两步超速离心法快速分离大量血浆极低密度脂蛋白及低密度…

本法先使血浆中的脂蛋白快速富集浓缩，再将脂蛋白各组份分离纯化。即具备序列漂浮法分离样品量大长处，双具有密度梯度法离心时间短的优点。使用ＢＥＣＫＭＡＮＬ８－８０Ｍ型超速离心机，Ｔｙｐｅ７０Ｔｉ转头，分离２８０ｍｌ血浆只需超速离心ｈ。所和极低密度脂蛋白及低密度脂蛋白经琼脂糖电泳、聚丙烯酰胺电泳及载脂ＳＤＳ－聚丙烯酰胺电泳鉴定纯度良好。     

兔血清ApoAI亚类的研究——Ⅰ.超速离心法分离兔血清脂蛋白

用垂直转头超速离心法一次可制备兔血清各种脂蛋白。经脂蛋白电泳、免疫电泳等鉴定表明各脂蛋白纯度满意。此法具有操作简单、时间短、制备容量大、脂蛋白纯度较高等特点。     

低密度脂蛋白密度梯度超速离心快速分离及~(125)Ⅰ标记的实验研究

用垂直转头、单个不连续密度梯度超速离心法从正常人混合血清中分离低密度脂蛋白,具有操作简便、收获量大和时间短的优点,且为聚丙烯酰胺凝胶电泳纯。再用一氯化碘法与Na~(125)I标记,可得到脂质标记率低、保留生物性、比放射性适宜的放射性配体。     

新生儿与母体红细胞胆固醇等8项指标相关性研究

应用相关分析法对１００名健康新生儿和母体、中亲的ＲＢＣ－Ｃ、ＨＤＬ－Ｃ、ＨＤＬ２－Ｃ、ＨＤＬ３－Ｃ、ＬＤＬ－Ｃ、ＶＬＤＬ－Ｃ、ＴＣ、ＴＧ的水平进行了相关性研究。结果表明，新生儿与母体、中亲除ＴＧ呈不显著正相关外，其余７项指标均呈显著正相关（γ＝０．２０３～０．４６２，Ｐ＜０．００２～０．０５），这种相关性在不同性别、产次、体重的新生儿中无明显变化。提示遗传因素对新生儿ＲＢＣ－Ｃ等８项指标的水平有重要影响。     

氧化修饰LDL及VLDL对兔主动脉平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白1mRNA表达的作用

单核细胞趋化蛋白１（ＭＣＰ－１）是一种强的单核细胞趋化因子，在体外可由多种细胞分泌，包括血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）。本研究采用斑点杂交方法检测了氧化修饰低密度脂蛋白（ＯＸ－ＬＤＬ）、极低密度脂蛋白（ＶＬＤＬ）及氧化修饰极低密度脂蛋白（ＯＸ－ＶＬＤＬ）对培养的兔主动脉ＳＭＣＭＣＰ－１ｍＲＮＡ表达的作用。结果表明，培养的ＳＭＣ可表达ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ，而且ＳＭＣ暴露于ＯＸ－ＬＤＬ、ＶＬＤＬ及ＯＸ－ＶＬＤＬ后，其ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ表达水平明显增高，分别增高约１１倍、６倍和２０倍。因此我们认为ＯＸ－ＬＤＬ、ＶＬＤＬ及ＯＸ－ＶＬＤＬ可以刺激培养的兔主动脉ＳＭＣＭＣＰ－１ｍＲＮＡ的表达。     

快速大量分离血浆低密度脂蛋白亚组分的方法

目的 :研究快速大量分离低密度脂蛋白亚组分的方法。方法 :通过2步超速离心法分离LDL亚组分 ,并用电泳法及电镜观察鉴定2种亚组分。结果 :仅用10h就将LDL亚组分分开 ,并证实经分离的2种亚组分为纯品。结论 :本方法是1种分离LDL亚组分较好方法     

超速离心密度梯度中间区带加样插入法进一步快速分离人血清脂蛋白

本文报告使用HITACHI80P—7系列制备型超速离心机,RP80T—3角度转子,溴化钠(NaBr)不连续密度梯度,密度范围1.00～1.30g/cm~3,采用中间区带加样插入法超离心技术,68000r/min(410.000g)离心3h,转子腔温态8℃,分离正常人血清脂蛋白,短时间一次分离即可获得血清脂蛋白VLDL、LDF、HOL、和LDS(缺乏     

人血浆载脂蛋白E的分离纯化及其抗血清制备

用短时间超速离心结合制备性 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化人血浆 apoE.以此纯品免疫家兔制备了单价兔抗人 apoE 抗血清,与常规方法相比,本法具有操作简单、费用低和提纯周期短等优点,是一种简单实用的方法。     

Rapid Isolation of Large Amount of Plasma VLDL and LDL by a Two Step Ultracentrifugation

ＲａｐｉｄＩｓｏｌａｔｉｏｎｏｆＬａｒｇｅＡｍｏｕｎｔｏｆＰｌａｓｍａＶＬＤＬａｎｄＬＤＬｂｙａＴｗｏＳｔｅｐＵｌｔｒａｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｔｉｏｎＷＡＮＧＣｈｕｎ－ｂｅｎ（王淳本）；ＦＥＮＧＹｏｕ－ｍｅｉ（冯友梅）；ＺＯＮＧＹｉ－ｑｉａｎｇ（宗义强...     

高脂膳食诱发家兔血清LPO升高及LDL、VLDL和HDL在活体内的氧化修饰

为探讨高脂膳食对家兔血清过氧化脂质（ＬＰＯ）升高和ＬＤＬ、ＶＬＤＬ，特别是ＨＤＬ氧化修饰的影响。正常对照组（ｎ＝８）喂以普通饲料，高脂实验组（ｎ＝８）用高胆固醇饲料（普通饲料加５％猪油，另每只兔加喂０．５ｇ胆固醇）喂养１２周。兔血清ＬＤＬ、ＶＬＤＬ及ＨＤＬ用密度梯度超速离心法分离得到。ＬＤＬ、ＶＬＤＬ及ＨＤＬ的氧化修饰用琼脂糖凝胶电泳、２３４ｎｍ光吸收及ＴＢＡＲＳ荧光检测进行鉴定。结果显示：高脂实验组兔血清的ＴＣ、ＴＧ和ＬＰＯ均显著高于正常对照组（Ｐ＜０．０１），而ＨＤＬ－Ｃ则显著降低（Ｐ＜０．０５）；同时，高脂实验组的ＬＤＬ、ＶＬＤＬ和ＨＤＬ的电泳迁移率增加，其２３４ｎｍ光吸收及ＬＰＯ含量均显著高于正常对照组（Ｐ＜０．０１）。表明高脂膳食在诱发家兔血清ＴＣ、ＴＧ显著增高的同时，不仅可引起血浆ＬＤＬ及ＶＬＤＬ的氧化修饰，而且还可引起ＨＤＬ在活体内的氧化修饰     

Relationship of VLDL receptor and LPL in metabolism of VLDL by macrophage

Summary Macrophages were incubated with^125I-VLDL for 5 h in presence or absence of lipoprotein lipase (LPL) inhibitor, benzene boronic acid (BBA). Both the uptake and degradation of^125I-VLDL by macrophages were saturable, and the uptake and degradation curves were virtually identical. When macrophages were incubated with^125I-VLDL for 10 h in presence of BBA, the uptake and degradation of^125I-VLDL were still saturable. However, in absence of BBA, the uptake and degradation were no longer saturable. The results suggest that with macrophages incubated with VLDL for a shorter period, VLDL was taken up predominantly via receptor pathway, with a longer period of incubation, LPL played a striking role in uptake of VLDL.     

过滤对超速离心法提取外泌体的影响

目的 明确过滤对超速离心法提取外泌体数量及纯度的影响,为当前外泌体的提取方法提供一定参考。方法 收集健康人血浆和肺癌PC-9/IR细胞培养上清,分为未过滤组(unfiltration group,NC) 和过滤组(filtration group,GL),过滤组采用0.22 μm 过滤器过滤。超速离心法提取外泌体,纳米颗粒跟踪分析(nanoparticle tracking analysis,NTA)检测过滤前后纳米颗粒(外泌体)数量及粒径大小变化,Aminis成像流式检测过滤前后CD9⁺外泌体(CD9⁺ exosomes,CD9⁺Exo)和CD63⁺外泌体(CD63⁺ exosomes,CD63⁺Exo)数量及百分比。结果 NTA结果显示,与NC组相比,血浆过滤后外泌体数量下降4.7倍,培养上清过滤后外泌体数量下降2.5倍。Aminis成像流式结果显示,血浆中CD9⁺Exo和CD63⁺Exo的数量过滤后分别下降了5倍和2.6倍,培养上清中CD9⁺Exo和CD63⁺Exo的数量过滤后分别下降了3倍和2.3倍,差异均有统计学意义(P<0.05)。同时,Aminis成像流式结果显示,过滤后颗粒中CD9⁺Exo和CD63⁺Exo的百分比没有提高,差异无统计学意义。结论 过滤降低了超速离心法提取外泌体的数量,并未提高外泌体的纯度。     

Regulation of ApoE Gene Expression in Mouse Peritoneal Macrophages by VLDL

Macrophageisoneofprecursors0far-terialwallfoamcellsandhasbeensuggest-edtoplayanimportantroleinthedevel0p-mentofather0sclerosis.Macr0phagescantakeupApoB-0rApoE-containinglip0pro-teinsviavariouslipoproteinreceptors,whichcauseslipidaccumulationinthecells.Inaddition,macr0phagescansecreteApoE['].Thoughthisphenomenonhasbeendiscoveredf6rmanyyears,itsimplicationremainsunclear.VLDLisoneof1ip0pr0teinscontainingApoE.ItcanbetakenupbymacrophagesviaApoEmediatedreceptors.SoVLDLcanstimulatelipidaccumu…     

人血浆脂蛋白（a）的分离纯化

用单向火肝免疫电泳法筛选健康献血员，获得LP（a）阳性新鲜血浆。先用多价阴高子化合物NaphT-MG^2 沉淀包括LP（a）的合部含apoB的脂蛋白，然后超速高心和经sepharose6B柱，抗apo（a）IgG-Sepharose 4B免疫亲和柱柱层析，得到的LP（a）、LDL和VLDL为纯品。     

家兔β-VLDL和VLDL对巨噬细胞内胆固醇水平的影响

本实验用 AS 模型家兔β-VLDL 和 VLDL 分别与小鼠腹腔巨噬细胞一起培养,测定细胞内 Ap(?)-B,TC、FC 和 CE 水平变化并观察细胞形态学改变。结果表明:β-VLDL 使巨噬细胞内脂质含量增加并使其转化为泡沫细胞,培养前后两者细胞内 Apo-B,TC,FC 和 CE 含量分别为30.6±3.4,148.6±6.1,49.8±2.8和98.8±10.7μg/mg,细胞蛋白质,差别均有高度显著性(P<0.01);VLDL 组培养前后的差别相应为12.3±2.5,24.0±2.4,11.24±1.6和12.9±2.7μg/mg·细胞蛋白质,差别亦均有高度显著性(P<0.01).两组问差异亦同样均有高度显著性(P<0.01).文中对两种脂蛋白与泡沫细胞的关系进行了讨论。