结构。结果干预28d．水疗组海马CA1区NR1的蛋白表达及学习记忆能力明显高于非干预组,但低于假手术组,与假手术组差异显著。透射电镜下,水疗组大鼠海马突触后膜致密物（post synaptic density,PSD）较多,结构致密,非干预组海马PSD少,结构疏松,颜色浅谈。结论水疗能一定程度改善HIBD新生大鼠的学习记忆能力,抑制海马NMDA受体下调是其可能的机制之一。     

学习记忆过程中磷酸化的CREB在大鼠脑纹状体内的表达

目的探讨大鼠在学习记忆过程中磷酸化的转录因子环磷酸腺苷反应单元结合蛋白 (cAMPresponsiveelementbindingprotein ,CREB)在脑纹状体内的表达。 方法将动物首先在Y迷宫中进行学习记忆训练 ,然后应用免疫组织化学方法检测磷酸化的CREB ( phosphorylatedCREB ,pCREB)在脑纹状体内的表达。结果大鼠经电Y迷宫训练后 ,脑纹状体内侧的边缘区内即有明显的 pCREB阳性表达 ,而假训练组或对照组的边缘区内均无明显的pCREB阳性表达。此外 ,在海马、前额叶皮质和扣带回等处也有较多的 pCREB阳性表达。结论大鼠进行电Y迷宫厌暗学习时 ,脑纹状体边缘区内磷酸化的转录因子pCREB参与学习记忆的信号转导过程。     

血管性痴呆小鼠学习记忆障碍与p-CREB表达水平的关系

目的探讨血管性痴呆（VD）小鼠前额叶皮质和海马内磷酸化环磷酸腺苷反应结合蛋白（p-CREB）的变化及其与学习记忆的关系。方法采用双侧颈总动脉线结反复缺血-再灌注法制备多发性脑梗塞性痴呆动物模型;Morris水迷宫测试空间学习记忆改变。免疫组织化学技术以观察小鼠前额叶和海马组织p-CREB的表达变化。结果VD小鼠学习记忆明显受损,海马和前额叶皮质内p-CREB表达明显下降（P〈0．01）。结论VD小鼠学习记忆明显受损,海马和前额皮质中p-CREB可能参与VD小鼠空间学习记忆变化的机制。     

早期干预对脑损伤大鼠神经可塑性相关蛋白的影响

目的 研究早期干预对缺氧缺血性脑损伤（HIBD）大鼠学习记忆能力及脑细胞中神经生长相关蛋白-43（GAP-43）表达的影响。方法 选用SD大鼠建立宫内HIBD动物模型，随机分为HIBD干预组、HIBD非干预组和对照组，每组12只。HIBD干预组采取早期触摸和丰富环境刺激，HIBD非干预组与对照组常规饲养。干预28d后，通过三等臂Y型迷宫试验检测大鼠学习记忆功能，而后取大鼠额皮质和海马组织，用免疫组织化学染色法检测GAP-43表达情况。结果 HIBD非干预组学习与记忆能力明显低于对照组（P〈0．01），HIBD干预组Y迷宫测试成绩则优于HIBD非干预组（P〈0．01）。同时，HIBD非干预组额皮质和海马神经元GAP-43阳性系数高于对照组（P〈0．01），而HIBD干预组GAP-43的表达又明显高于HIBD非干预组（P〈0．01）。结论 早期干预具有改善HIBD大鼠认知能力的效果，其促进HIBD脑功能修复的作用与增加脑组织GAP-43的表达有关。     

卒中后抑郁大鼠海马及皮层CREBmRNA表达及中药的干预作用

目的观察卒中后抑郁模型大鼠脑内核转录因子CREBmRNA的表达及中药颐脑解郁方的干预作用.方法在卒中后抑郁大鼠模型上,采用逆转录PCR(RT-PCR)方法,对CREBmRNA在卒中后抑郁大鼠脑内前额叶皮质、海马的表达及中药颐脑解郁方的干预作用进行观察.结果卒中后抑郁模型大鼠脑内前额叶皮质、海马CREBmRNA的表达明显低于正常组,中药颐脑解郁方能明显上调CREBmRNA的表达.结论卒中后抑郁模型大鼠脑内CREBmRNA的表达降低,中药颐脑解郁方能使之明显上调,提示卒中后抑郁症CREB表达下降,颐脑解郁方的抗抑郁作用可能与上调CREBmRNA的表达有关.     

聪圣胶囊对去皮层血管大鼠行为学及前脑AchE、ChAT的影响

采用去大鼠脑皮层血管建立模型 ,AchE组化及ChAT免疫组化方法 ,研究聪圣胶囊对此模型皮质、海马以及大细胞基底核胆碱能神经元的影响。发现去脑皮层血管大鼠出现了明显的学习、记忆功能的损害。大鼠皮层损伤侧扣带皮质、海马CA1区AchE阳性纤维的分布明显稀疏 ,着色浅。损伤侧的大细胞基底核的AchE、ChAT阳性胆碱能神经元出现了明显萎缩。聪圣胶囊治疗组大鼠的学习、记忆功能明显改善 ,皮质、海马AchE阳性纤维分布较密集 ,着色加深。大细胞基底核AchE、ChAT阳性神经元的变性、萎缩明显减轻。说明聪圣胶囊对去皮层血管后造成的皮质、海马、大细胞基底核的损害具有明显的保护和治疗作用。通过上调胆碱能系统的功能改善学习、记忆功能。