新型冠状病毒抗体检测及应用

<正>自2019年12月,由新型冠状病毒(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)引起的新型冠状病毒肺炎(corona virus disease 2019,COVID-19)迅速在全球暴发,是迄今为止全球最大的公共卫生事件。据世界卫生组织报道,截止2022年2月24日,全球新型冠状病毒肺炎感染人数已达4.2亿,死亡人数超过540万,严重威胁人类生命安全。     

新型冠状病毒血清特异性抗体不同检测方法的临床应用评价

目的 探讨胶体金免疫层析法(GICA)、酶联免疫吸附法(ELISA)及化学发光法(CLIA)检测新型冠状病毒(2019-nCoV)血清特异性抗体在新型冠状病毒肺炎(COVID-19)诊断中的临床应用价值.方法 对21例核酸检测阳性的COVID-19确诊病例的26份血清标本,以及排除2019-nCoV感染的30份血清作为...     

化学发光免疫分析技术和量子点免疫荧光组织化学检测新型冠状病毒特异性抗体及其应用评价

目的 分别采用化学发光免疫分析技术(chemiluminescence immunoassay,CLIA)和量子点免疫荧光组织化学(quantum dot-based immunohistochemistry,QD-IHC)检测新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coron...     

新型冠状病毒特异性抗体微流控法定量检测能力评价及应用

目的：建立并评价新型冠状病毒即严重急性呼吸综合征冠状病毒2型（severe acute respiratory syndrome coronavirus2,SARS-CoV-2）特异性抗体定量检测方法,为新型冠状病毒肺炎（corona virus disease-2019,COVID-19）疫情防控提供血清学研判支持。方法：采集2020年1—2月SARS-CoV-2感染者及其密切接触者的血清和咽拭子样本,分别用RT-qPCR法检测SARSCoV-2核酸,微流控法和胶体金法检测SARS-CoV-2特异性抗体,并比较分析检测结果的一致性。结果：微流控法、胶体金法检测SARS-CoV-2特异性IgG抗体的结果均与RT-qPCR方法一致。发病早中期（<14 d）与后期（≥14 d）微流控法IgG抗体阳性率差异有统计学意义。结论：微流控法是一种新型可定量的SARS-CoV-2抗体检测法,检测结果准确且耗时短。     

化学发光法检测SARS-CoV-2抗体试剂诊断效能比较及抗体筛查策略探讨

目的 研究新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者特异性抗体免疫球蛋白(Ig)M、免疫球蛋白(Ig)G及总抗体动态变化规律,评价应用化学发光在COVID-19诊断中的可靠性及诊断效能,并通过抗体血清学转化探讨普通人群筛查策略,为科学地防治COVID-19提供理论依据.方法 收集我院2020年1月25日至3月17日就诊患...     

抗体检测阴性新型冠状病毒患者的临床与实验室特征分析

目的 探讨新型冠状病毒肺炎（coronavirus disease 2019,COVID-19）确诊患者抗体检测阴性群体的临床特征与实验室检验特征,有助于增进对确诊患者抗体检测阴性结果的合理判读及对此类患者的有效管理。方法 回顾性分析荆门市第一人民医院2020年1月23日至2020年3月27日确诊的116例COVID-19患者的临床资料,并对患者一年内的总抗体检测结果进行跟踪分析。依总抗体检测结果、患者的临床分型分为抗体阳性/阴性组,轻症组（轻型、普通型）、重症组（重型、危重型）。采集上述患者的临床与实验室检测数据并分析比较。结果 总抗体阴性患者比例为17.2%(20/116)。慢性肾病者与糖尿病分属抗体阴性组、抗体阳性组的首位并发症。抗体阴性组的平均住院日（17.80±11.70）d少于抗体阳性组（28.88±10.14）d,抗体阴性组的谷丙转氨酶（中位数20.10）低于抗体阳性组（中位数28.00）,两组间的平均住院日、谷丙转氨酶差异均有统计学意义;抗体阴性组、阳性组入院时的白细胞计数、淋巴细胞计数基本一致;抗体阴性患者组的谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、D-二聚体、C反应蛋白（中位数分别...     

化学发光法检测梅毒螺旋体抗体的临床应用价值

目的探讨微粒子化学发光法(CMIA)检测梅毒螺旋体特异性抗体的临床应用价值。方法将2 813份标本分别采用CMIA法、甲苯胺红不加热实验(TRUST)和梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)检测梅毒螺旋体特异性抗体。结果 2 813份标本中,TPPA阳性为361例,阳性率为12.8%。以TPPA为金标准,CMIA的敏感性为96.5%(361/374),特异性为99.4%(2 439/2 452);TRUST的敏感性为28.3%(102/361),特异性为100%(2 452/2 452)。结论 CMIA法检测梅毒螺旋体特异性抗体的敏感性和特异性均较高,可广泛应用于临床。     

新型冠状病毒IgM-IgG抗体检测试剂盒的制备及对15例患者临床应用初试

目的 开发一种快速检测SARS-CoV-2病毒的IgM-IgG抗体的胶体金免疫层析检测试剂盒,并优化研发及应用策略,分析IgM-IgG抗体联合检测在新冠病毒检测中的临床应用价值。 方法 表达纯化SARS-CoV-2病毒S蛋白的RBD和NTD结构域,通过胶体金制备工艺包被抗原及多克隆抗体,制备IgM-IgG抗体检测试剂盒;收集15例阳性患者的血清进行抗体检测分析,计算试剂盒检测的阳性率,分析SARS-CoV-2抗体IgM-IgG对病毒响应的过程。 结果 在15例核酸RT-PCR检测阳性的患者血清样本中,IgM-IgG联合抗体检测的阳性率为73.33%,其中IgM阳性占总标本数的53.33%,IgG阳性占总标本数的60.00%;5例境外人员中有3例为抗体阳性;对患者的流行病学分析发现,病毒感染1周以上的患者共7例,抗体检测全部为阳性;抗体检测试剂盒的灵敏度73.33%,特异性95.00%。 结论 IgM-IgG联合抗体检测法具有快速、方便、易操作等特点,可以作为核酸检测的辅助手段对疑似患者(尤其是境外人员及无症状患者)进行初筛;且IgM-IgG的检测结果可以作为推测患者病毒感染过程的依据;快速检测IgM-IgG抗体将为COVID-19疾病的诊断和治疗提供帮助。     

化学发光免疫法检测甲状腺激素及抗体结果的临床意义

目的 应用CLIA法和RIA法检测正常人和甲功异常病人的甲状腺激素及抗体的含量,探讨两种检测方法的相关性及结果的临床意义.方法 取某院内分泌门诊或住院患者的血清标本分成甲功正常组、甲亢组、甲低组3组,每组40例,分别用两种方法检测其FT3、FT4、TSH、TG、TMA和TGA的含量,分析其统计学差异.结果 两种方法比较结果无统计学意义,P＞0.05.结论 CLIA法检测甲状腺激素及其抗体,是一项快捷、精确的检测方法,它完全避免了RIA法的废弃物污染、试剂有效期短等缺点.     

化学发光法检测肝纤维化血清学指标的临床应用

目的探讨化学发光法检测肝纤维化指标包括三型前胶原N端肽(PⅢNP)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、层粘蛋白(LN)及透明质酸(HA)对肝纤维化的诊断价值。方法用化学发光法检测132例乙型病毒性肝炎患者血清中肝纤维化四项指标的水平,评价四项指标鉴别诊断肝炎及肝硬化的价值。结果乙型肝炎组、肝癌组、肝硬化组血清中的四项指标依次升高,均与正常对照组差异有统计学意义(P<0.01)。ROC曲线显示,PⅢNP、CIV、LN、HA的曲线下面积分别为0.680、0.825、0.716、0.825,灵敏度分别为39.1%、87.0%、87.0%、82.6%,特异性分别为89.8%、69.3%、53.4%、86.4%,准确性分别为79.09%、72.73%、78.18%、85.45%。在联合检测中,HA+PⅢNP组合的灵敏度为83.0%,特异性为80.0%,准确性为80.1%。结论单个指标检测,HA是四项指标中鉴别诊断肝炎与肝硬化最有价值的一项,通过HA联合其他指标进行分析,其中HA+PⅢNP组合特异性、准确性最高。     

新型冠状病毒核酸荧光型RT-RAA检测方法的建立及其评价

目的 建立新型冠状病毒(SARS-CoV-2)荧光型RT-RAA快速检测方法.方法 以体外转录SARS-CoV-2的RNA为模板,利用单链DNA结合蛋白、重组酶和DNA聚合酶,在40.5℃恒温下,快速完成orf1ab基因和S基因序列片段的扩增,并用已知新冠核酸阳性和其他呼吸道病毒感染患者咽拭子标本进行初步评价.结果 该...     

类风湿因子与抗环瓜氨酸肽抗体联合检测的临床应用价值

目的探讨类风湿因子（RF）与抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP抗体）联合检测的临床应用价值。方法使用酶联免疫吸附法（ELISA 法）检测我院150例类风湿关节炎（RA）患者（A组）、28例非RA患者（B组）以及34例健康人群（C组）的血清,比较三组人群血清中RF、抗CCP抗体单独或联合使用对诊断RA的敏感性、特异性等。结果 A组人群抗CCP抗体和RF阳性率比B组、C组高（P〈0.01）;A组中单独使用RF的敏感性高于抗CCP抗体,抗CCP抗体的特异性高于RF,联合使用抗CCP抗体和RF,其检测敏感性、阴性预测值及约登指数等高于抗CCP抗体或RF单独使用。结论抗CCP抗体和RF联合使用用于诊断RA具有良好的临床应用价值。     

当前新冠病毒的主要检测手段

2019年,由新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染引起的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)被报道,随后疫情在世界上各个国家和地区暴发且迅速流行.COVID-19的传染性强、病死率高,为有效控制疫情的发展,新冠病毒的检测至关重要,国内外各研究团队及机构已研发出各种检测新冠病毒的有效手段和仪器设备,本文从背景原理、应...     

新型冠状病毒假病毒的构建及其在血清中和抗体测定中的应用

目的 构建新型冠状病毒(SARS-CoV-2)假病毒,优化假病毒制备条件并应用于中和抗体活性检测.方法 优化合成SARS-CoV-2刺突蛋白(S)基因,进行假病毒包装;通过Western blot检测S基因的表达;应用定量ELI-SA检测接种新冠灭活疫苗后血清中新型冠状病毒IgG抗体的滴度,同时应用假病毒中和实验对接种...     

化学发光法定量检测甲胎蛋白的分析性能评价

目的评价化学发光法定量检测甲胎蛋白的分析性能。方法将检验标准品按照浓度不同分为6个等级,各等级的标本应用化学发光仪每天测定5次,连续5天。对检验结果的精密度、准确度及测量线性范围进行评估。结果所有6个等级每天测量值及测量总值的变异系数均小于各自的1/4总误差,精密度可靠;6个等级5天总测量均值偏倚分别为0.14%、-0.03%、0.25%、-0.37%、0.1%和-0.4%,与预示值进行线性分析,R2=0.9999,y=1.002x-0.295,与仪器提供的线性范围相一致。结论化学发光法定量检测甲胎蛋白结果准确可靠,可满足临床需要。     

流动注射化学发光法检测食品中SO2含量的研究

目的:建立一种食品中SO2的化学发光快速检测法?方法:利用SO2定量的与酸性高锰酸钾反应,从而减弱高锰酸钾-间苯二酚的化学发光,其减弱值与被检物浓度有关?结果:在最优化条件下,SO2浓度在0.04~40.00 mg/L范围内与发光强度减弱值呈较好的线性关系?方法的检测限为0.03 mg/L (S/N=3)?结论:该方法可用于食品中SO2分析?     

抗SARS-CoV-2 N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

目的 制备针对严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核衣壳蛋白(N)的单克隆抗体(mAbs)并鉴定其生物学特性。方法 利用大肠杆菌原核表达重组SARS-CoV-2 N蛋白,通过杂交瘤技术将小鼠骨髓瘤细胞SP2/0与经重组蛋白免疫的BALB/c小鼠的脾细胞进行融合,采用间接ELISA法和有限稀释法筛选出阳性杂交瘤细胞株,并鉴定其亚型,腹水法制备mAbs, Protein G亲和柱纯化后通过SDS-PAGE、间接ELISA和Western blot检测其纯度、效价及特异性。结果 获得5株能稳定分泌抗SARS-CoV-2 N蛋白mAbs的杂交瘤细胞株,分别命名为N1～5。通过腹水法制备获得5个mAbs,亚型鉴定结果显示1个为IgG2a*κ型、4个为IgG1*κ型,其效价均达到2×104以上。Western blot结果表明5个mAbs都能与重组SARS-CoV-2 N蛋白结合。结论通过杂交瘤技术成功制备了5个能特异性识别重组SARS-CoV-2 N蛋白的mAbs,为开发免疫诊断试剂奠定了基础。     

血液样本灭活处理对三种SARS-CoV-2抗体检测方法结果的影响

目的 探讨56 ℃ 30 min灭活处理对不同方法测定2019新型冠状病毒（SARS-CoV-2）抗体检测结果的影响。方法 本文为回顾性研究。收集2020年2月12~18日在佛山市第一人民医院确诊为新型冠状病毒性肺炎患者血清样本、血浆样本及全血样本各11份,同时收集同期疑似病例及其他疾病患者血清、血浆及全血样本各10份,采用双盲法,在样本采用56 ℃ 30 min灭活处理前后,分别采用免疫层析法检测样本中的SARS-CoV-2总抗体、采用荧光免疫层析法检测样本中的SARS-CoV-2 IgM抗体、采用化学发光荧光免疫分析法检测血清及血浆样本SARS-CoV-2 IgM及SARS-CoV-2 IgG,比较灭活前与灭活处理后样本的抗体检测结果,并采用Pearson相关性分析灭活前后检测IgM及IgG半定量检测结果的相关性。结果 免疫层析法检测灭活前后血清与血浆样本中SARS-CoV-2总抗体的阳性样本符合率为90.9%,阴性符合率为100.0%,总符合率均为95.2%。免疫层析法检测灭活前后全血样本中SARS-CoV-2总抗体的总符合率为100.0%。荧光免疫层析法检测灭活前后血清、血浆及全血样本中SARS-CoV-2 IgM抗体的阳性符合率均为100.0%,阴性符合率均为0%,总符合率均为47.6%。化学发光免疫分析法检测灭活 前后血清样本中SARS-CoV-2 IgM及IgG抗体及血浆中的IgG抗体,阳性符合率、阴性符合率及总符合率均为100.0%,检测血浆IgM抗体的总符合率为95.2%。采用Pearson相关对灭活前后血清及血浆样本IgM和IgG半定量检测结果进行相关性分析,其中IgM灭活前后结果的相关系数为0.9999（95%CI：0.9998~1.000,P<0.001）,IgG灭活前后结果的相关系数为0.9999（95%CI： 0.9998~1.000,P<0.001）。结论 56 ℃ 30 min灭活处理血液样本对免疫层析法及化学发光免疫分析法检测SARS-CoV-2抗体结果几乎无影响,可在检测前先进行灭活以降低检验人员感染风险,荧光免疫层析法不可使用灭活后样本进行检测。