不同来源乳香的高效薄层色谱数码轮廓指纹图谱分析及基原鉴别

目的:建立乳香药材的高效薄层色谱指纹图谱,并对不同来源乳香药材的指纹图谱进行比较分析。方法:样品经甲醇超声提取,点样于硅胶GF254高效预制薄层板上,以甲苯-乙酸乙酯-庚烷-无水甲酸(8∶2∶1∶0.3)为展开剂展开,先置紫外灯(254nm)下检视并成像,再喷以茴香醛试液,并于105℃加热至条斑清晰,日光下再次成像,图像经CHROMAP软件转换成数码轮廓图并生成共有模式后,进行相似度、聚类和主成分分析。结果:日光下,埃塞俄比亚乳香的指纹图谱由12个特征条斑组成,薄层色谱图像与数码轮廓图谱结合分析比较,可分为埃塞俄比亚乳香模式和索马里乳香模式,不同种的乳香可被鉴别并归类。结论:该法简便、专属、准确,适用于乳香的鉴别和质量控制。     

蠲痹汤基准样品“一测多药”薄层鉴别方法研究

目的 建立“一测多药”薄层鉴别方法,同时鉴别蠲痹汤基准样品中的当归、川芎、羌活和独活4个药味。方法 通过考察供试品溶液制备方法、展开剂、点样量、点样方式、加热时间等因素,建立最优的薄层鉴别方法,并进行专属性和耐用性考察。结果 建立了“一测多药”薄层鉴别方法,即吸取供试品溶液3~5 μL、对照品溶液和对照药材溶液各2 μL,分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上,以环己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸（5.0∶1.0∶2.0∶0.2）为展开剂,置紫外光灯（254 nm）下检视,供试品在与藁本内酯对照品色谱相应的位置上显相同深蓝色斑点,再喷以10%硫酸乙醇溶液,在105 ℃加热至斑点显色清晰,置紫外光灯（365 nm）下检视,供试品在与羌活醇对照品和独活对照药材色谱相应的位置上显相同颜色的荧光斑点。结论 所建立的薄层鉴别方法专属性强、耐用性好,提高检测效率的同时降低了检测成本。     

薄层色谱法快速筛查降脂、降压、止咳平喘类中药制剂中的29种添加化学药物

 目的 建立快速筛查降脂、降压、止咳平喘类中药制剂中非法添加化学药物的薄层色谱法。方法 样品用甲醇超声提取,采用硅胶GF₂₅₄薄层板,降脂类药物以正己烷-乙酸乙酯-乙醚-冰醋酸（10∶8∶2∶1）为展开剂,紫外254 nm检视,并以5%香草醛硫酸试液为显色剂测定;降压类药物以乙酸乙酯-甲醇-二乙胺（40∶0.5∶3）为展开剂,于紫外254、365 nm下检视;止咳平喘类药物以异丙醇-乙酸乙酯-氨水（15∶25∶1.5）为展开剂,于紫外254 nm下检视。结果 上述方法 可快速筛查出中成药中可能非法添加的10种降脂药物烟酸、普伐他汀钠、瑞舒伐他汀钙、阿托伐他汀钙、氟伐他汀钠、苯扎贝特、辛伐他汀、洛伐他汀、非诺贝特、普罗布考;9种降压药物苯磺酸氨氯地平、盐酸特拉唑嗪、盐酸哌唑嗪、甲磺酸多沙唑嗪、硝苯地平、非洛地平、尼群地平、尼莫地平、拉西地平;10种止咳平喘药物茶碱、二羟丙茶碱、特布他林、羟乙基茶碱、盐酸二氧丙嗪、富马酸酮替芬、咖啡因、盐酸克仑特罗、多索茶碱、盐酸氨溴索等共29种化学药物。结论 本方法 简便快速,可作为非法添加日常监督检验的有效方法 。
     

骨痨敌薄膜衣片中4种药材的薄层色谱法鉴别

目的:建立骨痨敌薄膜衣片中三七、黄芪、骨碎补和没药的薄层鉴别方法。方法:采用对照品、对照药材双对照鉴别三七,以正丁醇-乙酸乙酯-稀氨溶液(5→50)(4∶1∶5)上层溶液为展开剂,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点清晰,在可见光下检视;采用对照药材对照鉴别黄芪,以正丁醇-乙酸乙酯-稀氨溶液(5→50)(4∶1∶5)上层溶液为展开剂,取出,晾干,在紫外灯(254 nm)下检视;采用柚皮苷为对照,鉴别骨碎补,以三氯甲烷-甲醇-水-冰乙酸(13∶4∶1∶1.5)为展开剂,喷以1%三氯化铝(Al Cl3)溶液,在紫外灯(365 nm)下检视;采用对照药材对照鉴别没药,以环己烷-丙酮(9∶2)为展开剂,在紫外灯(365 nm)下检视。结果:4种药材的TLC中,供试品色谱中,在与对照品或对照药材色谱相应的位置上均显相同颜色的斑点,且阴性对照均无干扰。结论:所建立的4种药材的TLC鉴别方法简便可行、专属性强、重复性好,可用于骨痨敌薄膜衣片中三七、黄芪、骨碎补和没药的薄层鉴别。     

基于网络药理学探讨乳香——没药药对干预乳腺增生症的分子机制＊

目的 采用网络药理学方法，探索乳香-没药药治疗乳腺增生症的作用机制。方法 本研究利用中医药数据库收集筛选乳香-没药药对的化学成分信息，通过Pubchem数据库以及其他化学结构数据库转换成各活性成分有效成分的SMILES式，将SMILES式输入Swiss Target Prediction数据库进行靶点预测，利用DAVID数据库进行KEGG通路注释分析，最后利用Cytoscape根据收集乳香没药药对的预测靶点和进一步的富集分析，构建活性成分-预测靶点网络模型和成分-靶点-通路网络模型，并分析其作用机制。结果 乳香-没药药对抑制乳腺增生主要有乳香脂酸、因香酚、没药甾酮、曼苏宾酸等51个活性成分；雄激素受体、细胞色素P450、微管相关tau蛋白、雌激素受体、类固醇17α-羟化酶/17,20裂解酶、糖皮质激素受体、盐皮质激素受体等271个作用靶点；类固醇激素生物合成，雄激素和雌激素代谢，VEGF、ErbB、mTOR信号通路；类固醇生物合成6条信号通路参与乳腺增生症调控；类固醇生物合成、类固醇代谢、激素调节、激素代谢14个生物过程。结论 本研究通过对乳香-没药药对的网络药理学分析，发现了乳香-没药药对乳腺增生症治疗的相关信号通路和生物过程，其作用机制主要涉及抑制乳腺细胞增生、促进细胞凋亡自噬、抑制炎症反应和血管新生等方面，体现了乳香-没药药对在“多成分-多靶点-多途径”方面对乳腺增生症的治疗作用，为理解乳香-没药药对中各有效组分的协同作用提供科学依据。     

《中华人民共和国药典》2020年版收载何首乌和制何首乌质量标准【鉴别】项的商榷

目的 讨论完善《中华人民共和国药典》（以下简称《中国药典》）2020年版何首乌及制何首乌的薄层色谱鉴别项。方法 考察超声及加热回流2种不同的样品制备方式,以及用二氯甲烷-甲醇-甲酸、乙酸乙酯-石油醚-甲酸展开系统代替原标准中三氯甲烷-甲醇展开系统的可行性,同时比较了不同显色条件。结果 2种制备方式制得的样品在相同的展开条件下展开结果并没有明显差异,超声提取操作更加简便;以二氯甲烷-甲醇-甲酸（5∶1∶0.3）和石油醚-乙酸乙酯-甲酸（5.0∶1.0∶0.3）代替三氯甲烷-甲醇展开系统后,喷10%硫酸乙醇显色剂并在紫外灯365 nm下检视,薄层色谱板上斑点明显增多且分离效果好,较《中国药典》2020年版何首乌和制何首乌薄层色谱鉴别条件更理想。结论 改进后的方法毒性低、简便易行、可行性良好,为进一步完善《中国药典》2020年版何首乌和制何首乌质量标准提供参考。     

土白术药材中(6E,12E)-十四癸二烯-8,0-二炔-1,3-二乙酸酯和芹烷二烯酮的定性定量方法研究

  目的：建立土白术药材中(6E,12E)-十四癸二烯-8,0-二炔-1,3-二乙酸酯(TDEYA)和芹烷二烯酮两种化学成分的定性定量方法。  方法：采用薄层色谱法和高效液相色谱法。薄层色谱采用G254薄层硅胶预制板,以石油醚-乙酸乙酯(10∶1)为展开剂,置紫外光(254 nm)下检视。高效液相采用ZORBAX SB-C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-1%甲酸溶液(67∶33),检测波长为254 nm,流速1.0 ml/min；柱温30 ℃；进样量10 μl。  结果：TDEYA和芹烷二烯酮在薄层色谱和高效液相色谱上均获得良好的分离,可作为土白术药材的定性定量指标。  结论：本法操作简单,结果准确,重现性好,可为评价土白术药材的质量标准提供检测方法。     

乳香没药对大鼠肝脏毒性的比较研究

目的: 比较乳香和没药对大鼠的肝脏毒性。 方法: 48只Wistar大鼠随机分为4组,分别为对照组、乳香没药(1 ∶1)组、乳香组、没药组,各给药组剂量均为2.1 g·kg^-1,连续ig 12周。禁食12 h后水合氯醛麻醉动物,取血检测血清生化指标,并解剖称取肝脏湿重计算肝脏系数,并测定肝组织中MDA含量,光镜下对肝脏进行病理组织学检查。 结果: 乳香没药组和乳香组大鼠的血清总胆固醇(TC)和肝组织中丙二醛(MDA)明显高于对照组(P<0.05)。给药组大鼠肝系数均明显升高(P<0.01),肝系数乳香组>乳香没药组>没药组。肝脏病理组织学检查表明,乳香组2只大鼠肝脏中度脂肪变性,而乳香没药组和没药组则未见明显异常。 结论: 乳香对大鼠的肝脏毒性强于没药。     

乳香与醋乳香对溃疡性结肠炎大鼠抗炎作用的对比研究

目的 对比乳香醋炙前后对溃疡性结肠炎（Ulcerative colitis，UC）模型大鼠的作用。方法 SD大鼠随机分为正常对照组（10只）和模型组（60只）；模型组注射2,4,6-三硝基苯磺酸（2,4,6-trinitrobenzenesulfonic acid solution，TNBS）/乙醇建立UC大鼠模型，正常组注射生理盐水；造模成功后，将造模大鼠随机分为6组，每组10只；每天给药1次，连续2周。观察大鼠疾病活动指数（Disease activity index，DAI）；观察结肠组织并评分结肠黏膜损伤指数（Colonic mucosal damage index，CMDI）；光镜下观察结肠组织的病理学改变，并做结肠组织学观察及评分（Histopathological score，HS）；采用ELISA法测定血清中肿瘤坏死因子（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素-1β（Interleukin-1β，IL-1β）、白介素6（Interleukin-6，IL-6）的含量变化。结果 与正常组比较，模型大鼠的DAI、CMDI、HS评分、细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6的含量均明显上升（P ＜ 0.01）；与模型组比较，各给药组大鼠的DAI、CMDI、HS评分以及TNF-α、IL-1β和IL-6含量均显著降低，显示乳香和醋乳香对UC模型大鼠具有治疗作用，而醋乳香较乳香作用更强，且以2倍剂量组作用最明显。结论 乳香和醋乳香均对UC大鼠具有治疗作用，醋炙后作用增强，且2倍剂量优于等剂量。     

基于网络药理学的乳香-没药药对药效机制研究＊

目的 网络药理学方法，研究乳香-没药药对在抗溃疡、抗炎、抗肿瘤和炎症性肠病和镇痛的治疗过程中的共性作用机制。方法 借助中药系统药理学分析平台（TCMSP）检索乳香-没药药对的化学成分和作用靶点，通过人类基因数据库(Genecards)和在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)等多个数据库筛选上述5种疾病相关靶点。利用 Cytoscape3.7.1 软件构建“药物-靶点-疾病”交互网络图。运用蛋白相互作用（PPI）筛选核心靶点；通过生物学信息注释数据库（DAVID）做基因本体（GO）功能分析和基因组百科全书（KEGG）通路分析。结果 乳香-没药药对共包含403个化合物，247个活性靶点，与五种疾病基因交集获得79个高频基因，通过构建“药物-靶点-疾病”网络及对网络进行分析，共获得20个关键靶标；在对GO富集分析时，获得8个高频共性相关条目，主要病毒感染和肿瘤信号通路等；在对靶标进行KEGG通路分析时，共获得6条高频相关的通路，其中病毒感染和肿瘤信号通路为主要通路。结论 本研究结果初步验证了乳香-没药药对在抗溃疡、抗炎、抗肿瘤、炎症性肠病和镇痛这五种疾病治疗的作用机制以及高频共性靶点、基因、信号通路等，为进一步阐述乳香-没药药对作用机制奠定了良好的理论基础。     

姜黄素无水乙醇溶液的光稳定性研究

 目的采用UV-VIS、HPLC-UV、HPLC-MS等研究方法对姜黄素无水乙醇溶液光稳定性进行考察,研究姜黄素无水乙醇溶液的光降解动力学以及光解产物。方法姜黄素的无水乙醇溶液采用254nm紫外光照射。采用反相高效液相色谱法,以乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水(39∶12∶2∶47)为流动相,425nm为检测波长研究姜黄素的光降解动力学;以甲醇-冰醋酸-水(30∶3∶67)为流动相,310nm为检测波长研究姜黄素的无水乙醇溶液光降解产物动力学;HPLC-MS采用电喷雾离子源(ESI)和离子阱分析器,50-500m/z内扫描研究姜黄素无水乙醇溶液光解产物。结果UV-VIS法检测姜黄素的最大吸收峰位随着光照时间的延长向短波长移动。254nm紫外光照射24h,500,50,5mg·L^-1样品的浓度越低其降解速率越快;LC-MS检测光解产物中含有香草醛。结论姜黄素无水乙醇溶液对光不稳定,在光照作用下发生降解。     

金银花和山银花的薄层色谱指纹图谱分析

目的建立高效薄层指纹图谱定性鉴别方法,使用金银花对照提取物(JYH ERS)直接比较金银花和山银花药材的异同。方法使用高效薄层色谱法、硅胶G60薄层板,分别以乙酸丁酯-丙酮-甲酸-水(10∶1∶4∶4)和三氯甲烷-甲醇-水(12∶4∶1)为展开剂,用绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷、断氧化马钱子苷和断马钱子酸对金银花及山银花进行定性鉴别。结果高效薄层色谱显示JYH ERS与金银花药材在整体图谱上具有一致性。与山银花药材比较,金银花及JYH ERS中的断马钱子酸斑点明显,两种不同的展开剂均能有效鉴别出金银花和山银花药材。结论金银花与山银花药材容易混淆,使用所建立的高效薄层指纹图谱鉴别方法及JYH ERS可快速、有效地区分金银花与山银花。     

西红花特征图谱研究及真伪鉴别

目的建立一种西红花Crocus sativus特征图谱分析方法,并用以鉴别西红花中掺假栀子Gardenia jasminoides。方法采用HPLC法,色谱柱为ZorBax XDB-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.5%醋酸水溶液-0.5%醋酸甲醇溶液梯度洗脱,检测波长为254 nm,分析时间为45 min,体积流量为1.0 mL/min。结果通过多批样品的检测,共标出8个特征峰,建立的分析方法有较好的重复性,能够显著区分西红花和栀子。结论方法稳定、可靠、简便,为西红花质量控制和真伪鉴别提供参考。     

人血浆中霉酚酸浓度测定方法研究及药物监测应用

 目的建立用高效液相色谱快速测定人血浆中霉酚酸浓度的方法,对我院肾移植病人霉酚酸血药浓度进行监测。方法血浆样品加20μLH₃PO₄酸化,乙醚提取,萘啶酸为内标,采用Kromasil 100-5C₈(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-乙腈-0.05 mol·L^-1 KH₂PO₄(用磷酸调pH2.8)(12∶38∶50)为流动相,流速0.5 mL·min^-1,柱温25℃,检测波长254 nm。结果霉酚酸在0.191～24.45 mg·L^-1内线性关系良好(r=0.999 8),最低定量限为0.191 mg·L^-1(S/N=10)。高、中、低3个质控样品的平均方法学回收率为89.7%～101.5%,提取回收率大于85%,日内、日间精密度的RSD均小于10%。监测肾移植患者环孢霉素或他克莫司的谷浓度同时,测定其MPA血药浓度,82.3%的患者MPA浓度小于2 mg·L^-1,低于有效治疗谷浓度。结论本法简便、灵敏、重现性好,可用于肾移植病人服用霉酚酸酯后霉酚酸血药浓度监测和霉酚酸酯药动学研究。     

灵芝及其近缘种高效薄层色谱指纹图谱的研究

 目的 以赤芝为基础建立灵芝三萜类化合物高效薄层荧光色谱指纹图谱,并与赤芝的近缘种无柄灵芝、 平盖灵芝 等的指纹图谱进行比较分析。 方法 硅胶 GF₂₅₄ 高效预制薄层板,以 正己烷 - 乙酸乙酯 - 甲醇 - 甲酸（ 30 ∶ 30 ∶ 2 ∶ 0.2 ）为展开剂展开,展至约 5 cm ,再以正己烷 - 乙酸乙酯 - 甲醇 - 甲酸（ 30 ∶ 30 ∶ 1 ∶ 0.2 ）为展开剂进行二次展开, 10% 硫酸乙醇溶液显色后获得 薄层荧光色谱指纹图谱,经指纹图谱系统解决方案软件（ Chromafinger^TM ）生成共有模式,并进行相似度和主成分分析。 结果 赤芝薄层荧光色谱指纹图谱由 9 个特征荧光条斑组成。荧光色谱图像与轮廓扫描图谱结合分析比较,建立了赤芝指纹图谱模式。赤芝与紫芝、无柄灵芝、 平盖灵芝、薄树芝、黑芝 等在三萜类化合物方面区别较大。 结论 通过指纹图谱考察,当前市场灵芝类型主要是赤芝、紫芝为主流,但两者区别较大,其他灵芝的近缘种均为代用品,不可做灵芝使用,应加以区别。     

胶束电动毛细管电泳同时检测刺五加中紫丁香苷及绿原酸的含量

 目的建立简单、快速且能同时分离测定刺五加中紫丁香苷、绿原酸含量的胶束电动毛细管电泳法。方法采用胶束电动毛细管电泳法,缓冲体系为100mmol·L^-1 NaH₂PO₄-100mmol·L^-1 Borax-100mmol·L^-1 SDS-双蒸水(6.25∶43.75∶37.5∶12.5,pH9.25),熔融石英毛细管柱(25μm×45cm),分离电压为16kV,检测波长为254nm,进样时间为25s,进样高度10cm。结果紫丁香苷、绿原酸在0.0625～2.0000,0.2500～8.0000g·L^-1与峰面积线性关系良好,线性方程依次为:Y=112904ρ+1645.1(r=0.9999),Y=98191ρ-165.11(r=0.9999);样品回收率分别为100.78%和99.56%;两种成分含量以刺五加根中最高。结论该方法简单、快速、准确、重现性好,可用于刺五加药材的质量控制,不同部位两成分均存在一定的差异。     

巴戟天寡糖的高效薄层色谱指纹图谱研究

 目的 建立巴戟天寡糖的高效薄层色谱（HPTLC）指纹图谱,并对不同产地巴戟天药材、炮制饮片、混伪品及含巴戟天药材的复方制剂——口服液X中寡糖成分进行分析比较。方法 在湿度40%～55%、温度20～32 ℃条件下,以乙酸乙酯-甲醇-水-冰醋酸为展开剂二次展开,展距13 cm,α-萘酚试液加热至显色,于可见光下检视。将巴戟天寡糖HPTLC指纹图谱导入指纹图谱系统解决方案软件（CHROMAP 1.5）生成共有模式。结果 巴戟天寡糖指纹图谱由11个特征条带（色谱峰）构成,并指认了其中的果糖、蔗糖、1-蔗果三糖、耐斯糖及1F-果呋喃糖基耐斯糖5个峰。结论 通过HPTLC指纹图谱考察,炮制后巴戟天寡糖成分出现质与量的改变;来源于4省的巴戟天药材无明显差异;混伪品中不含巴戟天寡糖不能作为巴戟天替代药材入药;含巴戟天药材的制剂仍可采用该HPTLC法进行制剂质量评价与控制。     

银杏叶中银杏酚酸类成分含量测定方法研究

 目的 建立银杏叶药材中白果新酸(C13∶0)、白果酸(C15∶1)、十七烷二烯银杏酸(C17∶2)、氢化白果酸(C15∶0)和十七烷一烯银杏酸(C17∶1)等5种银杏酚酸类成分的含量测定方法。方法 采用HPLC法。色谱柱为Phenomenex Luna C₁₈(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸(90∶10)为流动相,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为310 nm,柱温为30 ℃。结果 白果新酸(C13∶0)、白果酸(C15∶1)和十七烷一烯银杏酸(C17∶1)质量浓度分别在1.47~29.40、6.05~121.00、8.00~160.00 μg·mL^-1内呈良好线性关系,相关系数分别为0.999 9、0.999 9和0.999 9,平均回收率分别为98.6%(RSD=2.57%,n=9)、100.1%(RSD=2.36%,n=9)、97.4%(RSD=2.99%,n=9),建立了十七烷二烯银杏酸(C17∶2)、氢化白果酸(C15∶0)相对定量分析方法。结论 该方法简便、准确、重现性好,可用于银杏叶的质量控制。不同产地、不同采收期的银杏叶药材中5种银杏酚酸类指标成分含量差异较大。     

小柴胡颗粒制剂-药材谱峰匹配指纹图谱研究

目的 建立小柴胡颗粒制剂的多波长指纹图谱并进行药材-制剂谱峰匹配研究,进一步验证单一波长下指纹图谱质量评价的局限性。方法 采用RP-HPLC法对3个厂家各3个批次及实验室自制3批小柴胡颗粒（共12批样品）进行多波长指纹图谱相似性评价,并与相同色谱条件下的实验室自制小柴胡颗粒时所用的原药材指纹图谱进行谱峰匹配;RP-HPLC法测定不同来源的小柴胡颗粒中的指标成分的量。结果 在210、254、280、323 nm 4个波长下,同一药厂3个批次小柴胡颗粒之间及实验室自制的3批制剂之间的指纹图谱相似度差别较小,不同厂家的制剂之间,仅A厂制剂与实验室自制的3批制剂在4个波长下相似度均在0.9以上,其余二药厂除280 nm波长相似度在0.9以上外,在210、254、323 nm的相似度均小于0.9。在210、254、280、323 nm 4个波长,柴胡、甘草、党参和黄芩与小柴胡颗粒模式指纹图谱分别有5、5、2、18个色谱峰匹配;不同来源的小柴胡颗粒制剂中甘草酸和黄芩苷的量差异较大。在制剂中未能检测到柴胡皂苷a和d、阿魏酸、苍术内酯III、党参炔苷。结论 仅以280 nm波长指纹图谱相似度评价小柴胡颗粒制剂的质量存在很大的局限性。由于制剂过程及工艺的影响,部分药材的指标成分并未在制剂中测得;多波长相似度评价结合制剂用药材与制剂指纹图谱谱峰匹配及活性组分的定量测定相结合的方法,可为较全面评价中药制剂质量提供参考。