一种高效的超薄切片染色法

最常用最简单的超薄切片染色法莫过于Kay介绍的液滴漂浮法。即将载网的切片面朝下倒扣在染液滴上,染毕用双蒸水冲洗。但在实际工作中却由于种种原因而往往难以取得理想的效果。首先是此法操作费时,每个载网的染色时间难以均     

关于透射电镜样品污染问题的探讨

在透射电镜样品制备过程中,经常会遇到超薄切片被污染的问题。本文分析了造成超薄切片污染的原因,并针对超薄切片制作过程中的污染,提出了改善切片室环境、铜网支持膜、合理使用切片刀及刀槽的改进措施,针对切片电子染色过程中的污染,提出了在染液配制过程中严格遵守操作程序、在染色操作过程中严格坚持正确的方法等注意事项,并阐明了必要的防范措施,这些将有效避免电镜样品污染现象。     

提高电镜超薄切片染色效率的装置

随着电镜技术应用的普及,利用电镜观察肾小球超微结构进行临床诊断的样品日益增多.传统的超薄切片染色方法不能1次进行大批量染色操作(费时、费工,且易造成污染).为此,笔者对传统的电镜染色法作了探索和改进,最终做出了制作简便、染色量大、染色效果稳定的电镜超薄切片染色装置.     

Lillie-Mayer苏木精在冷冻切片快速进行性染色中应用

恒温冷冻切片是用于术中快速病理诊断的主要制片技术,除了要求技术人员有熟练的操作技能外,更重要的是要求在制作程序及苏木精染液的配制和使用方法上做出有效的选择,才能达到最佳的染色效果.Lillie-Mayer苏木精染液是一种从英国引进的改良配方,应用于冷冻切片的快速进行性染色,全程染色约90 s完成,该方法简化了盐酸乙醇分化的程序,节省了分化和返蓝中所消耗的时间,避免了盐酸乙醇酸化后引起的部分组织脱落掉片的现象.现将我科多年来在冷冻切片的快速染色方法及Lillie-Mayer苏木精染液的配制方法介绍如下.     

超薄切片自动染色机应用体会

随着超微病理技术的快速发展，超薄切片自动染色机已逐步取代传统超薄切片的双面染色手工工艺。大庆油田总医院病理科自2003年开始使用超薄切片自动染色机，不仅加快了实验进程，而且规范了染色结果，现介绍如下。     

Infinity HE高清恒染系统在病理常规染色中的应用

在日常病理工作中,为保证HE染色的质量,一般染片1500~1800张需更换染液。由于苏木精氧化持续等因素的存在,每张切片进行染色时试剂所处的状态不一致,也无法做到每张切片着色均一。在相对固定的染色程序中寻找稳定性较高的染液,保证在一定染片数量范围内每张切片着色均一,成为病理工作者致力解决的问题之一。本文就In-finity高清恒染系统在常规病理染色的稳定性进行评价。     

抗酸染色中碱性品红用量分析

抗酸染色主要使用对象是抗酸菌中的抗酸杆菌,其属于分枝杆菌。结核分枝杆菌是引起人和动物结核病的病原体,常侵犯全身各组织及器官,尤其是以肺、淋巴结等多见。由于其内含大量脂质,故对一般染液不易着色,从而影响诊断及治疗。常规抗酸杆菌染色多采用传统的Ziehl-Neelsen法[1],但染液放置一段时间后易出现沉淀,滴染时切片上染液残渣易造成污染。本科室在配制染液时通过对碱性品红用量的调整及对比染色,能较好的显示抗酸杆菌,现报道如下。     

超薄切片密封染色装置

超薄切片密封染色装置刘连璞，肖焕才，张薇，张树春，罗深秋为保证超薄切片的染色质量，我们建立了一套全密闭式的染色装置，其结构简单，操作方便，较好地解决了超薄切片染色中的铅污染问题。一、材料与方法１．构成染色装置的主要材料：滴定管架１个；定量吸液球１个（...     

透射电镜负染色技术常见影响因素与对策

正负染色技术又称阴性反差染色,简称负染。它是由HaL L和Huxley首先采用的一种应用于生物大分子研究的染色技术。与传统染色不同的是,样品进行负染色时,由于其与染液之间不发生反应,故样品本身并不着色。利用样品与染色剂密度的悬殊对比,在电子致密的黑色背景中能反衬出低电子密度的白色样品,形成负反差,故称负染色~([1])。负染色技术的样品无需经固定、脱水、包埋和超薄切片     

苏木素染色液配制方法的改进

苏木素-伊红染色(HE)在组织学、病理学、细胞学及病理诊断、科研和教学中有着十分重要的意义,HE染色质量的好坏与细胞核着色有着十分密切的关系。目前多采用Harris(1900)氏法来配制苏木素染液,该方法存在着媒染剂析出结晶多、染液表面有亮膜污染切片及氧化程度不易控制等缺点。针对上述缺点,我们对媒染剂铝明矾的用量进行了实验,经三年多的实际应用,改进后的苏木素染色,其染色效果与原配制方法相同,而且节省了媒染剂的用量。     

透射电镜超薄切片污染产生的原因及对策

目的 分析电镜超薄切片污染产生的原因及消除污染的对策。方法 对样品制备及观察的每个环节逐一分析，对可能引起污染的各种因素采取有针对性的解决方法，严格按照透射电镜生物样品的制备要点进行操作。结果 消除了污染，保证了超薄切片的质量，电镜下拍出高质量的照片。结论 污染的原因是多方面、多因素的，只要工作中精益求精，基本上可以避免切片污染。     

常用苏木素几种配方与染色结果的比较

苏木素是组织切片最常用的细胞核染料 ,H.E染色中配方甚多 ,染色效果也有差异 ,影响染色的因素颇多 ,未经氧化的苏木素无染色能力 ,氧化后的苏木素要使细胞核染色鲜蓝 ,还要借助媒染剂的作用 ,苏木素、氧化剂、媒染剂三者的搭配比例及染液的使用期限与染色效果都有着直接的关系。如何优化三者的比例和判断染液的有效期 ,使苏木素染色达到最佳效果 ,为此我们进行了以下探讨。1　方法与结果1.1　Ehrlich苏木素染液　这是一种自然氧化成熟的苏木素染液 ,比较合理的配方是 :苏木素 5g,无水乙醇2 0 0 ml,硫酸铝钾 2 0 g,甘油 2 0 0 ml,蒸馏水 1…     

几种半薄切片染色法的比较与改进

半薄切片是超薄切片前的一个重要步骤。光镜检查半薄切片,可确定电镜观察部位,判断组织固定和包埋的质量。半薄切片染色法很多,我们对几种常用方法进行了一些比较和改进,现将实践中的体会介绍如下,供参考。一、方法及结果:用Epon812包埋的组织块切成1微米或1.5微米厚的半薄切片,捞到滴有蒸馏水的载片上,在烘箱内烤干,待染色。1.甲苯胺兰染色法:将染液滴于切片上,在酒精灯上加热数秒钟,勿煮沸,流水冲洗,自然干燥,树胶封固后观察。不必经酒精及二甲苯,免切片皱缩不平。如染色适度,组织染成兰色,结构清楚,而树脂无色。2.苏木精—伊红染色法:锇酸固定、树脂包埋的组织,用此法难于着色,一般须先用氢氧化钾溶液脱去树脂,然后染色.为避免氢氧化钾液对组织可能产生的损伤,我们参考Chang法改用2.5%高碘酸处理切片,并用滴     

改良使用Carazzi苏木素染液的体会

H.E染色是组织切片最常用的染色方法,苏木素染液的配方甚多,染色效果也有差异,影响染色效果的因素颇多。未经氧化的苏木素无染色能力,氧化后的苏木素要使细胞核染色鲜蓝,还要借助媒染剂的作用。苏木素、氧化剂、媒染剂三者的搭配比例及染液的使用期限与染色效果都有着直接的关系。多年来,我们在探讨一种使用方便,染色效果好的苏木素染液。经过对原Carazzi苏木素染液配方的不断改良,摸索出一个比较合适的使用方法介绍如下。1　材料和方法为了更好的优化组合苏木素、钾明矾、碘酸钠三者的比例和探讨染液的有效期,我们多次改良原Carazzi的配…     

超薄切片制备关键环节的处理

超薄切片质量是电镜技术的基础,理想的超薄切片应该是厚度适中,厚薄均匀,结构清晰,没有颤痕、皱褶、重叠、刀痕、空洞及污染.优质超薄切片的获得,与样品的取材、脱水、浸透、包埋和切片的好坏诸因素息息相关.笔者根据多年的工作经验,就样品制备的几个关键环节在实践中不断研究和探讨,摸索出一些技巧,供同行们参考.     

透射电镜超薄切片前期载网清洗方法

在透射电镜生物样品的制备与观察中,要经过取材、固定、漂洗、脱水、修块、定位、超薄切片、染色等一系列繁复的程序,所有步骤环环相扣,缺一不可.超薄切片需被捞取在特殊的载网上才可进行透射电镜观察,而制作载网的材料一般为铜,因此也将载网称为铜网.     

一种超薄切片枸橼酸铅染液的长期保存方法

<正>超薄切片技术是将样本切成50～100 nm的切片^[1]，通过透射电子显微镜(transmission electron microscope, TEM)观察其细胞器、病理变化及病原体等超微结构，是生物学、医学研究和临床诊断的重要手段^[2-3]，由于生物样本对电子的散射能力弱，难以在TEM下清晰成像，故需要原子序数高、散射电子能力强的重金属染液提高样本超微结构的反差从而获得清晰的图像，枸橼酸铅(lead citrate, LC)是最常用的超薄切片染液^[4]，其优点在于对细胞各种成分都有亲和力，更易与核蛋白、糖原结合。     

组织化学染色技术在超薄生物塑化标本中的应用

目的 探讨组织化学染色技术是否可以应用于塑化标本并验证染色塑化标本是否具有自发荧光。 方法 选取1个手掌标本经超薄生物塑化技术做成组织块,进行连续切片,切片数量56张,并按切片顺序进行染色处理：原始切片,苏木素-伊红染色,凡尔霍夫- 酸性品红染色,亚甲蓝-天青Ⅱ号染色,在扫描仪、光学显微镜和激光扫描共焦显微镜下观察染色效果和组织结构特点并进行比较。 结果 3种染色技术都可应用于塑化切片染色。苏木素-伊红染色显示肌肉、结缔组织呈红色或紫红色,骨质呈紫蓝色或蓝色。凡尔霍夫-酸性品红染色显示弹力纤维呈黑色,胶原呈红色,其他组织为黄色或棕黄色。亚甲蓝-天青Ⅱ号染色显示肌腱呈紫红色,骨质呈粉红色,软骨呈紫罗兰,其他组织呈紫色。但细胞内结构的染色效果并不理想。在激光扫描共焦显微镜下,胶原纤维、弹力纤维和肌肉纤维具有自发荧光,结构清晰可辨。结论 常用的组织化学染色技术适合于超薄塑化切片染色,染色切片的各种组织结构比未染色的观察效果好。染色后,塑化切片中具有自发荧光的结构在激光扫描共焦显微镜下亦可清晰显影。     

超薄切片染色方法的探讨

随着电子显微镜在医学上的广泛应用,如何保证超薄切片的质量即成了电镜工作者比较关心的问题。一张优良的超薄切片除了应具备薄、平整、无皱缩、无刀痕和震颤之外,还必须干净、染色强度适     

改良半薄切片多色性染色方法

半薄切片有助于电子显微镜超薄切片的准确定位。现有的半薄切片有各种不同的染色方法,但在观察时往往组织结构、细胞核及细胞浆分辨不够清楚。我们在半薄切片中改进染色液的配制和染色方法,并