超薄切片染色方法的探讨

随着电子显微镜在医学上的广泛应用,如何保证超薄切片的质量即成了电镜工作者比较关心的问题。一张优良的超薄切片除了应具备薄、平整、无皱缩、无刀痕和震颤之外,还必须干净、染色强度适     

一种高效的超薄切片染色法

最常用最简单的超薄切片染色法莫过于Kay介绍的液滴漂浮法。即将载网的切片面朝下倒扣在染液滴上,染毕用双蒸水冲洗。但在实际工作中却由于种种原因而往往难以取得理想的效果。首先是此法操作费时,每个载网的染色时间难以均     

超薄切片染色方法的改进及体会

在透射电子显微镜(transmission electron microscopy, TEM)(简称电镜)检查中,为确保检查的效率及拍片质量,所提供的超薄切片除应具备厚薄适中、平整、无刀痕和颤痕特征外,还需干净、结构反差效果好。由于生物样品本身结构的反差低,需经过重金属染色才能在电镜下显示清晰的超微结构。利用重金属离子对不同细胞结构的结合能力不同,使细胞内各结构对电子产生不同的散射能力,显示在荧光屏上,产生不同的反差[1]。以往实验均采用铀-铅双染法进行染色,由于该染色方法影响因素较多,结果常不稳定,故人们对染色液、染色方法和染色工具做了许多改进与探索[2,3]。近几年来河南中医学院病理实验中心对传统的染色方法“漂浮式滴染法”进行了改良[4],在关键的细节上给予注意和处理,有效地获得无污染的切片,现将具体方法及体会介绍如下。     

不脱钙骨组织标本超薄切片的制作方法

在骨超微结构研究和临床外检工作中,我们利用Epon-812含钙盐的骨组织标本来制备超薄切片.由于不脱钙的超薄切片在电镜下显示了骨组织的真实结构,更利于深入地研究骨组织的形态学.     

人植入前胚胎细胞超薄电镜切片制作

目的改进人植入前胚胎细胞超薄切片的制备方法,观察不同时期人早期胚胎细胞超微结构的变化。方法选取我院生殖中心试管婴儿助孕技术后异常受精的3原核胚胎,于2~8细胞期进行固定,改进透射电镜的常规操作方法,使用3%~4%琼脂进行预包埋,制成超薄切片后在镜下观察植入前胚胎细胞凋亡的超微结构。结果使用本方法可以对少量胚胎进行超薄切片的制作。结论使用3%~4%琼脂预包埋的方法可以成功的制作人植入前胚胎细胞的超薄电镜切片。     

电镜超薄切片染色装置及方法的应用

<正>透射电子显微镜(简称电镜)在大型三级医院的部分病理诊断工作中具有重要意义。超薄切片染色一直是电镜工作中的重点和难点。从20世纪30年代起至今,电镜工作者们对染色装置和方法做出许多改变,出现了自动染色机[1]、滴染法[2]、真空染色法[3]等。多年来,北京儿童医院病理科     

超薄切片自动染色机应用体会

随着超微病理技术的快速发展,超薄切片自动染色机已逐步取代传统超薄切片的双面染色手工工艺。大庆油田总医院病理科自2003年开始使用超薄切片自动染色机,不仅加快了实验进程,而且规范了染色结果,现介绍如下。     

避免电镜超薄切片污染的探讨

在生物学和医学的研究中 ,观察细胞超微结构的变化具有重要意义 ,目前电镜已成为临床病理诊断 ,形态学研究的必要工具。要获得清晰的电镜图像 ,电镜样品制备是重要环节 ,理想的超薄切片应具备以下几点要求 :①细胞超微结构保存良好 ,没有明显的人工假象。②反差好且分辨力高。③切片平展均匀 ,无污染、刀痕、震颤、皱褶等。样品制作过程中最容易影响切片 ,提高工作效率 ,我们必须重视一些易忽略的环节 ,保证制样工作顺利进行。切片污染可出现在样品制作的全过程及电镜观察时 ,分析如下 :1　制备包埋块过程中的污染及注意事项①取材的污染 :…     

介绍一种冰冻切片快速染色法

介绍一种冰冻切片快速染色法毕学杰，薛春梅冰冻切片在保证制片质量的前提下，所用时间越短，对临床越有利。我们配制了一种快速冰冻染色液，使染色时间在５ｍｉｎ内即可完成，染色效果和原来慢速染色法相同，现介绍如下。１材料和方法１．１染液配制所用试剂有１０％福尔...     

快速脱蜡超薄切片用于超微病理诊断

快速脱蜡超薄切片用于超微病理诊断王晶，朱晓滨，孙开华，倪淑兰近年来随着透射电镜研究手段的应用和普及，应用超微病理诊断也日益引起临床病理工作者的重视。但往往在常规光镜下发现一些疑难诊断的病理切片。需进一步透射电镜协助诊断时，手术后标本已用常规１０％福尔...     

自带放大镜包埋机在超薄标本切片制备中的应用

传统组织HE切片的制备中,包埋组织的最小厚度在mm级大小,对于μm级厚度的组织则难以制片.本实验在包埋机及放大镜的辅助下,完成对微米级组织切片的制作.     

透射电镜超薄切片污染产生的原因及对策

目的 分析电镜超薄切片污染产生的原因及消除污染的对策。方法 对样品制备及观察的每个环节逐一分析，对可能引起污染的各种因素采取有针对性的解决方法，严格按照透射电镜生物样品的制备要点进行操作。结果 消除了污染，保证了超薄切片的质量，电镜下拍出高质量的照片。结论 污染的原因是多方面、多因素的，只要工作中精益求精，基本上可以避免切片污染。     

冷冻切片5min快速制片染色法

冷冻切片整个过程所用时间的快与慢,切片染色质量的好与坏直接影响病理诊断的速度和准确性,如何又快又好地制好一张冷冻切片,一直是困绕病理技术员的难题.我们通过多年的不断摸索和改进,对一些特定的标本,如乳腺肿瘤、卵巢实性肿瘤、子宫肌瘤标本,在接到标本后5 min内制好2张冷冻切片,制片结果符合诊断要求,质量令人满意,现总结报道如下.     

Tween-20在超薄切片刀槽液中的应用

文献报道在超薄切片收集过程中可使切片产生皱褶,尤为多见使用有膜载网的贴片法收集切片,因而时常影响超微结构的观察和拍照.虽然用环套法或打捞法捞片可以减少皱褶,但比较麻烦或难度较大.为了能够简单易行地解决捞片皱褶问题,我们经过反复试验,认为采用Tween-20配制刀槽液和进行有膜载网的拖片法收集切片可以得到满意效果.现介绍如下.[第一段]     

人体组织切片的Giemsa染色法诊断输入性疟疾

疟疾可根据流行病学史、临床表现以及实验室检查结果等进行诊断,疟原虫是疟疾的病原体.显微镜观察血涂片来检查疟原虫或疟原虫抗原阳性是实验室确诊疟疾的关键.利用人体组织切片查见疟原虫,取代血涂片镜检确诊疟疾在国内尚未见报道.笔者在法医病理鉴定中遇到1例,对组织切片进行了Giemsa染色,并尝试摸索最适宜的染色条件,清楚地显示了疟原虫在脑、肝脏组织深部血管内的形态及发育状况,现报道如下.     

有脱钙骨组织标本超薄切片的制作方法

在骨超微结构研究和临床外检工作中，我们利用Epon812含钙盐的骨组织标本来制备超薄切片。由于不脱钙的超薄切片在电镜下显示了骨组织的真实结构，更利于深入地研究骨组织的形态学。     

不同湿度下 Epon812、Epon618对电镜制样的影响

透射电镜广泛应用于细胞及亚细胞结构的观察,获得质量满意的超薄切片是电镜观察的基础,而选择合适的包埋剂又是基础制样的关键。由于我国南北方环境差异较大,尤其是环境湿度会对包埋剂造成很大的影响。作者就此做了相关的实验,并调整相应的配比,得到了较为满意的切片,现报道如下。     

冷冻切片的快速黑色素染色法

在恶性黑色素瘤的冷冻切片中 ,仅靠形态学诊断非常困难 ,Ｍａｓｓｏｎ Ｆｏｎｔａｎａ染色有一定帮助 ,对冷冻切片上黑色素形成不明显 ,黑色素颗粒细小、散在或棕色颗粒难与含铁血黄素相鉴别时尤为有用〔1〕,但常规的Ｍａｓｓｏｎ Ｆｏｎｔａｎａ染色需要时间长 (12ｈ)不能用于快速冷冻切片的诊断。我院采用一种快速黑色素染色法 ,全部过程仅需 11ｍｉｎ ,取得了满意效果。1　材料与方法1.1　氨银液的配制　取 5 %硝酸银水溶液 40ｍｌ,逐滴加入浓氨水至产生棕黑色沉淀 ,再继续缓慢地逐滴加入浓氨水 ,边加边震荡 ,当沉淀几乎接近溶解 ,仅有少…     

冰冻切片染色法观察重组狂犬病病毒对乳鼠脑的感染和定位

目的冰冻切片染色法观察重组狂犬病病毒对乳鼠脑的感染和定位。方法将本实验室构建并拯救成功的人用狂犬病疫苗株重组病毒（CTN—GFP）脑内接种1日龄乳鼠和4周龄成年鼠,待感染乳鼠发病后至濒死期,通过心内灌流方法固定并制作脑组织冰冻切片,观察重组病毒在感染鼠的大脑海马组织中的绿色荧光蛋白的表达及分布。结果DAPI将所制作的冰冻切片中脑组织内细胞的胞核染成蓝色,在共聚焦显微镜下观察到受感染乳鼠的脑组织海马回位置有大量绿色荧光蛋白的表达。结论通过制作脑组织冰冻切片的方法可以清楚的观察到病毒的感染及其在海马回中的位置,同时为追踪病毒在体内的移行过程提供了一种新方法。