食管鳞癌患者Th1/Th2漂移与临床病理因素之间关系的研究

目的:探讨食管鳞癌患者Th1/Th2转录因子和细胞因子的表达与临床病理因素之间的关系,为肿瘤免疫治疗提供实验依据.方法: 实时荧光定量PCR(RQ-PCR)检测食管癌患者及正常组外周血单个核细胞(PBMC)中转录因子T-bet mRNA、GATA-3 mRNA表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆中细胞因子IFN-γ、IL-2和IL-4、IL-10的表达.结果: 与正常对照比较,食管鳞癌患者PBMC中Th1型转录因子T-bet和血浆中Th1型细胞因子IFN-γ、IL-2的表达水平显著降低(P<0.01);Th2型转录因子GATA-3和细胞因子IL-4、IL-10的表达水平显著升高(P<0.01),并且Th1/Th2漂移程度与肿瘤的CT分期和病灶长度相关(P<0.05),而与病变的部位、病理分型及分化程度无明显相关性(P>0.05).结论: 食管鳞癌患者体内存在Th1/Th2漂移,这可能是肿瘤细胞发生免疫逃逸的机制之一.     

食管鳞状细胞癌外周血单个核细胞Th1/Th2漂移的临床意义

目的：探讨外周血单个核细胞（PBMC）Th1、Th2类细胞因子的表达与食管鳞状细胞癌病理因素之间的相关性.方法：采用双抗体酶联免疫吸附法（ELISA）检测39例食管鳞状细胞癌患者外周血Th1、Th2类细胞因子的含量水平,并与食管鳞状细胞癌病理因素之间进行相关分析.结果：食管鳞状细胞癌患者PBMC中,IL-2、INF-γ的表达明显低于健康对照组,P＜0.05;IL-6的表达明显高于对照组,P＜0.05,存在Th1/Th2漂移现象.且发现TNM分期越晚,Th1类细胞因子IL-2的表达越弱,而IL-6表达越强,差异有统计学意义,P＜0.05.Th1/Th2漂移现象与肿瘤分化程度无明显相关性.结论：食管鳞状细胞癌患者PBMC存在Th2细胞优势,而Th1类细胞因子表达减弱;Th1/Th2漂移现象与肿瘤的TNM分期有关.     

化疗对结肠癌Th1和Th2类细胞因子基因表达的影响及意义

目的：探讨结肠癌Th1和Th2类细胞因子的基因表达水平及化疗对其表达的影响。方法：采用RT-PCR技术．检测35例正常人、30例结肠息肉和67例结肠癌患者及结肠癌组化疗后外周血单个核细胞（PBMC）’rhl和Th2类细胞因子mRNA表达水平。结果：正常对照组及结肠息肉组Th1和Th2类细胞因子基因表达呈阴性或基本不表达。结肠癌组IL-4、IL-6、IL-10mRNA表达水平显著高于正常对照组及结肠息肉组（P〈0．05）；IFN-γ无阳性表达（0／67）．IL-2则仅有3例阳性表达。化疗后Th1类细胞因子表达增强，Th2类细胞因子的表达则减弱（P〈0，05）。结论：结肠癌患者呈Th2类细胞因子强势表达，细胞免疫受抑，化疗可纠正Th1／Th2的失衡状态，甚至使Th2类向Th1类漂移。     

骨髓增生异常综合征和再生障碍性贫血患者蛋白激酶Cθ及Th1/Th2、Tc1/Tc2类细胞因子的表达

 【摘要】 目的：分析骨髓增生异常综合症（MDS）及再生障碍性贫血（AA）患者外周血单个核细胞（PBMC）蛋白激酶Cθ（PKCθ）的表达及Th1/Th2,Tc1/Tc2的变化,探讨PKCθ在MDS及AA发病机制中的作用。方法：收集外周血标本,MDS-RA 14例,AA 15例,正常人30例,分离PBMC,实时荧光定量PCR（RT-qPCR）方法检测PKCθmRNA表达水平;流式细胞术检测 Th1/Th2类细胞因子和Tc1/Tc2类细胞因子的表达水平。结果：MDS及AA患者PBMC中PKCθ mRNA相对表达量较正常对照组升高（P＜0.05）;MDS及AA患者Th1、Tc1类细胞因子IFN-γ、IL-2、TNF-α分泌水平较正常对照组均升高（P＜0.05）;Th2、Tc2类细胞因子IL-4、IL-6、IL-10分泌水平较正常对照组无统计学差异（P＞0.05）;MDS及AA患者组间PKCθmRNA表达及Th1/Th2,Tc1/Tc2类细胞因子表达无统计学差异（P＞0.05）。结论：MDS及AA患者外周血单个核细胞中PKCθ表达增高,PKCθ可能通过上调Th1、Tc1相关细胞因子分泌,导致造血干细胞的损伤。     

转录因子T-bet和GATA-3在食管癌患者外周血单个核细胞中的表达及其与患者免疫状态的关系

目的 观察转录因子T-bet和GATA-3在食管痛患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达,并探讨其与患者免疫状态的关系.方法 采用逆转录-荧光定量-聚合酶链反应(RT-FQ-PCR)检测60例食管癌患者和30例健康对照者PBMC中T-bet和GATA-3的mRNA表达水平,采用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测血浆中干扰素γ(IFN-γ)和白细胞介素4(IL-4)的水平.结果 与健康对照组相比,食管癌患者T-bet mRNA表达明显降低(Ⅰ、Ⅱ期食管癌组为0.27±0.05,Ⅲ、Ⅳ期食管癌组为0.12±0.02),GATA-3 mRNA表达明显升高(Ⅰ、Ⅱ期食管癌组为0.45±0.06,Ⅲ、Ⅳ期食管癌组为0.55±0.03),IFN-γ表达明显降低[Ⅰ、Ⅱ期食管癌组为(12.12±1.48)ng/L,Ⅲ、Ⅳ期食管癌组为(8.44±0.90)ng/L],IL-4表达明显升高[Ⅰ、Ⅱ期食管癌组为(18.64±0.77)ng/L,Ⅲ、Ⅳ期食管癌组为(25.28±2.02)ns/L],Ⅰ、Ⅱ期食管癌组与Ⅲ、Ⅳ期食管癌组间差异无统计学意义(均P>0.05).IFN-γ水平与T-bet mRNA表达呈正相关(r=0.79,P<0.05),IL-4与GATA3 mRNA表达呈正相关(r=0.43,P<0.05).结论 食管癌患者外周血中T-bet表达降低,GATA-3表达升高,Th1和Th2平筏被打破,Th2占优势.T-bet和GATA-3参与了Th1和Th2平衡的调控.     

子宫内膜癌患者外周血Th1和Th2细胞因子的表达及临床意义

目的：探讨子宫内膜癌患者外周．61Th1和Th2细胞因子的表达及其临床意义。方法：采用流式细胞小球微阵列术（Cytometrie Bead Array，CBA）检测52例子宫内膜癌患者、46例正常女性的外周血血清中Th1型细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-2和Th2型细胞因子IL-4、IL-5、IL—10细胞因子的含量，然后进行比较分析。结果：子宫内膜癌组与正常对照组比较，IL-2、IL-4和IL-5的表达升高，TNF—α的表达降低，Th1/Th2（IFN-γ/IL4）比值下降（P〈0．001）。中晚期患者的Th1／Th2比值较早期患者进一步下降（P〈0．05）。不同病理类型及分级的细胞因子水平和Th1/Th2比值无差异（P〉0．05）。深肌层浸润、淋巴结转移患者Th2细胞因子水平上升（P〈0．05）。手术后患者的IFN-γ、TNF—α水平和Th1／Th2比值上升（P〈0．05）。细胞因子水平与预后无关。结论：子宫内膜癌患者中可见Th2细胞因子升高，Th1／Th2平衡向，Th2方向漂移。细胞因子水平、Th1／Th2比值与病理类型及病理分级无关（P〉0．05）。深肌层浸润、淋巴结转移患者的Th2型细胞因子水平偏高。手术可纠正Th1／Th2的失衡。     

食管鳞状细胞癌外周血单个核细胞Th1/Th2漂移的临床意义

目的:探讨外周血单个核细胞(PBMC)Th1、Th2类细胞因子的表达与食管鳞状细胞癌病理因素之间的相关性。方法:采用双抗体酶联免疫吸附法(ELISA)检测39例食管鳞状细胞癌患者外周血Th1、Th2类细胞因子的含量水平,并与食管鳞状细胞癌病理因素之间进行相关分析。结果:食管鳞状细胞癌患者PBMC中,IL-2、INF-γ的表达明显低于健康对照组,P<0·05;IL-6的表达明显高于对照组,P<0·05,存在Th1/Th2漂移现象。且发现TNM分期越晚,Th1类细胞因子IL-2的表达越弱,而IL-6表达越强,差异有统计学意义,P<0·05。Th1/Th2漂移现象与肿瘤分化程度无明显相关性。结论:食管鳞状细胞癌患者PBMC存在Th2细胞优势,而Th1类细胞因子表达减弱;Th1/Th2漂移现象与肿瘤的TNM分期有关。     

宫颈癌患者Th1／Th2细胞因子表达水平的研究

  目的 检测宫颈癌患者外周血CD+4 T细胞分泌细胞因子的水平变化，分析Th1和Th2细胞的细胞因子免疫活动，为肿瘤的免疫治疗提供实验依据。方法 用刺激物刺激细胞，增加细胞内细胞因子的表达，再加入荧光标记的特异性抗细胞因子单克隆抗体，特异性抗原抗体结合，以流式细胞仪分析特异性细胞因子表达水平。结果 宫颈癌患者Th1型细胞因子白细胞介素-2（IL-2）表达水平较正常对照组降低，差异有统计学意义，而Th1 型细胞因子干扰素-γ（IFN-γ）表达水平较正常对照组差异无统计学意义。Th2型细胞因子白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）表达水平较正常对照组显著升高，差异有显著性意义。结论 宫颈癌患者Th1型反应模式处于弱势状态，Th2型反应模式处于优势状态，Th1／Th2平衡失调，Th1／Th2平衡向Th2方向漂移，这可能是肿瘤细胞发生免疫逃逸，从而导致肿瘤的发生或者转移的原因之一。     

肺癌患者Th1和Th2类细胞因子的基因表达及临床意义

目的观察肺癌患者体内Th1和Th2类细胞因子的基因表达及化疗对其表达的影响。方法采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术，检测肺癌患者在化疗前、化疗后外周血单个核细胞（PBMC）Thl和Th2类细胞因子mRNA表达。结果正常对照及良性肺部疾病组Th1和Th2类细胞因子基因表达呈阴性或基本不表达；肺癌组IL4、IL．6、IL-10的mRNA表达水平显著高于良性肺部疾病组和正常对照组（P值均〈0．001）；IFN-γ无阳性表达（0／52），IL-2则仅有2例阳性表达，均较正常对照组及良性肺部疾病组明显减少（P值分别为0．006，0．007；0．004，0．003）；且Th1和Th2类细胞因子基因表达水平与肺癌的病理分型及临床分期无相关性（P值分别为0．925，0．752，0．868，0．780，0．949）。化疗后IL-4、IL-6、IL-10的阳性表达较化疗前显著减少（P值分别为0．003，0．001，0．002）。而IFN-γ、IL-2阳性表达较化疗前有显著增加（P值均〈0．001）。结论 肺癌患者Th1类细胞因子表达受抑，Th2类因子呈强势表达；化疗可使肺癌患者Th2类细胞因子的强势表达向Th1类逆转。     

宫颈癌患者外周血Th1／Th2细胞因子表达水平的研究

目的：分析27例宫颈癌患者外周血单个核细胞(PBMC)中Th1／Th2两类细胞因子的表达水平，并与正常人比较。了解宫颈癌患者的免疫漂移现象。方法：利用RT-PCR技术检测27例宫颈癌患者PBMC中Th1／Th2两类细胞因子的mRNA表达水平。结果：27例宫颈癌中IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6和IL-10的表达阳性率依次为2/27、3／27、18／27、14／27和18／27。结论：宫颈癌患者高表达Th2类细胞因子．低表达Th1类细胞因子，出现典型的Th2漂移现象。为宫颈癌的生物治疗提供可能。     

维吾尔族宫颈癌患者 Th1／Th2型细胞因子表达水平及临床意义

目的：评估宫颈癌及癌前病变患者免疫水平，进一步探讨维吾尔族宫颈癌患者血浆中Th1／Th2型细胞因子表达水平及临床意义。方法本研究收集宫颈癌、癌前病变（ CIN Ⅲ）患者及对照组外周血标本，使用ELISA法检测血浆中Th1型细胞因子IL－2、IFN－γ及Th2型细胞因子IL－4、IL－10的表达水平，绘制ROC曲线分析四种细胞因子在宫颈癌辅助诊断中的价值。结果与对照组相比，宫颈癌和癌前病变组Th1型细胞因子IL－2、IFN－γ表达量显著降低（P＜0．05），Th2型细胞因子IL－4、IL－10表达量显著升高（P＜0．05）；在宫颈癌组中，IL－10表达量随肿瘤分期逐渐升高（P＜0．05）；维吾尔族宫颈癌患者血浆IL－2表达量较汉族患者显著降低（ P＜0．05）；在区分宫颈癌组与对照组中，IL－2、IFN－γ、IL－4和IL－10的AUC分别为0．979、0．766、0．736和0．903。结论宫颈癌患者细胞免疫水平低下，体内发生Th1／Th2漂移，提示这可能是肿瘤细胞发生免疫逃逸的机制之一，Th1／Th2型细胞因子的检测对宫颈癌的辅助诊断具有一定参考价值，此外IL－2表达量的下调可能在维吾尔族宫颈癌发生发展过程中起到重要作用。     

射频消融术对原发性肝癌患者甲胎蛋白和Th1、Th2细胞因子的影响

目的:观察原发性肝癌患者经射频消融(RFA)治疗后外周血甲胎蛋白(AFP)和Th1、Th2细胞因子的变化,探讨射频消融术对原发性肝癌患者治疗效果与免疫功能间的关系。方法:应用射频消融治疗仪治疗原发性肝癌46例,采用化学发光方法检测AFP值,酶联免疫吸附(ELISA)方法检测患者在射频消融前和治疗后14天、28天外周血Th1细胞因子[白介素(IL)-2、肿瘤坏死因子(TNF-α)、干扰素(IFN)-γ]及Th2细胞因子(IL-4、IL-6、IL-10)的表达。结果:原发性肝癌患者射频消融治疗前外周血AFP值明显高于健康志愿者(P<0.05),Th1细胞因子降低,Th2细胞因子升高,与正常对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。射频消融术后,大部分患者外周血AFP值明显降低,Th1细胞因子升高,Th2细胞因子降低,与正常对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Th1、Th2细胞因子的水平状态在原发性肝癌射频消融治疗后与AFP的变化存在相关性,可能对肝癌的预后有一定指导意义。     

化疗对晚期非小细胞肺癌外周血Th1/Th2细胞因子表达的影响

目的探讨化疗对非小细胞肺癌患者外周血Th1/Th2细胞因子表达的影响。方法应用ELISA方法,检测患者化疗前、化疗3个周期后和化疗6个周期后Th1/Th2细胞因子的表达水平。结果晚期非小细胞肺癌患者外周血Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ表达水平低于正常组(P<0.05),而Th2型细胞因子IL-6和IL-10表达水平显著高于正常组(P<0.05)。化疗3个周期后血IL-2、IFN-γ水平明显高于化疗前,差异有统计学意义(P<0.05),IL-6和IL-10水平明显低于化疗前(P<0.05)。化疗6个周期后血IL-2、IFN-γ表达水平明显低于化疗3个周期,差异有统计学意义(P<0.05),而化疗6个周期后血IL-6和IL-10水平稍低于化疗3个周期,差异无统计学意义(P>0.05)。结论晚期非小细胞肺癌患者存在免疫相关因子紊乱,3个周期的化疗对改善机体的免疫平衡有效;6个周期的化疗未能进一步改善机体免疫功能,甚至出现免疫功能恶化。     

调节性T细胞及Th1/Th2细胞因子在急性白血病中的表达及意义

目的:探讨调节性T细胞（Tregs）及Th1/Th2型细胞因子在急性白血病发病中的作用。方法:采用流式细胞术检测37例急性白血病患者［包括急性髓细胞性白血病（acute myeloid leukemia,AML）24例,急性淋巴细胞白血病（acute lymphocytic leukemia,ALL）13例］及28例健康对照者外周血CD4+CD25+Foxp3+Tregs的比例,酶联免疫吸附法（ELISA）法检测血浆IL-2、IFN-γ、IL-10、IL-4和TGF-β水平。结果:AML和ALL患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Tregs比例均高于健康对照组 (P＜0.05);AML及ALL患者血浆IL-4、IL-10和TGF-β水平均较健康对照组升高 (P＜0.05);IFN-γ水平较健康对照组降低 (P＜0.05);IL-2水平与健康对照组比较无明显差异 (P＞0.05)。结论:Tregs与Th1/Th2细胞因子同时参与了急性白血病的发生;急性白血病患者机体Th1/Th2细胞因子失衡,Th2占优势状态,这可能是导致急性白血病细胞免疫逃逸的原因之一;Tregs可能通过影响Th1/Th2细胞因子平衡参与急性白血病的发病。     

肺癌患者转录因子T-bet和GATA3的基因表达状况及药物干预研究

目的 分析肺癌患者Th1和Th2两类细胞因子的基因表达与转录因子T－bet和GATA3表达的相关性,探讨黄芪和（或）川穹嗪对Th2型肿瘤的干预作用。方法 利用RT－PCR技术检测42例肺癌患者人外周血单个核细胞（PBMC）中IFNγ、IL－2、IL－4、IL－6、IL－10、T-bet、GATA3以及肺癌组织特异性mRNA CK19和CEA的表达状况;体外加入黄芪和（或）川穹嗪后,观察IFNγ、IL－4、T－bet和GATA3表达的变化情况。结果 42例肺癌患者IFNγ、IL－2、IL－4、IL－6和IL－10的表达频率依次为4／42,5／42,27／42,24／42和31／42;表达强度依次为0.109,0.116,0.318,0.306和0.372。转录因子T－bet和GATA3的表达频率为6／42和34／42,表达强度为0．139和0．359,而且CEA和CK19 mRNA阳性的患者中,T－bet的表达频率和表达强度较代,GATA3的表达频率较高,表达强度也相应提高,表明黄芪和（或）川穹嗪能干预这种现象。结论 肺癌患者Th2类细胞因子群谱的高表达与T－bet表达降低,GATA3表达增高有关,黄芪和（或）川穹嗪能降低Th2类细胞因子和GATA3的表达,提高Th1类细胞因子和T－bet的表达。     

淋巴细胞功能相关抗原-1/细胞间黏附分子-1介导的细胞因子诱导的杀伤细胞体外抑瘤机制

 目的　探讨淋巴细胞功能相关抗原-1（LFA-1）／细胞间黏附分子-1（ICAM-1）介导的细胞因子诱导杀伤细胞（CIK）的体外抑瘤机制。方法　从白血病患儿外周血分离淋巴细胞,经过干扰素-γ（IFN-γ）、抗CD3单克隆抗体（CD3McAb）、白细胞介素-2（IL-2）诱导并与树突状细胞（DC）共培养,获得大量的DC-CIK。在经10、20 μg／ml等不同质量浓度小鼠抗人LFA-1单克隆抗体处理后,采用MTT法研究DC-CIK细胞对多种白血病细胞株的杀伤活性,RT-PCR与Western blotting方法检测GATA-3和T-bet基因表达水平的变化。ELISA方法测定DC-CIK细胞释放细胞因子IL-12、IFN-γ、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达水平。结果　诱导后的DC-CIK细胞形态规则,经不同浓度的LFA-1单克隆抗体处理后,MTT结果：20 μg／ml LFA-1单克隆抗体封闭组DC-CIK细胞对B95细胞杀伤作用下降最为明显（t＝10.138,P＜0.05）;RT-PCR与Western blotting结果：20 μg／ml LFA-1单克隆抗体封闭的B95细胞组,GATA-3基因mRNA水平和蛋白水平表达增加最为明显（t＝16.386,P < 0.05;t＝22.652,P＜0.05）;同时T-bet 基因mRNA水平和蛋白水平表达降低最为明显（t＝17.728,P＜0.05;t＝17.452,P＜0.05）;ELISA结果：20 μg／ml LFA-1单克隆抗体封闭的B95细胞组中细胞因子IL-12、IFN-γ、TNF-α分泌水平下降最为明显（t＝21.621,P＜0.05;t＝13.739,P＜0.05;t＝15.278,P＜0.05）。结论　GATA-3和T-bet基因参与了LFA-1／ ICAM-1介导的DC-CIK抑瘤途径,并且通过分泌Th1型细胞因子IL-12、IFN-γ、TNF-α等发挥抑瘤作用。     

乳腺癌患者外周血Th1／Th2细胞因子的漂移及其与病理和临床病程的关系

 目的 检测乳腺癌患者外周血CD+3 T细胞分泌细胞因子的水平，分析Th1和Th2细胞的细胞因子免疫变化，为肿瘤的免疫治疗提供实验依据。方法 用刺激物刺激细胞，增加细胞内细胞因子的表达，加入荧光标记的特异性抗细胞因子单克隆抗体，特异性抗原抗体结合，应用流式细胞仪分析特异性细胞因子表达水平。同时用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清中相应的细胞因子。结果 CD+3 T细胞分泌的细胞因子水平及血清中的细胞因子皆表现Th1型细胞因子干扰素-γ（IFN-γ）、白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-12（IL-12）表达水平较正常对照组显著降低，Th2型细胞因子白细胞介素-4（IL-4）和白细胞介素-10（IL-10）表达水平较正常对照组升高，差异有统计学意义。肿瘤坏死因子-α （TNF-α）表达水平较正常对照组升高，差异有统计学意义。结论 乳腺癌患者体内Th2型细胞因子模式占优势状态，这可能是肿瘤细胞发生免疫逃逸，从而导致肿瘤的发生或者转移的原因之一。