碱性磷酸酶与骨代谢

碱性磷酸酶(以下略为ALP)是使磷酸单酯在碱性条件下分解,生成无机正磷酸的非特异性水解酶类。Robison(1923)首次发现这种酶在骨骼等硬组织钙化过程中活性升高。认为此酶在骨钙化中起重要作用。在后来几十年间,对它在骨代谢中的作用进行了很多研究,并提出各种不同的假说。在骨科临床上,很多骨疾病表现出血清ALP活性升高,而且根据ALP同工酶的变化,可以帮助诊断某些骨病。因此,这种酶在骨代谢基础理论研究和骨疾病的临床实践中均具     

组织细胞固定保护液在AKP组化染色中的应用

传统的碱性磷酸酶(AKP)组织化学染色法，染色前多采用10％福尔马林-钙液及丙酮等固定液在4℃冰箱内对组织进行处理后，再进行冷冻制片或低温石蜡包埋切片。在实际应用过程中，我们发现经这些方法处理的组织，染色后酶活性明显降低且定位不佳。我们在酶染色前改用自行研制的组织细胞固定保护液(tissue cell fix protection solution，TCFPS)对组织进行前期处理，可收到理想染色效果。     

乳酸脱氢酶在不同贮存温度下的稳定性

乳酸脱氢酶(LD)活性的稳定性取决于贮存温度、贮存介质及冷冻技术.以往关于生物样品(组织匀浆、肝素抗凝血浆、脐血血清、成人血清等)中LD对冷冻的不稳定性的说法不一.本文目的是:(1)重新评价成人血清在不同贮存温度(25℃、4℃,和-20℃)下LD同工酶的稳定性,并与肝素抗凝血浆和脐血血清进行比较;(2)试图应用底物和巯基试剂防止LD的不稳定性.作者除测定LD总活性外,还应用醋酸纤维素电泳和琼脂糖电泳及免疫抑制技术对LD同工酶进行了研究.结果表明:(1)人血清样品于25℃和-20℃贮存45天,其LD总活性分别保留74%和87%,可见-20℃下贮存对LD总活性无明显影响.(2)LD-1活性在25℃、4℃和-20℃下均稳定,贮存45天活性至多降低10%.与以往报导不同的     

采用高和低浓度甘油方法冰冻的RBCs解冻后的稳定性

背景 采用高浓度甘油方法(HGM)或低浓度甘油方法(LGM)RBCs能冰冻保存。解冻后 24小时的使用期限阻碍了冰冻RBCs的使用。一种封闭的洗涤系统(ACP 215)可以解决这个问题。研究设计和方法 作者比较高浓度(40％)与低浓度(19％)甘油在有和没有冰冻保存(HGM置于-80℃,LGM置于-196℃)条件下采用这种封闭的洗涤系统除去甘油及解冻后置于SAGM4℃于保存期内在体外对RBCs质量的影响。结果     

碱性成纤维细胞生长因子对庆大霉素致肾小管上皮损伤的拮抗效应

背景:体内实验证实成纤维细胞生长因子能有效保护庆大霉素致肾小管上皮细胞的损伤,但对体外培养细胞的作用如何不多见.目的:在建立庆大霉素肾毒性体外细胞模型的基础上,观察不同浓度碱性成纤维细胞生长因子对庆大霉素肾毒性的保护作用.方法:采用酶加网筛方法分离纯化昆明小鼠肾小管上皮细胞,调整细胞浓度为1×10~8L~(-1),将细胞悬液移入96孔细胞培养板,分组培养:空白对照组:正常培养:庆大霉素组:10,30,50 μL/孔(即400,1 200,2 000 U/孔)记为G1、G2、G3:碱性成纤维细胞生长因子组:20,50,80μL/孔(HP 90,225,360 ng/孔)记为B1、B2、B3:庆大霉素加碱性成纤维细胞生长因子干预组:先加碱性成纤维细胞生长因子12 h后,再加庆大霉素12 h培养,分9个剂量组,即G1B1、G1B2、G1B3、G2B1、G2B2、G2B3、G3B1、G3B2、G3B3,每组4复孔.观察细胞形态及数量变化.结果与结论:庆大霉素对肾小管上皮细胞的损伤呈剂量依赖性,中、高浓度组的上皮细胞皱缩,变圆,肿胀,贴壁差,内部胞质破坏严重,结构紊乱,低浓度组细胞数量改变不明显,并且开始有成纤维细胞出现;碱性成纤维细胞生长因子各组细胞饱满、折光性强,数量明显增多,50 μL/孔浓度以上效果显著,与80 μL/孔差异无显著性意义;庆大霉素加碱性成纤维细胞生长因子干预组中低浓度庆大霉素组细胞未见明显损害,细胞数量反而增多,中浓度庆大霉素组损害的细胞崩解减少、细胞皱缩和贴壁差的程度有所减轻,高浓度碱性成纤维细胞生长因子干预后细胞形态良好,但高浓度庆大霉素所致细胞肿胀、坏死损伤任何浓度的碱性成纤维细胞生长因子干预都无法改善.50 μL/孔碱性成纤维细胞生长因子对中、低浓度庆大霉素所致肾毒性有拮抗作用,对高浓度庆大霉素所致肾毒性无保护作用.     

急性肺损伤肺组织和血浆NO、ET-1变化的研究

目的 探讨急性肺损伤（ＡＬＩ）时肺组织和血浆一氧化氮（ＮＯ）、皮内素－１（ＥＴ－１）和白细胞介素８（ＩＬ－８）水平的变化和作用。方法 采用间隔２４ｈ两次注射大肠杆菌内毒素（ＬＰＳ）的方法,复制家兔内毒素急性肺损伤模型。结果 ＡＬＩ组浆、肺组织均浆及支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中ＮＯ、ＥＴ－１和ＩＬ－８水平显著升高（Ｐ〈０．０１）,ＢＡＬＦ内中性料细胞（ＰＭＮ）明显增多,肺系数（ＬＰＬ）、肺水含量     

膜联蛋白-1和碱性成纤维细胞生长因子在肾细胞癌中表达

目的:探讨肾细胞癌组织中膜联蛋白-1和碱性成纤维细胞生长因子的表达情况及意义.方法:应用免疫组织化学方法检测56例肾癌组织、20例不典型增生组织和16例正常肾组织中膜联蛋白-1和碱性成纤维细胞生长因子的表达情况.结果:肾癌组织、不典型增生组织和正常肾组织中膜联蛋白-1的阳性表达率分别为21.43%,35.00%和81.25%(P<0.05);碱性成纤维细胞生长因子阳性表达率分别为76.79%,45.00%和25.00%(P<0.05).肾癌组织中膜联蛋白-1和碱性成纤维细胞生长因子蛋白的表达呈负相关(r=-0.337,P<0.05).结论:联合检测膜联蛋白-1 和碱性成纤维细胞生长因子对肾细胞癌的早期诊断有重要价值.     

人骨形态发生蛋白2基因活化纳米骨浆的成骨能力

背景：纳米骨浆在骨缺损修复过程中仅起支架和骨传导作用,不具备骨诱导能力。目的：观察人骨形态发生蛋白2（human bone morphogenetic protein-2,hBMP-2）基因活化纳米骨浆的异位诱导成骨能力和修复骨缺损效果。时间及地点：实验于2006-06/2007-03在华中科技大学同济医学院分子生物中心实验室和协和医院骨科实验室完成。材料：将纳米骨浆与hBMP-2基因真核表达质粒相复合,形成hBMP-2基因局部释放系统。方法：实验一：昆明种小鼠24只右侧大腿后群肌袋注射纳米骨浆＋hBMP-2质粒作为实验侧,其中12只小鼠左侧大腿后群肌袋注射纳米骨浆＋空白质粒为对照侧1,另12只左侧注射纳米骨浆为对照侧2。实验二：新西兰白兔54只,其中6只作左桡骨中段骨缺损,不植入材料,为空白对照;另48只制成双侧桡骨中段15mm骨缺损模型,随机分成3组,缺损处分别植入hBMP-2＋纳米骨浆、空白质粒＋纳米骨浆、纳米骨。主要观察指标：实验一：采用放射学、分子生物学和组织形态学等方法检测成骨基因hBMP-2表达和诱导成骨效应。②实验二：取桡骨标本作影像学检查、组织学观察和生物力学检测。结果：实验一：小鼠术后2,4周实验侧有hBMP-2表达。实验侧术后2周出现大量软骨组织和呈岛状散在分布的骨组织,术后4周可见大量成骨组织,新生骨相互融合生长并形成较为成熟的板层骨和骨小梁结构;对照侧未见骨组织形成。实验侧碱性磷酸酶活性明显高于对照侧（P〈0.01）。实验二：术后12周空白对照组骨缺损无愈合,其余3组骨缺损均修复。植入hBMP-2＋纳米骨浆组的碱性磷酸酶水平、成骨速度及新生骨力学强度均明显优于植入空白质粒＋纳米骨浆或纳米骨组（P〈0.05）。结论：经组织学、影像学及生物力学的综合检测验证,纳米骨浆复合hBMP-2质粒后,具有一定的骨诱导作用,植入体内后成骨速度、质量及力学强度较单纯的纳米骨浆明显增强,能够有效修复骨缺损。     

微波炉融化新鲜冰冻血浆的观察报告

<正> 传统融化新鲜冰冻血浆(FFP)的方法是在水浴(Water Bath,WB)中进行。耗时长、易污染,不利于急救用血。我们使用微波炉(Microwave Oven,MWO)融化 FFP,并对融浆时间、温度、凝血因子和蛋白水平与37℃和45℃WB 进行比较,旨在为临床上选择快速安全的融浆方法。     

康惠尔透明贴在脑外科输液护理中的应用

脑外科患者在输液过程中,由于部分患者意识不清,躁动不合作,易造成静脉输液外渗;外周静脉输入高浓度药物(如20%甘露醇、10%氯化钠等)及化疗药物损伤血管;抢救中输入血管活性药物(如多巴胺、去甲肾上腺素等)。高浓度药物常造成血管平滑肌痉挛,血管内膜损伤,导致不同程度的静脉炎[1]。输液渗漏,造成患者局部皮肤肿胀、青紫、疼痛,血管变红变硬。化疗药物外渗对局部组织有严重影响。有较强的刺激药物,药物外渗刺激静脉及皮下组织造成无菌性炎症[2]。2004年1月1日～12月31日,我院脑肿瘤病房选用丹麦康乐保公司生产的康惠尔增强型透明贴,解决输液…     

碱性尿贮存温度、时间对β_2微球蛋白稳定性的影响

目的:探讨碱性尿不同贮存温度、时间条件下β2微球蛋白稳定性。方法:化学发光法测定不同贮存温度、时间条件下碱性尿β2微球蛋白含量的变化,比较各指标的稳定性。结果:4,25,37℃保存48h内,碱性尿β2微球蛋白较少发生降解,含量稳定;25,37℃保存48h以上,碱性尿β2微球蛋白含量发生较大变化,结果不可靠。结论:测定碱性尿中β2微球蛋白应注意标本的保存时间及温度,4℃保存7d或25,37℃保存48h内可保证测定结果的准确性。     

不同时间、温度、抗凝剂对血浆凝血酶原时间测定结果的影响

血浆血酶原时间测定(简称 PT)是反映凝血过程中的重要化验指标之一。我们在实验过程中发现,不同时间温度,抗凝剂对测定结果有所不同。实践证明,测定20人份献血员血浆分别用3.13%枸橼酸钠及1.34%草酸钠抗凝(抗凝剂与全血比例均为1:9)。时间温度分别为0,4,8,18,24,32℃,时间为2,4,6,8,12,24小时,在枸橼酸钠抗凝之血浆中,0℃保存一周无改变,4℃保存24小时,PT 延长0,34秒,P>0.05,而草酸钠抗凝血浆4保存6     

碱性成纤维细胞生长因子在正常及不同类型腰椎间盘突出组织中的表达及其意义

目的:研究碱性成纤维细胞生成因子在不同类型的椎间盘组织中的表达及其意义,以期探讨腰椎间盘退行性变分子生物学机制。方法:中南大学湘雅二医院2002-12/2003-05手术中所获得的椎间盘组织标本54例,其中41例来源于腰椎间盘突出症患者手术中取得的椎间盘组织(包含型17例,非包含型24例),13例来源于脊柱侧凸前路手术及腰椎骨折前路手术所获得的椎间盘组织。将这些椎间盘组织作苏木精-伊红染色及碱性成纤维细胞生长因子免疫组化检测,并作对照分析。结果:对照组中椎间盘组织碱性成纤维细胞生长因子表达为阴性,突出椎间盘组织中包含型碱性成纤维细胞生长因子阳性表达率为47%(8/17),非包含型为83%(20/24),包含型及非包含型碱性成纤维细胞生长因子阳性率均高于对照组(P<0.01)。包含型碱性成纤维细胞生长因子阳性表达率低于非包含型(P<0.05)。非包含型中病程在1年以上的碱性成纤维细胞生长因子阳性率明显低于病程在1年之内者(P<0.05)。结论:突出椎间盘组织可以诱导产生碱性成纤维细胞生长因子且与突出类型、病程相关,提示碱性成纤维细胞生长因子在腰椎间盘组织退变、自发性吸收中有重要的促进作用。     

碱性成纤维细胞生长因子在正常及不同类型腰椎问盘突出组织中的表达及其意义

目的:研究碱性成纤维细胞生成因子在不同类型的椎间盘组织中的表达及其意义,以期探讨腰椎间盘退行性变分子生物学机制.方法:中南大学湘雅二医院2002-12/2003-05手术中所获得的椎间盘组织标本54例,其中41例来源于腰椎间盘突出症患者手术中取得的椎间盘组织(包含型17例,非包含型24例),13例来源于脊柱侧凸前路手术及腰椎骨折前路手术所获得的椎间盘组织.将这些椎间盘组织作苏木精-伊红染色及碱性成纤维细胞生长因子免疫组化检测,并作对照分析.结果:对照组中椎间盘组织碱性成纤维细胞生长因子表达为阴性,突出椎间盘组织中包含型碱性成纤维细胞生长因子阳性表达率为47%(8/17),非包含型为83%(20/24),包含型及非包含型碱性成纤维细胞生长因子阳性率均高于对照组(P＜0.01).包含型碱性成纤维细胞生长因子阳性表达率低于非包含型(P＜0.05).非包含型中病程在1年以上的碱性成纤维细胞生长因子阳性率明显低于病程在1年之内者(P＜0.05).结论:突出椎间盘组织可以诱导产生碱性成纤维细胞生长因子且与突出类型、病程相关,提示碱性成纤维细胞生长因子在腰椎间盘组织退变、自发性吸收中有重要的促进作用.     

体内胶原网架生物学转归中碱性成纤维细胞生长因子的表达

背景:脱细胞真皮基质作为一种新型的真皮替代物,用于组织缺损的修复,但对于脱细胞真皮基质在长期生物学转归过程中碱性成纤维细胞生长因子的表达变化规律,国内外尚未见相关报道.目的:观察体内胶原网架长期生物学转归中碱性成纤维细胞生长因子的表达变化规律.方法:选用成年雄性Wistar大鼠21只用于制备脱细胞真皮基质.取84只大鼠,于脊柱左侧作一深至深筋膜表面、面积为2.5 cm×2.5 cm的创口,回植脱细胞真皮基质至成年雄性Wistar大鼠背部皮下,以对侧正常皮肤做对照.于术后3,5,7,10 d,2,3,4,6,8,10周,4,6,8,10个月取材,采用免疫组织化学方法检测碱性成纤维细胞生长因子的表达.结果与结论:碱性成纤维细胞生长因子3 d时开始出现阳性表达,并于10 d达到峰值,4周后趋于稳定,8周后各组未见明显变化,与正常皮肤表达一致.提示在脱细胞真皮基质长期的生物学转归过程中,脱细胞真皮基质的改建首先从周边开始逐渐向中央迁移,并于6～8周后改建趋于稳定,被视为自身组织,并参与机体正常组织代谢过程.     

碱性成纤维细胞生长因子与骨折后的组织修复重建

学术背景：碱性成纤维细胞生长因子广泛存在于人体各种组织中，在体内参与多种组织的创伤修复过程，是体内重要的创伤愈合因子之一。目的：总结碱性成纤维细胞生长因子在骨折愈合过程中作用的研究进展。检索策略：应用计算机检索Pubmed数据库2000—01／2007—12期间碱性成纤维细胞生长因子在骨折愈合过程中作用相关的文章，检索词为“fibroblast growth factor 2（basic fibroblast growth factor），fracture healing：regulation，signal transduction”，并限定文章语言种类为“English”。同时计算机检索中国期刊全文数据库、万方数据库2000-01／2007-12期间的相关文章，检索词为”碱性成纤维细胞生长因子，骨折愈合，调控，信号传导”。排除标准：重复性研究和缺乏原创性的研究。文献评价：经过筛选共收集到33篇文献。有关碱性成纤维细胞生长因子的分布3篇、生物学特性3篇和加速骨折愈合作用27篇文章。资料综合：骨愈合实质是骨损伤后的再生过程，也是骨组织的形成过程。碱性成纤维细胞生长因子可通过其趋化作用促进细胞迁移，使间充质细胞、巨噬细胞、成纤维细胞等向创伤部位聚集，从而启动创伤愈合过程。目前关于碱性成纤维细胞生长因子的动物实验研究已比较深入，临床应用也有报道，其在骨折愈合中的作用也逐渐的明朗，碱性成纤维细胞生长因子通过调节细胞增殖、分化并改变细胞产物的合成而作用于成骨过程，不仅能促进骨细胞的生长，且能促进成骨细胞与支架材料的黏附。结论：①碱性成纤维细胞生长因子的分布、生物学特性已被初步认识，其加速骨折的愈合的研究也进一步的深入。②碱性成纤维细胞生长因子及相关载体复合而成的骨修复材料已进入实验阶段，并有待进一步的研究。     

膜联蛋白-1及碱性成纤维细胞生长因子在前列腺癌中的表达

目的探讨膜联蛋白-1及碱性成纤维细胞生长因子在前列腺癌组织的表达及意义。方法 61例前列腺癌组织、40例癌旁组织、40例正常前列腺组织,应用免疫组织化学法检测膜联蛋白-1及碱性成纤维细胞生长因子在3种组织中的表达。结果正常前列腺癌组织、癌旁组织及前列腺组织中膜联蛋白-1阳性表达率分别为19.67%,22.50%及72.50%,碱性成纤维细胞生长因子阳性表达率分别为70.49%,42.50%及25.00%,差异有统计学意义(P<0.01);碱性成纤维细胞生长因子阳性表达在年龄、肿瘤大小、组织分化程度、肿瘤浸润深度、淋巴结转移、TNM分期及远期转移上差异有统计学意义(P<0.05)。结论联合检测膜联蛋白-1及碱性成纤维细胞生长因子有助于前列腺癌的早期诊断与治疗。     

康惠尔透明贴在脑外科输液护理中的应用

脑外科患者在输液过程中，由于部分患者意识不清，躁动不合作，易造成静脉输液外渗；外周静脉输入高浓度药物(如20％甘露醇、10％氯化钠等)及化疗药物损伤血管；抢救中输入血管活性药物(如多巴胺、去甲肾上腺素等)。高浓度药物常造成血管平滑肌痉挛，血管内膜损伤，导致不同程度的静脉炎。输液渗漏，造成患者局部皮肤肿胀、青紫、疼痛，血管变红变硬。化疗药物外渗对局部组织有严重影响。     

生骨注射液对骨折愈合过程中碱性成纤维细胞生长因子和血管内皮生长因子表达的影响

背景:在促进骨折修复研究中,应用外源性生长因子极不稳定,且造价高不适宜广泛推广,如何有效地促进内源性生长因子的表达将是值得深入研究的课题.目的:观察生骨注射液对骨折愈合过程中内源性碱性成纤维细胞生长因子和血管内皮生长因子表达的影响.设计、时间及地点:完全随机分组设计,对照实验,于2007-07/2008-08在华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科实验室完成.材料:清洁级3月龄雄性SD大鼠60只.生骨注射液由当归、土鳖虫、淫羊藿等药物组成,由湖北省中医院提供,质量浓度为1 g/L.方法:建立SD大鼠胫骨干骨折愈合模型,分成实验组和对照组各30只,分别在骨折断端等量注射生骨注射液和生理盐水,每两日1次,0.2mL/次.两组分别于术后第1,2,3,4,5,6周时各处死5只大鼠,取材.主要观察指标:采用免疫组织化学方法,检测两组大鼠骨折愈合过程中不同阶段骨痂组织中碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子蛋白的表达及差异情况.结果:免疫组织化学染色显示,各时间点实验组骨痂组织中碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子表达量及阳性定位均明显强于对照组.结论:生骨注射液能够增加骨折愈合过程中碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子在骨痂组织中的表达,这可能是生骨注射液促进骨折愈合的机制之一.     

香菇多糖对人淋巴细胞IL—2分泌及IL—2R表达的双向调节…

以佛波酸和卡西霉素Ａ２３１８７协同刺激正常人血淋巴细胞，用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶桥联酶标染色法观察香菇多糖对白细胞介素－２（ＩＬ－２）分泌及ＩＬ－２受体（ＩＬ－２Ｒ）表达的影响。Ｌｅｎ单独无刺激淋巴细胞ＩＬ－２分沁及ＩＬ－２Ｒ表达的作用，低浓度Ｌｅｎ与ＰＭＡ和Ａ３２１８７有明显协同促进ＩＬ－２分沁及ＩＬ－２表达的作用，随深度增高，这种促进作用逐渐减弱，高浓度度Ｌｅｎ则出现抑制作用。提示Ｌｅｎ对人淋