组织工程骨血管化策略的研究进展

骨组织工程的发展为大段骨缺损的修复提供了新的途径,众多的动物实验研究和逐渐兴起的临床应用研究已充分显示出其巨大的应用前景。然而,组织工程骨细胞支架复合物在植入体内后,尤其植入血供不佳的受区时,因不能及时地与机体建立起血供连接,使得成骨效果不稳定。近年来的研究表明,组织工程骨的血管化已成为构建大段组织工程骨的一个关键因素。我们对组织工程骨血管化策略的研究进展进行综述。     

组织工程软骨生物反应器的设计

目的 根据流体力学原理优化反应器内腔结构,并设计一套组织工程软骨生物反应器.方法 采用计算机仿真的方法对反应器内腔流场进行仿真计算,通过流场分析确定内腔结构,最终构建一套完整的生物反应器系统.结果 确定了生物反应器的内腔结构,生物反应器由控制系统和细胞培养室两部分构成,能置于培养箱中对软骨细胞材料复合物进行动态培养.结论 反应器内腔的结构是合理的.整个生物反应器系统运行可靠.     

Novel Imaging Analysis System to Measure the Spatial Dimension of Engineered Tissue Construct

The measurement of the spatial dimensions of tissue‐engineered constructs is very important for their clinical applications. In this study, a novel method to measure the volume of tissue‐engineered constructs was developed using iterative mathematical computations. The method measures and analyzes three‐dimensional (3D) parameters of a construct to estimate its actual volume using a sequence of software‐based mathematical algorithms. The mathematical algorithm is composed of two stages: the shape extraction and the determination of volume. The shape extraction utilized 3D images of a construct: length, width, and thickness, captured by a high‐quality camera with charge coupled device. The surface of the 3D images was then divided into fine sections. The area of each section was measured and combined to obtain the total surface area. The 3D volume of the target construct was then mathematically obtained using its total surface area and thickness. The accuracy of the measurement method was verified by comparing the results with those obtained from the hydrostatic weighing method (Korea Research Institute of Standards and Science [KRISS], Korea). The mean difference in volume between two methods was 0.0313 ± 0.0003% (n = 5, P = 0.523) with no significant statistical difference. In conclusion, our image‐based spatial measurement system is a reliable and easy method to obtain an accurate 3D volume of a tissue‐engineered construct.     

人脂肪来源细胞体内构建组织工程化脂肪的实验研究

目的探讨以组织工程技术，应用脂肪来源细胞（Adipose—derived cells，ADCs）体内构建脂肪组织的可行性。方法吸脂术获得人脂肪组织，一部分直接植入裸鼠体内；另一部分用酶消化法分离、培养ADCs，将第三代细胞接种于纤维凝胶（Fibrin glue）支架中，经成脂肪培养液诱导1周后，植入裸鼠体内，4周后取材，用称重法及油红、HE染色检测结果。实验分为直接注射脂肪组、单纯支架组、细胞-支架复合体脂肪诱导组、非诱导组。结果直接注射组在裸鼠皮下形成脂肪组织，但吸收量大；细胞-支架复合体诱导组有大量脂肪类组织形成，油红染色显示组织有脂滴形成；细胞-支架复合体非诱导组和单纯支架组均未发现脂肪组织形成。结论采用组织下程技术将吸脂术获得脂肪来源细胞接种纤维凝胶支架，体内构建脂肪组织，具有可行性。     

组织工程骨的牛血清白蛋白残余量检测

目的检测体外构建的组织工程骨中的牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,BSA)残余量,并探讨减少残余量的方法。方法体外分离培养hBMSCs,将第2代细胞消化、离心、洗涤3次,获取细胞洗涤液样品。取第2代h BMSCs接种于β-TCP支架材料,体外成骨诱导2周,构建组织工程骨。生理盐水浸洗3次,获取洗涤液样品。然后加入PBS,37℃振荡浸提24h,获取浸提液样品。同法获取未接种细胞的单纯支架材料的浸提液样品作为对照。采用酶联免疫法检测洗涤液与组织工程骨样品浸提液中BSA的残余量,观察洗涤次数与洗涤液中BSA含量的变化关系。结果随洗涤次数增多,洗涤液与浸提液中的BSA含量明显降低。酶联免疫法测定的组织工程骨与单纯支架材料浸提液中BSA残余量分别为(19.54±6.70)ng和(15.67±5.49)ng,单位重量的残余量分别为(0.656±0.213)ng/mg和(0.796±0.205)ng/mg,两组无显著差异(P>0.05)。结论酶联免疫法适用于组织工程骨中BSA残余量的检测。因为支架材料较细胞更易吸附BSA,现有条件下构建的组织工程骨BSA残余量仍然较高,需要进一步探索降低残余量的方法 。     

组织工程气管体内构建的研究进展

气管替代物利用体内天然环境对细胞贴覆生长及支架性能改善,促进移植物血管化,诱导免疫耐受和提高术后生存率有指导意义。内外层壁覆有干细胞和气道上皮细胞的脱细胞气管,利用天然生物反应器于体内预培养促组织工程气管成熟的方法,以实现黏膜的再上皮化、软骨细胞形成和血管化,在此基础上进行原位移植,对于长段气管病损有良好的临床应用前景。现就组织工程气管体内构建的意义及研究现状予以综述。     

Morphological Aspects of Dorsum and Sacrum Skin as Related to Liposuction

Analysis of the dorsum's skin and sacrum region allowed the authors to evaluate regional characteristics of cutaneous skin integument, taking into consideration the age group most subjected to liposuction. Thus, it was attempted to establish rules to facilitate, in a comparative form, the evaluation of results related to cutaneous retraction in plastic surgery.     

组织工程心脏瓣膜裸鼠体内移植的实验研究

目的将人血管混合细胞体外动态种植于脱细胞牛心包构建的组织工程心脏瓣膜（Tissue engineered hean valves，TEHVs）并移植入裸鼠体内，观察其生物学特征变化。方法将体外动态构建的TEHVs移植入裸鼠体内，30d时取材，观察组织、细胞的超微结构变化，种子细胞的生长行为和生物学特征变化，种子细胞与支架材料的黏附性，TEHVs的生物相容性等参数。结果组织学观察见：细胞数量、分层数较移植前增多，并有大量细胞浸润入TEHVs深层组织内：免疫组化显示：TEHVs上细胞的内皮细胞Ⅷ因子、平滑肌细胞α-肌动蛋白、成纤维细胞Fibronectin相关抗原呈阳性表达；扫描电镜见：裸鼠体内移植后细胞数量较移植前增多，细胞表面和细胞之间的网状胶原结构较埋置前增多明显；透射电镜可见：W—P小体、质膜小泡、密斑、密体、微丝等特征性结构。结论TEHVs细胞能够在裸鼠体内定向分化、增殖，生物学特征无改变，TEHVs生物相容性良好。