HPLC-荧光检测法测定大鼠血浆伊伐布雷定浓度

 目的 建立测定血浆中伊伐布雷定浓度的高效液相-荧光(FLU)测定方法,用于临床血浆伊伐布雷定浓度的测定。方法 血浆样品经Varian C₂柱固相萃取后采用HPLC-FLU法在Kromasil C₁₈柱分离,流动相采用乙腈-10 mmol·L - 1磷酸二氢钾（含0.3%10 mmol·L-1盐酸）（28∶72）,流速为1 mL ·min- 1,柱温为25 ℃,荧光检测波长：λ₁=328 nm,λ₂=283 nm。结果 内源性杂质不干扰测定,伊伐布雷定在0.5～50 μg·L-1内线性良好（r=0.999 6）,最低定量限为0.5 μg·L-1。萃取回收率为78.74%～90.77%（n=5）,批内和批间精密度（RSD%）分别为2.53～6.33（n=6）和6.38～8.91（n=3）。结论 建立的固相萃取-HPLC-FLU方法简便、灵敏、准确、所需血浆量少,可以用于临床血药浓度测定。     

川贝母新资源太白贝母中生物碱类成分含量测定

 目的 利用高效液相色谱法测定太白贝母中的生物碱成分。方法 采用Agilent Extend C₁₈柱（4.6 mm×250 mm,5 μm,流动相为甲醇-0.02%三乙胺水溶液,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,漂移管温度90 ℃;载气体积流量2.3 L·min-1,增益值2,进样量10 μL;柱温25 ℃。结果 贝母辛在28.75～690.0 μg·mL-1,贝母素乙在27.37～560.6 μg·mL-1,贝母素甲在25.75～527.0 μg·mL-1与峰面积的对数值呈线性关系,平均回收率分别为99.4％（n=6,RSD为1.10％;99.7％（n=6,RSD为3.61％;100.3％（n=6,RSD为2.82%。结论 太白贝母中的生物碱成分与川贝母非常相似,为其作为川贝母来源的合理性奠定了基础。     

LC-ESI-MS/MS快速测定人血浆中艾司西酞普兰的浓度

 目的建立测定人血浆中艾司西酞普兰浓度的高效液相色谱串联质谱电喷雾法(LC-ESI-MS/MS)。方法以Agilent C₁₈反相柱(Agilent C₁₈ column,2.1 mm×30 mm,3.5μm)为色谱柱,流动相为甲醇-5 mmol·L^-1甲酸铵(75∶25),流速为0.4mL·min^-1,柱温:25℃,以正己烷-异戊醇(95∶5)为提取剂。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测(SRM)对艾司西酞普兰(m/z 325→109)和内标利培酮(m/z 411→191)进行测定。并用此法测定40例患者稳态血药浓度。结果艾司西酞普兰的高、中、低(25,10,0.5μg·L^-1)3个浓度的平均回收率分别为99.16%、99.94%和92.28%,日内(n=5)、日间(n=3)RSD均小于10%;分析方法的最低定量限为0.2μg·L^-1。线性范围为:0.2～50μg·L^-1,回归方程为Y=0.394 2ρ+0.020 5,r=0.999 4(n=8)。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血浓监测和药动学研究。     

LC-MS/MS测定碘海醇及其注射剂中有关物质的研究

 目的 建立液相色谱-串联质谱联用方法,对碘海醇及其注射剂中两种有关物质进行分离和测定。方法 色谱柱：Agilent C₁₈分析柱（4.6 mm×150 mm,3.5 μm）,流动相为0.05%的甲酸水溶液(A)和乙腈(B),进行梯度洗脱,流速0.25 mL·min-1,柱温为30 ℃,采用ESI离子化-串联质谱选择离子监测（SRM）正离子模式检测,喷雾电压：3 500 V,鞘气流速：30 L·min-1,辅助气流速：5 L·min-1,毛细管温度：325 ℃,离子选择通道分别为m/z 747.8/528.9（有关物质A）、m/z 705.8/614.9（有关物质B）和m/z 328.2/237.3（内标）。结果 该方法中有关物质A、有关物质B分别在0.281 7～11.27 mg·L-1（r=0.999 4）和27.00～1 080 μg·L-1（r=0.996 3）内线性关系良好,有关物质A、有关物质B在高、中、低3个浓度的平均回收率分别为103.2%（RSD为4.4%）、105.4%（RSD为7.8%）。结论 该方法可同时测定碘海醇及其注射剂中的两种有关物质。     

LC-MS/MS方法同时测定人血浆和尿液中乌头碱与次乌头碱的含量

 目的 建立同时测定血浆和尿液中乌头碱（aconitine）与次乌头碱（hypaconitine）含量的LC-MS/MS分析方法。 方法 采用Phenomenex Gemini C₁₈柱 (4.6 mm×150 mm,5 μm) 为色谱柱,以甲醇-0.1%甲酸（70∶30）为流动相,流速为0.5 mL·min-1,以乙醚提取血浆和尿液中乌头碱与次乌头碱。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过API3200三重四级杆串联质谱仪,采用多反应离子监测（MRM）对乌头碱(m/z 646.3→105.2)与次乌头碱(616.3→105.2)进行测定。结果 生物样品中乌头碱在0.5~40 μg·L-1内、次乌头碱在0.25~25 μg·L-1内线性关系良好;乌头碱与次乌头碱最低定量限分别为0.5和0.25 μg·L-1,在尿液中的平均提取回收率76.54%~81.25%,血浆中的平均提取回收率73.22%~80.31%;日间和日内精密度均小于15%。结论 本方法简便、灵敏可靠,适用于血浆、尿液中乌头碱与次乌头碱的分析。     

LC-MS/MS测定人血浆中长春西汀体内代谢物阿朴长春胺酸

 目的 建立人血浆中长春西汀体内代谢物阿朴长春胺酸的LC-MS/MS分析测定方法。方法 采用Diamonsil C₁₈ 色谱柱(4.6 mm×200 mm,5 μm);流动相为2 mmol·L-1醋酸铵-甲醇（8∶92）;采用三重四极杆串联质谱以多反应离子检测(MRM)方式进行负离子检测。结果 阿朴长春胺酸的定量下限为10.61 μg·L-1,线性范围为10.61~424.40 μg·L-1(r=0.999 3, n=7),日内、日间精密度均小于6.8%,平均方法回收率为97.48%。结论 所建方法灵敏、精密、准确,可用于阿朴长春胺酸的药动学研究。     

HPLC-MS/MS法测定山药中尿囊素的量

目的 建立高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定山药中尿囊素的量.方法 采用Agilent Eclipse Plus C₁₈色谱柱(100 mm×4.6 mm,3.5 μm),以乙腈-水(90:10)为流动相,体积流量0.3 mL/min,柱温为30 ℃;采用电喷雾负模式电离(ESI^-),多反应监测扫描模式(MRM)进行定量分析,选定的母离子是m/z 156.9,定量子离子是m/z 96.7.结果 尿囊素在0.12～6.0 μg/mL范围内线性关系良好(r=0.998 5),平均加标回收率为101%(n=6),RSD为3.2%.结论 本方法灵敏、准确、专属性强,能准确有效地测定出山药中尿囊素的量.     

HPLC测定清肝活血方中4种黄酮的含量

 目的 建立HPLC同时测定清肝活血方中葛根素、黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法。方法 采用HPLC进行分析,色谱柱为Agilent Zorbax Eclipse XDB-C₁₈柱(4.6 mm×250 mm, 5 μm),流动相为甲醇-0.5%甲酸水梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为276 nm。结果 葛根素的线性范围为0.12~1.98 g·L-1(r=0.999 8),平均回收率为99.87%,RSD=2.04%;黄芩苷的线性范围为0.24~3.82 g·L-1(r=0.999 9),平均回收率为99.74%,RSD=1.84%;黄芩素的线性范围为0.01~0.14 g·L-1(r=0.999 6),平均回收率为99.64%,RSD=1.96%;汉黄芩素的线性范围为0.007~0.12 g·L-1(r=0.999 5),平均回收率为100.83%,RSD=2.37%。结论 本方法操作简便,测定结果准确可靠,可用于清肝活血方的质量控制。     

HPLC-MS测定人血浆中奥美拉唑浓度及药动学

 目的 建立测定人血浆中奥美拉唑的HPLC-MS方法,并应用于药动学研究。方法 血浆样品经蛋白沉淀法处理后,采用Alltima C₁₈色谱柱（2.1 mm×100 mm,3 μm）,以乙腈-0.05%甲酸溶液（50∶50）为流动相,流速为0.2 mL·min-1,通过电喷雾电离源,以选择反应监测（SRM）方式进行正离子检测,通道分别为m/z 346→198（奥美拉唑）和m/z 324→127（内标,格列齐特）,用非室模型计算药动学参数。结果 奥美拉唑的线性范围为0.002 5～2.0 mg·L-1,最低检测限为0.5 μg·L-1,日内、日间精密度均小于15%。低、中、高3个浓度提取回收率均大于95%,其主要药动学参数t_max为（2.5±0.7）h,ρ_max为（1.3±0.3）mg·L-1,AUC_0-t为（2.8±1.2）mg·h·L-1,t_1/2为（1.1±0.3）h。结论 该法操作简便,分析快速,灵敏度高,可用于人血浆中奥美拉唑的测定和药动学研究。     

HPLC测定二巯丁二酸的有关物质

 目的 建立二巯丁二酸中有关物质的HPLC测定方法。方法 色谱柱为Ultimate XB-C₁₈（4.6 mm×150 mm,5 μm）;流动相A：硫酸氢四丁基铵磷酸盐溶液（含硫酸氢四丁基铵3.2 g·L-1、磷酸二氢钠6.5 g·L-1和乙二胺四乙酸二钠0.09 g·L-1）-甲醇（85∶15）,流动相B：甲醇;流速：1.0 mL·min-1;检测波长220 nm;线性梯度洗脱：0 min,100%A;10 min,100%A;20 min,80%A;50 min,80%A。结果 二巯丁二酸与丁炔二酸、各杂质峰之间分离良好。二巯丁二酸在14.0~112.0 μg·mL-1内线性良好,r=0.999 3,检测限为1.8 μg·mL-1;丁炔二酸在10.3~82.3 μg·mL-1内线性良好,r=1.000 0,检测限为0.4 μg·mL-1,丁炔二钠的平均加样回收率为98.3%。结论 本方法专属性强、准确度高,适合测定二巯丁二酸的有关物质。     

液相色谱-串联质谱联用测定人血浆中伪麻黄碱、O-去甲基右美沙芬和苯海拉明的浓度

 目的建立同时测定人血浆中伪麻黄碱、苯海拉明和O-去甲基右美沙芬的液相色谱-串联质谱方法。方法血浆中加入内标酚妥拉明后,进行固相萃取,以甲醇-0.5%甲酸水溶液(55∶45)为流动相,经C₁₈柱分离后;采用三重四极杆串联质谱,电喷雾离子源(ESI),以正离子多反应监测(MRM)方式进行定量分析,用于监测的离子为m/z 166.4→m/z 115.2(伪麻黄碱),m/z258.2→m/z157.1(O-去甲基右美沙芬),m/z256.2→m/z167.2(苯海拉明),m/z282.2→m/z212.2(内标,酚妥拉明)。结果线性范围为伪麻黄碱1.0～200μg·L^-1(r=0.9993),O-去甲基右美沙芬为0.05～10μg·L^-1(r=0.9991),苯海拉明为1.0～200μg·L^-1(r=0.9988);提取回收率为伪麻黄碱在67.4%～73.4%之间,O-去甲基右美沙芬在74.6%～75.7%之间,苯海拉明在81.9%～83.9%之间,日内、日间RSD均小于6.2%,伪麻黄碱、苯海拉明和O-去甲基右美沙芬的最低定量浓度分别为1.0,1.0和0.05μg·L^-1。结论该方法专属性强、灵敏度高、准确,适用于伪麻黄碱、O-去甲基右美沙芬、苯海拉明的临床药动学研究。     

高效液相色谱-质谱联用测定大鼠体内西罗莫司血药浓度

 目的 建立测定SD大鼠体内雷帕霉素（RAPA）血药浓度的HPLC-MS/MS联用方法。方法 色谱柱为Phenomenex Luna C₁₈（2.0 mm×250 mm,5 μm）;以甲醇-水（90∶10）为流动相;流速0.25 mL·min-1;柱温55 ℃。选用ESI源,以多反应采集模式（MRM）进行正离子检测,RAPA m/z 936.6→409.2和丙酸睾酮（内标）m/z 345.4→109.1。取全血样品经液-液萃取后,HPLC进样10 μL。结果 RAPA的线性范围为0.54～108.00 μg·L-1,定量下限为0.54 μg·L-1,日内、日间精密度（RSD）均小于12％。结论 本方法精密、准确,适用于RAPA在大鼠体内的药动学研究。     

反相高效液相串联质谱法快速测定人血浆中齐拉西酮的浓度及临床应用

 目的建立测定人血浆中齐拉西酮浓度的反相高效液相串联质谱电喷雾检测法(LC-ESI-MS/MS)。方法以迪马公司C18反相柱(Dialmonsil C₁₈ column,4.6 mm×150 mm,5μm)为色谱柱,流动相为甲醇-5 mmol·L^-1甲酸铵(90∶10),流速为1 mL·min^-1,柱温:25℃,以醋酸乙酯-二氯甲烷(4∶1)为提取剂。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测(SRM)对齐拉西酮(m/z 413.2→194.1)和内标替米沙坦(m/z 515.3→276.2)进行测定,并用此法测定20例患者稳态血药浓度。结果齐拉西酮的高(250μg·L^-1)、中(100μg·L^-1)、低(10μg·L^-1)3个质量浓度的平均回收率分别为100.33%,94.31%和104.70%,日内(n=5)、日间(n=3)RSD均小于15%;分析方法的最低定量限为5μg·L^-1。线性范围为:5～500μg·L^-1,回归方程为F=1.367 7ρ-0.024 5,r=0.999(n=7)。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血浓监测和药动学研究。     

反相高效液相串联质谱检测法测定人血浆中阿立哌唑的浓度及临床应用

 目的建立测定人血浆中阿立哌唑浓度的反相高效液相串联质谱电喷雾检测法(LC-ESI-MS/MS)。方法以迪马C18反相柱(4.6mm×150mm,5μm)为色谱柱,流动相为甲醇-5mmol·L^-1甲酸铵(90∶10),流速为1mL·min^-1,柱温:25℃,以醋酸乙酯-二氯甲烷(4∶1)为提取剂。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测(SRM)对阿立哌唑(m/z 448.3→285.0)和内标替米沙坦(m/z 515.3→497.3)进行测定。并用此法测定30例患者稳态血药浓度。结果阿立哌唑的高(400μg·L^-1)、中(125μg·L^-1)、低(10μg·L^-1)3个质量浓度的平均回收率分别为94.27%、102.58%和97.97%,日内(n=5)、日间(n=3)RSD均小于15%;分析方法的最低定量限为1μg·L^-1。线性范围为:5～500μg·L^-1,回归方程为F=0.5469ρ+0.0714,r=0.999(n=7)。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血浓监测和药动学研究。     

HPLC-MS/MS测定人体内齐墩果酸血药浓度

 目的 建立快速、灵敏的高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）法测定人血浆中的齐墩果酸。方法 血浆样品定量加入内标液,经乙酸乙酯液液萃取后,以甲醇-0.1%醋酸铵缓冲溶液（93∶7）为流动相,采用Zorbax Extend-C₁₈（4.6 mm×250 mm, 5 μm）柱分离。使用电喷雾离子化,负离子SRM检测。用于定量的离子反应分别为m/z 455.1→455.3（齐墩果酸）;m/z 469.1→469.3（内标甘草次酸）。结果 测定血浆中齐墩果酸的线性范围为0.1～40.0 μg·L-1,定量限为0.1 μg·L-1,批内、批间精密度（RSD）均小于20.0%,方法学回收率94.0%～102.0%,符合相关规定。单个样品的分析时间为6.5 min。本法已用于齐墩果酸口服制剂的人体生物等效性研究。结论 本方法灵敏度高,选择性强,分析测试时间较短,适用于人血浆样品中齐墩果酸的测定。