银杏提取物对大鼠肺缺血再灌注损伤细胞凋亡、NO含量和NOS活性的影响

目的 观察银杏提取物(EGB)对大鼠体外循环肺缺血再灌注损伤(I/R)时NO含量和NOS活性及对细胞凋亡的影响.方法 建立离体大鼠肺灌流模型,24只大鼠随机分成3组:假手术组(Sham);I/R组;I/R+EGB组,观察大鼠肺组织形态学改变,测定肺组织匀浆及灌流液中一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)的含量、肺湿干重比(W/D)和平均肺动脉压(MPAP),凋亡指数测定.结果 HE染色显示EGB组肺损伤明显减轻、肺组织湿/干重比和MPAP显著低于I/R组;EGB组肺组织匀浆中NOS和NO含量显著高于I/R组.EGB组凋亡指数明显低于I/R组.结论 EGB对大鼠肺I/R损伤具有保护作用,其机制可能与增强NOS表达,促进NO合成,同时与减少细胞凋亡有关.     

猪心脏移植缺血再灌注损伤中NO和NOS的表达

①目的　了解猪同种原位心脏移植术后早期一氧化氮 (NO)、一氧化氮合酶 (NOS)含量的变化 ,及其与早期缺血再灌注损伤的关系。②方法　建立猪同种原位心脏移植模型。供心在移植前低温保存 (Thomas液 ,4℃ ) 4h ,移植成功心脏复搏后 2h取材。应用组织化学方法测定心肌组织中NO、NOS的含量 ,应用核酸原位末端标记法 (TUNEL)测定心肌细胞凋亡指数 ,作为评价心肌缺血再灌注损伤的指标。以正常心肌及单纯缺血心肌组织作为对照。③结果　移植后心肌组织NO、NOS的含量较缺血组与正常组低 ,差异有显著意义 (F =2 7.2 2 9、16 .2 0 3,q =5 .716～ 6 .4 12 ,P <0 .0 1)。移植组心肌细胞凋亡指数与正常组及缺血组比较明显升高 ,差异有显著性(F =16 3.884 ,q =7.4 82、6 .975 ,P <0 .0 1)。心肌组织NO、NOS含量与心肌细胞凋亡指数呈负相关关系 (r =- 0 .886、- 0 .795 ,P <0 .0 1)。④结论　猪心脏移植后早期心肌缺血再灌注损伤所致的细胞死亡主要表现为心肌细胞凋亡 ;再灌注期间内源性NO、NOS的减少参与了心脏移植后早期缺血再灌注损伤的发生     

前列腺素E1对缺血再灌注大鼠心肌NO及NOS活性的影响

目的：通过观察前列腺素E1（PGE1）对缺血再灌注大鼠心肌一氧化氮（NO）及一氧化氮合酶（NOS）活性的影响,探讨PGE1保护心肌的机制。方法：18只SD大鼠随机分成3组,正常组、缺血再灌注组织和PGE1组,以结扎大鼠冠脉左室支30min后再灌注生理盐水60min作为缺血再灌注组,灌注PGE1 12．5μg/kg为实验组,用RT－PCR方法检测心尖心肌组织eNOSmRNA和iNOSmRNA的变化,通过凝胶图象分析系统对RT－PCR产物电泳条带进行密度分析,硝酸还原酶法测定血浆NO浓度。结果：缺血再灌注注后iNOS升高,eNOS,NO下降,而PGE1组与缺血再灌注组比较,eNOS明显升高,iNOS变化无显著差异,NO上升。结论PGE1通过提高eNOS活性水平而达到对缺血再灌注心肌的保护作用。     

雌二醇对大鼠肝缺血再灌注损伤NOS表达的影响

目的 探讨雌激素对大鼠肝缺血再灌注损伤（HIRI）中诱生型一氧化氮合酶（iNIS）和内皮型一氧化氮合酶（eNOS）表达的影响及其作用机制。方法将48只Wistar大鼠分为4组：A组，雄性组；B组，卵巢去势组（OVX组）；C组，雌性对照组（假手术组）；D组，给予17β-雌二醇的卵巢去势组（OVX＋E2组）。建立原位大鼠HIRI模型，观察大鼠肝缺血再灌注40min后6，12，24h大鼠的血清雌二醇（E2）水平变化，同时采集肝组织标本，利用免疫组化方法观察肝细胞胞质一氧化氮合酶（NOS）表达情况。结果 ①各时点A组与B组赐水平较低，两组间比较无统计学差异（P〉0．05）。C组赐水平增高，D组B水平最高。A组与B组组间比较无差异，其余各组间比较均有显著差异（P〈0．05）。②再灌注6h各组肝细胞、枯否细胞均少许表达iNOS，肝窦内皮细胞均表达eNOS，再灌注12—24hiNOS表达明显升高。eNOS表达明显降低；各时点NOS表达A组与B组比较、C组与D组比较无统计学差异（P〉0．05），其余各组间比较均有显著差异（P〈0．05）。结论 大鼠HIRI后雌激素促进eNOS表达，抑制iNOS表达，可能是其减轻HIRI作用的机制之一。     

银杏提取物对缺血再灌注的心肌保护作用及作用机制

目的:研究银杏提取物对大鼠缺血再灌注的心肌保护作用及其作用机制.方法:Wistar大鼠先用银杏提取物(0.1mg/kg)预处理,1 h后拮扎冠状动脉左前降支50 min,之后再灌注5 h.用氯化三苯四唑(TTC)染色测量梗死灶的大小.用电泳迁移率变动分析法(EMSA)分析Stat的活化.Coll样受体(TLLR)和MyD86的结合用免疫印记法进行分析.结果:银杏提取物的处理使再灌注5 h鼠的心肌梗死面积降低58.1%.当银杏提取物在心肌缺血后10 min给药时也被观察到了相同的保护作用.银杏提取物诱导心肌保护的机制包括降低TLLR和MyD86的结合,降低了Stat的活性.并使得I/R后心肌细胞凋亡数目减少.结论:提示了银杏提取物能够对大鼠在体缺血再灌注的心肌起到保护作用并且这种保护作用可能与抑制TLLR介导Stat信号传导途径激活途径相关,后者在心肌L/R损伤中起着重要作用,并促使心肌细胞凋亡的减少.     

肢体缺血再灌注后肺组织中NOS的表达

（1）目的 观察肢体缺血再灌注后肺组织中NOS同工酶活性，分布和mRNA表达的变化；（2）方法 复制肢体缺血再灌注模型。实验动物随机分为4组；正常对照组（Control组），损伤组（IR组），L-精氨酸组（L-Arg组）和氨基胍组（AG组），用免疫组织化学方法检测肺组织中NOS蛋白的表达；用RT-PCR方法检测肺组织中NOSmRNA的表达。（3）结果 免疫组织化学结果显示，Control组iNOS染色少有阳性；IR组iNOS染色阳性，染色阳性细胞主要分布在支气管上皮细胞，支气管平滑肌细胞，支气管周围浸润的中性粒细胞也呈阳性表达；AG组iNOS染色较IR组减弱；L-Arg组则无明显差异。eNOS染色在Control组呈阳性，主要分布于毛细血管内皮细胞，其余3组染色均减弱，RT-PCR结果显示，iNOSmRNA的表达在Control组较少，IR组呈高表达，AG组，L-Arg组表达与IR组相比无明显差异；eNOSmRNA表达降低，肺组织中NO的水平增高；给予外源性的L-Arg增加NO的生成，应用AG不影响NOSmRNA的表达，只是 在蛋白水平对iNOS有抑制作用。     

雌二醇对大鼠缺血再灌注心肌诱生型及内皮型一氧化氮合酶活性的影响

目的 研究1713-雌二醇（E2）对缺血再灌注心肌诱生型一氧化氮合酶（iNOS）及内皮型一氧化氮合酶（eNOS）活性的影响,并探讨其心肌保护作用机制。方法采用Langendorff离体鼠心脏灌注模型,将40只卵巢切除（OVX）大鼠随机均分为心肌缺血前对照组（C组）：离体鼠心脏预灌注15min;缺血再灌注组（I—R组）：灌注改良St．ThomasⅡ停搏液,完成心肌缺血再灌注全过程;溶剂对照组（D组）：停搏液中含0．1％的二甲基亚砜（DMSO）,余同I—R组;E：组（E组）：停搏液中含0．1％DMSO及5μmol／L的E2,余同I—R组。检测缺血再灌注前后心肌iNOS和eNOS活性变化,测定冠状动脉流出液中肌酸磷酸激酶（CPK）、乳酸脱氢酶（LDH）、一氧化氮（NO）的含量以及心脏功能的变化,观察E2对心肌缺血再灌注损伤（MIRI）的影响。结果心肌缺血再灌注后eNOS活性下降（P〈0．01）,iNOS活性升高[C组（8．9±3．7）nmol·min^-1·g^-1,I—R组（15．8±2．4）nmol·min^-1·g^-1,D组（17．6±3．2）nmol·min^-1·g^-1,P〈0．01],E组iNOS活性升高更明显[（25．85±5．21）nmol·min^-1·g^-1,P〈0．01],I—R组及D组NO生成减少（均P〈0．05）,E组NO增加[C组（31±5）μmol／L,E组（33±6）μmol／L,P〈0．01],E组CPK和LDH产生减少（均P〈0．05）,E组心脏功能恢复良好（P〈0．05）。结论E2通过提高诱生型一氧化氮合酶活性,促进一氧化氮的产生,减轻心肌缺血再灌注损伤,促进心脏功能恢复。     

肝脏肿瘤缺血再灌注损伤后NO和NOS的改变及意义

目的 :研究肝脏肿瘤缺血再灌注后正常肝脏和肿瘤组织中一氧化氮 (NO)和一氧化氮合酶 (NOS)的改变 ,探讨缺血再灌注对肿瘤组织的影响及其意义 .方法 :通过超声引导将VX2肿瘤组织混悬液穿刺注射到新西兰兔肝脏左中叶 ,建立肝脏肿瘤模型 ,用无损伤血管钳阻断肿瘤所在肝叶的肝动脉分支 6 0min ,然后去除血管阻断恢复血流 ,并随机将模型动物分为缺血再灌注前 (对照 )、缺血再灌注后 0min ,1h ,1d ,3d ,7d 6个时间组 ,取肝脏组织和肿瘤组织 ,分别测定NO和NOS的含量 .结果 :肝脏组织中的NO含量除缺血再灌注 1h升高外 ,其余各时间点均低于正常水平 ,变化幅度较小 ;肿瘤组织的NO含量于缺血再灌注后 0min开始下降 ,1h降到最低 (P <0 .0 1 ) ,随后又有所升高 ,但至 7d时仍明显低于正常水平 (P <0 .0 1 ) .肝脏组织的总NOS含量于 0min时有所降低 ,但随后恢复 ,变化幅度较小 ,而iNOS含量 0min至 1d明显下降 (P <0 .0 1 ) ,其后有所恢复 ,但仍未达正常水平 ;肿瘤组织的总NOS含量 0min开始下降 ,0min至 1h低于正常水平 ,随后开始升高 ,1～ 7d明显高于正常 (P <0 .0 1 ) ,其中iNOS含量持续上升 ,至 7d明显高于正常水平 (P <0 .0 1 ) .结论 :缺血再灌注对肿瘤组织的损伤明显高于肝脏组织 ,NO在肿瘤组织缺血再灌注中对肿瘤     

缺血-再灌注心肌诱导型一氧化氮合酶基因表达及其活性的变化和卡托普利的影响

目的探讨心肌诱导型一氧化氮合酶（iNOS）mRNA表达及其活性的变化在心肌再灌注损伤中的作用；研究卡托普利对缺血再灌注心肌保护作用的机制。方法采用Langendorff离体鼠心灌流模型；将18只SD大自鼠随机均分为3组：对照组、缺血一再灌组及卡托普利组；观察心肌iNOS mRNA表达及其活性、丙二醛（MDA）含量、过氧化物歧化酶（SOD）活性、肌酸激酶（CK）含量和冠状静脉流出液一氧化氮（NO）的变化。结果缺血再灌注后心肌iNOS mRNA表达显著上调（P〈0．001），iNOS活性增高（P〈0．001）；卡托普利组再灌注30min，心肌iNOS mRNA表达及其活性、心肌MDA含量均低于缺血-再灌组（P〈0．01，P〈0．05），而心肌SOD活性（P〈0．01）和CK含量（P〈0．05）高于缺血-再灌组，再灌注期间冠状静脉流出液NO含量高于缺血-再灌组（P〈0．01）。结论缺血-再灌注心肌iNOS基因表达上调，心肌iNOS活性增高；影响心肌iNOS mRNA表达、调节心肌iNOS活性可能是卡托普利抗心肌脂质过氧化作用的机制之一。     

川芎嗪对家兔肠缺血再灌注损伤时一氧化氮水平的影响

目的:观察一氧化氮(NO)在家兔小肠缺血再灌注损伤(ⅡRI)过程中的变化及川芎嗪对其的影响.方法:实验兔随机分为2组:肠缺血再灌注组(UR组,n=9)和肠缺血再灌注 川芎嗪治疗组(LGT组,n=10).分别测定不同时间点血浆一氧化氮代谢产物(NOP)含量,并于实验末取兔小肠粘膜测定NOP含量及NOS活性,同时行电镜观察.结果:ⅡR组家兔血浆NOP含量进行性下降;LGT组家兔在再灌注15min和30min时血浆NOP含量明显高于ⅡR组(P＜0.05),实验末小肠粘膜NOP含量和NOS活性亦明显比IIR组增高(P＜0.05),肠粘膜超微结构异常改变显著减轻.结论:川芎嗪可通过提高机体NO水平而对肠缺血再灌注损伤发挥积极的保护作用.     

维生素C对心肌缺血/再灌注家兔心功能和SOD、MDA的影响

目的：观察维生素C（VitC）对心肌缺血/再灌注（I/R）家兔心功能和心肌组织中超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）的影响。方法：家兔24只随机分为3组,假手术组（A组）、心肌缺血/再灌注组（B组）、VitC组（C组）;用生物机能实验系统记录各组家兔左室收缩峰压（LVSP）、左室舒张末压（LVEDP）和左室内压最大收缩/舒张变化速率（±dp/dtmax）;用黄嘌呤氧化酶法测定SOD,硫代巴比妥酸法测定MDA含量。结果：与A组比较,B、C两组的±dp/dtmax减低,有显著性差异（P〈0.01）;与B组比较,C组±dp/dtmax增高,有统计学差异（P〈0.05）;与A组比较,B、C两组心肌组织SOD活性减低,而MDA含量增高（P〈0.05或P〈0.01）;与B组比较,C组心肌组织中SOD活性增高,而MDA含量降低（P〈0.05）。结论：VitC能够改善心肌I/R家兔的心功能,其机制可能与抑制机体内脂质过氧化有关。     

吉非罗齐预治疗对兔缺血再灌注心肌的保护作用

目的 探讨吉非罗齐预治疗对高脂血症兔心肌缺血再灌注损伤的影响.方法 采用冠状动脉左前降支结扎法复制家兔心肌缺血再灌注损伤模型.24只新西兰大白兔随机分3组,每组8只.缺血再灌注(I/R)组:缺血再灌注前12周予以高脂饲料(1%胆固醇、7.5%蛋黄粉和8%猪油)饲养;吉非罗齐组:缺血再灌注前高脂饮食饲养8周,在继续饲以高脂饲料的基础上给予吉非罗齐(200mg/kg·d)口服4周;假手术组:高脂饲料饲养12周后,仅在左前降支下穿线,并不结扎.观察各组不同实验阶段血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的变化,以及心肌细胞超微结构的变化并测定心肌梗死面积.结果 吉非罗齐组心肌缺血及再灌注后血浆TNF-α水平显著低于I/R组(P<0.01);吉非罗齐组心肌细胞超微结构破坏及心肌梗死面积均明显小于I/R组.结论 吉非罗齐预治疗可减轻高脂血症兔心肌缺血再灌注损伤.     

氯丙嗪与维拉帕米合用对心肌缺血再灌注大鼠心脏功能的保护作用

应用大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,记录心脏左室压(LVP).左室压变化速率(±dp/dt),左室舒张末期压(LVEDP)和动脉压(BP),来研究氯丙嗪与维拉帕米合用对心肌缺血再灌注大鼠心脏功能的影响。结果:小剂量氯丙嗪与维拉帕米合用可明显改善缺血再灌注大鼠心脏血流动力学、心脏收缩和舒张功能,其作用优于单用同等剂量氯丙嗪或维拉帕米,与两药大剂量单用相似。     

益心脉颗粒对心肌缺血再灌注损伤心功能的影响

[目的]观察益心脉颗粒(由人参、桂枝、瓜蒌、水蛭、茯苓等组成)对家兔心肌缺血再灌注损伤心功能的保护作用.[方法]45只新西兰家兔随机分成A、B、C、D、E5组,分别喂饲益心脉颗粒(大、小两种剂量)、维生素E、复方丹参片及普通饲料,连续7 d.末次给药1 h,以结扎家兔冠状动脉左前降支(LAD)造成心肌缺血再灌注损伤模型,观察造模后各组心功能指标的变化.[结果]结扎LAD前,各组心功能指标无显著性差异(P＞0.05),结扎后,各组心功能指标呈现不同程度抑制现象.在缺血30min和再灌注30min后,A、B组左室收缩压(LVSP)、左室压力上升和下降最大速度(±dp/dtmax)值均高于C、D、E组(P＜0.05或P＜0.01),而LVSP值C、D组又高于E组(P＜0.01);在缺血60nin和再灌注30min后,A、B组左室心肌收缩成分实测最大缩短速度(fpm)、左心室心肌收缩成分零负荷时的缩短速度(fmax)和左心室内发展压力为5.33 kPa时心肌收缩成分缩短速度(f40)值均高于C、D、E组(P＜0.05或P＜0.01),而各组左室舒张末压(LVEDP)值均低于E组(P＜0.01).[结论]益心脉颗粒改善心脏舒缩功能作用优于维生素E和复方丹参片,对缺血再灌注造成的损伤具有显著的保护作用.     

缺血后处理对家兔缺血-再灌注心功能和MDA、SOD的影响

目的：研究缺血后处理对家兔心肌缺血-再灌注心功能、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）的影响。方法：24只新西兰大白兔随机分为3组,假手术组（A组）、缺血-再灌注组（B组）、缺血后处理组（C组）;记录家兔心肌缺血前、缺血30 min,再灌注180 min时心脏血流动力学指标,检测家兔血清MDA、SOD的变化。结果：（1）与B组比较,C组再灌注180 min左室收缩压、左室内压最大收缩和舒张变化速率均显著升高（P〈0.05）,左室舒张末压显著下降（P〈0.05）;（2）与A组比较,B组血清中MDA含量显著增高（P〈0.01）,而SOD活性显著降低（P〈0.01）;与B组比较,C组血清中MDA含量显著降低（P〈0.01）,而SOD活性显著增高（P〈0.05）。结论：缺血后处理能改善家兔缺血-再灌注心功能,其机制可能与减少自由基损伤和抗氧化作用有关。     

复方灯盏花滴丸对大鼠心肌缺血-再灌注保护作用的研究

目的：观察复方灯盏花滴丸对缺血—再灌注过程心肌的保护作用。方法：采用结扎左冠状动脉法，与假手术组、缺血—再灌注组、复方丹参滴丸组相对比，研究了复方灯盏花滴丸对大鼠心肌缺血—再灌注过程超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—Px)、丙二醛(MDA)、钙离子(Ca^2 )含量的影响。结果：复方灯盏花滴丸显著提高了再灌注心肌的SOD、GSH—Px活力(P＜O．01)，显著降低了心肌中MDA和Ca^2 含量(P＜0．05)。结论：复方灯盏花滴丸对心肌缺血—再灌注损伤具有一定的保护作用，该保护作用的机制可能与清除自由基功能和减轻钙超载有关。     

灯盏花素对大鼠缺血-再灌注心肌细胞凋亡和bcl-2表达的影响

目的 :探讨灯盏花素 (breviscapine,BRE)对大鼠缺血 -再灌注 (ischemia/reperfusion ,I/R)心肌细胞凋亡和凋亡抑制基因bcl 2表达的影响。方法 :采用TUNEL法、免疫组化和原位杂交方法 ,观察I/R心肌细胞死亡和凋亡抑制基因的bcl 2表达。结果 :(1)灯盏花素组凋亡心肌细胞核数量及阳性心肌细胞核占总心肌细胞核数的百分比均明显少于I/R组 (P <0 0 5 ) ;(2 )灯盏花素组bcl 2蛋白 (mRNA)表达阳性的心肌细胞数及阳性心肌细胞占心肌细胞总数的百分比均明显高于I/R组 (P <0 0 1)。结论 :(1)灯盏花素能够显著减少大鼠I/R心肌细胞凋亡 ;(2 )灯盏花素通过上调凋亡抑制基因bcl 2的表达可能是其减少大鼠I/R心肌细胞凋亡的机制之一。     

异丙酚对兔脊髓缺血再灌注损伤时神经源性胞浆酶的影响

目的观察异丙酚对兔脊髓缺血再灌注损伤时血清神经源性胞浆酶的变化与影响,以探讨异丙酚的保护效果及其机制。方法24只家兔随机分为假手术组、缺血再灌注组和异丙酚组,肾下主动脉阻断40min后松开再灌注60min。异丙酚组于阻断主动脉前沿耳缘静脉注射异丙酚5mg·kg~(-1),继以20mg·kg~(-1)·h~(-1)微量泵输注40min,假手术组与缺血再灌注组以同样方法静脉注射等容积生理盐水。测定阻断前、缺血40min及恢复灌注后60min时血清CK、CK—BB、LDH、AST、MDA的含量及观察术后3天脊髓的形态学改变。结果异丙酚明显降低血清CK、CK—BB、MDA的含量和减轻脊髓的形态学改变。结论异丙酚能明显减轻脊髓缺血再灌注损伤时血清神经源性胞浆酶的升高,对主动脉阻断所致的脊髓损伤具有保护作用。     

没食子酸丙酯对大鼠缺血再灌注心肌线粒体功能的影响

目的观察没食子酸丙酯对大鼠缺血再灌注心肌线粒体功能的影响作用。方法结扎大鼠冠状动脉30 min再灌注20 min,测定心肌线粒体中琥珀酸脱氢酶(SDH)、细胞色素氧化酶(CCO)、Ca2+.Mg2+—ATP酶、Ca2+—ATP酶、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶((GSH—PX)活性及细胞色素、磷脂和丙二醛含量。结果没食子酸丙酯(20和40 mg/kg,结扎冠状动脉前60 min ip)能显著减轻缺血再灌注所致琥珀酸脱氢酶(SDH)、细胞色素氧化酶(CCO)、Ca2+.Mg2+-ATP酶、Ca2+—ATP酶、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶活性的抑制(P<0.05)及细胞色素aa3、细胞色素C和膜磷脂含量的减少,并能抑制丙二醛含量的升高。结论没食子酸丙酯对缺血再灌注时心肌线粒体功能具有保护作用,其机制可能是通过提高对氧自由基的清除功能和抑制脂质过氧化。     

加味丹参饮预处理对缺血再灌注损伤家兔心功能的影响

目的 探讨加味丹参饮预处理对缺血再灌注损伤家兔心功能的影响。方法 32只健康家兔，随机分为假手术组(Sham)、缺血再灌注组(I／R)、加味丹参饮预处理组(DP)和缺血预处理组(IP)，每组8只，分别预处理24h后行心肌缺血60min，再灌注120min，观察家兔左室收缩压(LVSP)、左室舒张期末压(LVDP)、左室压力最大上升速率( dp/dt max)、最大下降速率(-dp/dt max)。结果 DP和IP对缺血再灌注所致的LVSP和LVDP下降有显著的抑制作用，其中DP对LVDP作用尤为明显。两者对 dp/dt max和-dp/dt max变化无明显的影响。结论 加味丹参饮预处理对缺血再灌注损伤家兔心功能改变具有调节作用。