天灸对小鼠造血功能的影响及其机理的探讨

本实验通过环磷酰胺（ＣＴＸ）小鼠模型,观察了天灸对化疗小鼠的造血功能和腹腔巨噬细胞分泌粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ ＧＭ－ＣＳＦ）能力的影响。结果发现, ＣＴＸ化疗可致小鼠出现明显的骨髓抑制,骨髓有核细胞计数和外周血ＷＢＣ数显著减少,脾指数减少,且其腹腔巨噬细胞诱生 ＧＭ－ＣＳＦ的能力降低。天灸或麦粒灸“大椎”、“肾俞”、“足三里”穴,不但可以不同程度地减轻骨髓抑制,促进骨髓增生活跃,提高骨髓有核细胞计数,提前回升外周血ＷＢＣ数,缩短化疗所致ＷＢＣ的持续低值期,其中尤以天灸Ⅱ、Ⅳ组的效果为佳,而且还可增强化疗小鼠巨噬细胞诱生ＧＭ－ＣＳＦ的能力。此外还从神经一内分泌一免疫途径探讨了其作用机理。     

麦粒灸对骨髓抑制小鼠骨髓细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的：观察麦粒灸“大椎”“足三里”“三阴交”对骨髓抑制小鼠骨髓细胞Wnt/β-连环蛋白（β-catenin信号通路相关蛋白表达的影响，探讨麦粒灸治疗骨髓抑制的可能机制。方法：将45只SPF级雄性CD1(ICR)小鼠随机分为空白组、模型组和麦粒灸组，每组15只。采用腹腔注射环磷酰胺（CTX,80 mg/kg）制备骨髓抑制模型。麦粒灸组于“大椎”“足三里”“三阴交”行麦粒灸治疗，每穴3壮，每壮约30 s，每日1次，连续7 d。检测小鼠造模前、干预前及干预3、5、7 d后白细胞计数（WBC）。干预后，观察小鼠一般情况；检测小鼠骨髓有核细胞计数；采用ELISA法检测小鼠血清白细胞介素-3(IL-3)、白细胞介素-6(IL-6)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）的含量；采用Western blot法和实时荧光定量PCR法检测小鼠骨髓细胞β-catenin、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、增殖调控蛋白（C-Myc）蛋白及mRNA表达。结果：与空白组比较，模型组小鼠反应迟钝、步态不稳、体重减轻，WBC、骨髓有核细胞计数及血清IL-3、IL-6、GM-CSF含量减少（P<0....     

针灸对骨髓抑制模型小鼠血清造血生长因子等含量的影响

目的:通过观察针刺和艾灸前后骨髓抑制模型小鼠血清中粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)的含量变化,探讨针灸改善化疗后骨髓抑制、促进白细胞升高的分子生物学机制。方法:选用清洁级、雄性昆明种小鼠80只,根据体质量随机分为正常组、模型组、针刺组、艾灸组,每组20只。模型组、针刺组、艾灸组注射环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)制造小鼠骨髓抑制模型,正常组腹腔注射等量0.9%NaCl溶液。造模后4h针刺组、艾灸组均选取"大椎""膈俞""肾俞""足三里"分别进行针刺、艾灸治疗,正常组、模型组同针刺组、艾灸组抓取、固定,不予任何治疗。均每日1次,连续5d。各组小鼠分别采尾部静脉血,人工镜检造模前至干预结束每日的外周血白细胞计数,并运用酶联免疫吸附试验(ELISA)观察治疗3天、5天后各组血清中GM-CSF、G-CSF含量的变化。结果:与正常组比较,模型组小鼠各时间点白细胞计数均降低(均P<0.05),血清中GM-CSF和G-CSF含量明显下降(均P<0.05)。治疗3天后,与模型组比较,针刺组与艾灸组白细胞计数增加,针刺组差异有统计学意义(均P<0.05),血清GM-CSF和G-CSF含量升高(均P<0.05)。治疗4天后,针刺组、艾灸组与模型组比较白细胞计数均增加(均P<0.05)。治疗5天后,与模型组比较,针刺组、艾灸组白细胞计数升高且接近正常值,血清GM-CSF和G-CSF含量明显升高(P<0.05)。结论:针刺和艾灸可以通过提高CTX小鼠血清中GM-CSF和G-CSF的含量,促进骨髓系造血细胞的增殖、分化,以利于骨髓造血功能重建,减轻烷化剂CTX造成的骨髓抑制,从而提升外周血白细胞。     

补虚化瘀方对联合化疗荷瘤小鼠骨髓造血功能的影响

目的观察补虚化瘀方对联合化疗荷瘤小鼠骨髓造血的作用。方法采用P388瘤株造成荷瘤小鼠模型后,再以环磷酰胺、阿糖胞苷腹腔注射获得联合化疗荷瘤小鼠骨髓抑制模型,实验分为正常组、模型组及补虚化瘀方组,进行血常规、骨髓有核细胞(BMC)计数、粒单系祖细胞(CFU-GM)集落计数、骨髓细胞增殖能力测定。结果联合化疗可致荷瘤小鼠血红蛋白(Hb)、白细胞计数(WBC),BMC、CFU-GM集落计数及骨髓细胞增殖能力明显低于正常组(P<0.01),补虚化瘀方可提高联合化疗荷瘤小鼠外周血Hb、WBC数,提高BMC、CFU-GM集落计数及骨髓细胞增殖能力(P<0.01)。结论补虚化瘀方对联合化疗荷瘤小鼠骨髓抑制模型具有保护造血细胞和促进其化疗损害后的修复作用。     

四君子汤合当归补血汤提高化疗荷瘤小鼠免疫功能的实验研究

目的:观察四君子汤合当归补血汤对环磷酰胺化疗荷瘤小鼠的免疫保护作用。方法:建立小鼠肉瘤S180移植性肿瘤模型,24 h后随机分为5组:模型组、环磷酰胺(CTX)组及四君子汤合当归补血汤低、中、高剂量~+CTX组。各组接种肿瘤细胞24 h后开始用药,1次/d,连续10 d。分别检测溶血素、碳粒廓清速率、体温及外周血c AMP/c GMP、血小板和T细胞亚群,处死小鼠,检测腹腔巨噬细胞吞噬功能和骨髓有核细胞数。结果:与模型组比较,CTX组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、外周血CD3~+、CD4~+T细胞比例、CD4~+/CD8~+比值、外周血c AMP/c GMP、血小板计数和骨髓有核细胞显著降低(P0.05),CD8~+T细胞比例升高(P0.05)。与CTX组比较,四君子汤合当归补血汤各组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、外周血CD3~+、CD4~+T细胞比例、CD4~+/CD8~+比值、外周血c AMP/c GMP、血小板计数和骨髓有核细胞均有不同程度提高(P0.05),CD8~+T细胞比例均有不同程度降低(P0.05)。结论:四君子汤合当归补血汤能拮抗化疗引起的机体免疫功能下降,增强机体免疫功能。     

补气生血精胶囊对环磷酰胺致小鼠骨髓抑制干预效应的实验研究

目的:观察补气生血精胶囊干预环磷酰胺致小鼠骨髓抑制的效应.方法:将60只小鼠随机分为空白对照组、骨髓抑制模型组(简称模型组)、贞苠扶正胶囊组、补气生血精胶囊低、中、高剂量组6组,每组10只.分别灌胃给药(20mL/kg),一日1次,连续11天,空白对照组及模型组给予等容积蒸馏水.除空白对照组外,其余各组均于第8、9两天腹腔注射环磷酰胺(100mg/kg),给药第12天摘取眼球取血,计数白细胞数, 取股骨进行骨髓有核细胞计数.结果:模型组小鼠骨髓有核细胞及外周血白细胞显著低于空白对照组(P<0.05);补气生血精胶囊低、中、高剂量组骨髓有核细胞及白细胞数显著高于模型组(P<0.05).结论:补气生血精胶囊能够明显升高环磷酰胺致骨髓抑制小鼠骨髓有核细胞、外周血白细胞.     

肉苁蓉对化疗荷瘤小鼠增效减毒作用的研究

目的探讨肉苁蓉对化疗荷瘤小鼠的增效减毒作用。方法建立S180荷瘤鼠模型后,随机分为4组,荷瘤对照组、单纯化疗组、肉苁蓉高、中剂量组,每组10只。造模次日开始给药,共10 d,停药次日处死,观察瘤重抑制率、外周血象、骨髓有核细胞计数、骨髓DNA、NK细胞活性、T淋巴细胞增殖能力。结果肉苁蓉可提高CTX的抑瘤率(P(0.05),增强化疗荷瘤小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力和自然杀伤细胞(NK)活性(P(0.05)。同时还能对抗化疗药物CTX所致白细胞(WBC)、骨髓有核细胞和骨髓DNA的下降(P(0.05)。结论肉苁蓉对化疗药物CTX抗S180小鼠具有增效减毒的作用。     

生血康胶囊拮抗放射对小鼠骨髓造血功能损伤的实验研究

目的:观察生血康胶囊对小鼠骨髓造血功能的调节作用。方法:分别用正常小鼠、Co60照射所致骨髓造血功能损伤小鼠,将小鼠随机分为若干组,除正常对照组外每日给予不同剂量的生血康和血康灌胃,连续7天。7天后检测小鼠外周RBC、WBC、PLT、Hb含量,计数骨髓有核细胞。结果:生血康对正常小鼠外周血RBC、WBC、PLT、Hb含量及骨髓有核细胞计数无明显影响;对Co60照射所致骨髓造血功能损伤小鼠的外周WBC、PLT、骨髓有核细胞均有明显升高作用,且对WBC升高作用优于血康胶囊。结论:生血康胶囊对骨髓有核细胞的分化和增殖有较好的调节作用。     

足三里、三阴交、大椎配伍治疗对肿瘤化疗后升白效果及造血保护机制研究

目的:探讨足三里、三阴交、大椎配伍治疗在肿瘤化疗过程中对白细胞和机体造血机制的保护作用。方法:选用SPF级小鼠108只,按随机数字表法分为空白组、模型组、处方组各36只,对模型组和处方组均采用环磷酰胺(CTX)100 mg/kg/d进行造模,3 d后空白组蒸馏水灌胃,处方组采用足三里、三阴交、大椎配伍进行针灸治疗,比较小鼠体质量及骨髓造血细胞变化情况。结果:造模前3组小鼠的白细胞、中性粒细胞、红细胞、骨髓有核细胞计数、Cyclin D1蛋白积分光密度比较差异无统计学意义;造模组的上述指标较空白组在造模后第1、3、7天均有不同程度的下降;处方组上述指标随着时间均呈增长趋势,与造模前比较差异有统计学意义。结论:足三里、三阴交、大椎配伍治疗对肿瘤化疗过程中的小鼠具有升高白细胞、淋巴细胞和保护骨髓造血功能的作用。     

生血康胶囊拮抗放射对小鼠骨髓造血功能损伤的实验研究

目的：观察生血康胶囊对小鼠骨髓造血功能的调节作用。方法：分别用正常小鼠、Co^60照射所致骨髓造血功能损伤小鼠，将小鼠随机分为若干组。除正常对照组外每日给予不同剂量的生血康和血康灌胃，连续7天。7天后检测小鼠外周RBC、WBC、PLT、Hb含量，计数骨髓有核细胞。结果：生血康对正常小鼠外周血RBC、WBC、PLT、Hb含量及骨髓有核细胞计数无明显影响；对Co^60照射所致骨髓造血功能损伤小鼠的外周WBC、PLT、骨髓有核细胞均有明显升高作用，且对WBC升高作用优于血康胶囊。结论：生血康胶囊对骨髓有核细胞的分化和增殖有较好的调节作用。     

STUDY ON THE EFFECT OF ACUPUNCTURE AND MOXIBUSTION ON THE CONTENT OF GM-CSF AND G-CSF IN THE SERUM OF CTX MICE

Objective: By observing the content change of granulocytemacrophage colony-stimulating factor(GM-CSF) and granulocyte colony-stimulating factor(G-CSF) of serum, to explore the biological mechanism of acupuncture and moxibustion in relieving myelo-suppression and increasing white blood cells.Methods: According to the weight, 80 clean male Kunming mice were randomly divided into the control group(group A), the model group(group B), the acupuncture group(group C), and the moxibustion group(group D).Each group was duplicated with CTX.Acupuncture and moxibustion therapies were applied respectively at the same time every day in groups C and D at points "Dazhui", "Geshu", "Shenshu" and "Zusanli", but no treatments were provided in groups A and B except daily fixation.ELISA method was uesd to detect the content of GMCSF and G-CSF in the serum.Results: CTX-induced injury in mice bone marrow hematopoietic cells, and the content of the GM-CSF and G-CSF decreased in group B; acupuncture and moxibustion can obviously upregulate the content and activity of the GM-CSF and G-CSF, so as to relieve CTX-induced myelosuppression and increase white blood cells.Conclusion: Acupuncture and moxibustion increase the content and activity of the GM-CSF and G-CSF of serum, so as to improve the maturation, proliferation, differentiation, and survival of myeloid hematopoietic cells, and increase the peripheral white blood cells by promoting the hematopoietic functional reconstruction.     

红景天与熟地配伍对骨髓抑制小鼠骨髓功能的影响

目的 探讨红景天与熟地配伍对环磷酰胺所致小鼠外周血白细胞下降及骨髓造血功能抑制的     

针灸对CTX小鼠骨髓细胞DNA切除修复相关蛋白的调节

目的:探讨针灸改善骨髓抑制,促进白细胞升高的分子生物学机制.方法:选用清洁级、雄性昆明种小鼠224只,随机分为正常组、模型组、针刺组、艾灸组,每组56只.用环磷酰胺(CTX)造成骨髓抑制模型.针刺组、艾灸组选取"大椎""膈俞""肾俞""足三里",分别进行针刺、艾灸,正常组、模型组每日与针刺组和艾灸组同时抓取、固定,不做任何治疗.各组分别于第2～7天用免疫组化法观察骨髓细胞DNA聚合酶β(pol β)、切除修复交叉互补基因(XPD)表达的动态变化.结果:针刺和艾灸可以明显上调CTX模型小鼠骨髓细胞DNA修复蛋白XPD、pol β的表达,促进骨髓细胞DNA损伤的碱基切除修复和核苷酸切除修复,从而减轻烷化剂CTX造成的骨髓抑制,增加白细胞.结论:促进骨髓细胞DNA的切除修复,保护造血细胞因化学药物引起的细胞损伤,是针灸改善化疗后骨髓抑制,保护造血功能,提升白细胞的重要机制之一.     

针灸对环磷酰胺化疗荷瘤小鼠血清白介素-7、白介素-18含量的影响

目的:观察针灸对环磷酰胺(CTX)化疗荷瘤小鼠血清白细胞介素-7(IL-7)和IL-18含量的影响,探讨针灸改善化疗所致免疫抑制,提高机体免疫功能的机制。方法:昆明小鼠64只随机分为空白组、模型组、针刺组、艾灸组,每组16只,采用种植S 180肉瘤,复制移植瘤模型,模型组、针刺组、艾灸组腹腔注射CTX,制备CTX荷瘤小鼠模型。针刺组、艾灸组分别针刺及艾灸"大椎"及双侧"膈俞""肾俞""足三里",均每日治疗1次,其中8只治疗3d,另外8只治疗5d。尾静脉取血计数外周血白细胞数,计算小鼠脾脏指数,ELISA法检测血清中IL-7和IL-18的含量。结果:注射CTX后,荷瘤小鼠免疫功能受损,脾脏指数下降,血清IL-18的含量以及白细胞数降低(P0.05)。治疗5d后,针刺组及艾灸组白细胞计数明显高于模型组(P0.05)。治疗3d后,艾灸组脾脏指数明显高于模型组(P0.05);治疗3d后,针刺组血清IL-7高于模型组,治疗5d后,仍高于模型组及艾灸组(P0.05);治疗3d和5d,针刺组血清IL-18均明显高于模型组及艾灸组(P0.05)。结论:提高血清中IL-7和IL-18的含量,促进多种细胞因子的产生和各种免疫细胞的成熟,从而增强机体细胞免疫和体液免疫功能,是针刺减轻烷化剂CTX对免疫功能造成的损伤,提高机体免疫功能的重要机制之一。     

调营饮对化疗所致骨髓抑制小鼠造血细胞因子的影响

目的观察调营饮对化疗所致骨髓抑制小鼠造血细胞因子的影响。方法将168只清洁级昆明小鼠,随机分为正常组、模型组、调营饮组、调营饮拆方组、六味地黄汤组、八珍汤组、当归补血汤组,每组24只。正常组予0.9%氯化钠注射液0.2 mL腹腔注射,其余各组予注射用环磷酰胺（CTX）100 mg/kg腹腔注射,每日1次,连续3 d。实验第4 d,调营饮组、调营饮拆方组、六味地黄汤组、八珍汤组、当归补血汤组分别给予相应药液0.2 mL灌胃,正常组、模型组予等容积蒸馏水灌胃,每日1次,连续10 d。分别于实验第4、7、10 d取小鼠眼球血,测外周血白细胞计数（WBC）、红细胞计数（RBC）。同时,第7 d采用放射免疫分析法检测血液中促红细胞生成素（EPO）,之后取各组小鼠右侧股骨,采用免疫组化法观察粒-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）平均光密度值。结果实验第4、7 d模型组及各药物组WBC均低于正常组（P〈0.05）。实验第10 d,模型组、调营饮拆方组、六味地黄汤组及当归补血汤组WBC均低于正常组（P〈0.05）。模型组各时间RBC均低于正常组（P〈0.05）。实验第4 d,调营饮组、调营饮拆方组及八珍汤组WBC较模型组升高（P〈0.05）;调营饮拆方组、六味地黄汤组RBC与模型组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。实验第7 d,调营饮组、八珍汤组WBC与模型组比较均明显升高（P〈0.05）;调营饮组、调营饮拆方组RBC高于模型组（P〈0.05）。实验第10 d,各用药组WBC、RBC与模型组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）,且调营饮组WBC高于调营饮拆方组、六味地黄汤组和当归补血汤组（P〈0.05）,调营饮组RBC高于其他各用药组（P〈0.05）。模型组EPO高于正常组（P〈0.05）,GM-CSF平均光密度值低于正常组（P〈0.05）。各用药组EPO、GM-CSF平均光密度值与模型组比较均有统计学意义（P〈0.05）,且调营饮组EPO、GM-CSF平均光密度值均高于其他各药物组（P〈0.05）。结论调营饮可明显提高化疗致骨髓抑制小鼠EPO分泌及GM-CSF的表达,从而改善外周血细胞状况,促进骨髓造血功能恢复。     

针灸对CTX荷瘤小鼠骨髓细胞中Notch信号通路差异基因jag1、notch2的影响

目的采用荷瘤小鼠为研究对象,以Notch信号通路为切入点,通过观察针刺与艾灸干预后环磷酰胺(CTX)模型荷瘤小鼠骨髓细胞中Notch信号通路差异基因jag1、notch2的表达、蛋白量以及mRNA转录情况,探讨针灸改善荷瘤小鼠骨髓抑制的相关作用机制及途径,为临床中针灸减轻肿瘤化疗患者骨髓抑制、提高生存质量及改善造血机能方面提供实验室依据及治疗思路。方法将40只昆明种雄性、清洁级小鼠自由饲养3 d后,在温度20~25℃,湿度60%左右的无菌条件下进行移植瘤模型制备,植瘤7 d后,对40只带瘤小鼠进行尾静脉采血,查其白细胞(WBC)总数并选取WBC数目接近正常范围,瘤体生长良好的荷瘤小鼠32只。将选取的荷瘤小鼠,随机分4组,每组8只,即空白组(A),模型组(B),针疗组(C),灸疗组(D)。B、C、D组均一次性腹腔注射环磷酰胺(CTX)150 mg/kg,A组给予相同体积的生理盐水。C、D组选取"大椎""膈俞""肾俞""足三里"穴位分别施以针刺、艾灸,A、B组每日陪同固定,不治疗。在课题组前期初步筛选的相关差异基因jag1、notch2的基础上,进一步运用免疫组化法、Real-time PCR法、Western Blot法全面深入地测定荷瘤小鼠骨髓细胞中Notch信号通路jag1、notch2基因的变化。结果(1)与空白组比,模型组中jag1和notch2基因蛋白表达升高,具有统计学意义(P<0.05);与模型组比,针疗组与灸疗组中jag1和notch2基因蛋白表达下降,具有统计学意义(P<0.05);(2)与空白组比,模型组中jag1、notch2基因mRNA表达升高;与模型组比,针疗组与灸疗组中jag1、notch2基因mRNA表达降低,但均无统计学意义;(3)与空白组比,模型组中jag1、notch2基因蛋白含量升高且具有统计学意义(P<0.05);与模型组比,针疗组、灸疗组jag1、notch2基因蛋白含量均降低,且具有统计学意义(P<0.05)。结论对Notch信号通路进行靶向调控,下调荷瘤小鼠骨髓细胞Notch信号通路中关键基因jag1、notch2的蛋白表达、mRNA表达、表达含量,是针灸减轻骨髓抑制、调控造血功能、改善造血微环境的重要途径之一。为了更贴近临床恶性肿瘤患者,本次研究选用带瘤体质的小鼠,以期为临床提供新的实验室依据及新的治疗途径。     

钩吻对小鼠造血功能的影响

目的 :观察钩吻对小鼠造血功能的影响。方法 :利用环磷酰胺 (Cy)抑制骨髓及辐照致骨髓损伤造模 ,检测钩吻对Cy所致骨髓抑制小鼠外周血细胞 ,红细胞 ,血小板 ,脾重和骨髓有核细胞的影响及对辐照致骨髓损伤小鼠CFU -S的影响和对小鼠生存的保护作用。结果 :钩吻对Cy骨髓抑制小鼠外周血细胞、红细胞、血小板及骨髓有核细胞均有明显提升作用(P<0 01) ,并显著提高生存率(P<0 05)和CFU -S数(P<0 01) ,而对脾重影响差异无显著性(P>0 05)。结论 :钩吻对抗肿瘤药物及放射线所致的骨髓抑制和/或损伤动物的造血功能有保护作用     

Clinical Observation on Treatment of Acute Gouty Arthritis with Acupuncture： A Report of 60 Cases

针刺双侧曲池、足三里、肾俞、膀胱俞、阴陵泉,大椎和阿是穴,并用艾条熏灸疼痛部位,治疗60例痛风性关节炎患者,同时用消炎痛和秋水仙碱治疗60例为对照.治疗2个星期后,两组有效率分别为93.3%和70.0%,两组疗效差异有显著统计学意义(P＜0.01).     

当归补血汤不同剂型及配伍对骨髓抑制小鼠造血调控的实验研究

 目的本实验通过比较当归补血汤煎剂及颗粒剂对骨髓抑制小鼠造血机能调控的影响来比较它们之间的疗效差异。旨在为中药颗粒剂的疗效提供实验室依据。方法本实验用高效液相色谱仪检测了当归补血汤不同制剂中阿魏酸、黄芪甲苷的含量差异;采用造血祖细胞培养术、外周血像计数法、ELISA等方法对造血祖细胞集落数、外周血像的变化及造血微环境中EPO,TPO,G-CSF的变化进行检测。结果当归补血汤煎剂、颗粒剂能通过平衡骨髓微环境中EPO,TPO,GM-CSF的表达;促进骨髓造血细胞从G_{0/G1期进入G2/M期和S期;促进造血祖细胞增殖,从而提高骨髓抑制小鼠外周血像和骨髓像。结论当归补血汤煎剂、颗粒剂均能改善骨髓抑制小鼠的造血机能,其中配方颗粒剂疗效较为突出。}