MCP-1/CCR2在老年高血压不同证型中的表达

目的观察单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）及其受体人CC趋化因子受体-2（CCR2）在老年高血压不同证型中的表达情况。方法 90例高血压患者随机分为肝阳上亢型、肝火上炎型、肝肾阴虚型各30例,选择30例健康人血清为对照组,采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清MCP-1浓度,应用流式细胞仪检测单核细胞表面CCR2的表达。结果肝火上炎组、肝阳上亢组、肝肾阴虚组血清MCP-1水平和单核细胞表面CCR2表达率均高于健康对照组,且肝肾阴虚组高于肝火上炎组和肝阳上亢组,差异均有统计学意义（P〈0.05和P〈0.01）。结论 MCP-1和CCR2可能参与了不同证型高血压的发生发展过程,且随着病程的延长、病情的加重,MCP-1/CCR2的生成也就越多。     

黄连解毒汤通过调控巨噬细胞极化防治动脉粥样硬化的机制

目的:研究黄连解毒汤对动脉粥样硬化(AS)模型小鼠M1、M2型巨噬细胞极化的调控作用,初步阐明其防治AS的机制。方法:将60只雄性ApoE^-/-小鼠随机分为空白对照组、模型组、辛伐他汀组[阳性对照,5 mg/(kg·d)]和黄连解毒汤低、中、高剂量组[5、10、20 mg/(kg·d),以生药总量计],每组10只。除空白对照组外,其余各组小鼠均饲以高脂饲料复制AS模型。造模结束后,各药物组小鼠灌胃相应药液,空白对照组和模型组小鼠灌胃生理盐水。每天给药1次,连续4周。给药结束后,采用全自动生化仪检测小鼠血清中三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量,采用天狼猩红染色法观察小鼠主动脉胶原纤维形成情况,采用酶联免疫吸附测定法检测小鼠血清中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、甘露糖受体(CD206)含量,采用实时荧光定量-聚合酶链式反应法检测小鼠主动脉中白细胞介素1β(IL-1β)、iNOS、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-10、类几丁质酶3样分子(YM1)、炎症区域分子1(Fizz1)mRNA的表达水平。结果:与空白对照组比较,模型组小鼠血清中TC、TG、LDL-C、iNOS含量以及主动脉中IL-1β、iNOS、TNF-αmRNA的表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01),血清中HDL-C、CD206含量以及主动脉中IL-10、YM1、Fizz1 mRNA的表达水平均显著降低(P<0.01);主动脉血管内皮下可见厚厚一层胶原纤维。与模型组比较,各药物组小鼠上述血清指标均显著改善(P<0.05或P<0.01);且黄连解毒汤中、高剂量组小鼠主动脉中IL-1β、TNF-α、iNOS mRNA的表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01),IL-10、YM1、Fizz1 mRNA的表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01),且其血管内皮相对光滑。结论:黄连解毒汤可通过抑制M1型巨噬细胞极化、促进M2型巨噬细胞极化,减少炎症反应,维持动脉内粥样斑块的稳定性,从而发挥抗AS的作用。     

黄连解毒汤治疗2型糖尿病

糖尿病是一种严重威胁人们身体健康的常见代谢性疾病,近年来,通过不断研究,认为胰岛素抵抗和胰岛β细胞缺陷与炎症因子和细胞免疫功能的失衡密切相关.黄连解毒汤作为清热解毒的代表方治疗2型糖尿病不仅有丰富的理论基础,而且与现代医学关于2型糖尿病的发病机制也是吻合的.     

黄连解毒汤对大鼠结肠炎组织损伤的影响

目的研究黄连解毒汤对实验大鼠结肠炎组织损伤的保护作用及其机制。方法用Wirst大鼠建立结肠炎动物模型,灌服用药2周后,取结肠组织评价大鼠结肠黏膜损伤指数(CMDI),检测结肠髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—PX)活性及丙二醛(MDA)的含量。结果不同剂量黄连解毒汤(10、30、50ml／kg体重)灌胃用药后均能不同程度降低模型大鼠结肠黏膜损伤指数(CMDI)和MPO活性、减少MDA含量,提高SOD、GSH—PX活性,且与用药剂量呈一定量效关系。结论黄连解毒汤通过抗脂质过氧化,对大鼠结肠炎结肠损伤进行修复,减轻结肠损伤,抑制结肠炎大鼠炎症反应。     

黄连解毒汤抗感染作用的研究进展

黄连解毒汤是清热解毒的经典古方,现代药理学及医学方解研究,黄连解毒汤中各味药中部分有效成分如小檗碱、黄芩苷、黄芩素等均具有一定的抗感染作用,尤其是在抑制体外细菌、真菌以及病毒性感染的效果尤为突出。综述黄连解毒汤抗细菌感染、抗真菌感染、抗病毒感染和临床上治疗感染性疾病的文献资料,对其研究进展作一分析。     

黄连解毒汤对过氧化氢诱导大鼠皮层神经元损伤的保护作用

目的:观察黄连解毒汤有效部位(HLJDTAF)对培养皮层神经细胞过氧化氢损伤的保护作用.方法:体外培养新生大鼠皮层神经细胞,加入过氧化氢观察其对神经细胞的损伤及HLJDTAF的保护作用.结果:HLJDTAF 610,305 mg·kg -1 可减少模型乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,305 mg·kg -1 还可提高模型细胞活性(P< 0.05 ;P< 0.01 ).同时HLJDTAF各剂量均可减少丙二醛生成,153 mg·kg -1 还可减少一氧化氮生成.结论:HLJDTAF对培养神经细胞自由基损伤具有显著的保护作用,其机制可能与抗脂质过氧化作用有关.     

黄连解毒汤对2型糖尿病大鼠血清炎性介质和标志物水平的影响

目的:探讨黄连解毒汤对实验性2型糖尿病血清部分炎症介质和标志物的影响,并初步讨论其作用机制.方法:以链脲佐菌素(STZ)静脉注射加高脂肪高热卡饮食饲养建立2型糖尿病大鼠模型,对照观察黄连解毒汤对实验性2型糖尿病大鼠治疗前后口服糖耐量实验(OGTT)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、急相反应蛋白C(CRP)一系列指标的影响.结果:给予黄连解毒汤治疗的实验性2型糖尿病大鼠,其血清中FBG、IL-1β、IL-6、TNF-α、CRP的水平比模型对照组明显降低,OGTT显著改善.结论:黄连解毒汤具有降糖、抗炎、改善胰岛素抵抗等作用,其作用机制可能与其改善2型糖尿病的炎症反应程度,改善胰岛素信号传导功能有关.     

黄连解毒汤有效部位对多发性脑梗塞大鼠大脑BDNF与trkB mRNA表达的影响

中日两国对黄连解毒汤及其提取物用于脑血管病的基础与临床研究提示黄连解毒汤治疗缺血性脑血管病有良好前景。我们运用复方有效部位研究模式与方法，利用大孔树脂色谱技术分离制备了黄连解毒汤有效部位(HLJDTAF)，前期研究表明其对多种缺血性脑损伤模型均有良好保护作用。目的：探讨HLJDTAF对大鼠     

黄连解毒汤有效成分对内皮细胞作用的研究进展

内皮细胞损伤是心血管疾病发生的关键因素,本文综述了黄连解毒汤主要有效成分黄芩苷、小檗碱、栀子苷通过提高内皮细胞抗脂质过氧化能力、抑制内皮细胞的氧化应激、对抗内皮细胞损伤、调节粘附蛋白或细胞因子基因的表达、加强调动机体或细胞的免疫功能等达到对内皮细胞的保护作用。     

黄连解毒汤不同组分群对热毒血瘀证大鼠的影响

目的:探讨黄连解毒汤各组分群对热毒血瘀证大鼠的影响。方法:采用内毒素与角叉菜胶联合制备大鼠热毒血瘀模型,分别灌胃黄连解毒汤水提物、总生物碱、总黄酮和总环烯醚萜后,观察不同组分群对热毒血瘀模型大鼠一般状态、血象和血液流变学的影响。结果:造模后大鼠一般状态差,有便溏等表现,白细胞有升高,全血粘度、红细胞压积、全血低切相对指数均明显升高(P0.05或P0.01);各预防给药组可明显改善大鼠的一般状态,使模型大鼠的血液全血粘度、压积明显降低,总生物碱还能明显降低全血高切还原粘度(P0.05或P0.01)。结论:黄连解毒汤水提物、总生物碱、总黄酮和环烯醚萜均对热毒血瘀证大鼠具有一定治疗作用,可改善其热毒症状,改善血液流变性,其中总生物碱是主要活性组分群。     

黄连解毒汤对快速老化小鼠皮层基因表达的影响

目的研究黄连解毒汤（HL）对快速老化小鼠亚系SAMP8皮层差异表达基因的影响，揭示HL对认知功能障碍的改善作用的分子机制。方法应用快速老化小鼠亚系SAMP8和SAMR1海马差异表达eDNA芯片，比较了以石杉碱甲或HL处理的SAMP8皮层基因表达谱，以及HL的药物反应基因，同时采用实时荧光定量PCR技术对芯片结果进行了验证。结果HL对SAMP8皮层基因表达具有明显的调节作用。差异表达基因有信号转导基因Dusp12，Rps6ka1，Rab26，Tat2，Phb，Syde1，Def8，Ihpk1，Pik3e2a，蛋白质代谢相关基因Tte3，Amfr，Prr6，核酸代谢基因Fhit，Itm2e，Cstf2t，能量代谢基因Stub1，Uqer，Nsf，免疫反应相关基因Clqb，转录调节基因D1ertd161e，细胞生长相关基因Ngm，Dip3b，Acrbp，递质转运相关基因skl7a7，神经系统发育相关基因Trim3，神经胶质细胞分化相关基因Tspan2，电子传递相关基因mt-Col，以及15个功能未知基因。结论HL可能是通过调节信号转导、突触传递、蛋白质和能量代谢、细胞增殖分化等途径发挥认知功能改善作用的；研究中发现的HL的药物反应基因可能是改善学习记忆的潜在靶标。     

Recent developments in CCR2 antagonists

Monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) is a major chemoattractant for monocytes and memory T cells by means of their binding to its specific cell-surface receptor, CC-chemokine receptor-2 (CCR2). CCR2 belongs to the G-protein-coupled seven-transmembrane receptor superfamily. The evidence in favor of CCR2 and MCP-1 having dominant roles in monocyte chemotaxis and chronic inflammation was provided by CCR2 and MCP-1 knockout mice. It has been recognized that CCR2 antagonists are potential therapeutic agents in preventing, treating, or ameliorating a CCR2-mediated inflammatory syndrome or disease such as psoriasis, uveitis, rheumatoid arthritis, multiple sclerosis, asthma, obesity, and chronic obstructive pulmonary disease. This review summarizes recent developments in small-molecule CCR2 antagonists disclosed by patent applications published between 2005 and 2008 and related publications.     

黄连解毒汤对人细胞色素P450酶6个亚型的体外抑制作用研究

目的:研究黄连解毒汤对人肝微粒体6个亚型CYP1A2、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4的体外抑制作用。方法:采用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)同时测定对乙酰氨基酚、6α-羟基紫杉醇、4-羟基双氯芬酸、4-羟基美芬妥英、右啡烷、1-羟基咪达唑仑和6β-羟基睾酮,分别代表CYP1A2、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4的活性;黄连解毒汤提取物和7种混合探针底物在人肝微粒体中共同孵育,并计算其IC50值表示对CYP450酶的抑制程度。结果:在人肝微粒体体外孵育体系中,黄连解毒汤对CYP2D6的IC50值为3.54μg/mL,对CYP1A2的IC50值为10.8μg/mL,对CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP3A4_T和CYP3A4_M亚酶的IC50值依次为67.7、299、530、199和607μg/mL。结论:在正常剂量下,黄连解毒汤对人肝微粒体CYP2D6和1A2可能有抑制作用,对人肝微粒体CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19和CYP3A4无明显抑制作用。     

金雀异黄素对MCP-1诱导人脐静脉血管平滑肌细胞增殖及c-fos mRNA转录的影响

目的研究金雀异黄素对单核细胞趋化蛋白1(MCP1)诱导的人脐静脉血管平滑肌细胞(hUVSMC)增殖及cfosmRNA转录的影响。方法用不同浓度(10,30,90μmol·L-1)金雀异黄素预作用hUVSMC2h后加入终浓度为10μg·L-1的MCP1作用30min;采用逆转录聚合酶链反应检测细胞中cfos基因的表达;作用48h,用细胞计数检测细胞增殖的情况。结果金雀异黄素在低剂量(10μmol·L-1)即能抑制平滑肌细胞的增殖(P<0.05),在高剂量(30,90μmol·L-1)才能抑制细胞内cfosmRNA的表达(P<0.01,P<0.01)。结论金雀异黄素能抑制MCP1诱导的hUVSMC增殖,其机制可能与降低cfos的表达有关。     

地塞米松对肺纤维化大鼠肺单核细胞趋化蛋白-1基因表达的影响

目的　研究地塞米松 (Dxs)对肺纤维化大鼠肺单核细胞趋化蛋白 1(MCP 1)mRNA表达的影响 ,阐明糖皮质激素治疗肺纤维化疾病的分子机制。方法　气管内滴注博莱霉素致大鼠肺纤维化模型 ,不同浓度的地塞米松处理后 ,观察肺组织的病理学变化和计数 5× 5mm高倍视野内炎症细胞数目 ;RT PCR方法检测肺组织MCP 1mRNA表达水平。结果　地塞米松减少了肺组织炎症细胞的聚集 ,延缓了肺纤维化的形成过程 ,并抑制了MCP 1mRNA的表达 ,呈现一定的剂量依赖效应趋势。结论　地塞米松治疗肺纤维化疾病的分子机制与抑制肺MCP 1基因表达有关     

Selective CCR2B receptor antagonists based on indole-2-carboxylic acid

The Src family tyrosine kinase p56^lck is predominantly expressed in T-lymphocytes and natural killer cells and there is an absolute requirement for p56^lck in T-cell development and activation. Consequently, there has been much effort in developing small molecule antagonists for p56^lck with a view for therapeutic use in a number of T-lymphocyte-dependent diseases. A large majority of protein kinase inhibitors are directed toward the ATP binding site and gain their specificity by exploiting adjacent topographical variations. To date, the most potent and widely studied class of Lck inhibitors are the pyrazolopyrimidines, which have proven to be valuable research tools. The development of pyrido[2,3-d]pyrimidine structures offer excellent potency and selectivity from a different structural platform and together these appear to offer the most promising scaffolds for the development of future therapeutics. SH2 domain inhibition offers the potential reward of escaping the constraints of the ATP binding site but developing potent and specific inhibitors of protein-protein interactions presents a significant challenge. The results briefly discussed in this review reveal the extent of progress toward this goal.     

苦参素对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠CCL5、CCR5及CCR5mRNA表达的影响

目的:观察苦参素对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠血清中趋化因子CCL5和脊髓中趋化因子CCL5相应的受体(CCR5)及CCR5mRNA表达的影响,探讨苦参素对EAE大鼠的防治机制。方法:用豚鼠全脊髓匀浆和完全弗氏佐剂混合制成抗原乳剂,诱导EAE模型,将40只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、苦参素低剂量组(150mg·kg^-1)、苦参素高剂量组(250mg·kg^-1),苦参素高、低剂量组均连续腹腔给药16d,同期正常组和模型组腹腔注射等量生理盐水,观察大鼠体质量变化,神经功能学评分,进行HE及C-2R-BG病理染色,用ELISA法测定大鼠血清中CCL5的含量、免疫组化法检测大鼠脊髓组织中CCR5的阳性表达、RT-PCR法检测脊髓中CCR5mRNA的表达。结果:苦参素高、低剂量组大鼠的体质量均高于模型组(P<0.05),神经功能学评分,炎症浸润和髓鞘脱失评分,血清中CCL5的水平,脊髓中CCR5、CCR5mRNA的表达均低于模型组(P<0.05),且高低剂量组有组间差异(P<0.05)。结论:苦参素对EAE大鼠具有一定的防治作用,其作用机制可能与下调大鼠CCL5、CCR5及CCR5mRNA的表达有关。     

Rational design of CCR2 antagonists: a survey of computational studies

Importance of the field: CC-chemokine receptor 2 (CCR2) belongs to the GPCR superfamily and is the primary receptor for monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1), also known as chemokine ligand CCL2. Studies indicate the possible involvement of MCP-1 and CCR2 in various disease conditions, such as rheumatic arthritis, multiple sclerosis, vascular diseases, obesity and diabetes, via the inflammatory pathway. MCP-1 and CCR2 knockout mice under a broad range of stimuli exhibit deficient monocyte recruitment suggesting its potential role in inflammation. Overall, there is evidence that an impairment of monocyte trafficking in inflammation models occurs when there is a loss of MCP-1 effector function. This makes its receptor, CCR2, an attractive target for pharmaceutical research. Several small molecular CCR2 antagonists have been developed, particularly in the industry.

Areas covered in this review: In this article, we have summarized the in silico work carried out in the area of CCR2 and reviewed mainly the computer aided drug design (CADD) studies reported on quantitative structure–activity relationship, homology modeling, molecular docking and virtual screening.

What the reader will gain: A survey of computational studies for the rational design and development of CCR2 antagonists.

Take home message: CADD tools can be used to rationalize the identification of the potential leads and these techniques can be effectively applied in the rapid searching of novel and potent CCR2 antagonists.     

大鼠鞘内注射MCP-1中和抗体缓解骨癌痛

目的观察脊髓趋化因子单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1,或CCL2)在骨癌痛大鼠中的可能作用。方法大鼠胫骨骨髓腔接种Walker256肿瘤细胞建立骨癌痛模型。观测造模前、后大鼠机械性痛觉超敏Von Frey阈值并观察造模后d 10～12,鞘内给予MCP-1中和抗体对大鼠Von Frey阈值和脊髓小胶质细胞激活标志物(ox-42)表达的影响。结果大鼠种瘤后6～12 d,机械性痛觉超敏Von Frey阈值进行性下降(P<0.01);与对照组相比,鞘内给予MCP-1中和抗体后,脊髓ox-42的表达水平明显降低(P<0.01),Von Frey阈值的明显升高(P<0.01)。结论大鼠鞘内注射MCP-1中和抗体缓解骨癌痛,其机制可能与抑制小胶质细胞的激活相关。     

基于SIRT1/UCP2信号通路观察二陈汤对2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病大鼠的影响

目的 探讨二陈汤对2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）合并非酒精性脂肪性肝病（nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD）大鼠糖脂代谢及氧化应激的作用,并探讨其可能作用机制。方法 40只♂ SD大鼠随机选取10只为正常对照组,其余大鼠造模成功后,随机选取20只分为模型组和二陈汤组,每组10只。正常对照组给予常规饲料喂养,模型组结合高脂高糖饲料喂养及单次腹腔注射链脲佐菌素30 mg·kg^-1以制备T2DM合并NAFLD大鼠模型,二陈汤组灌胃给予二陈汤（每天1.0 g·mL^-1生药量）。12周后检测各组大鼠生化指标、氧化应激指标;HE染色法观察肝脏组织病理变化;免疫组化法、q-PCR及Western blotting检测肝脏组织SIRT1/UCP2信号通路的表达。结果 与模型组比,二陈汤显著改善T2DM合并NAFLD大鼠体质量及代谢功能,降低空腹血糖、谷丙转氨酶、天门冬氨酸氨基转移酶、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、极低密度脂蛋白、游离脂肪酸、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数、丙二醛水平,且高密度脂蛋白、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶均明显升高。HE染色结果显示,模型组肝组织出现重度的脂肪变性,二陈汤显著减轻肝细胞脂肪性变。免疫组化、q-PCR与Western blotting结果显示,与模型组比较,二陈汤组SIRT1 mRNA和蛋白的表达显著上调,UCP2 mRNA与蛋白的表达显著降低。结论 二陈汤在一定程度上对T2DM合并NAFLD大鼠具有改善作用,其机制可能与调节SIRT1/UCP2信号通路有关。