IL-17等炎性因子在风湿免疫相关性血细胞减少骨髓细胞中的分泌状态及其临床意义

目的:观察风湿免疫相关性血细胞减少(Rheumatism immune-related hematocytopenia,RIRH)患者骨髓免疫细胞炎性因子分泌状态,探讨其对骨髓造血细胞损伤的病理作用及临床意义.方法:①ELISA法检测66例RIRH患者血清IL-5、IL-10、IL-12、IL-17和IFN-γ浓度,对照组30例采自健康查体血清;免疫化学法观察骨髓免疫细胞HLA-DR表达;②免疫荧光法观察骨髓细胞抗人球蛋白(IgG)抗体、FcγⅡ受体(FcγⅡR)、甘露糖受体(MR)、ICAM-1、IL-12、IL-17A与IL-17RA表达;30例缺铁性贫血患者骨髓作为疾病对照;③随机抽取32例血小板＞50×109 L-1无出血倾向患者,常规治疗同时联合复方丹参促进炎性因子代谢,与30例不联合复方丹参患者对照治疗效果.结果:①66例患者血清IL-5、IL-1O、IL-12、IL-17和IFN-γ浓度分别为(126.04±7.66) ng/L,(316.23 +25.163) ng/L,(328.43±27.01) ng/L,(48.17±4.22) ng/L和(40.28±3.69) ng/L,较之对照组(33.16 ±2.17) ng/L,(176.25±10.69) ng/L,(94.05±3.26) ng/L,(20.03±1.14) ng/L和(8.25 ±2.01)ng/L显著升高;②骨髓中活化的组织嗜碱细胞、嗜酸性粒细胞(EOS)、树突状细胞和巨噬细胞(Mp)等免疫细胞高表达HLA-DR、FcγⅡR、MR、ICAM-1、IL-12、IL-17A和IL-17RA;③32例IRHS患者联合复方丹参组经治疗2周后,血清IL-5和IL-17含量较之对照组显著降低,血象恢复时间较之对照组提前1周.结论:RIRH患者骨髓中多种免疫细胞活化,表达和分泌多种免疫分子,介导ADCC效应、细胞免疫功能和炎性反应,是损伤病变的造血细胞的重要免疫机制.抗感染、抑制免疫联合复方丹参活血化瘀,能改善骨髓造血微环境,促进造血恢复.     

骨髓造血细胞岛在免疫相关性血细胞减少患者中的异质性研究

目的:观察免疫相关性血细胞减少或免疫相关性全血细胞减少(Immuno-related hematocytopenia/immuno-relat-ed pancytopenia,IRH/IRP)患者骨髓"造血细胞岛"(Hematopoietic islands,HI)的不同性质,分析其与MHCⅠ/Ⅱ类分子和骨髓造血细胞抗人球蛋白(IgG)的关联,探讨相关免疫机制及其对临床诊疗的指导意义。方法:①对37例IRH/IRP患者骨髓涂片行常规瑞氏染色,观察HI的细胞成分和岛中免疫细胞性质;②细胞化学染色观察HI中免疫细胞过氧化物酶(POX)活性和铁贮存情况;③HLA-DR抗体免疫化学染色,观察免疫细胞MHCⅡ分子表达情况;④抗人IgG免疫荧光抗体(Immunofluores-cence,IF)染色,观察造血细胞和免疫细胞表面抗人IgG抗体表达;⑤观察不同HI在患者骨髓中出现的情况。结果:①HI中的造血细胞和免疫细胞各异,并与患者血沉和IgG、血清HLA-B27抗体浓度和过氧化物酶(POX)、HLA-DR和IF染色表达情况密切相关。②根据免疫细胞的生物学性质分为抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(Antibody dependent cell cytotoxicity,AD-CC)型HI、巨噬细胞(Mφ)型HI、抗原提呈(Antigen presenting,AP)型HI、浆细胞型HI和幼粒细胞型HI 5种。③HI中幼稚的造血细胞膜上均表达抗人IgG荧光抗体,HI中免疫细胞与造血细胞接触处和抗原提呈细胞(Antigen presenting cells,APC)浆中呈现不同的强阳性IF颗粒。④Mφ型HI数量最多,常与ADCC型HI在血沉升高患者骨髓中同时出现,HLA-B27和血沉均升高的IRP患者骨髓中可同时存在ADCC型、Mφ型和AP型HI。结论:IRH/IRP患者骨髓幼稚造血细胞膜表面抗原改变产生抗人IgG抗体是HI产生的基础;HI异质性及在骨髓中出现的不同形式则为患者体液免疫和细胞免疫不同程度的活化对造血细胞多重性损伤的生物学表现。     

RA患者滑膜液及血清中IFN-γ、IL-10、IL-12与TRAIL的病理学意义

目的:研究IFN-γ、IL-10、IL-12及TRAIL在类风湿关节炎(RA)病理过程中的作用。方法:采用夹心ELISA法检测46名RA患者关节滑膜液和血清中IFN-γ、IL-10、IL-12及TRAIL的浓度。结果:RA患者关节滑膜液中IFN-γ、IL-12及TRAIL浓度(ng/L)分别为(106.2±7.8)、(57.7±3.5)和(166.5±12.3);RA患者血清中IFN-γ、IL-12及TRAIL浓度(ng/L)分别为(56.3±7.4)、(35.1±12.7)和(69.5±8.3);正常对照血清中IFN-γ、IL-12及TRAIL浓度(ng/L)分别为(31.1±4.4)、(25.2±2.6)和(41.2±4.8);RA患者关节滑膜液IFN-γ高于其血清含量(P<0.05)及正常对照组(P<0.01);RA患者关节滑膜液和血清中IL-10浓度和正常对照差异无统计学意义。结论:在RA疾病中IFN-γ和IL-12浓度明高于正常人,表明RA发病过程中细胞因子分泌格局以Th1型为主,并且滑膜液比外周血更为典型。RA患者关节滑膜液和血清中TRAIL浓度增高,说明RA疾病过程中伴随有凋亡分子的参与。     

骨髓造血干/祖细胞自身抗体与免疫相关性全血细胞减少

背景：免疫相关性全血细胞减少涉及多个临床学科,近年来受到高度重视。骨髓造血早期细胞自身抗体及免疫调节功能可能是其症结所在。 目的：分析骨髓造血早期(干/祖)细胞自身抗体在免疫相关性全血细胞减少症发病机制中的作用及其进展。 方法：由作者电子检索1992年3月至2012年3月PubMed、万方医学网以及CHKD数据库中关于骨髓造血细胞相关抗体的文章,中文检索词为“免疫相关性全血细胞减少症、骨髓造血细胞、自身抗体、辅助性T细胞17”,英文检索词为“Immunorelated pancytopenia,Bone marrow hematopoietic cells,Autoantibody,Th17 cells”。排除重复性研究共保留30篇进行总结分析。 结果与结论：骨髓造血细胞自身抗体是由于T淋巴细胞调控失衡,导致B淋巴细胞及其亚群数量和功能异常而产生的一类抗体。它破坏或抑制骨髓早期造血细胞成熟分化,最终引起外周血细胞减少而致病。T辅助细胞17细胞数量增多、功能亢进可能与免疫相关性全血细胞减少症患者自身抗体产生呈一定相关性,是免疫相关性全血细胞减少症发病的重要因素。     

自身免疫性疾病的Fcγ受体的靶向治疗

IgG受体(Fcγ受体,FcγR)是重要的免疫应答调节分子。在人类,有3种白细胞FcγR,FcγRI(CD64)、FcγRⅡ(CD32)及FcγRⅢ(CD16)。FcγRⅡ具有两种功能不同的亚型,FcγRⅡA和FcγRⅡB。这两种亚型广泛分布于各种白细胞,是涉及自身免疫性疾病发病的主要受体。在临床和实验研究中已经发现FcγRⅡA的过度激活和/或FcγRⅡB的过度抑制均可导致免疫复合物介导的自身免疫性疾病。因此,下调FcγRⅡA或上调FcγRⅡB功能也许是治疗自身免疫性疾病的一种有效的方法。     

结核分枝杆菌Rv2450蛋白诱导小鼠免疫应答的实验研究

目的:以原核表达的结核分枝杆菌Rv2450蛋白在小鼠体内诱导体液和细胞免疫应答。方法:采用皮下包埋的方法,以预先转移到硝酸纤维素膜上的原核表达的Rv2450蛋白免疫小鼠(10只)3次,每次间隔2周。用间接ELISA法检测免疫小鼠血清特异性抗体的滴度。末次免疫完成后4周,处死3只免疫小鼠并分离脾淋巴细胞,体外经PPD(2μg/孔)刺激后,用MTT比色法检测免疫小鼠脾淋巴细胞的增殖指数。用ELISA法检测脾淋巴细胞悬液中IFN-γ、IL-10及IL-12的水平。结果:Rv2450蛋白免疫小鼠血清特异性抗体的滴度为1∶3200,淋巴细胞增殖指数为3.76±0.19。免疫小鼠脾淋巴细胞培养液中IFN-γ、IL-10及IL-12的含量,分别为(1740±19)ng/L、(678±15)ng/L、(469±13)ng/L,均高于各组的生理盐水对照组(P<0.05)。结论:Rv2450有可能作为新型结核疫苗的候选组分。     

香烟烟雾暴露对肺气肿小鼠CD4+IL-17+辅助性T细胞的影响

目的 探讨香烟烟雾暴露对肺气肿小鼠肺实质、外周血中CD4+IL-17+辅助性T细胞(Th17)的影响。方法 将40只雄性BALB/c小鼠按随机数字表法分为4组：对照12周组(C12)、对照24周组(C24)、烟雾暴露12周组(S12)、烟雾暴露24周组(S24),每组10只。香烟烟雾暴露法建立小鼠肺气肿模型。HE染色观察小鼠肺气肿的改变,计算平均内衬间隔(Lm)和肺泡破坏指数(DI);酶联免疫吸附法检测小鼠支气管肺泡灌洗液中IL-17、干扰素(IFN)-γ和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平及肺实质中IFN-γ和TNF-α水平;流式细胞术检测小鼠肺实质、外周血中CD4+ IL-17+T(Th17)细胞占CD4+T细胞的百分比;免疫荧光PCR法检测小鼠肺实质、外周血中RORγt和IL-17的mRNA表达,并分析这些指标的相互关系。结果 (1)S12组和S24组Lm为(39.19±3.51) μm和(46.87±7.16) μm,DI为39.13±1.57和45.16±3.13,均明显高于C12组和C24组(32.60±3.21) μm和(32.38±3.73) μm及28.23±1.62和28.86±2.07,以S24组增高更为明显,差异均有统计学意义(均P＜0.05)。(2) S12组和S24组BALF中IL-17、IFN-γ及TNF-α水平[(119.72±10.72) ng/L和(296.40±14.00) ng/L、(129.7±22.2) ng/L和(251.1±62.4) ng/L,(17.35±1.60) ng/L和(36.35±1.43) ng/L]较C12组和C24组[(52.06±4.70) ng/L和(51.89±6.82) ng/L、(85.8±26.8) ng/L和(88.9±11.5) ng/L,(6.41±0.90) ng/L和(5.85±0.92) ng/L]明显增高;在肺实质中,S12组和S24组IFN-γ及TNF-α水平[(1124.3±174.4) ng/L和(1342.7±206.1) ng/L,(77.2±13.7) ng/L和(101.7±19.0) ng/L]亦较C12组和C24组[(946.2±81.9) ng/L和(1027.2±188.3) ng/L,(62.1±16.1) ng/L 和(64.4±15.1) ng/L]明显增高;且以S24组增高更为明显,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。(3)S12组和S24组肺实质中Th17细胞比例[(3.27±1.12)％和(7.19±2.24)％]明显高于C12组和C24组[(1.80±0.75)％和(1.99±0.59)％];S12组和S24组外周血中Th17细胞比例[(1.96±0.61)％和(3.82±1.26)％]亦明显高于C12组和C24组[(0.90±0.37)％和(0.97±0.32)％];且以S24组增高更为明显,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。(4) S12组和S24组肺实质中RORγt和IL-17 mRNA表达量（1.73±0.35和4.52±1.15,4.00±0.87和83.43±21.01）较C12组和C24组（0.83±0.21和0.90±0.36,0.80±0.22和0.64±0.31）明显增高,以S24组增高更为明显,差异均有统计学意义(均P＜0.05);外周血中,S12组和S24组RORγt和IL-17 mRNA表达量(1.48±0.32和2.75±0.79,201.25±5.49和416.22±99.64)亦较C12组和C24组(0.59±0.25和0.75±0.36,24.90±5.49和22.28±4.24)明显增高,以S24组增高更为明显,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。(5)烟雾暴露组中,外周血和肺实质的Th17细胞比例均与Lm、DI值显著正相关(r值分别为0.767、0.772;0.722、0.706,均P＜0.05)。结论 Th17细胞在香烟暴露肺部炎症、肺气肿小鼠外周血及肺内表达增高,并伴活性的增强,且随烟雾暴露时间延长而增强,提示香烟暴露肺气肿小鼠Th17细胞上调可能是导致小鼠肺内及全身炎症反应放大的原因之一。     

藤黄微球菌Rpf结构域多肽诱导小鼠免疫应答的实验研究

目的:研究藤黄微球菌Rpf结构域多肽的免疫学特性.方法:用原核表达的藤黄微球菌Rpf结构域多肽免疫哌BALB/c小鼠3次,每次间隔2周.用ELISA法检测免疫小鼠血清中特异性抗体滴度.分离免疫小鼠的脾淋巴细胞,体外用抗原再刺激后,用MTT比色法检测免疫小鼠脾淋巴细胞的增值指数.ELISA方法检测淋巴淋巴细胞悬液中IFN-γ、IL-10和IL-12产生水平.另一部分免疫的小鼠经尾静脉感染MTB毒株H37Rv,4周后,计数脾脏细菌负荷数.结果:藤黄微球菌Rpf结构域多肽免疫小鼠血清特异性抗体滴度为1∶128 000,淋巴细胞增殖指数为(2.10±0.12),明显高于生理盐水对照组(0.90±0.21).ELISA方法检测Rpf结构域多肽免疫组IFN-γ,IL-10和IL-12水平为(1 126±36) ng/L,(368±13)ng/L和(289±14)ng/L,明显高于生理盐水对照组(P<0.01).与生理盐水免疫组(细菌负荷6.64±0.13)相比较,Rpf结构域多肽免疫的BALB/c小鼠,对攻击感染后抗MTB在脾脏中增殖有明显作用(细菌负荷为5.03±0.11,P<0.05).结论:藤黄微球菌Rpf结构域多肽有可能作为新型结核疫苗的候选组分.     

急性免疫性血小板减少症患儿IgG-Fc受体表达变化

目的 探讨小儿急性免疫性血小板减少症(aITP)外周血单核细胞(MC) IgG-Fc受体(FcγR)表达变化.方法 急性ITP患儿组27例,同龄健康对照组25例,流式细胞术检测单核细胞表面活化型受体FcγR Ⅰ及FcγRⅢ表达;荧光定量PCR( real-time PCR)检测MC活化型FcγRⅡa及抑制型FcγRⅡb mRNA表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆IFN-γ、IL-4和IL-10浓度.结果 (1)急性ITP患儿组MC FcγR Ⅰ和FcγRⅢ表达明显高于对照组(P＜0.05);FcγRⅡa mRNA及FcγRⅡa/FcγRⅡb mRNA比值显著高于对照组及治疗后,经地塞米松治疗后,活化型FcγR Ⅰ、FcγRⅢ、FcγRⅡa mRNA表达下降,抑制型FcγRⅡb mRNA表达增加,FcγR活化型/抑制型平衡逐渐恢复.(2)血浆炎症细胞因子IFN-γ浓度较对照组显著增高;抗炎因子IL-4显著低于对照组.IFN-γ浓度水平与MC FcγRⅡa mRNA表达显著正相关(r=0.79,P＜0.05),IL-4与FcγRⅡb mRNA表达正相关(r=0.84,P＜0.05).结论 单核细胞活化型FcγRs过度表达,抑制型FcγRⅡb表达降低,活化型/抑制型FcγRs表达失衡可能参与儿童急性ITP免疫发病机制,MC FcγRs异常表达可能与细胞因子IFN-γ、IL-4的改变有关,地塞米松治疗可恢复FcγRs活化型/抑制型平衡表达.     

HLA-DRB1*12及相应位点下IL-4及IFN-γ对乙型肝炎疫苗免疫效果的影响

目的 探讨人群HLA-DRB1*12基因及相应位点下IL-4及IFN-γ对乙肝疫苗免疫应答的影响.方法 选取74名对乙肝疫苗无、弱应答的广西籍健康大学生及条件相近的64名中、强应答者,采用PCR-SSP技术检测受试者的HLA-DRB1* 12等位基因,采用ELISA法检测血清中IFN-γ水平及IL-4因子水平.结果 (1)无、弱应答组的HLA-DRB1*12等位基因表达频率为10.8％,低于中、强应答组的32.8％ (P=0.002);(2)无、弱应答组的IFN-γ平均表达水平为(7.21±7.92) ng/ml,显著低于中、强应答组(16.36±11.00) ng/ml( P=0.000);(3)无、弱应答组中的IL-4平均表达水平为(3.18±4.45) ng/ml,显著低于中、强应答组(7.76±5.71) ng/ml(P=0.000);(4) HLA-DRB1* 12阳性组IFN-γ平均表达水平为(13.18±11.24) ng/ml,阴性组平均表达水平为(11.00±10.29) ng/ml,两组间差异无统计学意义(P=0.349);(5) HLA-DRB1*12阳性组IL-4平均表达水平为(5.947±4.530)ng/ml,阴性组平均表达水平为(5.132±5.800) ng/ml,两组间差异无统计学意义(P=0.423).结论 HLA-DRB1*12基因可能是促进广西人群乙肝疫苗免疫应答的相关基因;细胞因子IFN-γ及IL-4的表达水平可能影响机体乙肝疫苗的免疫效果.     

类风湿关节炎患者Th17细胞与调节性T细胞失衡的研究

目的观察类风湿性关节炎（RA）患者外周血Th17细胞与CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节性T细胞（Treg）平衡状态与疾病的关系,分析Th17／Treg细胞免疫失衡在RA发病机制中的作用。方法采用流式细胞仪四色荧光抗体标记法分别对47例RA患者和39名健康志愿者（HVs）进行CD3、CD8、IL-17与CD4、CD25、F0xP3标记,测定Th17与调节性T细胞的比例变化及相关细胞因子IL-6、IL-23和IL-17水平。结果RA组患者外周血中,CD3^＋CD8^＋IL-17^＋T细胞占CD3^＋T淋巴细胞的百分比为（1．12±0．38）％,明显高于对照组（0．68±0．29）％（t=1．83,P〈0．05）;CD4’CD25’FoxP3^＋细胞占CD4^＋T淋巴细胞的百分比为（2．74±0．71）％,明显低于对照组（4．69±1．23）％（t=-2．94,P〈0．05）。相关细胞因子测定结果：IL-6水平在RA组为（13．5±3．7）ng／L,正常人为（4．6±0．9）ng／L（t=6．24,P〈0．01）;IL-23水平在RA组为（71±19）ng／L,正常人为（25±6）ng／L（t=14．37,P〈0．01）;IL-17水平在RA组为（122±33）ng／L,正常人为（37±9）ng／L（t=19．01,P〈0．01）;RA患者血清IL-6、IL-23和IL-17水平均明显升高。结论RA患者外周血Th17与CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节性T细胞数量的异常可能是RA发病的重要因素,IL-6和IL-23的升高是引起这些改变的可能原因。     

巨细胞病毒对骨髓基质细胞粘附功能的影响

目的:探讨巨细胞病毒(CMV)对骨髓基质细胞表面粘附分子ICAM-1 和VCAM-1的表达及骨髓基质细胞对正常造血细胞的粘附率的影响。方法:用流式细胞仪检测骨髓基质细胞表达粘附分子ICAM-1和VCAM-1阳性率,用MTT方法检测骨髓基质细胞对正常骨髓造血细胞的粘附率。结果:本实验所用的CMV可以感染骨髓基质成纤维细胞;100TCID₅₀剂量以下CMV对骨髓基质细胞无明显破坏作用;活性CMV 感染骨髓基质细胞早期(18 h)粘附分子ICAM-1表达明显较高,晚期(120 h)ICAM-1表达明显较低;灭活的CMV也能使骨髓基质细胞ICAM-1表达增高,作用与有活性的CMV相似;骨髓基质细胞在CMV感染早期,对造血细胞的粘附率增高。CMV对VCAM-1的表达无明显影响。结论:CMV 感染骨髓基质细胞早期,骨髓基质细胞对造血细胞粘附能力增高,CMV感染晚期骨髓基质细胞对造血细胞粘附能力降低。     

川芎嗪对急性放射损伤小鼠骨髓中LFA- 1、ICAM-1表达影响的研究

目的：探讨川芎嗪对急性放射损伤小鼠骨髓中LFA-1、 ICAM-1表达水平的影响及其促进骨髓造血重建的机制。方法:正常24只清洁级昆明小鼠随机分为3组：正常组、生理盐水组和川芎嗪组。正常组未作任何处理，将生理盐水组和川芎嗪组小鼠用6.0 Gy ［⁶⁰Co］γ射线1次性全身均匀照射，吸收剂量率为0.56 Gy/min。照射后即分别喂饲相同剂量的生理盐水（0.2 mL/只，每天2次）和川芎嗪（2 mg/只，每天2次），直至处死为止。在照射后第7、14、21 d处死小鼠，制备骨髓细胞悬液，培养基质细胞，用RT-PCR、Western blotting方法检测骨髓基质细胞ICAM-1mRNA及其蛋白表达水平，用流式细胞仪检测骨髓单个核细胞表面LFA-1表达水平。结果:6.0 Gy ［⁶⁰Co］ γ 射线照射后，川芎嗪组骨髓单个核细胞表面 LFA-1表达水平均显著高于生理盐水组(P<0.01或P<0.05) ；骨髓基质细胞ICAM-1mRNA及其蛋白表达水平均明显低于生理盐水组（P<0.01或P<0.05）。结论:川芎嗪加快辐射后骨髓单个核细胞表面LFA-1的表达，降低骨髓基质细胞ICAM-1的表达，从而改善骨髓微环境，促进造血重建。     

Mechanisms mediating the inhibitory effect of all-trans retinoic acid on primitive hematopoietic stem cells in human long-term bone marrow culture

All-trans retinoic acid (RA) has generally been found to stimulate late committed (colony-forming unit- granulocyte, macrophage [CFU-GM]) and inhibit early (CFU-Blast) normal human myeloid progenitor cells. The present study provides the first evidence that the pharmacological concentration of 1 microM RA, exerts an inhibitory effect on the proliferation of functional human primitive hemopoietic stem cells (cobblestone area-forming cell [CFAC]) in long-term bone marrow cultures. Treatment of four-week confluent bone marrow culture with 1 microM RA for five days significantly reduced week 4 CAFC from 88 +/- 10 in control cultures to only 52 +/- 12 per 10(5) cells, p < 0.01. Quantitative enzyme-linked immunosorbent assay measurement of interleukin 6 (IL-6) and IL-11 produced from the four-week bone marrow stroma culture revealed only a slight and moderate increase of IL-6 and IL-11 production after treatment with RA. On the other hand, treatment with RA profoundly increased the soluble receptor gp130 released from the four-week bone marrow stroma by 7.5-fold from only 145 +/- 2.1 pg per ml in control cultures to 1,069.9 +/- 3.8 pg per ml in RA-treated cultures. A similar marked increase in the soluble adhesion molecules ICAM-1, and to a lesser extent VCAM-1, released from the four-week bone marrow stroma was observed after RA treatment. IL-6 has been implicated in the inhibitory effect of RA in several human hemopoietic and nonhemopoietic cells. The common transducing signal chain gp130, for all receptors of the IL-6 cytokine family, is expressed in most primitive human hemopoietic CD34(+) cells and its signaling was shown to synergize with other hemopoietic cytokines to expand primitive human hemopoietic stem cells. Recently, soluble gp130 was shown to be a natural potent antagonist of the human IL-6 cytokine family by binding the ligand and thereby reducing its bioavailability. The profound and rapid 7.5-fold increase in the natural antagonist of human IL-6 cytokine family after RA treatment could abrogate the gp130 signaling required for proliferation and/or expansion of human primitive hemopoietic stem cells and lead to the observed inhibitory effect of RA on CAFC. Both adhesion molecules VCAM-1 and ICAM-1 mediate human hemopoietic stem cell adhesion to marrow stroma. The present significant increase in the soluble form of these adhesion molecules after RA treatment could exert a significant antagonist effect on their function and hence may impair CAFC adhesion to marrow stroma. In conclusion, the RA inhibitory effect on the proliferation of primitive human hemopoietic stem cells could be mediated through: A) an impaired hemopoietic stem cell adhesion due to the significant increase in soluble adhesion molecules released from the marrow stroma after RA treatment, and B) a significantly reduced gp130 signaling that is necessary for stem cell proliferation due to the natural antagonistic effect of the profoundly increased level of soluble gp130 released from the marrow stroma after treatment with RA.     

类风湿性关节炎患者外周血芳香烃受体表达与Th17细胞相关性研究

目的 检测类风湿性关节炎患者(RA)外周血单个核细胞芳香烃受体(AhR)的表达情况,分析其表达与Th17细胞相关性并初步探讨AhR在RA发病中的作用机制.方法 Ficoll密度梯度法分离75例RA患者(其中活动期RA患者40例,缓解期RA患者35例)及70例健康对照者外周血单个核细胞(PBMC),酶联免疫吸附实验(EUSA)检测细胞裂解上清中AhR蛋白表达.流式细胞术检测75例RA患者Th17细胞表达比例.分析RA患者AhR蛋白表达与Th17细胞比例及其他临床指标的相关性.结果 RA患者PBMC内AhR表达[(91.25±15.27) ng/L]高于健康对照组[(41.81 ±9.72) ng/L],差异有统计学意义(t=3.191,P＜0.01).活动期RA患者AhR表达与缓解期RA患者表达差异无统计学意义(P＞0.05).RA患者PBMC中AhR水平与Th17细胞表达呈正相关(r=0.361,P=0.0015).RA患者PBMC中AhR表达与血清IL-17水平呈正相关,与其他临床指标无相关性(r=0.324,P=0.006).结论 RA患者PBMC中AhR表达升高,且与Th17细胞和血清中IL-17水平呈正相关,推测RA中AhR可能正向调控Th17细胞分化,促进IL-17表达.     

约氏疟MIF对小鼠BM-DC细胞作用的探索

 摘要：目的 探索约氏疟原虫来源巨噬细胞迁移抑制因子（PyMIF）对小鼠髓系树突状细胞（BM-DC）表型和功能的影响。方法分离小鼠骨髓细胞并经GM-CSF和IL-4诱导培养得到BM-DC：经PyMIF刺激后,通过流式细胞术检测其TLR2、TLR4、CD80、CD86、CD40、MHCII分子表达,通过ELISA方法检测IL-12、IL-10分泌;经PyMIF刺激的BM-DC与CD4+T或CD8+T细胞共培养,同样方法检测T细胞CD69表达、IL-2分泌情况,并检测CD8+T细胞对靶细胞杀伤能力。结果PyMIF可以下调小鼠骨髓来源树突状细胞TLR-4的表达;但不能影响BM-DC细胞表面分子TLR2、CD80、CD86、CD40、MHCII的表达,也不改变BM-DC分泌IL-12、IL-10。PyMIF可通过BM-DC下调CD8+T的CD69表达,但不能通过BM-DC改变CD4+T细胞CD69表达、IL-2分泌,及CD8+T细胞IL-2分泌。结论PyMIF可能是通过下调BM-DC细胞TLR4表达来抑制免疫细胞对疟原虫的识别,使之逃逸机体的攻击而存活。     

糖基化终产物刺激大鼠骨髓内皮细胞表达细胞间粘附分子-1的机制探讨

目的:探讨糖基化终产物(AGEs)致内皮细胞表达细胞间粘附分子-1(ICAM-1)与自由基产生之间的关系。方法:内皮细胞(EC)用抗AGEs抗体、抗IL-1多抗、N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理1 h后AGEs作用6 h,测定IL-1、超氧化物歧化酶(SOD)、ICAM-1、内皮细胞-中性粒细胞粘附率。结果:AGEs刺激后ICAM-1表达增加[吸光度(A)为0.65-0.14 vs 0.11-0.02]的内皮细胞SOD活性降低[(0.69-0.19)10³U/L vs(1.71-0.42)10³U/L]。ICAM-1的增加可被抗AGEs抗体[吸光度(A)为(0.12-0.01)]、NAC[吸光度(A)为(0.11-0.05)]和抗ICAM-1抗体[吸光度(A)为(0.10-0.04)]抑制。外源性IL-1也可刺激内皮细胞表达ICAM-1[吸光度(A)为(0.72-0.23)]。结论:AGEs刺激内皮细胞表达ICAM-1可能与其导致细胞自由基的产生有关;AGEs还可通过刺激其他细胞产生细胞因子间接作用于EC,参与促进ICAM-1表达。     

肺炎支原体肺炎伴喘息患儿血IL-10、IL-17和VEGF的检测及其意义

目的 观察白细胞介素10(IL-10)、白细胞介素17(IL-17)和血管内皮生长因子(VEGF)在儿童肺炎支原体肺炎中的表达水平及其与喘息的相关性.方法 选取62例肺炎支原体肺炎患儿,分为伴喘息组(A组,32例)和无喘息组(B组,30例),另选取健康儿童30位作为对照组(C组),检测三组儿童血清中IL-10、IL-17和VEGF的浓度.结果 肺炎支原体肺炎伴喘息组和无喘息组患儿血清IL-17和VEGF的水平均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);肺炎支原体肺炎伴喘息患儿的IL-17和VEGF的水平高于不伴喘息者,差异有统计学意义(P＜0.01).与对照组相比,肺炎支原体肺炎伴喘息组和无喘息组患儿的IL-10水平明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01);肺炎支原体肺炎伴喘息患儿的IL-10的水平低于不伴喘息者,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 IL-10、IL-17和VEGF可能在小儿肺炎支原体肺炎导致喘息样发作中起重要作用.