亚硒酸钠预处理对Aβ损伤PC12细胞的保护性作用

目的研究β淀粉样蛋白(Aβ)对PC12细胞的氧化损伤以及亚硒酸钠的保护作用。方法将PC12细胞分为正常对照组、亚硒酸钠预处理组、亚硒酸钠预处理后损伤组、损伤组,观察细胞形态、用MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测凋亡,测定各组乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、丙二醛(MDA)含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果 Aβ抑制PC12细胞的分裂增殖,经过Aβ作用24 h的PC12细胞,其GSH-Px活性下降,MDA含量升高;一定浓度亚硒酸钠预处理可有效地减轻Aβ引起的PC12细胞损伤,与Aβ损伤组相比亚硒酸钠预处理后Aβ损伤组的细胞存活率增加、凋亡下降、GSH-Px活性增高、LDH漏出率、MDA含量下降。结论亚硒酸钠对Aβ引起的PC12细胞氧化损伤具有明显的保护作用。     

亚硒酸钠对结直肠癌HT-29细胞AMPK/mTOR通路活化及凋亡的影响

目的研究亚硒酸钠对结直肠癌HT-29细胞中AMPK及其下游靶蛋白mTOR的作用,以及其对HT-29细胞凋亡的影响。方法分别用亚硒酸钠、AMPKα亚基特异激活剂AICAR和AMPK特异siRNAs处理HT-29细胞。采用Western印迹检测HT-29细胞中AMPK和mTOR的磷酸化水平、流式细胞术检测HT-29细胞凋亡率。结果与对照相比,亚硒酸钠可上调HT-29细胞中AMPK的磷酸化水平,下调mTOR的磷酸化水平,并促进HT-29细胞凋亡(P<0.01);亚硒酸钠单独处理HT-29细胞与AMPKα亚基特异激活剂单独处理HT-29细胞作用类似;敲低HT-29细胞中AMPK蛋白表达后,mTOR磷酸化水平升高,同时,亚硒酸钠对HT-29细胞的促凋亡作用降低(P<0.01)。结论亚硒酸钠通过激活AMPK通路进而抑制mTOR通路,从而促进HT-29细胞凋亡。     

京尼平苷对β淀粉样蛋白诱导的神经细胞PC12凋亡的影响及相关机制研究

目的 探讨京尼平苷对β淀粉样蛋白(Aβ)诱导的神经细胞PC12凋亡的影响及相关作用机制。方法 体外培养神经细胞PC12,以不同浓度梯度Aβ、京尼平苷作用于PC12,细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测其细胞活力。PC12分为对照组(不做任何处理)、Aβ组(32μmol/L Aβ)、京尼平苷组(32μmol/L Aβ+16μmol/L京尼平苷)和核因子E2相关因子2(Nrf2)抑制剂组(32μmol/L Aβ+16μmol/L京尼平苷+100 nmol/L鸦胆子苦醇),用CCK-8法和流式细胞仪分别检测PC12细胞活力和凋亡率;酶联免疫吸附法检测PC12细胞内活性氧、丙二醛和超氧化物歧化酶(SOD)含量;蛋白免疫印迹法检测PC12内Nrf2、血红素加氧酶1(HO-1)表达。结果 与对照组比较,Aβ组PC12细胞活力及细胞内SOD、Nrf2、HO-1表达明显降低,凋亡率及细胞内活性氧、丙二醛含量明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与Aβ组比较,京尼平苷组PC12细胞活力及细胞内SOD、Nrf2、HO-1表达明显升高(P<0.05),凋亡率[(15.28±0.93)%vs...     

亚硒酸钠、砒霜对肺腺癌细胞周期、凋亡、耐药的影响

目的通过比较低浓度亚硒酸钠、砒霜对肺腺癌细胞A549的周期、凋亡、耐药及线粒体的影响,探讨肺腺癌药物治疗的新方法。方法体外培养肺癌A549细胞,分为对照组及5.0μmol/L亚硒酸钠（A组）、5.0μmol/L砒霜（B组）处理组,药物处理24 h后以流式细胞仪检测细胞周期;Western blot检测三组促凋亡因子Caspase-3、抗耐药基因RARα的表达,RT-PCR检测三组凋亡抑制基因Bcl-2、细胞周期素CyclinD3表达;电子显微镜观察细胞线粒体结构与凋亡小体。结果与对照组相比,A、B组G0/G1期增加、S和G2/M期减少,出现细胞周期阻滞,凋亡细胞比例增加。Caspase-3、RARα表达上调,Bcl-2、cyclinD3表达下调。线粒体肿胀、线粒体嵴模糊不清,出现凋亡小体。结论亚硒酸钠、砒霜治疗肺腺癌均有良好的效果,因为氧化还原能力不同,作用各有侧重。     

亚硒酸钠调控AMPK/mTOR信号通路对结直肠癌细胞增殖凋亡的影响及机制

目的探讨亚硒酸钠调控AMPK/mTOR信号通路对结直肠癌细胞增殖凋亡的影响及机制。方法培养人结直肠癌细胞株HT-29、SW620和HCT116,用1.25、2.5、5、10、20μmol/L的亚硒酸钠处理细胞48 h,CCK8试验检测不同浓度亚硒酸钠对细胞增殖的影响;10、20μmol/L的亚硒酸钠作用于人结直肠癌细胞株HT-29 12、24、48、72 h后,CCK8试验检测亚硒酸钠作用不同时间对细胞增殖的影响;10、20μmol/L的亚硒酸钠作用于人结直肠癌细胞株HT-29 48 h,流式细胞仪检测细胞凋亡率并用Western印迹检测蛋白表达。结果随着亚硒酸钠浓度的增加,人结直肠癌细胞株HT-29、SW620和HCT116的抑制率增大,具有浓度依赖性,亚硒酸钠对人结直肠癌细胞株HT-29、SW620和HCT116的IC50分别为(5.060±1.01)、(6.701±1.21)、(7.471±1.47)μmol/L,后期选择人结直肠癌细胞株HT-29为研究对象;10和20μmol/L的亚硒酸钠对细胞的抑制率在各个时间点都显著高于0 h抑制率(P<0.01),且随着时间的延长抑制率增加;10、20μmol/L的亚硒酸钠处理后细胞的凋亡率均显著高于0μmol/L,具有浓度依赖性(P<0.01),细胞中p-AMPK和Bax的蛋白表达显著高于0μmol/L组,p-mTOR和Bcl-2的蛋白表达显著低于0μmol/L组且具有浓度依赖性(P<0.01)。结论亚硒酸钠能抑制人结直肠癌细胞株HT-29的增殖,促进细胞的凋亡,使Bcl-2蛋白表达下降,Bax蛋白表达上升,可能与AMPK/mTOR信号通路调控有关。     

转染PHGPx基因对Aβ及H2O2诱导PC12细胞凋亡的保护作用

目的　观察转染磷脂过氧化氢谷胱甘肽过氧化物酶 (PHGPx)基因对神经毒物质Aβ及H2 O2 诱导细胞凋亡的保护作用。方法　通过基因转染和筛选得到稳定高表达PHGPx基因的PC1 2 细胞 ,加入神经毒物质Aβ及H2 O2 ,采用电镜、DNA片段化测定、MTT比色微量分析及流式细胞凋亡率分析等方法观察转基因后抗逆变致凋亡的能力。结果　加入神经毒物质Aβ或H2 O2 后 ,未转染PHGPx基因的PC1 2 细胞出现凋亡的特征性形态学改变 ,电泳可见断裂的DNA片段 ,流式细胞仪检测细胞凋亡率较转染组明显增加。MTT比色微量分析显示细胞活力下降 (均P <0 0 1 )。结论　Aβ及H2 O2 能够诱导神经细胞凋亡。转染PHGPx基因能对抗Aβ、H2 O2 的神经毒性 ,保护Aβ、H2 O2 所致的神经细胞损伤凋亡 ,是AD等有活性氧参与的神经退行性疾病的一种新的基因干预治疗思路     

亚硒酸钠对慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞的作用及机制

目的:探讨慢性肝炎患者经过亚硒酸钠作用前后树突状细胞(DC)功能的改变及机制,寻求改善DC功能的途径.方法:慢性乙肝患者28例外周血,每份血分成2份,不加亚硒酸钠处理的为A组,加亚硒酸钠者为B组.健康献血者12例为对照组(C).采用MTT法通过MLR检测DC对同种异体淋巴细胞的增殖能力及ELISA法检测细胞因子IL-12的分泌.用比色法检测3组DC内GSH-Px活性、MDA含量和膜流动性.结果:A组与C组相比,DC分泌IL-12水平(12.46±0.17 ng/L vs 21.43±0.43 ng/L,P＜0.05)和刺激自身淋巴细胞反应能力明显降低;B组比A组相比显著升高(16.93±0.32 ng/Lvs 12.46±0.17 ng/L,P＜0.05).DC细胞内GSH-Px活性A组明显低于C组(65.35±5.37 U/106细胞 vs 94.73±4.81 U/106细胞,P＜0.05),B组高于A组和C组(107.13±3.42 U/106细胞 vs 65.35±5.37,94.73±4.81 U/106细胞,P＜0.05).MDA含量A组明显高于B组和C组(1.75±0.21 U/106细胞 vs 1.09±0.17,0.82±0.13 U/106细胞,P＜0.05).B组膜流动性与A组相比保持良好.结论:体外经亚硒酸钠作用后的乙肝患者的DC可有效的刺激淋巴细胞增殖反应,并可提高IL-12分泌水平,保持膜流动性,增强对自由基损伤的抵抗能力.     

COX-2抑制剂联合survivin反义寡核苷酸抗胰腺癌BxPC-3细胞的效应

目的:探讨COX-2抑制剂和survivin反义寡核苷酸联合应用对胰腺癌BxPC-3细胞的抗肿瘤效应及其可能机制.方法:应用胰腺癌BxPC-3细胞进行研究,将BxPC-3细胞分为4组:A组(对照组),B组(Celecoxib 80μmol/L)组,C组(300 nmol/L survivin ASODN),D组(80μmol/L celecoxib 300 nmol/L survivin ASODN).采用MTT检测细胞增殖.流式细胞仪检测细胞凋亡率,caspase-3试剂盒检测caspase-3活性,并用RT-PCR检测Bcl-2、survivin和Mcl-1的mRNA国的变化.结果:将80μmol/L celecoxib和300 nmol/L survivin反义寡核苷酸单独或联合作用于胰腺癌BxPC-3细胞24h和48h,D组细胞的存活率明显低于B,C组(24h:41.0%±0.4% vs 71.0%±2.2%,63.3%±4.5%;48h:34.2%±1.1% vs 61.6%±1.7%,55.0%±3%;P<0.01).作用24h后,流式细胞仪检测细胞凋亡率显示,D组细胞的凋亡率明显高于B,C组(30.33%±3.49% vs 11.93%±1.17%,22.07%±0.93%;P<0.01).caspase-3活性在B,C,D组明显高于对照组(0.04867±0.0021,0.02967±0.0021,0.08767±0.0042 vs 0.007±0.0001;P<0.01),D组细胞的caspase-3活性明显高于B,C组(0.08767±0.0042 vs 0.04867±0.0021,0.02967±0.0021;P<0.01).用100μmol/L塞来昔布作用于胰腺癌BxPC-3细胞24h后,survivin/β-actin和Mcl-1/β-actin的mRNA的比值明显低于对照组(0.68±0.05 vs 1.05±0.06,P<0.01),而Bcl-2/β-actin的mRNA的比值无明显变化(0.99±0.02 vs 1.07±0.06,P>0.05).结论:联合应用COX-2抑制剂塞来昔布和survivin反义寡核苷酸可明显诱导胰腺癌细胞的凋亡,抑制细胞增殖,并能够明显提高caspase-3活性.COX-2抑制剂塞来昔布诱导细胞凋亡可能通过survivin和Mcl-1途径,而非Bcl-2途径.     

促红细胞生成素对Aβ25～35诱导神经细胞损伤保护作用的体外实验

目的 探讨促红细胞生成素(EPO)对β淀粉样肽(Aβ)诱导神经细胞毒性的保护作用.方法 取对数生长期的PC12细胞分为3组:空白对照组、模型组、EPO预处理组.细胞培养24 h后,EPO预处理组加入终浓度为25 U/ml的EPO预处理8 h,再与模型组同时加入终浓度为10 μmol/L Aβ25～35,继续培养48 h收集细胞检测指标.采用MTT比色法分析细胞存活率,碘化丙啶(PI)流式细胞仪检测凋亡,免疫组化检测细胞色素C(CytC)和Bcl-2表达.结果 MTT显示EPO处理组细胞存活率明显高于模型组(P<0.05),并且中剂量存活率最高;凋亡率较模型组明显下降(P<0.05);免疫组化显示:EPO处理组Bcl-2阳性表达细胞较Aβ25～35处理组明显增加(P<0.05),而EPO处理组CytC阳性染色细胞较模型组明显减少(P<0.05).结论 EPO可以提高细胞存活率,降低凋亡率,对Aβ诱导神经细胞毒性起保护作用,其机制主要通过上调Bcl-2的表达,从而抑制CytC释放,阻止细胞凋亡,促进PC12细胞存活.     

不同浓度脂多糖对支气管哮喘大鼠模型建立的影响及调节机制

目的 观察不同浓度大肠埃希菌脂多糖(E.coli LPS)对年幼期哮喘大鼠模型建立的影响及其调控机制.方法 清洁级SD大鼠45只,随机分为对照组(A组)、哮喘组(B组)、LPS组(分为C1组、C2组、C3组),每组9只.用卵白蛋白(OVA)致敏与激发建立大鼠哮喘模型.光镜、电镜观察肺组织病理及超微结构的变化;支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸粒细胞(EOS)及其它炎症细胞计数;酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清OVA-sIgE与BALF中TGF-β1含量;TUNEL法检测肺组织EOS凋亡.结果 ①光镜电镜观察:光镜下B组见支气管及血管周围、肺间质及肺泡腔内炎性细胞浸润,支气管黏膜下水肿,黏液腺增生,黏膜皱折增多,部分黏膜上皮细胞脱落,可见气道黏液栓;C1组、C3组上述改变无明显减轻;C2组上述现象明显减轻.电镜下B组见EOS数量增多,周围有大量浆细胞聚集;C1组无明显改变;C2组凋亡的EOS增多;C3组中性粒细胞和凋亡的EOS均增多.②BALF中炎症细胞计数:B组BALF中细胞总数、EOS绝对计数和EOS占细胞总数的百分比(EOS%)均高于A组 (均P<0.01);C2组均低于B组(均P<0.01).③血清OVA-sIgE和BALF中TGF-β1含量:血清OVA-sIgE检测,B组高于A组(P<0.01);C2组、C3组明显低于B组(均P<0.01);但C1组与B组比较无统计学意义(P>0.05).BALF中TGF-β1含量测定,B组与A组比较,两组有显著性差异(P<0.05);C2组、C3组明显高于B组(均P<0.01).④肺组织EOS凋亡率检测结果,B组与A组比较,两组有显著性差异(P<0.05);C2组、C3组与B组比较EOS凋亡率均明显增高(均P<0.01);但C1组与B组比较无统计学意义(P>0.05).相关分析结果,BALF中TGF-β1水平与EOS数有非常显著性负相关(r＝-0.483,P<0.01);EOS绝对计数与血清OVA-sIgE水平显著性正相关(r＝0.634,P<0.01).结论 E.coli LPS(>10 μg/ml)通过降低OVA-sIgE水平,增加TGF-β1分泌,诱导EOS凋亡,从而可能减轻变态反应症状,但过高浓度E.coli LPS(100 μg/ml)可能会促使中性粒细胞增高.     

不同浓度β-淀粉样蛋白对大鼠小胶质细胞特异性蛋白CD11b表达的影响

目的探讨免疫细胞膜表面整合素(CD11b)在β-淀粉样蛋白(Aβ)所引起阿尔茨海默病(AD)中的作用、机制及与Aβ剂量的关系。方法雄性Wistar大鼠50只,随机分为A、B、C、D、E 5组,每组10只;A组大鼠双侧海马CA1区注射5μl生理盐水,B~E组双侧海马注射5μl Aβ(分别含Aβ_(25~35)0.5、1、5、10μg);HE染色观察五组大鼠海马CA1区细胞形态及数量变化;免疫组化(IHC)检测海马CA1区Aβ、CD11b表达;实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)检测CD11b mRNA表达。结果 HE染色,光镜下观察D组、E组大鼠海马CA1区神经细胞数明显少于A组、B组、C组(P<0.01);IHC检测D组、E组两组Aβ阳性表达率均高于A组、B组、C组(P<0.01);D组、E组CD11b阳性表达率明显高于A组、B组、C组(P<0.01);qRT-PCR检测大鼠海马组织内CD11b mRNA表达D组、E组组明显高于A组、B组、C组(P<0.01)。结论 Aβ可激活小胶质细胞,募集MG到Aβ沉积部位,Aβ沉积量和CD11b表达量呈正相关。     

lncRNA-BC200调控Aβ25-35诱导的神经细胞PC12炎症因子表达和细胞凋亡

目的 探讨lncRNA-BC200对Aβ₂₅-35诱导的神经细胞炎症和细胞凋亡的影响及可能机制。方法 将神经细胞PC12分为正常对照组(细胞常规培养)和10、20、40 μmol/L Aβ₂₅-35组(分别用10、20、40 μmol/L Aβ₂₅-35干预细胞24 h),流式细胞术检测细胞凋亡,qRT-PCR法检测细胞中lncRNA-BC200表达。将PC12细胞分为正常对照组、Aβ₂₅-35组(用20 μmol/L Aβ₂₅-35干预PC12细胞24 h)、si-NC+Aβ₂₅-35组(用20 μmol/L Aβ₂₅-35干预转染si-NC的PC12细胞24 h)、si-lncRNA-BC200+Aβ₂₅-35组(用20 μmol/L Aβ₂₅-35干预转染si-lncRNA-BC200的PC12细胞24 h)和TNF-α+si-lncRNA-BC200+Aβ₂₅-35组[用20 μmol/L Aβ₂₅-35和20 μg/L肿瘤坏死因子α(TNF-α)共同干预转染si-lncRNA-BC200的PC12细胞24 h],流式细胞术检测细胞凋亡,酶联免疫吸附法检测细胞培养上清液中TNF-α、白细胞介素6(IL-6)和γ干扰素(IFN-γ)表达,Western blot检测细胞中cleaved-Caspase-3、p-p65和p-IκBα蛋白表达。结果 10、20、40 μmol/L Aβ₂₅-35组PC12细胞凋亡率和lncRNA-BC200表达均高于正常对照组。Aβ₂₅-35组细胞中cleaved-Caspase-3、p-p65和p-IκBα蛋白表达,以及TNF-α、IL-6和IFN-γ水平均高于正常对照组。si-lncRNA-BC200+Aβ₂₅-35组PC12细胞凋亡率和细胞中cleaved-Caspase-3、p-p65和p-IκBα蛋白表达及TNF-α、IL-6和IFN-γ水平均低于Aβ₂₅-35组。TNF-α+si-lncRNA-BC200+Aβ₂₅-35组PC12细胞凋亡率和细胞中cleaved-Caspase-3、p-p65和p-IκBα蛋白表达及TNF-α、IL-6和IFN-γ水平均高于si-lncRNA-BC200+Aβ₂₅-35组。结论 敲减lncRNA-BC200可能通过抑制NF-κB信号通路的激活减少Aβ₂₅-35诱导的神经细胞PC12分泌炎症因子及细胞凋亡。     

胰岛素样生长因子-1抑制庆大霉素引起的小鼠耳蜗毛细胞凋亡

目的探讨胰岛素样生长因子(IGF)-1是否通过Notch信号通路抑制庆大霉素(GM)引起的离体小鼠耳蜗毛细胞凋亡。方法体外培养新生小鼠耳蜗基底膜,在分别含有正常对照培养液(A组)、0.5 mmol/L GM(B组)、0.5 mmol/L GM+10 ng/ml IGF-1(C组)的成分中培养24 h后收集细胞及固定。应用TUNEL法观察各组耳蜗毛细胞的凋亡情况。应用Western印迹、实时定量聚合酶链反应(PCR)观察各组小鼠基底膜Notch2/hes1信号通路的表达量。结果 A组观察到少量凋亡毛细胞,B组耳蜗毛细胞凋亡数量及Notch2/hes1的表达量较A组明显上升(P<0.01),C组细胞凋亡数量及Notch2/hes1的表达量较B组明显下降(P<0.01)。结论 IGF-1通过抑制Notch2/hes1信号通路,减少GM诱导的离体耳蜗毛细胞凋亡。     

Aβ和氧自由基诱导的培养神经元凋亡及维生素E的保护作用

目的研究β淀粉样肽(Aβ)、反应活性氧(ROS)对原代培养鼠脑皮层神经细胞凋亡的诱导及维生素E(VE)可能的保护作用。方法通过形态学观察、MTT法检测、流式细胞技术分析、DNA琼脂糖凝胶电泳、免疫细胞化学技术研究Aβ、ROS对培养皮层神经细胞的损伤。结果经Aβ、活性氧的作用,神经细胞出现明显的凋亡特征,OD值降低,DNA电泳显示出现断裂DNA片段。凋亡细胞数增多。免疫细胞化学显示Bcl2表达下降,Bax表达增加(均P<0.05),而VE组可明显改变上述凋亡特征。结论Aβ、活性氧诱导培养皮层神经元凋亡机制可能与氧化损伤有关,维生素E能减缓这一作用。     

神经生长因子对缺血淤血性损伤早期脊髓功能恢复的影响

将健康30只新西兰大白兔随机分为假手术组(A组)、对照组(B组)和神经生长因子(NGF)干预组(C组).以选择性阻断腰动脉和永久性结扎后腔静脉制作腰髓缺血淤血损伤动物模型.C组肌注含NGF的生理盐水0.2ml,1次/d,共3周,对各组行MRI检查及神经功能行为学评分.结果:C组于给药后1、2、3周神经功能缺损较B组明显下降.脊髓MRI显示,C组脊髓阶段性的水肿程度改善明显,细胞凋亡数明显下降(P<0.05).认为NGF可降低神经细胞凋亡率,减轻神经细胞损伤,损伤早期可促进神经功能的恢复,对于治疗脊髓缺血淤血性损伤有明显疗效.     

谷胱甘肽过氧化物酶1高表达对β淀粉样蛋白介导PC12细胞损伤的保护作用

目的探讨β淀粉样蛋白(Aβ)所致阿尔茨海默病发病的分子机制,以及谷胱甘肽过氧化物酶1(GPX1)高表达时对其所致细胞损伤的保护作用。方法将PC12细胞转染合人GPX1基因的plncx质粒及空载体plncx质粒,对PCl2、GPXl-PCl2、plncx-PCl2 3组细胞,分别给予Aβ_(25-35)和亚硒酸钠+Aβ_(25-35)2种干预方式,MTT法检测细胞的存活情况,免疫细胞化学法观察磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(pCREB)的表达情况。结果 PCl2组与plncx-PCl2组细胞存活率比较,差异无统计学意义(P>0.05);GPXl-PC12组较plncx-PCl2组细胞存活率明显增高(P<0.01);Aβ_(25-35)干预后,plncx-PC12组和GPX1-PC12组pCREB蛋白阳性率明显下降,plncx-PC12组较GPX1-PCl2组下降更明显(P<0.05)。亚硒酸钠+Aβ_(25-35)干预后,plncx-PC12组和GPX1-PC12组pCREB蛋白阳性率明显上升,GPX1-PC12组较plncx-PC12组增高更明显(P<0.01)。结论 GPX1基因高表达对Aβ_(25-35)所介导的PCl2细胞损伤有明显保护作用;Aβ_(25-35)可下调pCREB在PCl2细胞中表达,而GPXl与pCREB共同参与保护PCl2细胞,减少Aβ_(25-35)所引起的细胞损伤。     

硼替佐米对HCT8细胞增殖、凋亡及黏附能力的影响

目的: 观察硼替佐米对HCT8细胞增殖、凋亡及黏附能力的影响.方法: 不同浓度梯度(12.5-200 nmol/L)的硼替佐米作用于HCT8细胞后, 用MTT检测细胞增殖抑制作用; 25 nmol/L的硼替佐米作用48 h后, 流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率; Western blot检测E-cadherin、β-catenin、cyclinD1和NF-κB表达.结果: 硼替佐米对HCT8细胞的增殖抑制作用有时间和浓度的依赖性. 25 nmol/L的硼替佐米作用48 h诱导细胞的凋亡, 凋亡率为12.3%,显著高于对照组( P<0.05), 上调了E-cadherin和β-catenin蛋白的表达, 下降了NF-κB和cyclinD1蛋白的表达.结论: 硼替佐米可以抑制HCT8细胞的增殖,诱导细胞凋亡. 抑制NF-κB通路的激活有可能为其作用机制之一; 并有可能增加细胞之间的黏附, 降低肿瘤的远处转移.     

β淀粉样蛋白诱导体外培养海马神经细胞死亡方式的研究

目的经β淀粉样蛋白(Aβ)作用后海马神经细胞的死亡方式及其意义。方法观察不同浓度(分为浓度效应组和浓度效应对照组)、不同时间(分为时间效应组和时间效应对照组)Aβ1-40对体外培养的海马神经细胞的毒性,并用透射电镜、琼脂糖凝胶电泳、荧光染色进行细胞死亡的检测。结果经51、0、20μmol/L Aβ1-40处理12 h后,神经细胞凋亡和胀亡率明显高于浓度效应对照组;给予10μmol/L Aβ1-40处理的条件下,经过61、2、24 h后,神经细胞凋亡和胀亡率明显高于时间效应对照组。结论一定浓度的Aβ1-40对体外培养的海马神经细胞具有细胞毒性,并且诱导神经细胞死亡具有时间和剂量相关效应。     

下调肌细胞增强因子2C基因对动脉粥样硬化血管内皮细胞增殖凋亡及核因子-κB信号通路的影响

目的探讨下调肌细胞增强因子(MEF) 2C基因对动脉粥样硬化(AS)血管内皮细胞增殖凋亡及核因子(NF)-κB信号通路的影响及机制。方法 Western印迹检测AS患者斑块组织和正常对照组MEF2C的蛋白表达;将MEF2C的特异性siRNA(si-MEF2C)及阴性对照siRNA(NC)转染人脐静脉血管内皮(ECV)-304细胞,Western印迹检测转染效果。ECV-304细胞经H_2O_2处理后转染si-MEF2C,细胞分为NC组、H_2O_2组、H_2O_2+si-MEF2C组和正常对照组,噻唑蓝(MTT)检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡率及活性氧(ROS)水平; Western印迹检测核因子(NF)-κB p65、NFkappa B激酶抑制剂(IKK)α、增殖细胞核抗原(PCNA)和Bcl-2的蛋白表达。结果 AS患者斑块组织MEF2C蛋白表达显著高于正常对照组(P<0. 05); MEF2C的特异性siRNA转染ECV-304细胞后MEF2C蛋白表达显著低于空白对照组(P<0. 05)。H_2O_2组细胞活力及PCNA和Bcl-2的蛋白表达均显著低于NC组,细胞凋亡率、ROS水平及NF-κB p65和IKKα的蛋白表达均显著高于NC组(P<0. 05),而H_2O_2+si-MEF2C组细胞活力及PCNA和Bcl-2的蛋白表达均显著高于H_2O_2组,细胞凋亡率、ROS水平及NF-κB p65和IKKα的蛋白表达均显著低于H_2O_2组(P<0. 05)。结论下调AS血管内皮细胞MEF2C基因表达可提高细胞活力,抑制细胞凋亡,机制可能是细胞内ROS水平降低及NF-κB信号通路的下调。     

亚硒酸钠对胃上皮肿瘤SGC-7901细胞抑制作用的研究

应用细胞培养技术、电子显微镜技术、流式细胞仪技术及DNA末端原位标记染色法（TUNEL技术）,观察亚硒酸钠溶液对胃上皮肿瘤SGC-7901细胞的抑制作用。结果随着亚硒酸钠溶液浓度增高、作用时间延长对SGC-7901细胞的抑制率升高;可见较典型的细胞凋亡形态学变化;流式细胞仪DNA直方图上出现典型的亚二倍体的“凋亡峰”;TUNEL染色法细胞凋亡指数为8．4％～33．4％。证明亚硒酸钠溶液能抑制SGC-7901细胞生长,诱导其凋亡;抑制作用与亚硒酸钠溶液的浓度及作用时间呈正相关。