姜黄素干预对乙二醇诱导的大鼠肾草酸钙结石形成的影响

目的 研究姜黄素对乙二醇诱导的大鼠肾草酸钙结石形成的影响.方法 32只Wistar大鼠分为单纯诱石组(1％乙二醇自由饮用诱导肾草酸钙结石形成)、诱石+姜黄素干预组(1％乙二醇自由饮用+20 mg·kg-1·d-1姜黄素灌胃)、单纯姜黄素组(去离子水自由饮用+ 20 mg· kg-1·d-1姜黄素灌胃)和空白对照组(去离子水自由饮用),每组8只.于实验前和实验结束时(分组处理后4周末),分别检测大鼠血、尿离子钙和镁浓度、尿草酸、尿枸橼酸及血清肌酐浓度;处死大鼠后取肾脏组织,检测肾脏组织丙二醛(MDA)含量及总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性;HE染色观察肾脏组织草酸钙结晶形成情况;TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡.结果 与空白对照组比较,单纯姜黄素组大鼠尿草酸、肾小管上皮细胞凋亡指数、肾脏组织MDA含量和血清肌酐水平轻度升高,尿镁离子浓度、尿枸橼酸盐含量和肾脏组织T-SOD活性轻度降低.与单纯诱石组比较,诱石+姜黄素干预组大鼠尿草酸、肾小管上皮细胞凋亡指数、肾脏组织MDA含量明显下降,尿镁离子浓度、尿枸橼酸盐含量、肾脏组织T-SOD活性显著升高,组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 姜黄素对正常饮食大鼠具有轻微的诱发肾草酸钙结石的作用,但可明显抑制乙二醇诱导的大鼠肾结石生成.     

两种草酸钙结石大鼠模型的比较研究

目的 比较乙二醇法与草酸铵法大鼠草酸钙结石模型的肾脏病理改变及功能损害情况,探讨两种草酸钙结石模型的选择与应用。方法 36只SPF级雄性健康Wistar大鼠随机分为空白对照组、乙二醇组和草酸铵组(n=12)。乙二醇组大鼠给予1%乙二醇自由饮水和每日2%氯化铵2 m L灌胃,草酸铵组大鼠给予5%草酸铵饲料。造模后,检测各组大鼠血尿素氮(UN)、血清肌酐(Cr)及血清钙(Ca2+)、磷(P)和镁(Mg2+)含量,24 h尿草酸、Ca2+、P和Mg2+含量;显微镜下观察肾组织切片中草酸钙结晶沉积及病理变化。结果 乙二醇组和草酸铵组大鼠的尿草酸、Ca2+及P含量明显高于空白对照组(P<0.05,P<0.01)。两种方法复制大鼠草酸钙结石模型的成石效果均较显著、稳定,但大鼠肾脏病理改变及功能损害程度的差异有统计学意义(P<0.05)。结论 与乙二醇法造模比较,草酸铵法造模致大鼠肾脏病理改变及肾损害较严重,更适合应用于结石病致肾功能受损的研究。     

受损伤肾小管细胞膜诱导草酸钙结石形成的分子机制

生物矿化的核心问题之一是有机基质（蛋白质/类脂）对无机矿物成核、生长和沉积图形的调控作用,从而使得生物矿物具有优异的物理性能和生物功能.肾结石是生物体内异常生物矿化的产物,其发病率为5%～15%,但80%以上的肾结石患者病因不清,其形成机制未完全阐明,因而对其预防尚无十分理想的方法.     

不同葡萄糖浓度对大鼠草酸钙结石模型的影响

目的研究不同葡萄糖浓度对大鼠肾草酸钙结石的影响。方法以目前普遍使用的肾草酸钙结石造模方法为基础,设立传统的对照组和加入不同浓度葡萄糖的实验组,同时设立空白对照。A组(生理盐水),B组(1%氯化铵+1%乙二醇),C组(5%葡萄糖+1%氯化铵+1%乙二醇),D组(10%葡萄糖+1%氯化铵+1%乙二醇)E组(15%葡萄糖+1%氯化铵+1%乙二醇)。建模完成后,收集各组大鼠24 h尿液、血清,比较各组大鼠24 h尿量、尿草酸钙结石程度、血清肌酐(Cr)、血糖(Glu)、尿素氮(BUN)、左肾重量,光镜下观察肾脏HE染色结果,比较各组大鼠肾脏病理改变程度和肾小管内草酸钙结石形成情况。结果 A组肾小管完整,尿液,肾组织中均未发现有草酸钙结晶;相比于A组,3个实验组:C组、D组、E组的肾脏、尿液草酸钙沉积在光镜(400×)下均有明显的增加(P <0.05);D组、E组的草酸钙沉积在光镜(400×)下比B组有显著提高(P <0.05);B组、C组、D组、E组的血肌酐相比于A组有明显增高(P <0.05);C组、D组、E组的血肌酐之间差异有统计学意义(P <0.05);C组、E组... 更多     

六味化石通对大鼠草酸钙结石形成影响的实验研究

目的：观察六味化石通过实验性大鼠草酸钙结石形成的影响。方法：在乙二醇法诱导的大鼠肾结石模型上,口服给予六味化石通,以大鼠肾组织草酸和钙含量以及肾结石发生率、肾组织学检查作为观察指标。结果：六味化石通高剂量组肾组织草酸含量非常明显的低于对照组（P＜0．01）;对照组、低、中、高剂量组及阳性对照组肾结石发生率分别为：75％、45．5％,50％,18．2％和81．8％。结论：六味化石通能明显降低实验性大鼠草酸钙结石的发生率。     

间α胰蛋白酶抑制物在大鼠肾草酸钙结石模型中的表达

目的　研究间α胰蛋白酶抑制物(IαI) 在实验性肾草酸钙结石大鼠肾组织中的表达及意义。方法　采用乙二醇和氯化铵诱导形成大鼠肾草酸钙结石模型, 检测各组大鼠肾功能、肾组织Ca2 含量和草酸钙晶体沉积、尿生化,并用免疫组化和计算机图像分析技术观察IαI在肾组织的表达情况。结果　模型组大鼠的血清Cr、BUN、肾Ca2 含量、24 h尿Ca2 和草酸分泌量均明显高于正常组(P<0. 05)。正常肾组织IαI分布仅在近曲小管, 而在结石组肾组织的近曲小管、上皮细胞、皮髓质交界处等的表达显著增加。结论　高草酸尿和草酸钙结晶的沉积能使肾脏通过合成更多的IαI来抑制草酸钙晶体的形成。     

泽泻水提取液预防草酸钙结石形成的体外及动物实验研究

分别采用Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ籽晶粒度法和乙二醇与活性维生素Ｄ３诱导的大白鼠实验性肾结石模型，泽泻水提取液体对草酸外结晶生长和集以及对大白鼠的实验性肾结石形成的影响，结果发现泽泻的水提取液体外能明显抑制草酸钙结晶的生长和聚集，体内能明显降低肾钙含量和减少肾小管内草酸钙结晶形成而抑制大白鼠的实验性肾结石形成。     

实验性大鼠肾草酸钙结石模型的筛选研究

目的筛选简捷且成石效果好的实验性大鼠肾草酸钙结石造模法。方法采用两类10种诱导法制作大鼠肾草酸钙结石模型,比较各组大鼠24h尿草酸排泄量和肾组织草酸钙结晶情况,综合评价10种造模法。结果10种造模法组的24h尿草酸排泄量及草酸钙结晶评分均显著高于空白对照组(P<0.05),其中1%乙二醇 1%氯化胺饮水1周建模效果好,且耗时最短。结论1%乙二醇 1%氯化铵饮水1周为首选造模法。     

实验性大鼠肾草酸钙结石模型的筛选研究

目的 筛选简捷且成石效果好的实验性大鼠肾草酸钙结石造模法.方法 采用两类10种诱导法制作大鼠肾草酸钙结石模型,比较各组大鼠24 h尿草酸排泄量和肾组织草酸钙结晶情况,综合评价10种造模法.结果 10种造模法组的24 h尿草酸排泄量及草酸钙结晶评分均显著高于空白对照组(P<0.05),其中1%乙二醇 + 1%氯化胺饮水1周建模效果好,且耗时最短.结论 1%乙二醇 + 1%氯化铵饮水1周为首选造模法.     

后肾间充质细胞对大鼠急性肾小管损伤的防护作用

目的 观察外源性后肾间充质细胞(MMCs)对缺血再灌注(I/R)后急性.肾小管损伤的防护作用,并探讨其可能的机制.方法 取孕13 d大鼠胚胎分离培养后肾间充质细胞,采用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记.建立缺血再灌注急性肾小管损伤大鼠模型,SD大鼠随机分为MMCs组、I/R组和假手术对照组(sham),MMCs组大鼠在成功建立肾脏缺血再灌注损伤后,即经下腔静脉输注BrdU标记后的大鼠后肾间充质细胞,分别于术后24、48、72、96 h处死各组大鼠,自动生化仪检测血清尿素氮(BUN)及血清肌酐(Scr)水平,常规HE染色观察肾脏病理改变,原位末端标记法(TUNEL)检测肾小管上皮细胞凋亡情况,免疫组织化学染色法观察凋亡调控蛋白Bcl-2、Bax在肾脏表达,荧光显微镜观察标记的MMCs在肾组织中的定位分布.结果 MMCs组各时相点大鼠BUN、Scr水平均显著低于同时相点I/R组(均P＜0.05),TUNEL结果显示,术后48 h凋亡的肾小管上皮细胞数量MMCs组[(13.4±3.2)/HPF]明显少于同时相点I/R组[(25.4±5.2)/HPF](P＜0.05),免疫组化结果显示I/R组Bcl-2、Bax蛋白表达水平均高于sham组,48 h达高峰,MMCs组Bcl-2表达水平高于同时相点I/R组,而Bax表达水平则低于同时相点I/R组,Bcl-2/Bax比值明显升高(均P＜0.05).MMCs组术后72 h肾组织内可见BrdU阳性细胞[(60±6)/HP],术后96 h阳性细胞明显增多,为[(143±8)/HP].结论 外源性后肾间充质细胞能够迁移、定居于缺血再灌注损伤后的肾脏小管上皮,MMCs输注后可抑制肾小管上皮细胞凋亡、坏死及炎症细胞浸润,对缺血再灌注急性肾小管损伤具有防护作用.     

防石酸奶与市售酸奶降低大鼠尿草酸排泄量的效果比较

目的 比较自制结石预防型酸奶（防石酸奶）与某市售品牌酸奶对大鼠尿草酸排泄量的影响。方法 50只SD大鼠随机分为5组(n=10）,连续20 d分别每日灌喂4 mL自制防石酸奶（防石酸奶组）、某市售品牌酸奶（市售品牌酸奶组）、灭菌防石酸奶（灭菌防石酸奶组）、灭菌某市售品牌酸奶（灭菌市售品牌酸奶组）和去离子水（空白对照组）,灌喂前1天及灌喂期间每隔4天测量大鼠体质量及24 h尿草酸排泄量。结果 灌喂期间,各组大鼠体质量和24 h尿草酸排泄量均逐渐增加;灭菌防石酸奶组、灭菌市售品牌酸奶组和空白对照组尿草酸排泄量差异无统计学意义（P>0.05）;防石酸奶组和市售品牌酸奶组尿草酸排泄量的增加趋势明显小于其他三组,其分别于灌喂8 d和12 d后显著小于灭菌防石酸奶组和灭菌市售品牌酸奶组（P<0.05）;防石酸奶组尿草酸排泄量于灌喂16 d后小于市售品牌酸奶组（P<0.05）;各组大鼠体质量与24 h尿草酸排泄量呈正相关（r＝0.97～0.99,P<0.01）。结论 自制防石酸奶与某市售品牌酸奶均可降低大鼠尿草酸排泄量,前者效果显著优于后者。     

Association of Vitamin D Receptor Gene Polymorphisms with Calcium Oxalate Calculus Disease

Urinary calculus is a common disease that isclosely related to the disorder of calcium metabolismand has the tendency of polygenic inheritance.Butup to now its predisposing genes have yetto be iden-tified.Vitamin D receptor(VDR) can regulate themetabolism of calcium and phosphorus in the body.Its allele polymorphisms are widely used to detectge-netic characteristics of some diseases such as osteo-porosis,rickets and secondary hyperparathy-roidism[1— 6 ] .In recent years,some researchers be-…     

从化地区复杂性肾结石晶体成分分析

目的：总结从化地区复杂性肾结石晶体化学成份特点,为预防其复发提供依据。方法：检测从化地区95例复杂性肾结石患者的结石晶体的化学成份,同时分析患者的相关临床资料。结果：本组95例复杂性肾结石患者中,结石晶体为混合成份91例（95．8％）,其中草酸钙＋磷酸钙47例（49．5％）、草酸钙＋尿酸7例（7．4％）、草酸钙＋磷酸钙＋尿酸9例（9．5％）、草酸钙＋磷酸钙＋磷酸镁铵25例（26．3％）、草酸钙＋磷酸钙＋胱氨酸3例（3．2％）;结石晶体为草酸钙成份4例（4．2％）。结论：从化地区复杂性肾结石以混合成份为主,应加强病因诊断并采用针对多种病因的积极的复发预防性治疗。     

富马酸二甲酯对肾草酸钙结石大鼠肾功能和氧化应激的影响及其机制研究

目的 基于p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路,探讨富马酸二甲酯对肾草酸钙结石大鼠肾功能及氧化应激的影响及其作用机制。方法 将30只SPF级SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组、富马酸二甲酯组,每组10只。其中模型组、富马酸二甲酯组大鼠腹腔注射0.25% L-羟脯氨酸2.5 kg/（kg·d）复制肾草酸钙结石大鼠模型。富马酸二甲酯组大鼠腹腔注射富马酸二甲酯25 mg/（kg·d）,连续28 d,对照组、模型组同时腹腔注射等量生理盐水。采用全自动生化分析仪检测大鼠尿蛋白、尿钙,以及血肌酐水平;HE染色检测大鼠肾组织草酸钙晶体形成情况;试剂盒检测血清超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）及活性氧簇（ROS）水平;Western bloting检测大鼠肾组织p38 MAPK通路蛋白相对表达量。结果 与对照组比较,模型组和富马酸二甲酯组大鼠肾组织SOD活性降低,草酸钙晶体含量、尿蛋白、尿钙、血肌酐及肾组织MDA、ROS水平,p-JNK、p-p38蛋白相对表达量升高（P <0.05）;但富马酸二甲酯组大鼠SOD活性高于模型组（P <0.05）,肾组织草酸钙晶体含量、尿蛋白、尿钙、血肌酐,肾组织MDA、ROS水平,p-JNK、p-p38蛋白相对表达量低于模型组（P <0.05）。结论 富马酸二甲酯可能通过抑制p38 MAPK通路活化,抑制肾脏组织氧化应激反应,从而抑制肾草酸钙结石形成,进而保护肾功能。     

A Comparative Study on Several Models of Experimental Renal Calcium Oxalate Stones Formation in Rats

In order to compare the effects of several experimental renal calcium oxalate stones formation models in rats and to find a simple and convenient model with significant effect of calcium oxalate crystals deposition in the kidney, several rat models of renal calcium oxalate stones formation were induced by some crystal-inducing drugs (CID) including ethylene glycol (EG), ammonium chloride (AC), vitamin D3 [1α(OH)VitD3, alfacalcidol], calcium gluconate, ammonium oxalate, gen-tamicin sulfate, L-hydroxyproline. The rats were fed with drugs given singly or unitedly. At the end of experiment, 24-h urines were collected and the serum creatinine (Cr), blood urea nitrogen (BUN), the extents of calcium oxalate crystal deposition in the renal tissue, urinary calcium and oxalate ex-cretion were measured. The serum Cr levels in the stone-forming groups were significantly higher than those in the control group except for the group EG L-hydroxyproline, group calcium gluconate and group oxalate. Blood BUN concentration was significantly higher in rats fed with CID than that in control group except for group EG L-hydroxyproline and group ammonium oxalate plus calcium gluconate. In the group of rats administered with EG plus Vitamin D3, the deposition of calcium ox-alate crystal in the renal tissue and urinary calcium excretion were significantly greater than other model groups. The effect of the model induced by EG plus AC was similar to that in the group in-duced by EG plus Vitamin D3. EG plus Vitamin D3 or EG plus AC could stably and significantly in-duced the rat model of renal calcium oxalate stones formation.     

草酸钠结晶肾损伤肾小管上皮细胞中骨桥蛋白相关长链非编码RNA的差异表达

目的 检测草酸钠诱导的人肾小管上皮细胞结晶肾损伤模型中与骨桥蛋白(OPN)相关的长链非编码RNA(lncRNA)的差异表达,并探讨OPN相关lncRNA在结晶肾损伤发病中的作用.方法 利用草酸钠(20 mmol/L)刺激人肾近曲小管上皮细胞HK-2建立草酸钠诱导的结晶肾损伤肾小管上皮细胞模型.运用RNA干扰技术对其转染OPN小干扰RNA构建OPN敲低细胞模型(OPN-siRNA组),对照组细胞转染阴性随机对照序列(NC-siRNA组).采用Arraystar公司提供的人类全基因组lncRNA芯片(V4.0)检测两组结晶肾损伤肾小管上皮细胞模型中与OPN相关的lncRNA和mRNA的差异表达水平,并采用生物信息学方法分析lncRNA芯片结果.结果 全基因组lncRNA芯片结果显示草酸钠诱导的结晶肾损伤肾小管上皮细胞模型中与OPN相关的差异表达lncRNA共583个,其中OPN-siRNA组表达上调354个、下调229个;差异表达mRNA共235个,上调139个,下调96个.生物信息学分析结果显示差异表达lncRNA参与结晶肾损伤中细胞生长、酶活性调节等多种生物学过程.结论 草酸钠体外诱导的结晶肾损伤肾小管上皮细胞模型中存在OPN相关的差异表达的lncRNA.     

Klotho基因沉默对肾小管上皮细胞草酸钙晶体粘附的影响

目的 探讨短发夹RNA(shRNA)稳定转染方法沉默Klotho基因对草酸钙晶体诱导人肾小管上皮细胞氧化应激及粘附的影响。方法 肾小管上皮细胞分为Ctrl、shRNA-NC、shRNA-Klotho、COM、shRNA-Klotho+COM组。ELISA检测5组氧化应激指标谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、血红素氧合酶1(HO-1)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)水平。Western blot检测5组Klotho蛋白水平。AlexaFluor-488-标记钙检测草酸钙晶体的黏附。结果 与Ctrl组相比,shRNA-Klotho组GSH、SOD、HO-1含量均显著降低(P<0.05),而MDA及ROS含量显著增高(P<0.05)。与Ctrl组相比,shRNA-Klotho组Klotho蛋白表达水下调(P<0.05);与其他组相比,shRNA-Klotho+COM组Klotho蛋白表达水平下调最为明显(P<0.05)。与COM组相比,shRNA-Klotho+COM组草酸钙晶体黏附增加了123.47%(P<0.05)。结论 沉默Klotho...     

夏枯草提取物对大鼠尿草酸钙结石形成的影响

目的探讨夏枯草不同提取物对大鼠尿草酸钙结石形成的影响。方法40只Wistar大鼠随机分为5组（每组8只），采用乙二醇和氯化铵诱导的大鼠肾草酸钙结石模型进行试验研究。对照组（A组）、成石组（B组）、夏枯草水溶性提取物组（c组）、50％甲醇提取物组（D组）、100％甲醇提取物组（E组），分别通过灌胃方式予一定剂量的夏枯草不同提取物。饲养4周后，检测各组大鼠血BUN、Cr，24h尿草酸（Ox）、Ca^2＋分泌量和肾组织Ca^2＋含量。镜下观察肾组织切片中草酸钙结晶及肾小管扩张情况。结果A组大鼠血BUN、Cr明显低于其他各组，差别有显著性（P〈0.05），各组间血Ca^2＋、P浓度则无明显差异；24h尿Ox、Ca^2＋分泌量各夏枯草实验组与B组差异无显著性（P〉0．05）；C、D组肾组织Ca^2＋含量明显低于B组，差异有显著性（P〈0．05）。A组肾小管正常，B组肾小管腔可见大量成片草酸钙结晶存在，管腔明显扩张；C组肾小管腔可见散在草酸钙结晶存在，少数呈片状，管腔轻度扩张；D组肾小管腔仅见少许散在草酸钙结晶存在，管腔未见明显扩张；EL、EH组基本同B组。结论夏枯草水提取物和50％甲醇提取物能有效防止大鼠尿草酸钙结石形成。     

钙拮抗剂对高草酸尿导致的大鼠肾小管上皮细胞损伤的保护作用

目的 观察高草酸尿对大鼠肾小管上皮细胞内游离钙离子浓度 ([Ca~(2+)]i)和细胞凋亡的影响,并了解钙拮抗剂硝苯地平对该影响的保护作用.方法 60只雄性SD大鼠随机分成饮水组(只饮去离子水)、硝苯地平组(饮去离子水,并灌喂硝苯地平10 mg·kg~(-1)·d~(-1))、诱石组(饮1%乙二醇去离子水)、诱石+硝苯地平干预组(共3组,饮1%乙二醇去离子水,并分别灌喂硝苯地平 3、6、10 mg·kg~(-1)·d~(-1)),每组10只,连续处理4周.测定各组大鼠24 h尿草酸浓度;TUNEL技术检测肾小管上皮细胞凋亡指数;应用Flou-3/AM荧光指示剂测定大鼠肾近曲小管细胞内Ca~(2+)的荧光强度.结果 诱石组和诱石+硝苯地平干预组24 h尿草酸浓度均高于饮水组和硝苯地平组(P<0.01).与饮水组相比,诱石组大鼠肾小管上皮细胞凋亡指数和肾小管上皮细胞内Ca~(2+)荧光强度均明显增加(P<0.01).诱石+硝苯地平(3、6、10 mg·kg~(-1)·d~(-1))干预组Ca~(2+)荧光强度分别为诱石组的76.7%、62.7%和56.4%,量效关系显著(r＝0.839,P<0.01).肾小管上皮细胞内Ca~(2+)荧光强度与肾小管上皮细胞凋亡指数密切相关(r＝0.826,P<0.01).结论 高草酸尿可使大鼠肾小管上皮细胞[Ca~(2+)]i及细胞凋亡水平显著增加,钙拮抗剂硝苯地平对此有明显的干预效果.     

钙拮抗剂对高草酸尿导致的大鼠肾小管上皮细胞损伤的保护作用

目的 观察高草酸尿对大鼠肾小管上皮细胞内游离钙离子浓度 ([Ca2+]i)和细胞凋亡的影响,并了解钙拮抗剂硝苯地平对该影响的保护作用。方法 60只雄性SD大鼠随机分成饮水组（只饮去离子水)、硝苯地平组（饮去离子水,并灌喂硝苯地平10 mg·kg-1·d-1）、诱石组（饮1%乙二醇去离子水）、诱石＋硝苯地平干预组（共3组,饮1%乙二醇去离子水,并分别灌喂硝苯地平 3、6、10 mg·kg-1·d-1）,每组10只,连续处理4周。测定各组大鼠24 h尿草酸浓度;TUNEL技术检测肾小管上皮细胞凋亡指数;应用Flou-3/AM荧光指示剂测定大鼠肾近曲小管细胞内Ca2+的荧光强度。结果 诱石组和诱石＋硝苯地平干预组24 h尿草酸浓度均高于饮水组和硝苯地平组（P<0.01）。与饮水组相比,诱石组大鼠肾小管上皮细胞凋亡指数和肾小管上皮细胞内Ca2+荧光强度均明显增加（P<0.01）。诱石＋硝苯地平(3、6、10 mg·kg-1·d-1)干预组Ca2+荧光强度分别为诱石组的76.7％、62.7％和56.4％,量效关系显著（r＝0.839,P<0.01）。肾小管上皮细胞内Ca2+荧光强度与肾小管上皮细胞凋亡指数密切相关（r＝0.826,P<0.01）。结论 高草酸尿可使大鼠肾小管上皮细胞[Ca2+]i及细胞凋亡水平显著增加,钙拮抗剂硝苯地平对此有明显的干预效果。