转录信号传导子和激活子3在人胃癌组织中的表达及意义

目的探讨人胃癌中转录信号传导子和激活子3（STAT3）的表达情况，分析其表达与胃癌临床病理因素的关系。方法应用固定化蛋白质印迹法（Westernblot）检测42例胃癌组织、转移淋巴结及邻近的正常胃粘膜中STAT3蛋白的表达。结果胃癌组织中STAT3蛋白表达水平明显高于正常胃粘膜，平均为正常胃粘膜中的2.14倍（P＜0.05）；低分化胃癌STAT3蛋白表达水平高于高分化胃癌［分别为正常胃粘膜的(2.44±2.99)倍和(1.03±0.88)倍,P＜0.05］；Ⅲ、IV期胃癌STAT3蛋白表达水平高于I、II期胃癌［分别为正常胃粘膜的(2.59±3.22)倍和(1.24±0.92)倍,P＜0.05］；有淋巴结转移的胃癌STAT3蛋白表达水平高于无淋巴结转移胃癌［分别为正常胃粘膜的(2.55±3.12)倍和(1.11±0.82)倍,P＜0.05］；转移淋巴结STAT3蛋白表达水平高于阴性淋巴结。结论STAT3过表达可能在胃癌的发生、发展过程中发挥重要作用，其表达与胃癌组织学分化程度、TNM分期及淋巴结转移有关。     

果蝇zeste基因增强子2和信号转导与转录激活子3在人胃癌组织中的表达及意义

目的检测胃癌组织标本中果蝇zeste基因增强子2（EZH2）和信号转导与转录激活子3（STAT3）的表达情况,并分析其与临床病理学特征以及患者预后关系。方法回顾性分析1999年5月至2000年4月北京大学人民医院收治的67例胃癌患者的临床资料。连续收集患者手术切除的胃癌组织及癌旁组织（距肿瘤边缘〉5cm）,用4％甲醛固定,常规石蜡包埋后,制作组织芯片,通过免疫组织化学染色法检测组织中EZH2和STAT3的表达情况,并分析其与临床病理学特征以及患者预后关系。胃癌组织中EZH2、STAT3的蛋白表达水平与临床病理指标之间的关系用配对,检验,Kaplan—Meier法绘制胃癌患者的生存曲线,Log—rank检验生存率,COX比例风险模型分析胃癌各临床病理指标与预后之间的关系。结果胃癌组织中EZH2和STAT3蛋白的高表达率分别为73．1％（49／67）和67．2％（45／67）,显著高于癌旁组织中的32．8％（22／67）和37．3％（25／67）,两者比较,差异有统计学意义（X2=21．839,11．964,P〈0．05）。EZH2蛋白表达水平与TNM分期、有无淋巴结转移相关（X2=11．573,5．902,P〈0．05）。STAT3蛋白表达水平与年龄、TNM分期、有无淋巴结转移相关（x2=5．475,9．998,5．475,P〈0．05）;EZH2和STAT3蛋白共同表达率（高表达和低表达合计49例）为73．1％（49／67）,EZH2和STAT3蛋白表达呈正相关（r=0．397,P〈0．05）。EZH2和STAT3蛋白共同高表达率随TNM分期的增高而增高,EZH2和STAT3蛋白在胃癌组织中的共同表达与临床TNM分期有关（X2=6．997,P〈0．05）。EZH2蛋白低表达胃癌患者的5年生存率显著高于EZH2蛋白高表达的胃癌患者（X2=7．386,P〈0．05）。STAT3蛋白低表达胃癌患者5年生存率显著高于STAT3蛋白高表达的胃癌患者（X2=12．253,P〈0．05）。EZH2和STAT3蛋白共同低表达的胃癌患者5年生存率显著高于EZH2和STAT3蛋白共同高表达的胃癌患者（X2=8．765,P〈0．05）。单因素分析结果显示：年龄、TNM分期、EZH2表达、STAT3表达、淋巴结转移和远处转移是影响胃癌患者生存的危险因素（RR=2．136,3．452,3．179,8．341,11．773,6．873,P〈0．05）。多因素分析结果显示：TNM分期、STAT3表达水平是影响胃癌预后的独立危险因素（RR=2．453,7．535,P〈0．05）。结论胃癌中EZH2及STAT3表达有显著相关性;其联合表达模式可能是判断胃癌TNM分期及患者预后的肿瘤分子标志物。     

环氧化酶2和癌胚抗原在结肠癌分子病理研究中的作用

目的研究距结肠癌不同距离的癌旁组织中环氧化酶2（COX-2）和癌胚抗原（CEA）的表达情况。方法收集42例行结肠癌根治术患者的组织标本．分别采集新鲜结肠癌组织．远、近端癌旁1、2和3cm的肠壁组织和距肿瘤8cm正常肠壁组织．应用RT-PCR技术检测CEA、COX,2在上述组织中的表达情况。结果42例结肠癌肿瘤旁远、近端3cm处肠壁组织病理检测均为阴性。CEAmRNA、COX-2mRNA的相对含量由结肠癌组织到远、近端癌旁1、2和3cm肠壁组织及到距肿瘤8cm正常结肠组织呈逐渐减少趋势。远、近端癌旁3cmCEAmRNA（分别为18．2±7．9和16．2±6．5）和COX-2mRNA（分别为21．2±10．3和18．3±7．6）明显低于肿瘤组织（分别为135．2±23．3和134．9±31．1）,差异有统计学意义（P〈0．01）;但与正常组织（分别为16．6±7．0和17．1±6．3）比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。在CEA阳性表达的40例结肠癌组织中,有30例存在COX-2的表达．Pearson相关分析显示,两者呈正相关（r=O．725．P〈0．01）。结论COX-2和CEA可作为结肠癌分子边缘研究的分子标记物。     

环氧化酶2和癌胚抗原在结肠癌分子病理研究中的作用

目的 研究距结肠癌不同距离的癌旁组织中环氧化酶2(COX-2)和癌胚抗原(CEA)的表达情况.方法 收集42例行结肠癌根治术患者的组织标本,分别采集新鲜结肠癌组织,远、近端癌旁1、2和3 cm的肠壁组织和距肿瘤8 cm正常肠壁组织,应用RT-PCR技术检测CEA、COX-2在上述组织中的表达情况.结果42例结肠癌肿瘤旁远、近端3 cm处肠壁组织病理检测均为阴性.CEA mRNA、COX-2 mRNA的相对含量由结肠癌组织到远、近端癌旁1、2和3 cm肠壁组织及到距肿瘤8 cm正常结肠组织呈逐渐减少趋势.远、近端癌旁3cm CEA mRNA(分别为18.2±7.9和16.2±6.5)和COX-2 mRNA(分别为21.2±10.3和18.3±7.6)明显低于肿瘤组织(分别为135.2±23.3和134.9±31.1),差异有统计学意义(P＜0.01);但与正常组织(分别为16.6±7.0和17.1±6.3)比较,差异无统计学意义(P＞0.05).在CEA阳性表达的40例结肠癌组织中,有30例存在COX-2的表达,Pearson相关分析显示,两者呈正相关(r=0.725,P＜0.01).结论 COX-2和CEA可作为结肠癌分子边缘研究的分子标记物.     

环氧化酶2抑制剂对结肠癌细胞中BCL-3及细胞周期蛋白D1表达的影响

目的 探讨环氧化酶2（COX-2）抑制剂对BCL-3基因及其靶向基因细胞周期蛋白1（cyclin D1）的转录和表达的影响.方法 实验组分别以25、50、100及200 μmol/L的NS398（COX-2抑制剂）处理结肠癌SW480细胞48 h或72 h;对照组以不含NS398的溶媒处理SW480细胞.采用RT-PCR、Western blot及免疫细胞化学染色方法分别从mRNA和蛋白水平检测各组细胞中BCL-3和cyclin D1的表达情况.结果 各组细胞处理48 h后,与对照组相比,实验组BCL-3和cyclin D1 mRNA水平下降,呈剂量依赖性;而蛋白水平则无明显差异（P〉0.05）.处理72 h后,与对照组相比,实验组BCL-3和cyclin D1蛋白水平下降,亦呈现剂量依赖性.当NS398浓度达到100 μmol/L时,其BCL-3 mRNA及蛋白表达水平与对照组比较差异即有统计学意义（P〈0.01）：当NS398浓度达到50 μmol/L时,其cyclin D1 mRNA及蛋白表达水平与对照组比较差异即有统计学意义（P〈0.05）.结论 结肠癌细胞株SW480中有BCL-3的表达.COX-2抑制剂NS398可从基因及蛋白水平对BCL-3及cyclinD1进行抑制,并呈剂量依赖性.NS398可能通过BCL-3而抑制cyclinD1.     

肝癌细胞VEGF转录调控的信号传导通路

目的研究磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)和p42／p44丝裂源激活的蛋白激酶(MAPK)在肝癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)转录调控中的作用。方法应用缺氧诱导剂氯化钴或重组人表皮生长因子(EGF)刺激HepG2细胞中VEGF的转录，在此过程中应用PI3K特异性阻断剂LY294002或p42／p44 MAPK特异性阻断剂PD98059干预，采用半定量逆转录PCR检测VEGF mRNA表达的变化。结果氯化钴或EGF可以诱导HepG2细胞中VEGF的表达。PI3K阻断剂LY294002可以在一定范围内浓度依赖性地抑制VEGF mRNA的表达，而p42／p44 MAPK阻断剂PD98059对VEGF mRNA的表达无抑制作用。结论肝癌细胞VEGF的转录调控受PI3K通路调控，而不受p42／p44 MAPK调控。     

信号传导与转录激活因子3和E-钙黏蛋白及波形蛋白在结肠癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨信号传导与转录激活因子3（STAT3）和E-钙黏蛋白（E—cadherin）及波形蛋白（vimentin）在结肠癌组织中的表达及其临床意义。方法收集70例结肠癌患者结肠癌组织和相应癌旁组织标本．应用免疫组织化学方法检测STAT3、E-cadherin和vimentin的表达,分析其与结肠癌临床病理特征的关系及三者表达之间的相关性。结果STAT3、E-cadherin及vimentin在结肠癌组织中阳性表达分别为52例（74．3％）、23例（32．9％）和55例（78．6％）,在癌旁组织阳性表达分别为13例（15．7％）、58例（82．9％）和9例（12．9％）,差异均有统计学意义（均P〈0．01）。STAT3、E-cadherin及vimentin的表达均与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关（均P〈0．05）。STAT3表达与vimentin表达呈正相关．而与E-cadherin表达呈负相关（均P〈0．01）。结论STAT3、E-cadherin及vimentin与结肠癌关系密切,其表达水平可作为判断结肠癌病程和预后的参考指标之一．     

选择性环氧化酶2抑制剂对膀胱癌细胞体外侵袭力的影响

晚期膀胱癌患者死亡的主要原因仍然是肿瘤的浸润和转移，已发现膀胱癌中环氧合酶2（COX-2）的表达与肿瘤的侵袭性有关。本实验旨在观察COX-2抑制剂对T24膀胱癌细胞侵袭力的影响。[第一段]     

环氧化酶-2及其选择性抑制剂在宫颈癌研究中的进展

宫颈癌是中老年女性常见的一种恶性肿瘤。近年研究发现,参与炎症反应的环氧化酶-2（COX-2）与宫颈癌的发生、发展密切相关。本文就COX-2与宫颈癌关系的研究现状作一综述,同时就COX-2抑制剂对宫颈癌的防治进展进行了总结。     

选择性环氧化酶-2抑制剂NS398诱导前列腺癌PC-3细胞系凋亡的研究

目的观察选择性环氧化酶2(COX-2)抑制剂氮-2,环己氧-4,硝基苯-甲基磺胺 (NS398)在诱导COX-2表达阴性的前列腺癌PC-3细胞凋亡中的作用. 方法应用RT-PCR和Western blot的方法对PC-3细胞mRNA和蛋白水平的COX-2表达情况进行检测,四甲基偶氮唑蓝快速比色法观察不同浓度和时间NS398对PC-3细胞生存率的影响,流式细胞术检测100 μmol/L NS398作用24 h PC-3细胞的凋亡情况. 结果 mRNA和蛋白水平PC-3细胞COX-2均呈阴性表达;NS398可以抑制PC-3细胞的存活,并随浓度增加而增强,但无显著的时间依赖性;与对照组(10.563±2.582)%相比,100 μmol/L NS398诱导PC-3细胞早期凋亡比率(19.307±3.773)%显著增加,差异有统计学意义(P=0.01). 结论选择性COX-2抑制剂NS398可以诱导COX-2表达阴性的PC-3细胞凋亡,提示COX-2非依赖性途径的存在.     

胆管癌组织中信号转导及转录激活因子3信号通路相关基因的表达与意义

目的 探讨胆管癌组织中信号转导及转录激活因子3（STAT3）信号通路相关基因Survivin及环氧化酶2（COX-2）的表达及其与胆管癌患者临床病理特征和预后的关系.方法 收集2007年9月至2012年7月安徽医科大学附属省立医院收治的43例胆管癌患者的癌组织标本,收集同期行胆肠内引流术和胆管修复的12例肝内外胆管结石和胆管损伤患者的正常胆管组织标本作为对照.应用免疫组织化学染色检测胆管癌及正常胆管组织中STAT3、磷酸化STAT3（p-STAT3）、Survivin及COX-2蛋白的表达,并分析其与胆管癌患者临床病理特征和预后的关系.采用门诊或电话方式对胆管癌患者进行随访,随访时间截至2014年3月.计数资料采用x2检验,相关性分析采用Spearman检验.采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,生存分析采用Log-rank检验.结果 STAT3、p-STAT3、Survivin、COX-2蛋白在胆管癌组织中阳性表达率分别为69.8％ （30/43）、65.1％（28/43）、72.1％ （31/43）、79.1％（34/43）,在正常胆管组织中阳性表达率分别为41.7％（5/12）、8.3％（1/12）、16.7％（2/12）、41.7％（5/12）.p-STAT3、Survivin、COX-2蛋白在胆管癌组织中的阳性表达率显著高于正常胆管组织,两组比较,差异有统计学意义（x2=12.136,9.811,4.679,P＜0.05）.p-STAT3、Survivin、COX-2蛋白在胆管癌组织中的高表达与肿瘤局部浸润转移有关（x2=14.700,5.959,4.075,P＜0.05）;p-STAT3蛋白阳性表达与肿瘤神经侵犯有关（x2=10.384,P＜0.05）;Survivin、COX-2蛋白表达与胆管癌患者肿瘤神经侵犯无关（x2=2.718,3.024,P＞0.05）;p-STAT3、Survivin、COX-2蛋白表达与胆管癌患者性别、年龄、肿瘤位置、分化程度、肿瘤直径无关（x2=0.148,0.720,1.835,1.040,0.236;0.001,0.009,0.029,1.863,0.197;0.433,0.686,0.002,2.974,0.029,P＞0.05）.Survivin及COX-2蛋白的表达与p-STAT3呈正相关（r=0.524,0.583,P＜0.05）.43例胆管癌患者获得随访,随访时间为6个     

抑制信号转导和转录激活因子-3活化对恶性胶质瘤细胞LN229运动能力的影响

目的 观察抑制信号转导和转录激活因子-3( STAT3)的活化对调控人恶性胶质瘤LN229细胞运动能力的影响.方法 应用JAK/STAT3信号通路抑制剂AG490处理LN229细胞株,Westem blot检测STAT3、磷酸化STAT3( p-STAT3)的表达.噻唑蓝(MTr)比色法筛选能够阻断LN229细胞STAT3活化的最适AG490浓度;划痕实验和趋化实验检测AG490给药后,LN229细胞运动能力的变化;F-肌动蛋白( F-actin)实验检测AG490对LN229细胞肌动蛋白聚合能力的影响.结果 AG490可有效抑制LN229细胞STAT3的持续活化.50 μmol/L浓度的AG490在不影响LN229细胞存活时(t=1.862,P＞0.05),能够有效抑制STAT3的磷酸化,对照组和50μmol/L AG490处理组的p-STAT3/STAT3的密度比值分别为0.530±0.040和0.291±0.036(t =4.821,P＜0.01).伤口愈合实验可见50μmol/L AG490处理的LN229细胞非定向运动能力降低,24h时对照组运动的距离为(0.290±0.049) mm;实验组为(0.150±0.054) mm(P ＜0.05).体外趋化实验显示50 μmol/LAG490处理的LN229细胞定向运动能力降低(P＜0.01),表皮细胞生长因子(EGF)浓度为10 μg/L时对照组穿过膜的细胞数为93.92±9.52;实验组为24.52±3.04.50μmol/L浓度的AG490抑制LN229细胞肌动蛋白聚合能力(P＜0.05).结论 STAT3信号转导通路参与调控胶质母细胞瘤LN229的细胞运动过程,阻断STAT3的活化可以抑制恶性胶质瘤的运动能力.     

信号转导和转录激活因子5在小鼠CD4+CD25+调节性T细胞中的表达

目的:观察信号转导和转录激活因子5(STAT5)在小鼠CD4+CD25+调节性T细胞中的表达情况.方法:免疫磁珠法分离C57BL/6J小鼠脾脏中的CD4+CD25+调节性T细胞,共聚焦荧光法检测细胞内STAT5的分布并进行初步定位,进一步采用Western blot技术从蛋白水平检测细胞内STAT5的表达.结果:激光共...     

选择性环氧化酶2抑制剂抗结肠癌作用途径研究

目的探讨选择性环氧化酶2(COX2)抑制剂抗结肠癌细胞株SW480与细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、凋亡蛋白Bcl2的关系,明确COX2抑制剂抗结肠癌非COX2依赖性途径的细胞内分子机制。方法用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测结肠癌细胞系SW480中COX2的mRNA表达水平;将选择性COX2抑制剂NS398,作用于结肠癌细胞系SW480,运用MTT法分别于0、24、48、72h检测细胞增殖状态;流式细胞仪观察NS398对细胞凋亡的影响,进一步采用Westernblot检测药物作用前后CyclinD1、Bcl2的表达。结果结肠癌细胞系SW480中未检测到COX2mRNA的表达;空白组S及G2/M期DNA百分含量与处理组比值分别为1.28、1.55(P<0.01),故NS398呈时间、剂量依赖性方式抑制SW480细胞增殖,促进其凋亡。同时,72h时空白组与NS398(75μmol/L)处理组CyclinD1、Bcl2表达水平比值分别为6.41和2.74(P<0.01),故两者表达水平随作用时间延长而下降。结论选择性COX2抑制剂NS398抗结肠癌存在着COX2非依赖性途径,可能通过CyclinD1,Bcl2影响结肠癌细胞SW480的增殖与凋亡,提示COX2抑制剂抗结直肠癌存在着新的靶点。     

STAT3抑制剂S3I－201对实验性肾小管间质纤维化的保护作用

目的探讨STAT3抑制剂S3I－201对小鼠实验性肾小管间质纤维化的保护作用。 方法采用单侧输尿管梗阻手术的方法建立肾小管间质纤维化模型。将实验小鼠随机分为药物假手术组(Sham＋S3I－201),安慰剂假手术组(Sham＋Vehicle),药物造模组(UUO＋S3I－201),安慰剂造模组(UUO＋Vehicle)4组,通过腹腔注射S3I－201溶液(药物)或0.05%DMSO PBS(安慰剂)给药,每天给药一次。造模第7天时留取肾脏标本,用Masson染色和颜色面积测算法评估胶原蛋白沉积的情况。用qRT－PCR法检测肾组织内趋化因子配体16(CXCL16),白介素－1β(IL－1β),细胞间黏附分子1(ICAM－1),转化生长因子－β(TGF－β),肿瘤坏死因子(TNF－α)的mRNA表达,用免疫组化法染色和免疫印迹法检测PDGFRβ蛋白在梗阻肾脏内的表达。 结果UUO＋Vehicle小鼠的肾间质胶原蛋白沉积显著高于Sham＋Vehicle组(P<0.05)。UUO＋Vehicle小鼠肾组织CXCL16,IL－1β,ICAM－1,TGF－β,TNF－α的mRNA表达显著高于Sham＋Vehicle组(P<0.05),UUO＋Vehicle小鼠肾组织血小板来源生长因子受体β(PDGFRβ)蛋白表达显著高于Sham＋Vehicle组(P<0.05)。经过S3I－201治疗7 d后,UUO＋S3I－201小鼠的上述各项指标均显著低于UUO＋Vehicle(P<0.05)。 结论S3I－201通过抑制多种细胞因子的mRNA表达,以及降低PDGFRβ蛋白的表达,减轻实验性肾小管间质纤维化小鼠的肾间质炎症反应,从而发挥肾脏保护作用。