比较不同类型抗抑郁剂对新生大鼠神经细胞内游离Ca~(2 )浓度的影响

比较不同类型抗抑郁剂对新生大鼠神经细胞内游离Ｃａ２＋浓度的影响张凤琴罗质璞（军事医学科学院毒物药物研究所，北京１００８５０）随着社会的快速发展，心理疾患日益增多，抗抑郁药物的研究也成为发展最快的领域之一．尽管国内外对抗抑郁剂作用机理研究报道颇多，试图...     

白芍总甙对大鼠腹腔巨噬细胞Ca2+跨膜转运的影响

通过检测大鼠腹腔巨噬细胞(M_ф     

抗抑郁剂慢性给药对强迫游泳大鼠下丘脑c-Fos蛋白表达水平的下调作用

应用c-Fos蛋白免疫组织化学定位观察的方法, 在强迫游泳大鼠抑郁模型上, 观察地昔帕明(5, 20 mg·kg^-1), 吗氯贝胺 (10, 40 mg·kg^-1)和氟西汀 (5, 20 mg·kg^-1) 慢性给药 (ip 每日1次, 连续7 d)对大鼠游泳不动时间和下丘脑核团c-Fos蛋白表达水平的影响. 结果表明: 强迫游泳可使大鼠下丘脑多个核团的c-Fos蛋白表达水平明显升高, 而地昔帕明, 吗氯贝胺, 氟西汀明显缩短强迫游泳大鼠的不动时间, 并选择性地使强迫游泳诱导增加的下丘脑室旁核Fos样免疫阳性神经元数目明显减少. 提示下丘脑室旁核可能是介导抗抑郁剂抑制大鼠绝望行为的中枢部位之一. Fos蛋白可能是不同类型抗抑郁剂共同的受体后信号转导物质.     

抗抑郁剂慢性给药对强迫游泳大鼠下丘脑c-Fos蛋白表达水平的下调作用

应用ｃ－Ｆｏｓ蛋白免疫组织化学定位观察的方法，在强迫游泳大鼠抑郁模型上，观察地昔帕明（５，２０ｍｇ·ｋｇ－１），吗氯贝胺（１０，４０ｍｇ·ｋｇ－１）和氟西汀（５，２０ｍｇ·ｋｇ－１）慢性给药（ｉｐ每日１次，连续７ｄ）对大鼠游泳不动时间和下丘脑核团ｃ－Ｆｏｓ蛋白表达水平的影响．结果表明：强迫游泳可使大鼠下丘脑多个核团的ｃ－Ｆｏｓ蛋白表达水平明显升高，而地昔帕明，吗氯贝胺，氟西汀明显缩短强迫游泳大鼠的不动时间，并选择性地使强迫游泳诱导增加的下丘脑室旁核Ｆｏｓ样免疫阳性神经元数目明显减少．提示下丘脑室旁核可能是介导抗抑郁剂抑制大鼠绝望行为的中枢部位之一．Ｆｏｓ蛋白可能是不同类型抗抑郁剂共同的受体后信号转导物质     

三氟拉嗪对大鼠脑突触体内Ca2+水平和Ca2+, Mg2+-ATP酶活性的作用

用Quin 2法测得大鼠脑突触体内静息游离Ca²⁺浓度([Ca²⁺]_i)为85±13 μmol·g^-1 protein. 三氟拉嗪(TFP) 1, 5和10 μmol·L^-1对静息突触体[Ca²⁺]_i无明显影响, 但能以剂量依赖方式增高65 mmol·L^-1 KCl所致突触体[Ca²⁺]_i升高, 从192±58 μmol·g^-1 protein分别达到233±63, 431±99和661±173 μmol·g^-1 protein. TFP 5,10和50 μmol·L^-1分别使突触体Ca²⁺, Mg²⁺-ATP酶活性降低31％, 41％和45％; 使Mg²⁺-ATP#FK酶活性降低30％, 36％和39％, 提示TFP可能是通过抑制钙调素, 进而抑制Ca²⁺, Mg²⁺-ATP酶活性, 使突触体[Ca²⁺]_i升高, 促进神经末梢释放递质.     

微矩阵基因芯片筛选抗抑郁剂地昔帕明相关基因的研究

目的　研究抗抑郁剂相关基因 ,探讨其可能作用机制。方法与结果　以高浓度皮质酮 (Cort) 1 0μmol·L-1或Cort与三环类经典抗抑郁剂地昔帕明(DIM) 5 μmol·L-1共同处理PC1 2细胞 3d分别作为对照组和实验组 ,按Trizol一步法提取细胞总RNA并纯化mRNA ,将等量的对照组与实验组mRNA以逆转录法分别标记荧光素cy3和cy5 ,合成cDNA探针并等量混合 ,与小鼠 2 0 48点微矩阵基因芯片杂交 ,扫描荧光信号图像并分析比较二组差异表达基因 ,发现DIM与Cort共孵PC1 2细胞 3d可以诱导2 5 9个基因表达水平发生改变。其中 1 63个基因表达降低 ,如葡萄糖调节蛋白 78ku、葡萄糖激酶(GA)、细胞骨架蛋白、转化性生长因子 β受体结合蛋白、细胞色素C氧化酶、锂盐敏感性内消旋肌醇一磷酸酯酶等 ;有 96个基因表达水平升高 ,如神经元生长分化因子 9(GDF 9)、锌指蛋白 2 1 6、细胞色素P45 0、睾丸特异基因 1等。随机选取二个差异表达基因GA和GDF 9,以细胞原位杂交方法验证 ,取得与基因芯片评价一致的结果。结论　抗抑郁剂DIM作用可能与能量代谢、细胞骨架、营养因子、酶等多层次、多水平的基因表达改变有关。本研究利用基因芯片技术对抗抑郁剂相关基因进行了初步探索 ,为深入研究抗抑郁剂作用机制和药物筛选芯片的研发提供了线索与依     

丙泊酚对大鼠脑突触体Na+, K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性的影响

Effect of propofol on Na⁺, K⁺-ATPase and Ca²⁺-ATPase activities of cerebral synaptosomes was investigated in rats. It was found that propfol 50 mg·kg^-1 ip significantly inhibited Na⁺, K⁺-ATPase activity of hippocampal and brain stem′s synaptosomes (P<0.01). Propofol 100 mg·kg^-1 ip significantly reduced Na⁺, K⁺-ATPase and Ca²⁺-ATPase activity of cerebrocortical, brain stem′s and hippocampal synaptosomes (P<0.01). It is suggested that the central inhibitory effect of propofol may be related to the inhibition of Na⁺, K⁺-ATPase and Ca²⁺-ATPase activity of cerebral synaptosomes.     

小檗碱对培养大鼠神经细胞内游离Ca2+的影响

以Fura-2/AM为细胞内钙离子的荧光指示剂,用AR-CM-MIC阳离子测定系统,直接测定了体外培养的新生大鼠神经细胞内游离钙([Ca²⁺]i)值,并观察了小檗碱(Ber)的影响。结果表明,Ber对神经细胞静息[Ca²⁺]i无明显影响,Ber1～100μmol·L^-1能剂量依赖地抑制去甲肾上腺素和H₂O₂引起的[Ca²⁺]i升高,其IC₅₀分别为39.9和17.9μmol·L^-1。高剂量Ber(10～100μmol·L^-1)能抑制高K+引起的[Ca²⁺]i升高。姐果提示,Ber对去甲肾上腺素,高K⁺及H₂O₂引起的[Ca²⁺]i升高的抑制作用可能是其抗脑缺血作用机制之一。     

地昔帕明和氟西汀拮抗5,7—二羟色胺对海马和皮质神经元的损伤

AIM: To assess the protective effect of desipramine (Des) and fluoxetine (Flu) on the neurons against the lesion induced by a selective serotonergic neurotoxin in vitro. METHODS: The 10-day cultured primary neurons of hippocampus and cortex of rat was exposed to 5,7-dihydroxytryptamine (5,7-DHT) to determine the optimal lesion concentration and duration. Before exposing to 5,7-DHT, Des and Flu was added to the medium for 30 min to observe the protective effects. RESULTS: The optimal concentration and duration for 5,7-DHT was 600 micromol.L-1 and 4 h, respectively. Both Des and Flu showed a protective effect in the dose range of 0.8 micromol.L-1 to 10 micromol.L-1 and 0.04 micromol.L-1 to 0.6 micromol.L-1, respectively, when the neurons were injured by 5,7-DHT 600 micromol.L-1 for 4 h. Flu showed a higher efficacy than Des. Both exhibited a more powerful protective effect on the hippocampal neuron than on the cortical neuron. CONCLUSION: The antidepressant effect of Des and Flu was attributed to their protective effect on the injured serotonergic neuron of the hippocampus and the cortex.     

异丙肾上腺素致大鼠心肌肥厚时心肌细胞核Ca2+转运

目的 观察异丙肾上腺素(Iso)致大鼠心肌肥厚模型心肌细胞核⁴⁵Ca²⁺摄取、钙释放通道肌醇1,4,5-三磷酸(IP₃)受体(IP₃R)和ryanodine受体(RyR)的动力学变化，以探讨细胞核Ca²⁺的转运是否参与心肌肥厚发生。方法 Iso(sc 20、10和5 mg·kg^-1剂量递减3 d，3 mg·kg^-1维持7 d)制备大鼠心肌肥厚模型，用差速离心和蔗糖密度梯度离心提纯心肌细胞核，用⁴⁵Ca²⁺同位素法测定细胞核钙摄取，用［³H］标记配体分析心肌细胞核IP₃R和RyR的动力学特点。结果 与对照组相比，Iso可导致大鼠心肌显著肥大，伴有显著心肌纤维化；心肌细胞核膜IP₃R与其配体的最大结合容量(B_max)减少23.4%(P<0.05)，解离常数(K_d)无明显变化(P>0.05)；细胞核RyR的B_max增加59.9%(P<0.01)，K_d无明显变化(P>0.05)；⁴⁵Ca²⁺摄取显著低于对照组(P<0.01)，最大摄取与对照组相比降低62%(P<0.01)，达半数最大摄取时［Ca²⁺］无显著变化。结论 Iso导致大鼠心肌肥厚纤维化发生过程中，心肌细胞核⁴⁵Ca²⁺摄取能力降低，核上RyR数目上调，而IP₃R数目下调，受体亲和力无变化，提示心肌细胞核钙调节系统参与心肌肥厚的发生过程。     

抗抑郁新化合物SIPI-C和SIPI-F对PC12细胞内游离钙离子浓度的影响

目的研究抗抑郁新化合物SIPI-C和SIPI-F对PC12细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响,初步探讨其神经毒性的机制。方法 接种PC12细胞于经胶原Ⅰ包被的培养皿,加入钙离子荧光探针Fluo-3/AM染色后,用激光共聚焦显微镜分别记录①有钙外液中,10μmo.lL-1的SIPI-A,B,C和F对PC12细胞[Ca2+]i的影响;②有钙外液中,1,10和100μmol.L-1的SIPI-C和SIPI-F对[Ca2+]i的影响;③有钙外液中,硝苯地平10μmo.lL-1对10μmo.lL-1的SIPI-C或SIPI-F作用的影响;④无钙细胞外液中,10μmo.lL-1SIPI-C和SIPI-F对[Ca2+]i的影响。结果 有钙外液中,SIPI-A 10μmol.L-1给药后[Ca2+]i下降,10μmol.L-1的SIPI-B,SIPI-C和SIPI-F分别使[Ca2+]i增加27%(P<0.05),84%(P<0.05)和87%(P<0.01);SIPI-C和SIPI-F明显升高[Ca2+]i;同时给予SIPI-C 10μmol.L-1和硝苯地平10μmo.lL-1或SIPI-F 10μmo.l L-1和硝苯地平10μmo.lL-1,给药后荧光强度立即上升达到峰值,随后下降,[Ca2+]i分别增加24%和15%(P<0.05)。在无钙外液中,SIPI-C和SIPI-F 10μmo.lL-1分别使[Ca2+]i增加16%和18%(P<0.01)。结论 抗抑郁化合物SIPI-C和SIPI-F可以引起PC12细胞中[Ca2+]i显著增加,此影响可能与其神经毒性有关。     

Cl~-通道及Ca~(2+)通道阻断剂对ATP触发的牛脑血管平滑肌细胞Ca~(2+)内流作用的影响

采用Fura 2荧光测定胞浆游离Ca2 + 浓度([Ca2 + ]i)变化技术 ,在培养的牛脑中动脉平滑肌细胞上 ,观察电压依赖Ca2 + 通道 (VDCC)抑制药尼莫地平 ,非电压依赖Ca2 + 通道 (NVDCC)SK&F96365以及Cl-通道抑制药呋塞米 ,印防己毒素对ATP引起的[Ca2 + ]i 反应的影响 .实验表明ATP可使 [Ca2 + ]i 呈现双相升高反应 ,即快速峰相及随后持续稳定的平台相 .尼莫地平 ,SK&F96365及印防己毒素对ATP触发的Ca2 + 内流无明显影响 ,而呋塞米能呈浓度依赖性地抑制ATP触发的Ca2 + 内流 .提示ATP触发的牛脑中动脉平滑肌细胞Ca2 + 内流是经SK&F96365不敏感的NVDCC ,与呋塞米敏感的Cl- 通道开放有关 .     

氯丙烯对神经细胞内 Ca2+, 游离钙调蛋白, 环腺苷酸含量和钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ活性的影响

用培养的鸡胚脑神经细胞研究了1.02和2.04 mmol·L^-1氯丙烯作用24 h后细胞内Ca²⁺, 游离钙调蛋白(CaM)和环腺苷酸(cAMP)含量及钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(Ca²⁺/CaM-PK Ⅱ)活性的改变. 结果显示, 随着氯丙烯浓度的增加, 细胞内Ca²⁺分别增加了4.2和6.2倍, cAMP含量增加了22%和39%, Ca²⁺/CaM-PK Ⅱ活性增加了2.8和5.0倍(P<0.01); 而游离CaM含量则分别减少了55%和69%(P<0.01). 结果提示氯丙烯引起病理性神经轴浆内微管和神经微丝堆积与细胞内Ca²⁺增加有关. 这可能由于细胞内Ca²⁺增加, 激活CaM, 继而激活Ca²⁺/CaM-PK Ⅱ, 催化微管相关蛋白2和tau-蛋白磷酸化, 抑制微管组装, 使解聚的微管堆积在轴浆内.     

AMP579与腺苷对大鼠心室肌细胞Na~+/Ca~(2+)交换电流作用的比较(英文)

目的阐明AMP579与腺苷不同药理作用与临床效果的机制。方法采用全细胞膜片钳记录Na+/Ca2 +交换电流。结果AMP579对Na+/Ca2 +交换的外向和内向电流均呈浓度依赖性增强。灌流腺苷A1受体阻断剂PD116948 30μmol·L-1,A2受体阻断剂DMPX10μmol·L-1,蛋白激酶A特异阻断剂KT5720 0 .2μmol·L-1或蛋白激酶C特异阻断剂GF109203X0 .4μmol·L-1对AMP579 Na+/Ca2 +交换电流的激动作用均无影响,提示AMP579对Na+/Ca2 +交换电流具有直接的激动作用。结论AMP579对Na+/Ca2 +交换电流可能具有直接的激动作用。     

ATP和凝血酶诱导的血管内皮细胞Ca~(2+)内流比较

采用fura 2荧光测定细胞 [Ca2 +]i 变化技术 ,在培养的牛主动脉内皮细胞上观察ATP和凝血酶诱导的Ca2 +内流的特性 .ATP和凝血酶均能诱导内皮细胞 [Ca2 +]i 呈双相升高 ,它们诱导的Ca2 +释放是环匹阿尼酸 (CPA)敏感Ca2 +池的一部分 .ATP诱导的Ca2 +释放和Ca2 +内流不完全通过激活磷脂酶C介导 ,而凝血酶诱导的Ca2 +释放和Ca2 +内流则完全通过激活磷脂酶C介导 .硝苯地平对ATP和凝血酶诱导的Ca2 +内流均无影响 ;SK&F 96 36 5与三七皂甙 2A对凝血酶诱导的Ca2 +内流没有影响 ,但可抑制ATP诱导的Ca2 +内流 ,且此作用比它们对CPA诱导Ca2 +内流的抑制作用小 .SK&F 96 36 5和三七皂甙 2A敏感的Ca2 +内流的特性不同 .结果表明ATP和凝血酶激活不同受体 ,引起Ca2 +内流的机理不同     

内皮素1对胞浆Ca~(2+)升高调控作用的研究进展

由21个氨基酸残基组成的内皮素1(ET-1)不仅是已知最强的缩血管活性肽,还对血管形成与重构、细胞增殖、细胞外基质合成和感觉神经活化等诸多生理活动具有调控作用。其生理效应多通过升高胞浆Ca2+继而促发连锁反应来实现。增强细胞外Ca2+内流和促进胞内Ca2+释放是ET-1升高胞浆Ca2+浓度的两条基本途径,同时,通过抑制胞内的Ca2+外排与重摄取及对细胞核等非典型Ca2+库内的Ca2+信号的调控同样可以达到升高胞浆Ca2+浓度的目的,本文主要就ET-1升高胞浆Ca2+的调控途径作一综述。