重组人生长激素对大鼠肠缺血再灌注后肠壁组织T淋巴细胞亚群和浆细胞的影响

目的　探讨肠道屏障功能损害时应用重组人生长激素(rhGH )对肠道免疫屏障中肠黏膜及固有层内T淋巴细胞亚群和浆细胞的影响。方法　将60只Wistar大鼠雌雄各半随机分为实验组和对照组,按实验天数(2、4、6d)又各分为3组,每组10只,以肠缺血再灌注模型造成肠道屏障功能损害的病理现象,实验组给与rhGH (每日1.3 3U/kg体重) ,观察回肠末端黏膜固有层内CD8+、CD4+、CD3 +T淋巴细胞数及IgA浆细胞的数量变化。结果　(1)实验组CD8+、CD4+、CD3 +T及IgA浆细胞第6天与第2、4天比较数量显著增多,差异有统计学意义(P <0 .0 5 )。(2 )实验组与对照组第6天,CD8+、CD4+T及IgA浆细胞的数量实验组均高于对照组,差异有统计学意义(P <0 .0 5 )。(3 )CD4+/CD8+比值第2天两组差异有统计学意义(P <0 .0 5 )。结论　肠道屏障功能损害时应用重组人生长激素能够调节肠黏膜的免疫屏障,其作用时间在第6天可能最明显     

早期肠内免疫营养对烫伤大鼠免疫功能的影响

目的了解早期肠内免疫营养对烫伤大鼠全身及肠道免疫功能的影响。方法将健康SD大鼠分为标准营养组（EN组）和免疫营养组（EIN组），每组32只。将两组大鼠制成烧伤总面积30％TBSA的Ⅲ度烫伤模型，于伤后1、4、7、10d检测其外周血T淋巴细胞亚群、肠黏膜增殖细胞核抗原（PCNA）表达水平、浆细胞数量及肠黏液分泌型免疫球蛋白A（S-IgA）含量的变化。另取8只健康大鼠检测上述指标作为正常参考值。结果（1）与正常值比较，伤后EN组CD3^＋、CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋降低但CD8^＋升高，与各项指标大部分时相点比较，差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。伤后10d与EN组（CD4^＋／CD8^＋为1．26±0．10）比较，EIN组CD3^＋、CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋（CD4^＋／CD8^＋为1．86±0．25）升高而CD8^＋下降（P〈0．01）。（2）伤后4、7、10d，EIN组肠黏膜PCNA表达水平、浆细胞数量及肠黏液S-IgA含量较EN组明显升高（P〈0．05或P〈0．01）。结论烫伤后早期给予肠内免疫营养，可以提高全身及肠道免疫功能，效果优于标准肠内营养。     

sCD40基因修饰树突状细胞抑制T细胞表型及细胞因子分泌

目的探讨sCD40基因修饰树突状细胞（DC）对T细胞表型及Th1和Th2类细胞因子分泌的影响及其体外诱导T细胞免疫耐受的机制。方法分别以sCD40基因及空载体修饰的13（2（实验组和对照组）作为刺激细胞，尼龙毛柱法收集Balb／c小鼠淋巴细胞作为反应细胞，初次进行混合淋巴细胞培养（MLC）7d。在培养的第1、3、4、5、7天时采用新型四唑氮盐（MTS）比色法检测淋巴细胞增殖率；酶联免疫吸附（EuSA）法测定培养液上清中的白细胞介素2（IL-2）、γ干扰素（IFN-γ）、白细胞介素4（IL-4）、白细胞介素10（IL-10）水平；第5天采用流式细胞仪检测CD4^＋、CD8^＋T细胞上CD25及CD69的表达。再次进行MLC5d，在培养的第1、3、5天时检测与初次MLC相同的项目，并比较初次及再次MLC后的各项检测指标。结果初次及再次MLC后，实验组（经sCD40基因修饰的DC）刺激细胞增殖反应明显低于对照组（空载体修饰的DC）。初次MLC中，实验组CD4^＋、CD8^＋T细胞比例及CD4^＋CD25^＋、CD8^＋CD25^＋、CD4^＋CD69^＋、CD8^＋CD69^＋T细胞比例明显低于对照组（P〈0．05）；实验组和对照组培养液上清中IL4和IL-10不能测出，而实验组培养液上清中IFN-γ和IL-2的水平均明显低于对照组（P〈0．01）。再次MLC后，培养液上清中IFN-γ、IL-2和IL-4、IL-10的分泌水平均明显低于对照组（P〈0．01）。结论体外MLC体系中，经sCD40基因修饰的DC可同时作用于CD4^＋和CD8^＋T细胞，使CD69和CD25表达降低，引起T细胞早期活化和成熟障碍，抑制T细胞增殖及Th1和Th2类细胞因子的分泌，诱导出T细胞免疫耐受状态。     

脓毒症患者外周血CD3+、CD4+、CD8+ T淋巴细胞的凋亡及Bcl-2蛋白表达

目的探讨脓毒症患者外周血淋巴细胞凋亡及其与Bcl-2蛋白表达的关系。方法采集44例脓毒症患者（脓毒症组，年龄19～86岁）和25例健康体检者（正常对照组，年龄29～80岁）的外周静脉血5ml，采用流式细胞仪分别检测CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞凋亡率和Bcl-2蛋白表达。分析细胞凋亡率与Bcl-2蛋白表达的相关性。脓毒症诊断标准参考1991年美国胸科医师协会和美国危重病医学会联席会议制定的诊断标准。结果与正常对照组比较，脓毒症组患者CD3^＋、CD4^＋T淋巴细胞凋亡率升高，Bcl-2蛋白表达下降（P〈0．05），CD8^＋T淋巴细胞凋亡率及其Bcl-2蛋白表达差异均无统计学意义（P〉0．05），CD3^＋、CD4^＋T淋巴细胞凋亡率分别与其Bcl-2蛋白表达呈负相关（r=-0．389，P〈0．05；r=-0．689，P〈0．05）。结论脓毒症患者细胞免疫功能异常可能与Bcl-2蛋白表达下调导致淋巴细胞凋亡增加有关。     

慢性特发性荨麻疹患者外周血T及Th淋巴细胞亚群的表达

目的：探讨慢性特发性荨麻疹患者外周血T及辅助性T淋巴细胞（Th）亚群的表达及其在慢性特发性荨麻疹发病机制中的作用。方法：采用流式细胞术检测经四色荧光抗体染色的慢性特发性荨麻疹患者及正常对照外周血CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞数及CD4^＋／IFN-γ’（Th1）、CD4^＋／IL-4^＋（Th2）细胞含量。结果：慢性特发性荨麻疹组外周血CD3^＋T淋巴细胞数无明显变化、CD4^＋T淋巴细胞数、CD8^＋T淋巴细胞数均降低;CD4^＋／CD8^＋比值增高,差异有统计学意义（P〈0．01）。慢性特发性荨麻疹患者外周血Th1细胞含量、Th1／Th2比值均明显低于正常对照组（P〈0．01,P〈0．05）,Th2细胞含量高于正常对照组（P〈0．01）。结论：慢性特发性荨麻疹患者外周血存在着T及Th淋巴细胞亚群分化失衡,这可能为慢性特发性荨麻疹发病的机制之一。     

IgA肾病患者外周血单个核细胞凋亡率及调控凋亡基因相关指标的检测

目的：探讨IgA肾病（IgAN）活动期与稳定期外周血单个核细胞（PBMC）凋亡率、CD3^＋、CD3^＋CD4^＋、CD3^＋CD8^＋、CD3^＋CD4^＋Fas、CD3^＋CD8^＋Fas、sFas、sFasL等表达的意义。方法：采用ELISA检测sFas、aFasL、IL-1β和流式细胞仪检测PBMC凋亡率等指标。结果：IgA肾病活动期患者PBMC凋亡率、sFas、sFasL明显高于正常人，稳定期sFas、sFasL较正常人有统计学差异（P〈0．01）；CD3^＋CD4^＋Fas、CD3^＋CD8^＋Fas升高（活动期，P〈0．05；稳定期，P〈0．01）；PBMC凋亡率与sFas、sFasL无相关性：sFasL与sFas、CD3^＋CD4^＋Fas、CD3^＋CD8^＋Fas有相关性。结论：IgAN活动期PBMC凋亡率明显高于正常人，导致sFas、sFasL增多，在IgAN中增加的sFas、sFasL可能抑制肾小球系膜细胞凋亡，而且可能是IgAN进展中的一个因素。     

乌司他丁对肝癌患者高强度聚焦超声治疗后细胞免疫功能的影响

目的 探讨乌司他丁对肝癌患者高强度聚焦超声（HIFU）治疗后细胞免疫功能的影响。方法 择期行HIFU治疗的肝癌患者20例，ASAⅡ或Ⅲ级，随机分为2组（n=10）：对照组（C组）和乌司他丁组（U组）。U组于麻醉诱导后缓慢静脉注射乌司他丁20万U，C组输注等量生理盐水。于HIFU治疗前即刻（T1）、治疗结束即刻（T2）及治疗结束后24h（T3）采取肘静脉血样2ml，使用流式细胞仪检测CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞和NK细胞百分率。结果 与T1比较，C组T2、T3时CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞百分率差异无统计学意义（P〉0．05），T2时CD4^＋，CD8^＋比值增高，T2、T3时NK细胞百分率增高（P〈0．05），U组T2、T3时CD3^＋T淋巴细胞百分率差异无统计学意义（P〉0．05），T2时CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞百分率增高（P〈0．05），T2、T3时CD4^＋／CD8^＋比值、NK细胞百分率增高（P〈0．01）；与C组比较，T2、T3时U组NK细胞百分率增高（P〈0．05）。结论 乌司他丁可有效提高HIFU治疗肝癌患者的细胞免疫功能。     

大面积烧伤脓毒症患者T淋巴细胞免疫功能的改变及临床意义

目的 了解大面积烧伤脓毒症患者T淋巴细胞免疫功能的变化，探讨其与脓毒症的关系。方法 选择59例烧伤面积≥30％TBSA的患者，分为脓毒症组43例和非脓毒症组16例。采集两组患者伤后1、3、5、7、14、21、28d的外周静脉血，检测T淋巴细胞增殖能力和白细胞介素2（IL-2）的分泌水平，并行相关性分析；通过流式细胞仪检测CD3^＋／CD4^＋ T淋巴细胞的百分率及其凋亡率，并行相关性分析。结果 与非脓毒症组比较，脓毒症组患者伤后l、14、2l、28dT淋巴细胞增殖能力和IL-2的分泌水平均显著下降（P〈0．05或P〈0.01），两指标呈显著正相关（r=0．82，P〈0．01）。伤后1、5、14、21、28d，脓毒症组患者CD3^＋／CD4^＋T淋巴细胞百分率明显低于非脓毒症组，而其凋亡率呈相反趋势（P〈0.05或P〈0．01），两指标呈显著负相关（r=-0.66，P〈0．05）。结论 大面积烧伤脓毒症患者T淋巴细胞免疫功能持续处于抑制状态，T淋巴细胞凋亡参与了脓毒症细胞免疫紊乱的病理生理过程。     

大鼠肝移植后树突状细胞的迁移变化

目的：研究大鼠肝移植后树突状细胞（DC）的迁移情况。方法：制作Wistar大鼠到SD大鼠的肝移植模型（实验组），并设Wistar大鼠间肝移植作为对照（对照组）。分别于术后第3、5、7天处死受者，切取移植肝组织及腹腔淋巴结，进行组织学观察，并以免疫组织化学染色观察移植肝组织和淋巴结中S-100^＋DC的动态变化，以及CD25^＋T淋巴细胞在淋巴结的活化增殖。结果：肝组织病理学检查显示，实验组移植后第5天即出现轻至中度急性排斥反应，至第7天发展成中至重度排斥反应，受者存活时间（9．7±1．4）d。免疫组织化学染色显示，术后第3天实验组移植肝组织中DC数量明显增多，于第5天达到高峰，第7天则出现下降，明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。从第3天开始，淋巴结中DC数量明显增多，第5、7天持续上升，与对照组相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。移植术后第3天，实验组淋巴结中CD25^＋T淋巴细胞明显增多，呈现明显的T淋巴细胞活化增殖反应。结论：同种异体肝移植后，DC对抗原的摄取和递呈加速，产生对T淋巴细胞强烈而持久的刺激，最终激活T淋巴细胞，导致排斥反应的发生。     

可诱导性共刺激分子单抗联合细胞毒T淋巴细胞4Ig在大鼠胰腺移植中的作用

目的 探讨可诱导性共刺激分子（ICOS）单抗、细胞毒T淋巴细胞4ig（CTLA41g）阻断共刺激通路对于异基因大鼠胰腺移植的作用及其机制。方法 建立胰腺移植模型，分A组（对照组），B组（CTLA4Ig组），C组（抗ICOS单抗组），D组（联合CTLA4Ig和抗ICOS单抗组）。术后1、4,7d监测血糖，第7天取胰腺做苏木素-伊红染色，脾脏做流式细胞检测CD3^＋CD8^＋T细胞、CD4^＋T细胞、CD4^＋CD25^＋T细胞。结果 与A组比较：B、C、D组排斥反应较A组明显减弱，显著延长了移植物的存活时间。CD3^＋CD8^＋T细胞计数B、C、D与A组比较均有减少，差异有统计学意义（P〈0．01）。CD4^＋T细胞B、D与A组的差异有统计学意义（P〈0．05）。CD4^＋CD25^＋T细胞各组间逐渐升高，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论 抗ICOS单抗和CTLA4Ig能有效地抑制大鼠胰腺移植排斥反应，延长移植物存活时间，且联合应用比单一应用更有效。其可能机制为诱导了CD4^＋CD25^＋T细胞的产生。     

生长激素对肝大部切除术后鼠肠黏膜的保护作用

目的: 探讨鼠肝大部切除术后生长激素对肠黏膜屏障的保护作用,为临床使用重组人生长激素保护肠黏膜提供实验依据.方法: 90只SD大鼠随机分为对照组、生理盐水(normal saline,NS)组和生长激素(recombinant human growth hormone,rhGH)组,后两组切除肝左叶和右叶;各组连续用药6 d,分别于术后第1,2,3,5和10天取回肠组织行光镜形态学观察及图像分析检测肠黏膜厚度和绒毛高度,并对回肠黏膜上皮细胞行核增殖抗原(proliferate cell nucleus antigen,PCNA)免疫组织化学测定;取心脏血4~6 ml,检测内毒素.结果: 肝大部分切除术后第1,2天,内毒素明显升高,而rhGH组与对照组无明显差异.术后第3,5天,回肠黏膜明显萎缩,绒毛变薄;黏膜上皮细胞PCNA明显下降(P<0.01).应用rhGH 3 d后,回肠绒毛高度、黏膜厚度和PCNA度均增加(P<0.01);术后第5天,达到对照组水平.结论: 肝大部分切除术后肠黏膜屏障受损,应用rhGH可保护肠黏膜屏障,减少血浆内毒素水平.     

加速康复外科对腹腔镜胃癌根治术患者炎症因子与免疫功能的影响

目的:探讨加速康复外科对腹腔镜胃癌根治术患者炎症因子及免疫功能的影响。方法:将患者分为围手术期加速康复外科模式管理的观察组(n=40)与常规围手术期管理的对照组(n=40),比较两组患者各时段炎性介质(IL-6、IL-8及IL-10)及IgA、IgG、IgM、CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+免疫指标水平,并进行对比分析。结果:术后第1天、第3天、第7天,两组患者IL-6、IL-8均显著上升(P0.05),对照组较观察组升高更明显(P0.05)。术后第1天,两组患者IL-10较术前均明显升高(P0.05),观察组升高更明显。术后第1天,两组患者IgA、IgG、IgM水平较术前均明显降低(P0.05)。术后第3天,观察组IgA、IgG水平明显高于对照组(P0.05);两组患者术后IgM水平无明显差异。术后第1天两组患者CD3~+较术前均明显降低(P0.05),对照组下降更明显;观察组术后CD4~+水平与术前相比差异无统计学意义;对照组CD4~+水平明显低于术前(P0.05)。术后第1天、第3天,两组患者CD8~+、CD4~+/CD8~+水平较术前明显降低(P0.05),但两组间差异无统计学意义。结论:加速康复外科模式可减轻腹腔镜胃癌根治术后患者机体炎性反应,并保护机体免疫功能,减少过度炎症反应,同时可在一定程度上降低胃癌细胞的转移、复发。     

重组人生长激素在儿童尿道下裂术后治疗中的临床疗效观察

目的:重组人生长激素(rhGH)是通过基因工程人工合成的人生长激素,保持了与垂体分泌的生长激素(GH)相同的结构和功能,它在一些代谢性疾病、烧伤以及感染性疾病的治疗上发挥着重要作用。但迄今为止,rhGH在儿童尿道下裂术后治疗中的作用国内外未见报道。本文对rhGH在儿童尿道下裂术后治疗中的临床疗效进行了观察,为提高手术治疗尿道下裂的临床疗效,改善临床预后和治疗尿道下裂新药的开发提供理论及实验依据。方法:将84例尿道下裂手术后患者随机分为试验组和对照组,每组42例。对照组:常规应用抗生素和止血药,并给予伤口常规护理。试验组:在常规治疗的基础上,给予rhGH(赛增)0.2 U/(kg.d),每晚睡前皮下注射1次,疗程1周。观察临床疗效、排尿症状、外周血白细胞(WBC)计数、C反应蛋白(CRP)含量、CD4+和CD8+、IgM、IgG和IgA含量,白蛋白和总蛋白含量。结果:①试验组临床治愈34例,显效8例,治愈率为81.0%。对照组临床治愈28例,显效12例,无效2例,治愈率为66.7%,试验组临床疗效明显优于对照组;②对照组外周血CRP含量和WBC数较术前明显升高,但试验组外周血CRP含量和WBC数较术前无明显升高,且试验组明显低于对照组;③试验组血清白蛋白和总蛋白含量术后明显高于对照组;④试验组术后IgM、IgG和IgA含量均明显高于对照组;⑤试验组治疗后外周血CD4+、CD4+/CD8+比值与治疗前相比显著上升,而CD8+较治疗前相比含量下降,上述指标与治疗后的对照组比较亦具有显著性差异。结论:rhGH在儿童尿道下裂术后治疗中具有显著疗效,且无明显不良反应,其作用机制与其促进蛋白质合成,纠正负氮平衡,提高免疫功能有关。     

大鼠烫伤后应用重组人生长激素对炎症反应的影响

目的 探讨大鼠烫伤后早期应用重组人生长激素(rhGH)，机体T细胞免疫和炎症反应的变化。方法 将SD大鼠制成30％TBSA的Ⅲ度烫伤模型，随机分为用药组：从伤后第1天开始，腹部皮下注射rhGH 6U／kg，连续10d；未用药组：烫伤后不予用药；对照组：不予烫伤。各组大鼠于伤后3、6、10d留取血液及脾脏标本，检测肿瘤坏死因子α（(TNFα)、白细胞介素(IL)2、IL—6浓度和CD4^ 、CD8^ 细胞数。结果 未用药组大鼠伤后3d，TNFα、IL—2、IL—6浓度和CD4^ 、CD8^ 细胞数均显增高，伤后6d均明显下降。用药组伤后3d CD4^ 、CD8^ 细胞显增加，IL—2、IL—6和TNFα水平显下降；伤后6d，用药组IL—2、IL—6水平上升，与对照组比较差异无显性意义，TNFα水平明显高于对照组和未用药组。伤后10d，用药组IL—2、IL—6和TNFα水平仍呈逐渐上升趋势，未用药组IL—2、IL—6水平显下降，TNFα水平有所上升。结论 在烫伤后不同应激状态下应用rhGH，对T细胞免疫和炎症反应可能产生不同影响。     

加速康复外科联合腹腔镜手术对胃癌患者术后肠道生物屏障稳定性的影响研究

目的探讨加速康复外科(ERAS)联合腹腔镜手术对于胃癌患者术后肠道生物屏障稳定性、免疫功能及应激反应的临床研究。 方法回顾性分析2016年1月至2018年6月期间收治的胃癌患者88例资料,患者均进行腹腔镜胃癌根治术治疗,按照治疗干预方案不同分为ERAS组和传统组。ERAS组42例患者采用ERAS干预,传统组46例患者给予常规治疗。采用SPSS 20.0进行数据分析,术后各临床指标、肠道菌属数目等计量资料采用 ±s表示,独立t检验;术后并发症、病理分级等计数资料采用χ²检验;P<0.05表示差异有统计学意义。 结果ERAS组患者术后肛门通气时间、发热时间、下床活动时间、首次进食时间、住院时间显著短于传统组(P<0.05);术后ERAS组患者粪便各菌属数量明显多于传统组(P<0.05);术后3 d ERAS组患者血清CD4^＋、CD4^＋/CD8^＋ 、IgG、IgM、IgA明显优于传统组(P<0.05);术后ERAS组患者应激反应较传统组低,血清IL－6、CRP、TNF－α水平明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。 结论加速康复外科联合腹腔镜手术对于胃癌患者术后肠道生物屏障、术后免疫功能、应激反应等具有重大意义,且可有效促进患者术后康复,值得临床推广。     

肝细胞移植治疗急性肝功能衰竭的免疫排斥研究

目的研究肝细胞腹腔移植治疗急性肝功能衰竭的免疫排斥反应。方法用胶原酶灌注法分离幼猪及BALB/c和C57BL/6小鼠肝细胞;用腹腔注射CCl4的方法建立C57BL/6急性肝功能衰竭模型;将实验动物分为同基因移植组、同种异基因移植组和异种移植组。各组动物肝细胞移植入急性肝功能衰竭小鼠腹腔内,观察受体小鼠存活情况,比较各组动物T细胞亚群、免疫球蛋白水平和细胞因子的变化。结果①受体小鼠存活情况:同基因移植组为8/10,同种异基因移植组为6/10,异种移植组为3/10,同基因移植组和同种异基因移植组受体的生存情况明显好于异种移植组(P<0.05)。②T细胞亚群变化:移植后7 d内,同基因移植组外周血中CD4+和CD8+T细胞均无明显变化,同种异基因移植组CD4+T细胞于移植后3 d时达高峰(P<0.05),而CD8+T细胞7 d内无明显变化,异种移植组CD4+和CD8+T细胞移植后7 d内均明显升高,且于移植后3 d时达高峰(P<0.05)。③免疫球蛋白水平:同基因移植组血清免疫球蛋白IgM和IgG水平在移植后0.5、1和3 d时未见明显变化,同种异基因移植组和异种移植组的IgM在移植后1 d时达高峰(P<0.05),而IgG在移植后3 d时达高峰(P<0.05)。④血清细胞因子水平:移植后7 d,同种异基因移植组和异种移植组的IFN-γ、TNF-α及IL-2血清浓度明显高于同基因移植组(P<0.05);异种移植组的IL-6血清浓度明显高于同基因移植组和同种异基因移植组(P<0.05)。结论无论同种还是异种肝细胞移植,初期均发生了强烈的CD4+及CD8+T细胞参与的细胞免疫和较强体液免疫反应。     

腹腔镜胃大部切除术对机体免疫功能的影响

目的:比较腹腔镜与开腹胃大部切除术对机体免疫功能的影响。方法:选择40例有胃大部切除指征的患者,分为腹腔镜组和开腹组,各20例,测定免疫球蛋白IgG、IgM、IgA,补体C3、C4水平及测定、组间比较CD3+(T细胞总数)、CD4+(T辅助/诱导细胞)、CD8+(T抑制/杀伤细胞)的数量。结果:两组IgM、IgA、C4手术前后均无明显变化,组间无统计学差异。腹腔镜组术后1d IgG、C3较术前有所下降,术后3d恢复至术前水平。开腹组IgG、C3术后1d明显低于术前水平,术后5d恢复至术前水平。腹腔镜组淋巴细胞亚群手术前后均无统计学差异,开腹组术后1d CD3+、CD4+、CD8+与术前比较均明显降低,术后5d恢复至术前水平。结论:腹腔镜对机体免疫功能的影响小,术后恢复较快。     

早期肠内免疫营养对烫伤小鼠肠道免疫功能的影响

目的 了解早期免疫强化肠内营养对烫伤小鼠肠道免疫功能的影响.方法 选择24只雄性BALB/c小鼠制作20%TBSAⅢ度烫伤模型,采用简单随机法分成2组.每组12只.普通营养组:于伤后2 h开始经口灌喂普通肠内营养剂;免疫营养组:方法同前,在普通营养剂基础上加入谷氨酰胺和精氨酸.2组营养剂糖、脂肪、蛋白质供热比均为82:3:15,热量与氮之比为150:1.每只小鼠营养摄入按732.2 kJ·kg-1·d-1计算,第1天摄入标准量的1/3,第2天摄入标准量的1/2,第3天起摄入全量,每天的计划量分4～6次喂完.2组营养摄入为等氮、等热量、等体积.小鼠连续灌喂7d后处死,取全段小肠.另取10只同品系小鼠作为健康对照组,同法取材.记录肠集合淋巴结细胞总数,通过流式细胞仪检测淋巴结中CD3+、CD4+、CD19+及凋亡细胞变化,双抗体夹心酶联免疫吸附测定法检测肠IgA变化.结果 健康对照组、普通营养组、免疫营养组小鼠肠道淋巴结细胞总数分别为(4.5±0.6)×106、(2.3±0.4)×106、(3.8±0.5)×106个,与健康对照组比较,后2组细胞数明显减少(P＜0.05).但免疫营养组高于普通营养组(P＜0.05);3组小鼠肠道淋巴结CD3+、CD4+、CD19+细胞数比较情况类似于淋巴结细胞总数.健康对照组、普通营养组、免疫营养组淋巴细胞凋亡率分别为(4.8±2.1)%、(12.7±2.4)%、(8.0±1.7)%,与健康对照组比较,后2组小鼠细胞凋亡率明显增加(P＜0.05),但免疫营养组低于普通营养组(P＜0.05).健康对照组、普通营养组、免疫营养组肠IgA水平分别为(42±7)、(35±6)、(38±6)μg/cm,与健康对照组相比,后2组水平明显减低(P＜0.05),但免疫营养组高于普通营养组(P＜0.05).结论 用强化免疫营养剂进行早期肠内营养,可以改善烫伤小鼠肠道免疫功能.     

Effect of Vitamin E Supplementation on Lymphocyte Distribution in Gut‐Associated Lymphoid Tissues Obtained from Weaned Piglets

Fifteen piglets were used to determine the effect of vitamin E supplementation on the number of CD4‐immunoreactive (CD4+) T‐lymphocytes, CD8‐immunoreactive (CD8+) T‐lymphocytes and IgA‐immunoreactive (IgA+) B‐lymphocytes per follicle in the Peyer's patch of distal ileum and the mesenteric lymph nodes of weaned piglets. Piglets, following a 3‐day adaptation period after weaning, were assigned to one of three experimental groups: control (no vitamin E supplementation), vitamin E supplementation of 100 mg/kg of diet and vitamin E supplementation of 300 mg/kg of diet. Supplementation of vitamin E lasted for a period of 36 days. The basal diet contained 80 mg α‐tocopherol/kg of diet. All piglets were killed at day 39 after weaning and samples of the distal ileum and adjacent mesenteric lymph nodes were collected. The number of cells for each lymphocyte subset was counted in the Peyer's patch and the mesenteric lymph nodes follicles, in cryostat sections processed for immunohistochemistry. Results showed that vitamin E supplementation (300 mg/kg diet) of piglets caused an increase (P < 0.05) in the number of IgA+ B‐lymphocytes in the Peyer's patch, but not in the mesenteric lymph nodes, compared with the corresponding values in control animals. Vitamin E supplementation had no effect (P > 0.05) on the number of CD4+ and CD8+ T‐lymphocytes in the follicles of the Peyer's patch and the adjacent mesenteric lymph nodes. Thus, vitamin E had relatively minor effects on distribution of the major immunocompetent cells in the gut. The numbers of CD4+ and CD8+ T‐lymphocytes as well as IgA+ B‐lymphocytes per follicle were higher by 26–77% (P < 0.05) in the mesenteric lymph nodes than the corresponding values in the Peyer's patch.