FISH检测宫颈脱落细胞hTERC基因的表达及其临床意义

目的:探讨宫颈上皮内瘤变(CIN)患者人类染色体末端酶(hTERC)基因的表达和临床意义。方法:收集2006年10月至2007年6月北京大学人民医院妇科122例宫颈脱落细胞标本,其中CIN患者66例、宫颈鳞癌(SCC)患者20例、正常细胞学妇女36例,用荧光原位杂交(FISH)方法检测脱落细胞hTERC基因。结果:在CINⅠ、CINⅡ/Ⅲ和SCC患者宫颈脱落细胞中hTERC基因的表达率分别是16.13%、48.57%和90%,CINⅠ、CINⅡ/Ⅲ、SCC组与正常组比较,hTERC基因阳性率差异有显著统计学意义(P<0.001),其中,CINⅠ与CINⅡ/Ⅲ、CINⅠ与SCC比较,CINⅡ/Ⅲ与SCC比较差异有统计学意义(P<0.05)。随着病变程度增加,hTERC基因表达率增加。hTERC基因检测CINⅡ/Ⅲ的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别是48.57%、92.53%、77.27%和77.5%。CIN和SCC组hTERC基因拷贝数明显增加,其中CIN患者平均拷贝数为2.8,SCC组平均拷贝数为3.2,hTERC基因的表达水平与宫颈病变的程度关系密切。结论:hTERC基因在CIN和SCC中表达异常,且随病变程度增加阳性表达率增加,可作为宫颈癌前病变进展的生物遗传学监测指标。     

人端粒酶RNA基因扩增和高危型HPV感染检测对宫颈癌及宫颈上皮内瘤变的预测意义

目的:研究人端粒酶RNA基因(hTERC)扩增及高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)在宫颈癌和宫颈上皮内瘤变(CIN)脱落细胞的表达,以探讨其在早期宫颈病变和疾病发展的作用和临床意义.方法:分别采用荧光原位杂交技术(FISH)和第2代杂交捕获法(HCⅡ),检测26例宫颈良性病变/湿疣、27例CIN、41例浸润性宫颈癌(ICC)共94例患者的hTERC基因扩增杂交信号数及HR-HPV阳性感染,上述两种检测方法与宫颈病理组织学结果对照.结果:hTERC基因在ICC组阳性表达为85.37%,高于CIN Ⅱ～Ⅲ组(15.83%)、CIN Ⅰ组(7.14%)与良性病变组(6.67%,1/15),差异有高度统计学意义(P<0.01);HR-HPV阳性感染率在良性病变/湿疣、CIN Ⅰ、CIN Ⅱ～Ⅲ、ICC分别为46.15%,71.43%,38.46%和19.51%;hTERC基因FISH检测对宫颈上皮病变的阳性预测值(PPV)和特异度(Sp)分别为92.68%、88.46%,明显高于HR-HPV-HC Ⅱ检测(65.71%、53.85%),P<0.01;敏感度(Se)55.88%,阴性预测值(NPV)43.40%,亦高于后者(33.82%、23.73%),P<0.05.结论:hTERC基因FISH检测与HR-HPV-HC Ⅱ检测比较能更可靠地辨别宫颈病变的程度;检测hTERC基因扩增对判断早期宫颈病变进展风险可能有一定的预测意义,有望作为宫颈癌早期筛查、病情判断和评估预后的辅助指标之一.     

hTERC基因表达在宫颈病变中的临床意义

目的探讨应用荧光原位杂交(FISH)技术检测人类染色体端粒酶(hTERC)基因异常扩增在子宫颈病变中的临床意义。方法选择经过液基细胞学(TCT)检查的112例患者为研究对象,根据组织学结果分组,CIN73例、宫颈癌19例、正常20例,用FISH方法检测脱落细胞hTERC基因的表达情况,其中行HPV检查65人,阳性39例,阴性26例。结果在CIN1、CIN2/3和宫颈癌患者宫颈脱落细胞中hTERC基因的表达率分别是16.67%、51.16%和89.47%,CIN1、CIN2/3和宫颈癌与正常组比较,hTERC基因阳性率差异有统计学意义(P0.001),其中,各组间比较差异有统计学意义(P0.05)。在HPV感染的39例患者中,hTERC基因扩增比例58.97%(23/39),而26例HPV阴性的患者中,其扩增比例为23.08%(6/26),两组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论 hTERC基因的阳性率随宫颈病变级别增高而增加,对宫颈早期病变进展有预测意义。hTERC基因的扩增与HPV感染及宫颈病变程度相关,其扩增可能是HPV感染致端粒酶活性增加的早期事件。     

FISH技术检测宫颈hTERC基因的表达及其临床意义

目的探讨荧光原位杂交技术检测宫颈上皮细胞hTERC基因的表达及其临床意义。方法应用荧光原位杂交技术(FISH)检测138例宫颈脱落细胞中hTERC基因的表达情况。结果118例各级宫颈病变中,CIN176例,CIN214例,CIN3/原位癌16例,宫颈浸润癌12例,用FISH检测hTERC基因的表达其阳性率分别是13%、64%、81%、100%,子宫颈癌hTERC基因的表达较宫颈上皮内瘤变各组差异有统计学意义(P0.05)。结论hTERC基因在各级宫颈病变均有一定的表达。hTERC基因的阳性表达率随着宫颈病变分级呈逐渐上升趋势。且hTERC基因在高度病变中的阳性表达率明显高于低度病变。     

宫颈脱落细胞hTERC基因扩增的初步研究

目的探讨人类染色体端粒酶RNA（hTERC）基因扩增在宫颈癌发生发展中的作用及其对CIN2及以上病变筛查的临床意义。方法应用荧光原位杂交（FISH）法检测17例宫颈癌、39例CIN3、7例CIN2、14例CIN1及33例慢性宫颈炎患者宫颈脱落细胞hTERC基因扩增情况,同时对检测hTERC基因异常扩增与宫颈液基薄层细胞学检查（TCT）和高危型HPV-DNA检测诊断CIN2及以上病变的特异性和敏感性进行比较。结果 hTERC基因在慢性宫颈炎、CIN1、CIN2、CIN3及宫颈癌中的异常扩增率分别为18.19%、14.29%、35.29%、71.79%和94.12%,差异有统计学意义（χ2=41.415,P=0.000）。其中,慢性宫颈炎组和CIN1组hTERC基因扩增率比较,差异无统计学意义（P=1.000）,但均显著低于CIN2、CIN3组和宫颈癌组（P=0.001）。而且,检测宫颈脱落细胞hTERC基因扩增诊断CIN2及以上病变的敏感性为68.49%（50/73）,特异性为86.21%（50/58）,而TCT诊断CIN2及以上病变的敏感性为63.01%（46/73）,特异性为74.19%（46/62）;高危型HPV-DNA检测诊断CIN2及以上病变的敏感性为90.41%（66/73）,特异性为62.26%（66/106）。结论 hTERC基因扩增在宫颈癌的发生发展中起重要作用。FISH检测宫颈脱落细胞中hTERC基因扩增在一定程度上可反映CIN2及以上病变存在,可弥补TCT和HPV检测的不足。     

人染色体端粒酶基因的扩增率与宫颈癌前病变和宫颈癌的研究

目的:探讨人染色体端粒酶基因(hTERC)扩增率与宫颈癌前病变及宫颈癌的关系.方法:应用荧光原位杂交技术(FISH)检测宫颈上皮内瘤变(CIN)组108例(CIN Ⅰ 39例、CINⅡ37例、CINⅢ32例),宫颈癌组24例和正常对照组33例,共165例宫颈脱落细胞中hTERC基因的表达情况.结果:CINⅡ、CINⅢ和...     

荧光原位杂交技术检测宫颈上皮内瘤变及宫颈癌中TERC基因的扩增及临床意义

目的:应用荧光原位杂交(FISH)技术检测宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈癌中TERC基因的扩增,探讨其在宫颈病变筛查中的意义.方法:筛选门诊就诊宫颈疾病患者宫颈脱落细胞标本120例,其中液基细胞学检查正常者20例,病理学检查CIN Ⅰ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌各25例.采用双色间期FISH技术检测宫颈脱落细胞TERC基因扩增,以正常标本的检测结果建立阈值.结果:①CIN Ⅰ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌中每例的异常细胞百分率均大于阈值(P<0.05),异常细胞百分率随病理学分级病变严重程度增高而增高(P<0.01).②2:3、2:4、2:5和4:4以上类型在CIN Ⅰ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌所占百分率比较,差异有高度统计学意义(均P<0.01),其中宫颈癌与CIN Ⅰ比较,2:3类型所占比例明显下降(P<0.001),2:4、2:5和4:4以上类型所占比例明显升高(JP<0.001).③不同细胞学分级中,异常细胞百分率随其病变严重程度增高而增高(P<0.01),2:3、2:5和4:4以上类型在ASCUS、LSIL和HSIL中的百分率差异有高度统计学意义(均P<0.01),其中HSIL与ASCUS比较,2:3类型所占比例明显下降(P<0.01),2:5和4:4类型所占比例明显升高(P<0.01).④在低级别及高级别CIN中,细胞学LSIL及HSIL检出率分别为10例(40.00%,10/25)及31例(62.00%,31/50),FISH技术检测出低级别与高级别CIN的敏感度均明显高于细胞学检查(P<0.05).结论:CIN Ⅰ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌均有TERC基因扩增,其拷贝数随病理学及细胞学分级严重程度增加而增加.应用FISH技术检测宫颈脱落细胞TERC基因扩增对宫颈病变筛查及对病变进展预测具有一定价值.     

宫颈病变细胞中hTERC、c-myc基因的表达及临床意义

目的:检测各级别宫颈上皮内瘤变、宫颈癌患者端粒酶(hTERC)和c-myc基因的表达,探讨二者与宫颈癌发生发展的相关性。方法:采用FISH技术检测193例宫颈病变及52例宫颈癌患者中hTERC基因,c-myc基因的扩增情况,比较分析两种基因表达与CIN级别及宫颈癌临床病理特征的关系。结果:随宫颈病变级别加重,hTERC基因阳性扩增率呈逐渐增高趋势,组间有显著统计学差异(χ2=148.353,P=0.000)。c-myc基因随宫颈病变级别的加重,阳性率逐渐增高,组间有显著统计学差异(χ2=110.128,P=0.000)。c-myc基因阳性率随分化程度的加重而升高,G3阳性率明显高于G1/G2(χ2=6.054,P=0.014),hTERC基因则无显著差异。结论:hTERC基因,c-myc基因可作为鉴别宫颈低度癌前病变和高度癌前病变的重要辅助指标,c-myc基因可能是揭示宫颈癌进展,分化程度的重要指标。     

人乳头瘤病毒生物状态和人端粒酶RNA组分基因扩增与宫颈病变的关系

目的:探讨人乳头瘤病毒(HPV)生物状态和人端粒酶RNA组分(hTERC)基因扩增与子宫颈病变之间的关系。方法:应用原位杂交(ISH)和荧光原位杂交(FISH)方法,分别检测114例宫颈石蜡包埋组织HPV生物状态及hTERC基因的异常扩增。结果:在非CIN、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、宫颈癌宫颈组织标本中hTERC基因表达率分别为2.78%、10.00%、50.00%、78.37%和86.67%,差异有统计学意义(χ2=55.56,P<0.001)。随着病变程度升高,HPV整合发生率逐渐升高(0.0%、10.00%、18.75%、72.97%、80.00%)。不同程度的宫颈病变HPV整合率有显著差异(χ2=52.49,P<0.001)。其中,非CIN组与CINⅢ、宫颈癌组之间差异有统计学意义,CINⅠ与CINⅢ、宫颈癌组之间差异有统计学意义,CINⅡ与CINⅢ、宫颈癌组之间差异有统计学意义。HPV DNA整合情况和hTERC基因扩增情况一致,用两种方法预测宫颈癌的效果一致。结论:HPV生物状态和TERC基因扩增与子宫颈病变的发生发展相关。HPV感染与HPV整合、端粒酶激活有时序性差异,但HPV整合和hTERC基因扩增的时序性和关联性有待进一步探讨。     

宫颈病变中hTERC的表达

目的:探讨人类染色体端粒酶RNA(hTERC)在宫颈病变中的表达.方法:荧光原位杂交(FISH)法检测8例宫颈癌,28例CINⅢ,10例CINⅡ,6例CIN Ⅰ及25例慢性宫颈炎组织中hTERC的表达情况.结果:hTERC在慢性宫颈炎组织、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ及宫颈癌中的阳性表达率分别为12.0%、16.7%、20.0%、71.4%和100.0%,与病变程度呈正相关(r=0.631,P<0.01),各组间差异有统计学意义(P<0.05).结论:hTERC的阳性表达率与宫颈病变程度密切相关,提示其在宫颈癌的发生发展中起着重要作用.     

miR-218下调与宫颈上皮内瘤变患者HPV病毒感染关系的研究

目的:探讨小分子RNA-218(miR-218)下调与宫颈上皮内瘤变(CIN)患者人乳头瘤病毒(HPV)感染的关系。方法:选择78例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者,其中CINⅠ22例(28.2%),CINⅡ27例(34.6%),CINⅢ29例(37.2%),逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-218的表达,GenoArray测试工具包检测组织标本中HPV的表达。结果:miR-218在高危型HPV感染患者中的含量低于低危型HPV感染者,CINⅡ、Ⅲ患者miR-218含量比CINⅠ患者低。结论:高危型HPV感染患者中miR-218表达降低,提示miR-218可能是宫颈癌发生的重要因素。     

人端粒酶RNA基因检测在子宫颈病变筛查中的意义

目的 探讨人端粒酶RNA(hTERC)基因检测在宫颈病变筛查中的意义.方法 选择经宫颈液基细胞学检查为正常一高度鳞状上皮内瘤变(HSIL)的301例患者为研究对象,采用人乳头状瘤病毒(HPV)杂交捕获2代(HC2)方法检测其高危型HPV感染状况,病理学检查明确其病变性质,荧光原位杂交(visa)技术检测其hTERC基因异常扩增情况.以病理学结果为金标准,将FISH技术检测结果与液基细胞学和HC2方法检测结果进行比较.结果 301例患者中,宫颈液基细胞学检查为正常、不典型鳞状细胞(ASC)、低度鳞状上皮内瘤变(LSIL)与HSIL细胞中,hTERC基因异常扩增率分别为3.0%(6/203)、21.2%(14/66)、44.4%(8/18)和92.9%(13/14),两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05～0.01).有病理检查结果的98例患者中,炎症或湿疣、宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ、CIN Ⅱ、CIN Ⅲ和浸润癌患者的hTERC基因异常扩增率分别为4.4%(2/45)、20.0%(4/20)、6/8、86.7%(13/15)和100.0%(10/10),炎症或湿疣、CIN Ⅰ细胞中hTERC基因异常扩增率明显低于其他病变(P<0.01).23例高级别CIN(即CINⅡ～Ⅲ)患者中,FISH技术检测为hTERC基因异常扩增阳性19例(82.6%,19/23),液基细胞学检查为HSIL者仅4例(17.4%,4/23),FISH技术检测筛出高级别CIN的敏感度明显高于液基细胞学检查(P<0.01).高危型HPV DNA感染率,CIN Ⅰ患者为75.0%,高级别CIN和浸润癌患者均为100.0%.hTERC基因异常扩增检出高级别CIN和浸润癌的敏感度分别为82.6%和100.0%,分别与高危型HPV DNA检测检出高级别CIN和浸润癌的敏感度(均为100.0%)比较,差异均无统计学意义(P>0.05);而特异度前者明显高于后者(分别为67.8%～73.5%和25.6%～27.7%,P<0.01).FISH技术检测结果显示,CIN Ⅰ细胞中hTERC基因异常扩增信号为2:3型者占84.9%,2:4型占15.1%,4:4型为0;CIN Ⅱ～Ⅲ细胞中异常扩增信号为2:3、2:4和4:4型者分别占44.6%、24.8%和17.8%,与CIN Ⅰ比较,2:3型比例明显下降(P<0.01),2:4型比例呈上升趋势(P>0.05),4:4型比例明显升高(P<0.01).结论 应用FISH技术检测hTERC基因异常扩增情况可辅助液基细胞学检查和HPV HC2方法诊断高级别CIN;且hTERC基因异常扩增信号为2:4和4:4型以上可能是进展为高级别CIN的预测指标.     

CD1a和E-cadherin在宫颈上皮内瘤变中的表达

目的:探讨CD1a和E-cadherin与宫颈癌发生发展的关系及作为早期癌变生物学指标的可能性。方法:采用免疫组化SP法检测CD1a和E-cadherin在同期56例宫颈上皮内瘤变、56例宫颈鳞癌和15例正常宫颈组织中的分布及表达。结果:(1)CD1a+朗格汉斯细胞在正常宫颈、CIN和宫颈癌各组中数量逐渐减少,两两比较有显著差异(P0.01);CIN中该细胞数量随病变严重程度减少,CINⅠ和CINⅡ、CINⅠ和CINⅢ组之间两两比较有显著差异(P0.05),而CINⅡ与CINⅢ组间无显著差异(P0.05);(2)E-cadher-in在正常宫颈、CIN和宫颈癌各组中的阳性表达率及强度逐渐下降,两两比较有显著差异(P0.05);在CIN中阳性表达率及表达强度随病变严重程度呈下降趋势,CINⅠ和CINⅡ、CINⅠ和CINⅢ之间两两比较有显著差异(P0.05),而CINⅡ和CINⅢ之间无显著差异(P0.05);(3)宫颈组织中CD1a+朗格汉斯细胞的细胞数与E-cadherin的阳性表达率及强度呈正相关(r=0.912,P0.05)。结论:CD1a+朗格汉斯细胞与E-cadherin可能在宫颈癌的发生、发展过程中起重要作用。     

hTERC基因表达在宫颈病变诊治中的应用

目的：探讨宫颈脱落细胞中hTERC的基因表达在宫颈上皮内瘤样病变（CIN）诊断与治疗中的应用。方法：抽取行子宫颈癌筛查的724例妇女为研究对象,对其同步进行宫颈脱落细胞的液基细胞学检查、第二代杂交捕获技术（HC-Ⅱ）检测高危型HPV（HR-HPV）和荧光原位杂交（FISH）技术检测hTERC基因。对于细胞学为未明确诊断意义的不典型鳞状上皮细胞（ASCUS）及以上病变,和（或）HR-HPV阳性者均行阴道镜下宫颈四象限多点活检进行病理诊断。结果：724例中经病理确定为CINⅠ,Ⅱ,Ⅲ及子宫颈癌者分别为251例（34.67%）、17例（2.35%）、48例（6.63%）和10例（1.38%）,宫颈脱落细胞hTERC的扩增率为11.05%。①724例HPV阳性率为39.64%;hTERC扩增在HPV阳性与阴性组分别为19.86%与5.26%（χ2=37.556,P ＜0.01）。②hTERC扩增在细胞学无宫颈上皮内瘤变（NILM）组为5.19%、ASCUS为10.23%、低度鳞状上皮内瘤样病变为（LSIL）11.84%、非典型鳞状上皮细胞－不除外高度鳞状上皮内瘤变（ASC-H）为21.43%、高度鳞状上皮内瘤样病变（HSIL）为73.17%、鳞状细胞癌（SCCA）为100.00%、非典型腺上皮细胞（AGC）为50.00%;hTERC在HSIL及以上病变中的扩增率明显高于LSIL及以下病变（χ2=186.755,P ＜0.01）。③在不同组织学结果中hTERC的扩增率分别为,NILM 3.70%、CINⅠ4.38%、CINⅡ47.06%、CINⅢ58.33%、浸润癌90.00%,hTERC在CINⅡ及以上级别病变中的扩增率明显高于CINⅠ和NILM者 （χ2=144.597,P ＜0.01）。结论：hTERC的扩增与宫颈细胞学和组织学异常密切相关,hTERC扩增与否有可能作为判断有无高度病变及估计预后的指标之一。     

半乳凝素-3在宫颈上皮内瘤变及宫颈鳞状细胞癌中的表达及其意义

目的:探讨半乳凝素-3(Galectin-3)在宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈鳞状细胞癌(SCC)中的表达及其意义。方法:选择经病理确诊为CIN和SCC患者的石蜡标本60例,以同时期因子宫肌瘤行全子宫切除患者的正常宫颈组织(NC)石蜡标本10例作为对照,采用免疫组化方法分析CIN及SCC中Galectin-3表达情况。结果:NC、CIN、SCC及SCCⅠ、SCCⅡ、SCCⅢ组Galectin-3表达阳性率分别为40.00%、50.00%、83.33%及70.00%、90.00%、90.00%。NC、CIN、SCC3组间Galectin-3表达阳性率差异有统计学意义(χ2=9.559,P=0.049);NC组Galectin-3表达阳性率与SCCⅡ期组及Ⅲ期组比较,差异有统计学意义(χ2=5.495,P=0.029)。宫颈肿瘤>2cm组Galectin-3表达阳性率高于≤2cm组,差异有统计学意义(χ2=4.690,P=0.047)。结论:SCC中Galectin-3的阳性表达与肿瘤大小有关;Galectin-3表达阳性率随宫颈病变发展而升高。Galectin-3可能在SCC的发生、进展中发挥作用。     

TSLC1基因异常甲基化及与HPV的关系在宫颈癌发生发展中的意义

目的:探讨TSLC1基因启动子甲基化状态以及与HPV感染的关系在子宫颈癌发生发展中的意义。方法:用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)法检测68例原发性宫颈癌,67例CIN及29例慢性宫颈炎症石蜡包埋组织中TSLC1基因甲基化状态。用聚合酶链反应(PCR)法检测人乳头瘤病毒(HPV)DNA的感染状况。结果:宫颈癌组织中45例异常甲基化(66.2%),其中鳞癌67.8%(40/59),腺癌55.5%(5/9);67例宫颈上皮内瘤变组织中29例可见异常甲基化(43.3%);29例慢性炎症组织中2例甲基化(6.9%);将鳞癌、腺癌、CIN与慢性炎症比较,鳞癌与CIN比较,CINⅡ～Ⅲ与CINⅠ比较均显示差异有统计学意义(P<0.05),腺癌与CIN比较,鳞癌分化程度之间的差异无统计学意义(P>0.05)。HPV感染率宫颈癌组51.5%(35/68),CINⅠ23.1%(6/26),CINⅡ～Ⅲ41.5%(17/41),慢性炎症组17.2%(5/29);TSLC1甲基化与HPV感染相关性比较,CIN组之间差异有统计学意义(P<0.05),宫颈癌组之间的差异则无统计学意义(P>0.05)。结论:TSLE1基因启动子区CPG岛的高甲基化是导致TSLC1基因失活的重要机制,可能参与宫颈癌的发生;它与HPV之间的关系提示TSLC1基因可能是宫颈细胞癌变过程中的早期事件。     

HER-2在宫颈病变脱落细胞的表达及临床意义

目的:研究癌基因HER-2在不同程度宫颈病变脱落细胞的表达,探讨它在宫颈癌发生发展中的作用及临床意义。方法:用荧光原位杂交(FISH)法检测12例正常宫颈、55例宫颈上皮内瘤变(CIN)及24例浸润性宫颈癌脱落细胞中HER-2的表达。结果:HER-2在正常宫颈脱落细胞中不表达,在CINⅠ、CINⅡ～Ⅲ及宫颈癌的阳性表达率分别为6.3%、25.6%及58.3%。HER-2在CINⅡ～Ⅲ及子宫颈癌组表达均显著高于正常组(P<0.01),同时宫颈癌组HER-2明显高于CIN组(P<0.01)。HER-2高表达与细胞分级明显相关(P<0.01),与临床分期、病理类型无关。结论:HER-2基因高表达在宫颈癌发生发展中可能起重要作用,在宫颈病变脱落细胞中检测HER-2基因对探讨宫颈病变的进展和预测不良预后可能有重要意义。