DHPG诱导的大鼠海马脑片癫癎样放电模型基因表达谱分析

目的 研究代谢型谷氨酸受体-Ⅰ(mGluR-Ⅰ)激动剂D-对羟基苯甘氨酸(DHPG)诱导的大鼠离体海马脑片癫样放电模型的基因表达谱.方法 以含50 μmol DHPG的人工脑脊液持续灌流大鼠离体海马脑片,诱导建立癫样放电模型(DHPG组,n=3).采用cDNA微阵列分析技术获得DHPG组的基因表达谱,与对照组(n=3)比较筛选出差异表达基因,并进行富集功能分类.结果 与对照组比较,DHPG组样本模型分别筛选出的上调基因206个,下调基因489个;其中差异表达达1.5倍的上调基因67个,下调基因86个;2.0倍以上的上调基因6个,0.5倍以下的下调基因25个.富集功能分类结果显示,差异表达基因功能涉及蛋白结合(19个)、分子功能、钙离子结合和核苷酸结合等多方面.结论 癫样放电及mGluR-Ⅰ激动剂的作用均涉及多种基因,是一复杂的调控过程.实验为进一步研究提供了依据.     

串刺激诱发大鼠海马脑片痫样放电模型的建立及谷氨酸对它的影响

A train of pulses (60 Hz, pulse duration 100 microseconds, train duration 2s, 2-3 fold maximal intensity) were applied to the CA3 stratum radiatum fiber pathway in rat hippocampal slices in vitro. Recordings of the field potentials were made from the stratum of CA3 pyramidal cells in response to these pulses so that the model of stimulus train-induced bursting (STIB) could be studied. It was a new and valuable model of epileptiform activity in hippocampal slices in vitro and the effect of L-glutamate (Glu) on STIB was also studied. Results showed that: 1. The number of train stimulus for a stable STIB averaged 5.5 +/- 2.1; the induced number of population spikes (PS) increased with an average in 5.2; and the STIB activity was long-last, persisting for up to 3-4 hours following the last train. 2. Superfusions of Glu in concentrations of 1, 2, and 3 mmol/L in hippocampal slices produced inhibition of STIB in CA3, but the first antidromic PS was unaffected, suggesting the site of inhibition is postsynaptic. The mechanisms related to the genesis of STIB and its inhibition by superfusion of Glu were discussed.     

大鼠海马神经元癫(癎)模型中神经元凋亡及caspase 3基因的表达

目的:探讨体外培养大鼠海马神经元癫(癎)模型中神经元丢失的分子机制.方法:制备大鼠海马神经元癫(癎)样放电细胞模型,以膜片钳全细胞记录对模型放电进行检测,采用RT-PCR法克隆大鼠全长caspase 3 cDNA,采用原位杂交和流式细胞术检测模型中caspase 3基因表达和神经元凋亡情况.结果:成功克隆获得大鼠全长caspase 3 cDNA,其序列与文献报道一致.模型组海马神经元癫(癎)样放电3 h后caspase 3基因表达开始增多,6 h后凋亡细胞开始明显增加,两者均较对照组明显增加.结论:癫(癎)样放电可能启动神经元caspase 3表达,继而介导神经元凋亡.     

大鼠海马神经元癫(癎)模型中神经元凋亡及caspase 3基因的表达

目的：探讨体外培养大鼠海马神经元癫痫模型中神经元丢失的分子机制。方法：制备大鼠海马神经元癫痫样放电细胞模型,以膜片钳全细胞记录对模型放电进行检测,采用RT-PCR法克隆大鼠全长caspase3 cDNA,采用原位杂交和流武细胞术检测模型中caspase3基因表达和神经元凋亡情况。结果：成功克隆获得大鼠全长caspase3 cDNA,其序列与文献报道一致。模型组海马神经元癫痫样放电3h后caspase 3基因表达开始增多,6h后凋亡细胞开始明显增加,两者均较对照组明显增加。结论：癫痫样放电可能启动神经元caspase3表达,继而介导神经元凋亡。     

匹罗卡品诱导颞叶癫大鼠海马CA1区代谢型谷氨酸受体1、4、7的表达变化

目的 观察匹罗卡品诱导的颞叶癫(癎)大鼠海马CA1区代谢型谷氨酸受体(mGluR)1、4、7的表达变化.方法 56只SD大鼠随机分为对照组、癫(癎)状态(SE)2 h组、SE 12 h组、SE 24 h组、SE 72 h组、SE 7 d组和SE 14 d组,每组8只.SE各组腹腔注射325 mg/kg匹罗卡品建立癫(癎)模型,对照组注射等量生理盐水.采用RT-PCR和免疫组织化学方法检测各组大鼠海马CA1 区mGluR1、4、7 mRNA和mGluR1蛋白的表达.结果 RT-PCR检测显示,SE 24 h组mGluR1 mRNA表达较对照组显著降低,而SE 7 d组则显著增加(P<0.05);SE各组mGluR4 mRNA表达与对照组差异无统计学意义(P>0.05);SE 12 h组、SE 24 h组、SE 72 h组和sE 14 d组mGluR7 mRNA表达较对照组显著降低(P<0.05).免疫组织化学检测显示,mGluRl蛋白主要存在于细胞膜上,其表达变化规律与mGluR1 mRNA一致.结论 mGluR1、4、7可能参与难治性癫(癎)的发病过程.     

大鼠癫癎持续状态后海马神经元凋亡的研究

目的：通过美解眠诱导鼠癫癎持续状态后观察海马神经元的细胞凋亡现象。　材料和方法：给ＳＤ大鼠腹腔注射美解眠（２０ ｍ ｇ／ｋｇ）,２４ ｈ 后在光镜和电镜下观察大鼠海马神经元的形态学改变,并以ＤＮＡ 末端标记法（ＴＵＮＥＬ）检测海马神经元的凋亡。　结果：ＳＤ大鼠注射美解眠后出现典型的癫癎发作,光镜和电镜下可观察到海马神经元有典型的细胞凋亡现象,包括细胞体皱缩、胞质浓缩、染色质凝聚成块状、有边集现象, 同时有少量凋亡小体形成。ＴＵＮＥＬ检测发现海马结构内可见ＴＵＮＥＬ染色阳性细胞,其分布不均匀,有区域性差异,以ＣＡ３ 区最为多见。致癎组海马ＣＡ３ 区ＴＵＮＥＬ阳性细胞数的平均百分率（７５．１４％ ）与对照组（９．４％ ）相比有极显著性差异（Ｐ＜ ０．０１）。　结论：癫癎发作可诱导大鼠海马神经元发生凋亡。     

马桑内酯在大鼠离体海马脑片上引起的癫痫样放电活动

Coriaria lactone (CL) is an active constituent of a medicinal herb used as psychosolytic in traditional Chinese medicine. Recently it has been found that CL appears to act as a convulsant agent. Subsequently both acute and chronic epilepsy models caused by CL have been established successfully. In order to observe further the epileptogenic effects of CL in vitro, the hippocampal slice technique was used in experiments with 36 slices. The results are as follows: Addition of CL to the perfusion bathing the slices of rat hippocampus increased evoked-response in body layer of CA1 in a dose-dependent manner, and induced epileptiform burst. CL augmented population spike of CA1 pyramidal neurons triggered by either orthodromic stimulus (through synapses) or antidromic stimulus (direct effect on the axon of CA1 pyramidal cells) without alteration of presynaptic fiber volley and field-EPSP, and there was no significant change in latency of burst. Finally GABA had a weak effect on CL-induced epileptiform activity. These observations suggest that CL probably has a direct effect on the soma of pyramidal neurons, CL-induced epileptiform burst may be a result of altering the innate capacity of burst and increasing the intrinsic excitability of pyramidal cell membranes.     

串刺激诱发大鼠海马脑片痫样放电模型的建立及谷氨酸对它的影响

作者用串脉冲(60Hz,波宽100μS,串长2S,2～3倍引起最大反应的刺激强度)刺激大鼠离体海马脑片CA3区辐射层,记录CA3区锥体细胞层产生的场电位,在国内首次成功地建立了串刺激诱发的暴发放电(STIB)模型——一种有价值的新型离体海马脑片痫样放电模型;并观察了L-谷氨酸(Glu)对该模型的影响;讨论了STIB的产生和Glu对其抑制的有关机理。     

海人酸致(癎)大鼠海马及脑脊液内氨基酸的变化

目的:研究海人酸(KA)致(癎)大鼠模型海马及脑脊液内谷氨酸(Glu)和天冬氨酸(Asp)的变化,方法:SD大鼠随机分成二组,KA组:KA(2 μg/kg)海马杏仁核注射后分为6 h、1、3、7天组,每组8只;9 g/L盐水对照组(n=8).采用高效液相色谱(HPLC)法测定大鼠海马组织及脑脊液中兴奋性氨基酸(Glu和Asp)水平变化.结果:海马中Glu、Asp的水平在观察的24 h内随时间推移呈逐步增长趋势,但与对照组相比统计学上无显著性差异,3天后仅Glu较对照组明显上升.脑脊液中Glu、Asp的水平在致(癎)后6 h便较对照组有显著差异,且7天内保持上升趋势.结论:癫(癎)大鼠脑脊液中兴奋性氨基酸水平变化较海马组织内早.其中Glu更具有代表性.     

DHPG和BMI诱导的癫痫样放电模型的建立及比较

目的在离体大鼠海马脑片上,通过激活Ⅰ型代谢型谷氨酸受体（mGluR）或阻断γ-氨基丁酸（GABA）受体,诱导癫痫样放电。方法将离体大鼠海马脑片暴露于Ⅰ型mGluR特异性激动剂对羟基苯甘氨酸（DHPG）或GABA．受体阻断剂荷包牡丹碱（BMI）,利用全细胞记录模式记录海马CA3区域单个锥体细胞的电活动。结果暴露于DHPG或BMI中的海马脑片CA3区域的锥体细胞均产生癫痫样放电,且两者的放电频率比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论在离体情况下,破坏神经兴奋性和抑制性系统的平衡可以诱导产生癫痫样放电活动。     

p38MAPK信号通路在癫痫大鼠海马结构中的激活

目的 探讨p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)在癫痫持续状态(SE)大鼠海马结构的活性变化规律及其意义.方法 建立氯化锂-匹罗卡品(LiCL-PILO)癫痫持续状态模型,在不同时间点用免疫组化法检测海马结构p38的磷酸化状态(P-p38),并观察组织病理学改变.结果 SE 30min P-p38在各区活化程度均增高,6h后P-p38表达减弱.在所有时间点,齿状回免疫组化阳性的神经元均显著高于CA1区和CA3区,海马结构各区可见到许多神经元发生变性和坏死.结论 p38MAPK信号转导途径在匹罗卡品致痫过程中被激活,并可能参与了CA1区、CA3区癫痫后神经神经元易损性的形成.     

谷氨酸钠和地塞米松对大鼠神经细胞代谢性谷氨酸受体1免疫反应性的影响

为了探讨糖皮质激素的抗痫效应，分别用成年大鼠以及培养的新生大鼠的神经细胞，在经谷氨酸钠和地塞米松处理后，进行免疫细胞化学染色。观察其代谢性谷氨酸受体1（mGLUR1)免疫反应性的变化，并对实验结果进行图像分析。结果发现：经谷氨酸钠致痫处理后，大鼠海马CA1区以及培养的神经细胞的mGLUR1免疫反应阳性细胞均较正常对照组增多，平均光密度值增加；再经地塞米松处理后，mGLUR1免疫反应阳性细胞则较致痫组减少，平均光密度值减少。上述改变经统计学分析均有显著性差异。结果提示：地塞米松可以抑制谷氨酸钠诱发的癫痫发作，其作用途径之一可能是通过抑制mGLUR1的表达实现的。     

Microarray analysis of genes differentally expressed in placentas of pregnancy-induced hypertension patients

Objective: To uncover new clue for the research of the etiology of pregnancy-induced hypertension (PIH)by testing the gene expression difference between preeclamptic placentas and normal ones. Methods: mRNA level of 4PIH placentas were examined using 4000 feature cDNA microarray in comparison with the pooled control consisting oftotal RNA from 4 cases of PIH placentas after the control cDNA and experimental cDNA were labeled by cy3 and cy5respectively. Results: Fifty-eight to 131 genes were found down or up-regulated in 4 runs of hybridization. Among the     

匹罗卡品诱导颞叶癫大鼠海马CA1区代谢型谷氨酸受体1、4、7的表达变化

目的 观察匹罗卡品诱导的颞叶癫（癎）大鼠海马CA1区代谢型谷氨酸受体（mGluR）1、4、7的表达变化.方法 56只SD大鼠随机分为对照组、癫（癎）状态（SE）2 h组、SE 12 h组、SE 24 h组、SE 72 h组、SE 7 d组和SE 14 d组,每组8只.SE各组腹腔注射325 mg/kg匹罗卡品建立癫（癎）模型,对照组注射等量生理盐水.采用RT-PCR和免疫组织化学方法检测各组大鼠海马CA1 区mGluR1、4、7 mRNA和mGluR1蛋白的表达.结果 RT-PCR检测显示,SE 24 h组mGluR1 mRNA表达较对照组显著降低,而SE 7 d组则显著增加（P〈0.05）;SE各组mGluR4 mRNA表达与对照组差异无统计学意义（P〉0.05）;SE 12 h组、SE 24 h组、SE 72 h组和sE 14 d组mGluR7 mRNA表达较对照组显著降低（P〈0.05）.免疫组织化学检测显示,mGluRl蛋白主要存在于细胞膜上,其表达变化规律与mGluR1 mRNA一致.结论 mGluR1、4、7可能参与难治性癫（癎）的发病过程.     

Coexistence of Immune-Neuro-Endocrine Substances in the Rat Central Neurons

Ｃｌｏｓｅａｎｄｃｏｍｐｌｉｃａｔｅｄｃｏｒｅｌａｔｉｏｎｓａｍｏｎｇｔｈｒｅｅｍａｊｏｒｍｏｄｕｌａｔｏｒｙｓｙｓｔｅｍｓ，ｉｍｍｕｎｅ，ｎｅｒｖｏｕｓａｎｄｅｎｄｏｃｒｉｎｅｓｙｓｔｅｍｓ，ｈａｖｅｂｅｅｎｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｂｙｍｏｒｅａｎｄｍ...     

介导大鼠海马CA1区癫痫样活动的离子型谷氨酸受体的变化

目的 观察离子型谷氨酸受体在大鼠海马CA1区癫痫样活动中的变化,为进一步探讨癫痫的发生机制提供依据.方法 正常大鼠海马脑片灌流促离子型γ-氨基丁酸受体(GABAA受体)拮抗剂bicuculline (30 μmol/L) 引起癫痫样活动并于右侧海马CA3区注射海人藻酸(KA)建立颞叶癫痫(TLE)大鼠模型,应用离体脑片...     

红藻氨酸诱导大鼠癫痫发作时海马mGluR1mRNA表达的动态变化

目的：探讨红藻氨酸（ＫＡ）诱导大鼠癫痫发作时海马ｍＧｌｕＲ１ ｍＲＮＡ表达变化的时空特征．方法：采用地高辛标记的ｃＤＮＡ探针原位杂交法检测海马ｍＧｌｕＲ１ ｍＲＮＡ表达,通过图像分析系统进行定量处理．同时观察大鼠行为学及脑电变化．结果：ＫＡ注射后大鼠均出现严重边缘性惊厥,脑电图表现为持续性癫痫样放电．海马ｍＧｌｕＲ１ ｍＲＮＡ表达在注射ＫＡ后１ｈ开始增高,４ｈ￣８ｈ达高峰,之后逐渐回落,７２ｈ降至