线粒体解偶联蛋白2在京尼平促进肾癌细胞抑制作用中的研究

目的:探讨京尼平(Genipin)对肾癌是否有治疗作用,该治疗作用是否与线粒体解偶联蛋白2(UCP2)相关?方法:将0?40?80和120 μmol/L 4种浓度的Genipin溶液分别浸染肾癌细胞48 h,MTT法和流式细胞术检测细胞的增殖和凋亡情况;聚合酶链反应和ELISA方法检测UCP2的基因和蛋白表达;使用荧光探针检测细胞内钙离子和活性氧分子(ROS)含量?结果:Genipin在中?高剂量组能明显抑制肾癌细胞的增殖并促进细胞的凋亡,随着给药浓度的增加,细胞增值抑制作用及细胞凋亡率逐渐增高(P < 0.005)?Genipin能抑制肾癌细胞中UCP2的表达,在中?高剂量给药组,UCP2的基因及蛋白的表达显著抑制(P < 0.05)?Genipin能提高细胞内钙离子和ROS的含量,在中?高剂量给药组出现了显著提高(P < 0.05)?结论:Genipin能明显抑制肾癌细胞的增殖,促进其凋亡,UCP2可能参与其作用机制?     

苦参碱抑制人肾癌细胞系GRC-1细胞株增殖和促凋亡的实验研究

目的观察苦参碱对体外人肾癌细胞系GRC-1细胞株增殖及细胞凋亡的影响,探讨苦参碱诱导GRC-1细胞株凋亡的作用机制。方法应用不同浓度的苦参碱分别作用于人肾癌细胞系GRC-1细胞株24、48、72、96h。采用MTT法观察苦参碱对GRC-1细胞株的细胞毒作用;透射电镜和流式细胞术观察、检测苦参碱诱导的细胞凋亡;免疫细胞化学技术检测苦参碱对GRC-1细胞株Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。结果不同浓度的苦参碱对GRC-1细胞株均有一定的增殖抑制作用,且呈量效和时效关系。苦参碱能明显诱导GRC-1细胞株凋亡。经苦参碱作用后,GRC-1细胞株Bcl-2蛋白表达明显减弱而Bax蛋白表达明显增强。结论苦参碱对体外人肾癌细胞系GRC-1细胞株有一定的增殖抑制作用,其机制可能与调节Bcl-2/Bax蛋白表达比值以诱导细胞凋亡相关。     

原花青素促进三阴乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的作用机制研究

目的 研究原花青素(Procyanidins,PC)对三阴乳腺癌MDA-MB-231细胞株增殖及细胞凋亡的作用及其机制.方法 常规培养细胞,24 h后随机分为阳性对照组、 对照组和PC10、20、40、80、160、320μg/mL组.MTT法检测细胞生长抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot法检测FoxA1蛋白及抗凋亡蛋白bcl2、UCP2表达.结果 PC各剂量组均可显著抑制抑制MDA-MB-231细胞增殖(P<0.05);PC(10-160μg/mL)组剂量依赖性抑制MDA-MB-231细胞增殖(P<0.05),PC(40-320μg/mL)可以时间依赖性抑制细胞增殖(P<0.05);PC320μg/mL组各时间点细胞抑制率与PC160μg/mL组差异无显著性(P>0.05);160μg/mL PC可以时间依赖性促进MDA-MB-231细胞凋亡(P<0.05);160μg/mL PC作用24 h后,FoxA1蛋白表达显著上升(P<0.05),同时bcl2及UCP2表达降低(P<0.05).结论 PC抑制MDA-MB-231细胞,促进MDA-MB-231细胞凋亡,升高其FoxA1表达,同时降低bcl2及UCP2表达,表明PC可能通过促进FoxA1表达发挥促进MDA-MB-231细胞凋亡的作用.     

钙通道阻滞剂对人肾癌细胞株GRC-1增殖和凋亡的影响

目的研究钙通道阻滞剂维拉帕米(Verapamil)对人肾癌细胞株GRC-1增殖和凋亡的影响。方法应用四唑盐 (MTT)法和流式细胞仪检测维拉帕米对人肾癌细胞株GRC-1增殖的影响,透射电镜超薄切片观察细胞超微结构检测细胞凋亡。结果MTT比色实验表明维拉帕米50 μmol·L-1、100μmol·L-1对人肾癌细胞株GRC-1增殖的抑制作用明显。流式细胞仪测定细胞增殖周期维拉帕米使大部分细胞停滞于G0／G1期。透射电镜扫描细胞超微结构显示,维拉帕米能促使人肾癌细胞株GRC-1 的细胞凋亡。结论钙通道阻滞剂维拉帕米能抑制人肾癌细胞株GRC-1的增殖,导致细胞凋亡。     

穿心莲内酯对人乳腺癌细胞迁移和侵袭的抑制作用

目的:探究穿心莲内酯对人乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移和侵袭的抑制作用及机制。方法:用穿心莲内酯0,5,10,20,40和80 μmol/L处理MDA-MB-231细胞24 h,MTT法检测细胞存活率;伤口愈合和Transwell小室实验检测细胞迁移与侵袭能力;逆转录聚合酶链反应检测解偶联蛋白2（uncoupling protein 2,UCP2） mRNA表达;蛋白质印迹法检测UCP2和丙酮酸脱氢酶（pyruvate dehydrogenase,PDH）蛋白表达水平;乳酸试剂盒检测乳酸含量;JC-1染色后共聚焦显微镜检测线粒体膜电位。结果:穿心莲内酯对MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用具有浓度依赖性;与0 μmol/L组相比,10,20,40 μmol/L组MDA-MB-231细胞的迁移与侵袭能力受到抑制（P<0.05或P<0.01）;UCP2的mRNA和蛋白表达下调（P<0.05或P<0.01）,线粒体膜电位升高,PDH蛋白表达上调,细胞内乳酸含量下降（P<0.05或P<0.01）。结论:穿心莲内酯可能通过抑制乳腺癌的糖酵解和改变能量代谢的方式抑制MDA-MB-231细胞的迁移与侵袭,其机制可能与UCP2有关。     

氟中毒对神经细胞线粒体功能及凋亡的影响

摘要:目的 通过研究神经细胞线粒体改变探索氟中毒致神经损伤的潜在生物学机制。方法 将 SH-SY5Y 细胞 设置为对照组和20、40、60mg/LNaF染毒剂量组,检测线粒体跨膜电位(ΔΨm)及线粒体内活性氧(MitoROS)水平,通 过 Westernblot法检 测 线 粒 体 动 力 学 和 自 噬 相 关 蛋 白 (Miro1、ATG5 和 PINK1)及 凋 亡 相 关 蛋 白 (PARP、cleaved Caspase-3和 Bcl-2)的表达情况,细胞免疫荧光法检测 Miro1、ATG5和 PINK1蛋白与线粒体共定位情况,流式细胞术检 测细胞凋亡。结果 随着 NaF浓度增加,SH-SY5Y 细胞 ΔΨm 降低(P<0.01),MitoROS水平升高(P<0.05);线粒体 转运蛋白 Miro1表达升高(P<0.05),自噬相关蛋白 ATG5(P<0.05)和 PINK1(P<0.05)表达均升高;细胞早期凋亡率 和总凋亡率均升高(均P<0.05),凋亡相关蛋白 PARP(P<0.05)和cleavedCaspase-3(P<0.05)表达升高,抗凋亡蛋白 Bcl-2表达降低(P<0.05)。结论 高剂量氟可促进线粒体的氧化应激、转运和自噬,并诱导神经元凋亡。     

DOX-GA3对βG转染人肾癌GRC-1细胞的体外杀伤作用

目的：建立高表达β-葡萄糖醛酸苷酶（SG）基因的肾癌模型,并观察SG前体药葡萄糖醛酸化阿霉素（DOX-GA3）对SG转染人肾癌GRC-1细胞的体外杀伤作用．方法：利用阳离子脂质体将已构建的真核表达载体pcDNA3．1（＋）转入肾癌细胞株GRC-1,用基因组PCR扩增,免疫荧光,免疫组化检测鉴定其转录和表达水平,分别用MTF及细胞计数法检测SG阳性细胞对DOX-GA3的体外敏感性和旁观者效应．结果：经G418筛选后的阳性细胞克隆,在DNA和蛋白水平证实了转染细胞内有SG基因高表达,100μmol／LDOX-GA3作用于亲本细胞3d,生存率为82％,但可杀死全部转染细胞,IC50GRC-1／SG为1．24μmol／L,而IC50GRC-1为100μmol／L以上,将转染细胞和亲本细胞以不同比例混合时,转染细胞占20％,有80％的细胞被杀死．结论：建立了稳定的SG基因高表达的肾癌模型．DOX-GA3对转染细胞有明显的杀伤作用,随时间延长和剂量增加作用增强,并显示较强的旁观者效应．     

UCP2蛋白通过调节细胞内ROS对上皮性卵巢癌的耐药性产生影响

目的 使用解偶联蛋白2(UCP2)抑制剂京尼平抑制UCP2功能,解偶联剂羰基-氰-对-三氟甲氧基苯腙(FCCP)模拟UCP2的解偶联作用,研究UCP2、活性氧(ROS)水平和人卵巢癌细胞顺铂(DDP)耐药性之间的关系.方法 COC1/DDP细胞分为空白组、FCCP组、京尼平组、DDP组、DDP联合FCCP组和DDP联合...     

HOXB5对结直肠癌细胞有氧糖酵解和恶性增殖的影响

目的 探讨同源盒蛋白（HOX）B5对结直肠癌（CRC）细胞有氧糖酵解和恶性增殖的影响。方法 通过预实验选取CRC细胞株Caco2构建过表达HOXB5的细胞株,HCT116构建敲低HOXB5的细胞株;分别采用CCK-8法、平板克隆实验、糖代谢检测试剂盒、Western blot法检测过表达或敲低HOXB5对CRC细胞增殖能力、平板克隆形成能力、有氧糖酵解、糖酵解相关蛋白的影响。结果 在Caco2细胞中,过表达HOXB5能明显增强细胞增殖及平板克隆形成能力（均P<0.05）,增加细胞葡萄糖消耗量以及乳酸、三磷酸腺苷（ATP）含量（均P<0.05）,上调丙酮酸激酶同工酶2(PKM2)、乳酸脱氢酶A(LDHA)、葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)蛋白表达水平（均P<0.05）;在HCT116细胞中,敲低HOXB5能明显减弱细胞增殖及平板克隆形成能力（均P<0.05）,减少细胞葡萄糖消耗量以及乳酸、ATP含量（均P<0.05）,下调PKM2、LDHA、GLUT1蛋白表达水平（均P<0.05）。结论HOXB5通过促进CRC细胞有氧糖酵解来增强其恶性增殖。     

不同时间高氧对大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞能量代谢的影响

目的 探讨不同时间高浓度氧对肺泡Ⅱ型上皮细胞线粒体能量代谢的影响。方法 将大鼠RLE-6TN细胞分为对照组(21%O₂常规培养4 h)、高氧1、2、3、4 h组(95%O₂分别培养1、2、3、4 h)。采用荧光素酶化学发光法检测各组细胞的三磷酸腺苷(ATP)含量，采用微量法检测线粒体呼吸链复合体V活性，荧光探针JC-1检测细胞线粒体膜电位，实时荧光定量PCR法检测线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ的核心亚基NADH脱氢酶亚基1(ND1)、细胞色素b(Cytb)、细胞色素C氧化酶亚基I(COXI)、ATP酶6(ATPase6)mRNA的表达水平。结果 与对照组比较，高氧1、2、3、4 h组细胞线粒体呼吸链复合体核心亚基ND1(q=24.800,P<0.001;q=13.650,P<0.001;q=9.869,P<0.001;q=20.700,P<0.001)、COXI(q=16.750,P<0.001;q=10.120,P<0.001;q=8.476,P<0.001;q=14.060,P<0.001...     

手术前谈话律师见证的实践与思考

目的：探讨重大手术术前谈话、签字进行律师见证的作用。方法：对本院2001年4月至2007年12月1303例重大手术的术前谈话、签字所进行的律师见证进行回顾分析。结果：患者及其亲属和医务人员对这种手术签字形式予以肯定,未发生因告知不足导致的医疗纠纷。结论：手术前谈话律师见证,有利于保障患者的知情同意权,和谐医患关系,保护医患双方的合法权益,促进医学发展。     

课堂教学质量多元综合评价与反馈方式的研究与实践

课堂教学质量评价的多元综合性关系到整体教学质量的提高.多元综合性评价体系包括教师授课质量、教学课件质量、学生对教学效果满意度、学生学习状态及教学环境等方面.课堂教学的反馈包括教学督导对授课质量反馈、对学生及教学环境的反馈,也包括学生对教师授课效果的反馈.通过对一学年100次评课实践结果进行总结和分析,证实多元综合评价和反馈体系具有全面性和准确性的特点,是促进教学质量提高的有效措施.     

网上评教结果及分析

本学期，我院首次进行了网上评教尝试。发现：公共课教师的评教分数低于专业课（P〈0．01）和基础医学课（P〈0．01）教师．基础医学课教师低于专业课教师（P〈0．05）；一年级组低于二、三年级组（P〈0．01）。外聘教师低于本校教师（P〈0．01）。认为学生对公共课和基础医学课与自己未来就业及职业的意义不明确；公共课和基础医学课不如专业课直观、具体、实用．难以激起学生的学习兴趣；不同年级、不同层次学生认知能力和学习态度的差异等是主要原因。     

吗啡和芬太尼用于术后镇痛效应与不良反应的临床观察

目的 观察吗啡、芬太尼用于患者自控硬膜外镇痛（PCEA）的镇痛效应及不良反应。方法 择期手术患者110例,ASAⅠ～Ⅱ级,随机分为两组,Ⅰ组（n=55例）选用吗啡10mg（1ml）加2％利多卡因和0．75％布比卡因各20ml加生理盐水59ml;Ⅱ组（n=55例）选用芬太尼0．5mg（10ml）（代替Ⅰ组配方中的吗啡）加生理盐水50ml。以LCP模式（负荷剂量5ml加持续剂量2ml／h加PCA每次0．5ml）进行镇痛。结果 Ⅰ组与Ⅱ组镇痛效果差异无统计学意义（P〉0．05）;Ⅰ组出现恶心、呕吐、尿潴留、皮肤瘙痒等不良反应发生率较Ⅱ组高（P〈0．01）。结论 吗啡较芬太尼的不良反应更多,应谨慎选用。     

从气血论脱发

脱发是皮肤科的常见病,临床诊断较易,但辨证复杂。气和血均是构成人体的物质基础,毛发的生长和濡养有赖于气血的充盈和条达,气血的异常改变可导致毛发的脱落。主要从气血两方面论脱发。     

葛根素对高血压性头颈痛疗效观察

目的：观察葛根素对高血压性头颈痛治疗效果。方法：对76例高血压头颈痛病例,随机分为治疗组34例（葛根素治疗）、对照组42例（β体阻滞剂治疗）。结果：5天内总的症状消失率治疗组82．4％,对照组57．1％,两组比较有显著性差异（P＜0．01）;总的停药反跳率分别为8．8％和42．9％,二者有显著性差异（P＜0．05）;不良反应峡谷组也有显著性差异（P＜0．01）。结论葛根素对高血压性头颈痛疗效优于β受体阻滞剂而且稳定,无不良反应。     

苦参碱对白血病细胞诱导分化作用和机理研究

为了解苦参碱对人粒系白血病细胞系HL－60细胞的诱导分化作用并探讨其机制,采用MTT法,光镜观察、S－AP免疫组织化学法、硝基蓝四氮唑（NBT）还原试验,流式细胞仪检测,逆转录酶／多聚酶链反应（RT－PCR）检测,观察苦参碱对HL－60细胞的增殖抑制作用,分化诱导作用及其对细胞周期移行和癌基因表达的影响,结果表明：苦参碱明显地抑制HL－60细胞的增殖,并诱导其向成熟粒系分化;苦参对HL－60细胞的诱导分化作用与其下调c-myc基因表达,阻滞细胞在G1期有关。