新蛋白质合成介导知母活性成分对M2受体稳定性的调节作用

目的 探讨知母活性成分ZMS提高CHOm2细胞毒蕈碱样乙酰胆碱2型受体 (M2受体) mRNA表达的机制.方法 体外培养至80% ～90%融合的CHOm2细胞分为ZMS 1组(单纯添加1×10-5 mol/L ZMS作用24 h)、ZMS 2组(添加1×10-5 mol/L ZMS作用24 h后加入1 μg/mL环己酰亚胺作用12 h)、ZMS 3组(加入1 μg/mL 环己酰亚胺预处理4 h后加入1×10-5 mol/L ZMS作用24 h),以上各组分别设立对照组(以等体积DMSO替代ZMS,其他处理与相应ZMS组相同).各组细胞培养基中均加入放线菌素D抑制mRNA合成,于不同时间点收集CHOm2细胞,Real-time PCR检测M2受体mRNA相对表达量并计算半衰期.结果 与相应对照组比较,ZMS 1组和ZMS 2组CHOm2细胞M2受体mRNA的半衰期明显延长,分别为(4.75±0.54)h vs(2.13±0.23)h和(5.43±1.13)h vs (2.46±0.09) h(均P<0.05);添加1 μg/mL 环己酰亚胺预处理的ZMS 3组CHOm2细胞M2受体mRNA半衰期的(3.06±0.23)h与其相应对照组的(3.00±0.20)h比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 ZMS提高M2受体mRNA的稳定性需要有新蛋白质合成的参与.     

知母皂苷元对HEK293sw细胞APP和BACE1的影响

目的 探讨知母活性成分知母皂苷元(ZMS)对HEK293sw细胞淀粉样前体蛋白(APP)和β-位点APP切割酶1(BACE1)的影响.方法 常规培养HEK293sw细胞,加入不同浓度ZMS预处理24 h后,换为无血清培养,继续处理48 h后观察ZMS的作用.Western blotting和RT-PCR技术测定APP和主要β-分泌酶BACE1的表达;荧光分析法测定BACE1活力.结果有效终浓度1 μmol/L和10 μmol/L的ZMS对BACE1的mRNA和蛋白表达均有显著降低作用,但对APP的mRNA和蛋白表达无明显影响.荧光分析结果显示,10 μmol/L ZMS能显著降低BACE1活力.结论 ZMS显著降低HEK293sw细胞主要β-分泌酶BACE1的表达及活力,而对APP的表达无明显影响.     

知母皂苷元对HEK293sw细胞APP和BACE1的影响

目的 探讨知母活性成分知母皂苷元(ZMS)对HEK293sw细胞淀粉样前体蛋白(APP)和β-位点APP切割酶1(BACE1)的影响.方法 常规培养HEK293sw细胞,加入不同浓度ZMS预处理24 h后,换为无血清培养,继续处理48 h后观察ZMS的作用.Western blotting和RT-PCR技术测定APP和主要β-分泌酶BACE1的表达;荧光分析法测定BACE1活力.结果有效终浓度1 μmol/L和10 μmol/L的ZMS对BACE1的mRNA和蛋白表达均有显著降低作用,但对APP的mRNA和蛋白表达无明显影响.荧光分析结果显示,10 μmol/L ZMS能显著降低BACE1活力.结论 ZMS显著降低HEK293sw细胞主要β-分泌酶BACE1的表达及活力,而对APP的表达无明显影响.     

知母活性成分ZDY101调节M2受体mRNA稳定性的研究

目的探讨知母活性成分ZDY101对M2受体mRNA稳定性的调节。方法转基因细胞CHOm2在含ZDY101或溶媒的培养基中培养不同时间后，实时荧光定量PCR检测M2受体的mRNA水平；用放线菌素D抑制基因转录，测定M2受体mRNA的时相变化，求出其mRNA的半衰期，比较ZDY101组和溶媒组的差别。结果ZDY101作用一定时问后M2受体的mRNA水平高于对照组；ZDY101作用24h以上，ZDY101组M2受体的mRNA半衰期明显高于对照组。结论ZDY101能提高M2受体mRNA的稳定性，使细胞M2受体的mRNA含量升高，是ZDY101提高M2受体密度的重要机制之一。     

异丙酚预处理对HK-2细胞缺氧/复氧损伤后水通道蛋白1表达的影响

目的 观察异丙酚预处理对HK-2细胞缺氧/复氧损伤后水通道蛋白(AQP-1)表达的影响.方法 将培养的HK-2细胞随机分为4组:对照组(A组):细胞未经任何处理;氯化钴(CoCI2)组(B组):培养孔中加入300 μmol/L的CoCl2处理4 h,然后更换正常的培养基培养24 h,之后更换无血清的培养基培养;脂肪乳剂组(C组):培养孔中加入10%脂肪乳剂90 μl预处理1 h,余同B组;异丙酚组(D组):培养孔中加入用DMEM稀释至终浓度25 μmol/L的异丙酚预处理1 h,余同B组.MTT法测定细胞增殖.RT-PCR技术检测AQP-1和bcl-2 mRNA的表达.结果 经过25 μmol/L的异丙酚预处理1 h后,HK-2细胞的增殖明显增高(P<0.01),AQP-1 mRNA的表达明显减少(P<0.01),bcl-2 mRNA的表达明显增加(P<0.01).结论 异丙酚预处理通过调节AOP-1和bcl-2的表达从而减轻HK-2细胞缺氧/复氧后的损伤.     

知母活性成分ZDY101调节M2受体mRNA稳定性的研究

目的探讨知母活性成分ZDY101对M2 受体mRNA 稳定性的调节.方法转基因细胞CHOm2在含ZDY101或溶媒的培养基中培养不同时间后,实时荧光定量PCR检测M2受体的mRNA水平;用放线菌素D抑制基因转录,测定M2受体mRNA的时相变化, 求出其mRNA的半衰期, 比较ZDY101组和溶媒组的差别.结果 ZDY101作用一定时间后M2 受体的mRNA水平高于对照组; ZDY101作用24 h以上,ZDY101组M2受体的 mRNA半衰期明显高于对照组.结论 ZDY101能提高M2受体mRNA的稳定性, 使细胞M2受体的mRNA含量升高, 是ZDY101提高M2受体密度的重要机制之一.     

EP2受体介导的前列腺素E2影响胆管细胞癌细胞HuCCT1细胞间黏附因子-1表达和侵袭的研究

目的:探讨前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)通过EP2受体影响人胆管细胞癌细胞HuCCT1细胞间黏附因子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的表达及癌细胞的侵袭能力?方法:用PGE2?EP1~4四种受体激动剂(17-phenyltrinor Prostaglandin E2?Butaprost?Sulprostone和Prostaglandin E1 Alcohol)?EP2受体抑制剂AH6809?腺苷酸环化酶(AC)抑制剂SQ22536和蛋白激酶A(PKA)抑制剂H89处理HuCCT1细胞,通过Western blot?划痕试验等方法检测ICAM-1的蛋白表达水平以及HuCCT1细胞侵袭能力的变化?结果:PGE2明显提高HuCCT1细胞ICAM-1蛋白的表达水平,5 μmol/L PGE2处理HuCCT1细胞24 h后,ICAM-1蛋白表达水平与对照组相比上升了66.17%(P < 0.05),并呈浓度依赖性和时间依赖性;5 μmol/L PGE2处理HuCCT1细胞24 h后,HuCCT1细胞的侵袭能力较对照组增强了43.29%(P < 0.01)?10 μmol/L EP1~4受体激动剂处理HuCCT1细胞24 h后,ICAM-1蛋白的表达水平与对照组相比明显增高,其中EP2受体激动剂上升了257.88%(P < 0.05),10 μmol/L EP2受体激动剂处理HuCCT1细胞24 h后,HuCCT1细胞的侵袭能力较对照组增强了56.99%(P < 0.01);10 μmol/L EP2受体抑制剂AH6809处理后ICAM-1蛋白的表达水平与PGE2组相比下降了49.14%(P < 0.05),细胞侵袭能力下降了52.06%(P < 0.01)?25 μmol/L AC抑制剂SQ22536?10 μmol/L PKA抑制剂H89处理HuCCT1细胞后,ICAM-1蛋白的表达水平较EP2受体激动剂处理组分别下降了72.87%(P < 0.05)和80.78%(P < 0.05)?结论:PGE2可通过EP2受体激活cAMP-PKA信号转导通路上调HuCCT1细胞ICAM-1的表达,从而促进HuCCT1细胞的侵袭转移?     

邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯对小鼠精母细胞JAZF1mRNA及孤核受体TR4蛋白表达的影响

目的 研究邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)对小鼠精母(GC-2 spd)细胞JAZF1 mRNA及TR4蛋白表达的影响.方法 将GC-2 spd细胞置于含终浓度为0(溶剂对照)、50、100、200 μmol/L DEHP的培养液培养24 h.采用Real-time PCR方法检测细胞JAZF1 mRNA的相对表达水平,采用Western blot检测TR4蛋白表达水平.结果 与对照组比较,50、100、200 μmol/L DEHP染毒组GC-2 spd细胞的JAZF1 mRNA表达升高,而200 μmol/L DEHP染毒组GC-2 spd细胞的TR4 蛋白表达下降,差异有统计学意义(P<0.05).结论 DEHP对生精细胞具有生殖毒性作用,可能通过JAZF1调控孤核受体TR4的表达从而影响雄性生殖功能.     

全反式维甲酸对HL-60细胞核干细胞因子mRNA表达的影响

目的:检测全反式维甲酸(ATRA)诱导后HL-60细胞核干细胞因子(NS)mRNA表达的变化,探讨NS mRNA表达与细胞分化之间的关系.方法:从NS基因的3个变异体中筛选出共同序列设计特异性引物,用终浓度为0.1 μmol/L、1 μmol/L、10 μmol/L的ATRA诱导分化HL-60白血病细胞48 h,以不加ATRA的HL-60细胞作为对照,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测HL-60细胞NS mRNA表达水平的变化.结果:ATRA诱导HL-60细胞分化后NS mRNA表达均有所降低,0.1 μmol/L、1 μmol/L、10 μmol/L浓度下NS mRNA表达量分别下降3.72%±0.84%、58.70%±4.98%和61.60%±2.26%.其中1 μmol/L和10 μmol/L组与对照组和0.1 μmol/L组比较,差异均有统计学意义(P均＜0.05).结论:NS可能与白血病细胞分化有关,参与调控细胞分化过程.     

槲皮素对宫颈癌细胞C33A增殖和凋亡的影响

目的 观察槲皮素对人宫颈癌细胞C33A增殖和凋亡的影响,初步探讨其相关作用机制.方法 用不同浓度槲皮素(空白对照、20、40、80 μmol/L),顺铂(空白对照、5、10、15、20 μg/mL)以及两者联合(槲皮素40 μmol/L+顺铂10 μg/mL)分别作用于C33A细胞24 h和48 h后,噻唑蓝(MTT法)检测细胞活力的变化;流式细胞术检测槲皮素对C33A细胞周期的影响;Western blot检测槲皮素对C33A细胞Cyclin D1、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达的影响.结果 MTT结果显示,经过槲皮素处理24 h后,各组细胞活力分别为86.92 ±3.953)%(20 μmol/L组)、(66.54 ±3.932)%(40 μmol/L组)和(52.21 ±2.970)%(80 μmol/L组),均低于空白对照组的(98.35 ±1.230)%;经过槲皮素处理48 h后,各组细胞活力分别为(65.19 ±7.071)%(20 μmol/L组)、(47.04 ±8.881)%(40 μmol/L组)和(29.71 ±6.505)%(80 μmol/L组),均低于空白对照组的(96.97 ±1.788)%.;此外,槲皮素40 μmol/L+顺铂10 μg/mL联合作用于C33A细胞24h后,细胞活力下降为(31.12 ±2.835)%;48 h后,细胞活力下降为(17.86 ± 3.182)%,同空白对照组相比均出现了明显的下降,(31.12 ±2.835)%;48 h后,细胞活力下降为(17.86 ±3.182)%(P<0.05).细胞周期检测结果显示,槲皮素可增加C33A细胞G0/G1期数量,减少S期数量.Western blot 结果显示,槲皮素可下调C33A细胞Cyclin D1蛋白的表达,还可上调Caspase-3和Caspase-9蛋白的表达.结论 槲皮素通过下调Cyclin D1蛋白的表达可以抑制C33A细胞的活力和增殖,槲皮素通过上调Caspase-3和Caspase-9蛋白的表达,可以诱导C33A细胞的凋亡.     

生长抑素对猕猴小肠环形肌收缩的影响及机制探讨

目的 探讨生长抑素(SST)对猕猴小肠环形肌自主收缩的直接作用及分子靶点.方法 通过开腹手术获得成年猕猴的小肠环形肌条,应用张力换能器将信号输入生理记录仪,记录小肠环形肌条在不同SST浓度作用时的自主收缩幅度和频率;通过免疫组织化学方法 观察SST在小肠组织内的分布,利用原位杂交检测SST受体2(SSTR2)的表达.结果 SST低浓度组(1×10~(-7) mol/L)小肠环形肌收缩频率[(8.33±1.53)次/min]较对照组明显增加[(2.67±0.58次/min),P＜0.05].在1×10~(-7) mol/L～1×10~(-4) mol/L SST浓度范围内,小肠环形肌收缩频率呈剂量依赖性提高(r=0.984,P＜0.05);小肠环形肌收缩幅度仅在SST浓度(1×10~(-7) mol/L～1×10~(-5) mol/L)范围内呈剂量相关性增加(r=0.991,P＜0.05).在猕猴小肠纵行和环行肌间可见散在分布的SST及SSTR2的阳性神经丛,小肠平滑肌细胞上未见SSTR2.结论 SST经小肠平滑肌间神经丛上的SSTR2介导,发挥对小肠环形肌自主收缩的兴奋作用.     

高浓度葡萄糖条件下罗格列酮对NIT-1细胞FOXO1、TSC2基因表达及细胞分泌功能的影响

目的：研究罗格列酮在不同浓度葡萄糖条件下,对胰岛β细胞增殖凋亡与胰岛素分泌以及叉头转录因子-1(FOXO1)和结节性硬化症-2(TSC2)表达的影响。方法： 将 NIT-1细胞按每孔5×10个放置于24孔细胞培养板,培养48 h后随机分为各处理组：5.6、7.8、11.1、16.7、22.2 和27.6 mmol/L葡萄糖组,继续培养24 h后再分别施加1×10^-5mol/L罗格列酮,分别于干预24和48 h后取细胞培养上清液,采用放射免疫法检测胰岛素水平和免疫荧光法检测细胞增殖情况,RT-PCR半定量法检测FOXO1和TSC2 mRNA表达水平。结果：①1×10^-6～1×10^-5 mol/L罗格列酮可以分别在不同浓度葡萄糖培养条件下使胰岛NIT-1细胞增殖（P<0.05）,且这种变化趋势随剂量的增加而增加（即1×10^-5 mol/L罗格列酮组＞1×10^-6 mol/L罗格列酮组＞1×10^-7 mol/L罗格列酮组）。1×10^-5 mol/L的罗格列酮干预后,可见细胞凋亡百分率增加趋势随着葡萄糖浓度不断升高;②在同一浓度罗格列酮作用下,当葡萄糖浓度为11.1 mmol/L时,胰岛素分泌水平最高,高于其他各组（均P<0.05）,随着葡萄糖浓度增加,胰岛素分泌量逐渐下降（11.1 mmol/L葡萄糖组>16.7 mmol/L葡萄糖组>22.5 mmol/L葡萄糖组>27.6 mmol/L葡萄糖组）,而葡萄糖为5.6 mmol/L时,胰岛素分泌量最低;③ 在1×10^-5 mol/L罗格列酮干预后,FOXO1和TSC-2 mRNA的表达水平均较未干预组明显下降,且呈现出5.6 mmol/L组＜11.1 mmol/L组＜16.7 mmol/L组＜22.5 mmol/L组＜27.6 mmol/L组的变化趋势,而且葡萄糖浓度＞16.7 mmol/L的各组均较前面小剂量葡萄糖组（≤11.1 mmol/L各组）表达明显。结论：罗格列酮可以通过直接影响胰岛β细胞内FOXO1和TSC2表达促进胰岛β细胞的增殖及影响细胞胰岛素分泌功能,提示通过调控FOXO1和TSC2表达,可以直接影响胰岛β细胞的生物学功能,如分泌功能、细胞的增殖与凋亡以及改善胰岛素抵抗状况。     

Study of vascular smooth muscle cell calcification induced by hyperphosphate and intervented by phosphonoformic acid

Objective:To evaluate the effects of different concentrations of phosphate on calcium deposition and osteocalcin level in cultured bovine aortic smooth muscle cell,investigate the mechanism of hyperphosphatemia to evoke calcification of vascular smooth muscle cell and observe the effects of phosphonoformic acid(PFA)in different concentrations on vascular calcification.Methods:The bovine aortic smooth muscle cells(BASMC)were cultured.Calcium deposition and the expression of osteocalcin of BASMC in different concentrations of phosphate(1.5mmol/Land2.0mmol/L)and PFA were determined by o-cresolphthalein complexone and radioimmunity methods,respectively.Osteocalcin mRNA expressions were determined by RT-PCR.Results:After six or nine days of BASMC cultured,the calcium deposition in Pi 2.0 mmol/L group was more than that in Pi 1.5 mmol/L group[(77.187±11.692)μg/(mg·protein)vs(25.768±1.750)μg/(mg·protein),P＜0.01 and(125.399±16.677)μg/(mg·protein)vs(29.046±2.635)μg/(mg·protein),P＜0.01 respectively].The calcium deposition was dependent on time and dosage of phosphate treatment.After 72 h culture the osteocalcin in Pi2.0 mmol/L group was more than that in Pi1.5 mmol/L group[in supernatant,(1.503±10-2±2.601×10-3)ng/(μg·protein)vs(2.981×10-3±8.382×10-4)ng/(μg·protein),P＜0.001],the same was found in osteocalcin mRNA expression[OC/GAPDH,(1.906±0.132)vs(0.748±0.037),P＜0.001].Compared to Pi 1.5mmol/L group,bovine smooth muscle cells(BSMC)cultured in media containing Pi 2.0 mmol/L phosphate levels increased calcium deposition[On day 6,(77.187±11.692)μg/(mg·protein)vs (25.768±1.750)μg/(mg·protein),P＜0.001].Elevated phosphate treamaent of BSMCs also enhanced the expression of the osteoblastic differentiation marker osteocalcin[On day 3,Pi 2.0 mmol/L group vs Pi 1.5mmol/L group,(1.503×10-2±2.601×10-3)ng/(μg·protein)vs(2.981×10-3±8.382×10-4)ng/(ug·protein),P＜0.001].PFA decreased ciacium deposition and osteocalcin expression statistically[Pi 2.0 mmol/L PFA1.0 mmol/L group vs Pi 2.0 mmol/L group,ciacium deposition,(37.729±5.899)μg/(mg·protein)vs(77.187±11.692)μg/(mg·protein),P＜0.001];Osteocalcin in supernatant,(4.529±10-3±1.250×10-3)ng/(μg·protein)vs(1.503×10-2±2.601×10-3)ng/(μg·protein),P＜0.001;osteocalcin mRNA expression,OC/GAPDH,(0.642±0.092)vs(1.89±0.165),P＜0.01].Conclusion:Hyperphosphate may directly promote calcium deposition and the osteocalcin expression of BASMCs.It may be a new explanation for the phenomenon of vascular calcification in hyperphosphatemic conditions.Hyperphosphatemia is an independent factor to stimulate vascular calcification.PFA can inhibit calcium deposition and osteocalcin expression induced by elevated phosphate.PFA may be a new medicine to treat vascular calcification induced by elevated phosphate.     

血清降钙素原检测对肝硬化合并肝肾综合征患者的诊断价值

目的：探讨肝硬化合并肝肾综合征患者血清降钙素原(PCT)检测的临床价值。方法选择2010年1月至2015年1月在我院综合科就诊的肝硬化患者106例,按患者是否合并肝肾综合征将其分为合并组32例和未合并组74例。另选取40例健康体检者作为对照组,检测并比较三组受检者的血清PCT水平、总胆汁酸(TBA)、胱抑素C (CysC)、C反应蛋白(CRP)、以及白细胞计数(WBC),计算三组受检者的24 h内生肌酐清除率,分析各生化指标与血清PCT的相关性。结果合并组、未合并组和对照组受检者的PCT [(4.02±1.20)μg/L vs (0.33±0.02)μg/L vs (0.13±0.03)μg/L]、WBC [(6.03±1.03)×109/L vs (3.94±1.82)×109/L vs (5.51±1.29)×109/L]、CRP [(6.24±1.92) g/L vs (5.73±1.24) g/L vs (1.60±0.39) g/L]、Cys-C [(2.34±0.32) mg/L vs (0.79±0.11) mg/Lvs (0.67±0.20) mg/L]、TBA水平[(33.29±3.94)μmol/L vs (23.39±3.04)μmol/L vs (20.39±2.02)μmol/L]比较,合并组上述指标均高于未合并组和对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05);合并组的24 h-Ccr水平为(62.48±6.02) mL/min,明显低于未合并组的(83.12±8.22) mL/min和对照组的(90.38±8.34) mL/min,差异均具有统计学意义(P<0.05);血清PCT与24 h-Ccr呈负相关(r未合并组=-0.278,r合并组=-0.600),与患者的CRP呈正相关(r未合并组=0.244,r合并组=0.605),与患者的Cys-C水平呈正相关(r未合并组=0.247,r合并组=0.530)。结论肝硬化患者的血清PCT升高,则其患有合并肝肾综合征的概率较高,血清PCT在诊断肝硬化合并肝肾综合征中具有较高的诊断价值。     

心钠素对高血压大鼠动脉平滑肌细胞离子泵活性和基因表达的影响

目的 探讨心钠素(ANP)对自发性高血压大鼠(SHR)动脉平滑肌细胞膜(ASMC)Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性及Na+,K+-ATP酶α,亚单位、Ca+-ATP)酶亚型1(PMCA1)mRNA表达的影响.方法 对SHR大鼠,予不同浓度ANP和血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)干预,通过放射免疫、生化酶学和逆转录-聚合酶链反应等方法,检测ASMC的ANP、AngⅡ含量,ATP酶活性及其mRNA表达变化并设WKY大鼠为对照.结果 SHR大鼠ANP含量比WKY大鼠下降[(7.3±2.4)pg·10-6比(19.3±3.3) Pg·10-6,P＜0.01],Ang Ⅱ含量增加[(57±4)pg·10-6比(44±4) pg·10-6,P＜0.01],Na+,K+-ATP酶、Ca2+-A11)酶活性及Na+,K+-ATP酶α1亚单位、PMCA1 mRNA表达均显著降低[Na+,K+-ATP:(4.3±0.8) μmol·h-1·mg-1比(5.3±1.0) μmol·h-1·mg-1,Ca2+-ATP酶:(3.2±0.7)μmol·h-1·mg-1比(4.5±0.7) μmol·h-1·mg-1,α1亚单位:0.524±0.025比0.704±0.116,PMCA1:0.193±0.030比0.547±0.045](P＜0.05～P＜0.01).ANP可增加SHR大鼠Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性及Na+,K+-ATP酶α1,亚单位及PMCA1 mRNA表达(均P＜0.01),Ang Ⅱ则抑制Ca2+-ATP酶活性和PMCA1 mRNA表达(P＜0.05～P＜0.01),仅1×10-7 mol/L AngⅡ抑制Na+,K+-ATP酶活性及α1亚单位mRNA表达,ANP能拮抗AngⅡ对两种ATP酶活性及其mRNA表达的效应.ANP也能拮抗AngⅡ对WKY大鼠Ca2+-ATP酶活性及PMCA1mRNA表达的效应,对Na+,K+-ATP酶活性及α1亚单位mRNA表达无影响(P＞0.05).结论 高血压大鼠ASMC两种ATP酶活性和基因表达下降与局部ANP和AngⅡ分泌异常有关,ANP能拮抗AngⅡ对两种ATP酶活性和基因表达的效应.     

转化生长因子、碱性成纤维细胞生长因子与大鼠膀胱出口梗阻后逼尿肌收缩功能障碍的关系

目的 探讨转化生长因子β1(TGFβ1)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)与大鼠膀胱出口梗阻(BOO)后逼尿肌收缩功能障碍的关系.方法 建立Wistar大鼠BOO模型(BOO 2周组11只;BOO 6周组10只),假手术组(8只)作为对照,测定离体逼尿肌肌条M受体激动剂刺激下收缩力,RT-PCR方法测定逼尿肌中TGFB1 mRNA、bFGF mRNA的表达,ELISA测定尿液中TGFβ1、bFGF 的水平.结果 在1×10-4、1×10-3 mmo/L氯化氨基甲酰胆碱(Carbachol)浓度下BOO 2周组的最大逼尿肌收缩力[(0.96±0.11)、(1.98±0.21)g]大于对照组[(0.85±0.18)、(1.82 ±0.19)g,均P＜0.05];大鼠在1×10-5、1×10-4、1×10-3和1 × 10-2 mmol/L Carbachol浓度下BOO 6周组的最大逼尿肌收缩力[(0.19 ±0.02)、(0.65 ±0.06)、(1.12 ±0.08)和(1.40 ±0.19)g]均小于BOO 2周组[(0.24±0.03)、(0.96 ±0.11)、(1.98 ±0.21)和(2.16 ±0.21)g,均P＜0.05]和对照组[(0.23 ±0.04)、(0.85 ±0.18)、(1.82 ±0.19)和(2.12 ±0.26)g,均P＜0.05].TGFβ1 mRNA在对照组、BOO 2周组、BOO 6周组逼尿肌的表达分别为0.32 ±0.01、0.34 ±0.10和0.72 ±0.21,后两组之间差异有统计学意义(P＜0.01);bFGF mRNA表达分别为0.10±0.05、0.21±0.07和0.38 ± 0.13,组间两两比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05).离体逼尿肌收缩力与其TGFβ1 mRNA、bFGF mRNA表达水平呈负相关(均P＜0.05).BOO 6周组尿中TGFβ1表达[(606±216)μg/mol肌酐]明显高于BOO 2周组[(131 ±49)μg/mol肌酐]和对照组[(107 ±22)μg/mol肌酐,均P＜0.05].结论 逼尿肌bFGF mRNA表达随BOO进展持续升高,TGFβ1 mRNA在失代偿阶段表达才明显升高;尿液TGFβ1在大鼠BOO 6周时呈强表达,有可能成为预测BOO后逼尿肌收缩功能的指标.     

曲古霉素A和枸杞多糖联合应用对人食管癌Eca-109细胞凋亡的影响

目的 探讨曲古霉素A(TSA)和枸杞多糖(LBP)联合应用对食管癌Eca- 109细胞凋亡的影响.方法 分别用二甲基亚砜DMSO,对照组）、1.0μmol/L TSA、1.0μmol/L TSA+ 10 mg/L枸杞多糖处理Eca-109细胞48h,用Annexin V-FITC和PI双染色,流式细胞仪检测3组细胞的凋...     

Multifactor Regulation on Expressions of MMP-9 and TIMP-1 in Endometrial Stromal Cells

Recent evidence suggests that preparation of the endometrium for implantation is notmerely a question of adequate hormonal stimulation but that implantation also depends on theinteraction between the blastocyst and the endometrium and is mediated by cytokines,growthfactors,and adhesion molecules,which are produced and secreted by the endometrium andthe blastocyst[1].Implantation is a complex process that involves embryo apposition andattachment to the maternal endometrial epithelium,the extrace…     

抗Gp210阳性原发性胆汁性肝硬化患者临床特征

目的：探讨抗Gp210阳性原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者的临床特征。方法选取2009年至2012年在常州市第三人民医院免疫性肝病科初诊的122例PBC患者,按照抗Gp210阳性、抗Gp210和AMA-M2阳性、AMA-M2阳性将患者分为三组,分别为12例、31例和79例,比较三组患者间肝功能主要指标、血常规主要指标、Mayo危险评分和其他自身抗体的差异。结果(1)三组患者的男/女构成分别为1/11、6/25、15/64,差异有显著统计学意义(P<0.01);年龄分别为(56.42±11.29)岁、(57.00±12.14)岁、(54.81±11.60)岁,差异无统计学意义(P>0.05);(2)三组患者的ALT[分别为(66.33±18.75) U/L、(82.65±69.53) U/L和(119.01±152.68) U/L,P=0.23]、ALP [分别为(329.25±171.90) U/L、(347.68±240.83) U/L和(286.53±228.89) U/L,P=0.42]、TBil [分别为(40.42±29.63)μmol/L、(55.41±63.89)μmol/L和(52.05±94.34)μmol/L,P=0.87]、ALB [分别为(34.98±5.51) g/L、(34.27±6.66) g/L和(36.63±5.71) g/L,P=0.15],CHOL [分别为(6.57±2.23) mmol/L、(4.39±2.25) mmol/L和(4.67±2.04) mmol/L,P=0.0090]比较,经统计学分析显示只有CHOL差异有统计学意义(P<0.05);(3)三组患者的WBC [分别为(4.19±2.07)×109/L、(4.51±2.10)×109/L和(4.66±1.98)×109/L,P=0.75]、Hb [分别为(115.46±14.62) g/L、(107.07±23.49) g/L和(110.99±25.22) g/L,P=0.56]、PLT [分别为(129.33±85.63)×109/L、(120.27±87.57)×109/L和(135.42±74.44)×109/L,P=0.66]比较,经统计学分析显示差异均无统计学意义(P>0.05);(4)患者共检测到13种自身抗体：AMA-M2、抗Gp210、抗SP100、ANA、抗SSA、抗SSA-Ro52、ACA、抗SSB、抗Sm、抗核糖体P蛋白、单链DNA抗体、抗肝细胞胞浆抗体1型和抗肝肾微粒体抗体总阳性率依次为90.16%、35.25%、8.19%、63.93%、18.03%、13.93%、10.66%、3.28%、2.45%、1.64%、1.64%、0.82%和0.82%,各抗体三组间比较差异均无统计学意义(P>0.05);(5) A、B、C三组患者Mayo危险评分分别为(5.80±1.39)分、(6.22±1.77)分、(5.43±2.01)分,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论在横断面上,与含AMA-M2阳性PBC患者比较,抗Gp210阳性PBC患者性别和总胆固醇存在差异。