黄芪抗γ射线辐射对小鼠淋巴细胞增殖和IL-2的作用研究

目的 :从免疫学方面探讨中药黄芪对辐射损伤小鼠淋巴细胞增殖和 IL - 2的研究。方法 :用 10 0 %黄芪水浸出液定期给小鼠灌胃 ,行γ线照射后检测小鼠淋巴细胞增殖和 IL - 2的产生。结果 :用药组小鼠脾淋巴细胞增殖和 IL - 2产生有显著增强作用 ,与照射组相比均有非常显著性差异 (P<0 .0 1)。结论 :黄芪有明显抗 γ线辐射、促进小鼠淋巴细胞增殖和IL- 2产生的作用。     

白首乌甙体外对小鼠T淋巴细胞功能影响的研究

目的：探讨白首乌甙的免疫调节作用,方法：采用Bal b/C小鼠常规制备脾细胞悬液的方法,观察白首乌甙体外对Ba 1b/C小鼠脾脏T淋巴细胞增殖反应,以及反应IL－2和IFN－γ活性的影响,结果：白首乌甙体外在高浓度（50,25,12ug/ml)时对小鼠脾脏TI林巴细胞增殖反应及产生IL－2,IFN－γ活性的均有抑制作用,,而在低浓度（1．5ug/ml)时则有促进作用,结论：白首乌甙体外小鼠T淋巴细胞具有双向免疫调节作用。     

当归有效部位对冷应激小鼠脾淋巴细胞增殖及细胞周期的影响作用

目的观察当归有效部位对冷应激小鼠模型脾淋巴细胞增殖及细胞周期的影响。方法采用水提醇沉法提取当归的总提取物、总多糖、小分子物质。随机数字表法将60只SPF小鼠分为对照组、模型组、当归总提取物组、当归总多糖组、当归小分子物组、红景天组,每组10只。分别灌胃,连续14 d。从第10天起每天灌胃0.5 h后逐一将动物置于水温为(8±2)℃的游泳池游泳3 min,连续5 d建立冷应激小鼠模型。对照组给予等量生理盐水。第14天游泳后处死动物,无菌摘除脾脏,制备脾淋巴细胞悬液。MTT观察各组细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞周期分布变化。结果与对照组相比,模型组细胞OD值明显下降,增殖抑制率为(36.24±3.56)%,细胞周期分布变化显著,其中G0/G1期增高,S期降低,G2/M期降低,分裂增殖指数均明显下降(P<0.01)。与模型组相比,当归多糖组、红景天组细胞OD值增高,增殖抑制率明显降低(P<0.05或P<0.01),而当归总提取物组、当归小分子物组OD值及抑制率均无明显变化(P>0.05)。与模型组相比,当归多糖组、红景天组G0/G1期百分比均下降(P<0.05),当归多糖组、当归小分子物组、红景天组S期百分比均增高(P<0.05),红景天组G2/M期百分比增高(P<0.01),当归多糖组、红景天组分裂增殖指数均增高(P<0.05),当归总提取物组、当归小分子物组均无明显变化(P>0.05)。结论当归总多糖能增强冷应激小鼠脾淋巴细胞增殖能力。     

黄芪水溶性黄酮类对小鼠细胞免疫功能的影响

目的：观察黄芪水溶性黄酮类对小鼠细胞免疫功能的影响。方法：采用“细胞毒”法和“MTT”法，通过观察小鼠T淋巴细胞及其亚群和淋巴细胞的增殖作用，初步研究黄芪水溶性黄酮类（AF）对氢考（HC）致免疫功能低下小鼠和正常小鼠的细胞免疫功能的影响。结果：AF能提高免疫功能低下小鼠T细胞总数及L3T4^ 、Lyt2^ 细胞百分率和L3T4^ /Lyt2^ 细胞比值，并可恢复至正常水平；AF能ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞的增殖，且本身具有丝裂原的作用。结论：AF对细胞免疫功能具有促进作用。     

黄芪糖蛋白对胶原诱导性关节炎小鼠脾组织T-bet及GATA-3表达的影响

目的:探讨黄芪糖蛋白对胶原诱导性关节炎(Collagen-induced Arthritis,CIA)小鼠特异性转录因子T-bet和GATA-3表达的影响,阐述黄芪糖蛋白治疗胶原诱导性关节炎小鼠的免疫作用机制。方法:建立牛Ⅱ型胶原诱导的小鼠关节炎模型,随机分为CIA模型组、氢化可的松阳性对照组、黄芪糖蛋白低剂量组、中剂量组、高剂量组;HE染色观察CIA小鼠脾组织损伤程度;采用流式细胞术检测CIA小鼠外周血IFN-γ和IL-4的水平;Western blot法检测CIA小鼠脾组织中T-bet和GATA-3蛋白的表达。结果:与模型组比较,黄芪糖蛋白改善了CIA小鼠脾组织损伤情况,减轻炎性反应细胞浸润,下调了外周血IFN-γ和IL-4水平(P0.05);同时,降低了T-bet和GATA-3蛋白的表达(P0.05)。结论:黄芪糖蛋白对CIA小鼠的治疗作用,可能是与降低T-bet、GATA-3表达,调整Th1/Th2功能失衡有关。     

黄芪糖蛋白对EAE小鼠的神经保护作用及其修复机制分析

目的:观察黄芪糖蛋白(HQGP)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠的保护作用,并探讨其神经修复机制。方法:复制髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG_(35-55))多肽诱导的小鼠EAE模型,20只C57BL/6雌性小鼠随机分为EAE组和HQGP组。HQGP组于免疫后第3日起,按1 mg·kg~(-1)·d~(-1)腹腔注射HQGP,持续给药18 d。通过五级临床症状评分和小鼠体质量变化观察HQGP对EAE小鼠的干预效应;取小鼠脊髓进行苏木精-伊红(HE)和固蓝(LFB)染色观察HQGP的神经保护作用;免疫组织化学法检测小鼠脊髓白细胞分化抗原(CD)68~+巨噬细胞的浸润以及诱导型一氧化氮合酶(i NOS),微管相关蛋白2(MAP-2)和神经元核抗原(Neu N)的表达;免疫荧光组织化学双染法检测小鼠脊髓CD11b~+细胞和趋化因子配体-5(CCL-5)的表达;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠脾脏单个核细胞(MNC)培养上清液中相关细胞因子的变化。结果:HQGP有效缓解EAE小鼠的临床症状,推迟发病时间,减轻中枢神经系统的炎性反应和髓鞘脱失;HQGP能减少小鼠脊髓CD68~+巨噬细胞和CD11b~+细胞的数量,抑制脊髓i NOS和趋化因子CCL-5的表达,增加MAP-2和Neu N的表达水平;HQGP能明显降低EAE小鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL)-6的分泌,促进IL~(-1)0和γ-干扰素(IFN-γ)的分泌。结论:HQGP具有治疗EAE的潜在作用,其神经保护机制与抑制炎症反应、调控免疫细胞表达及细胞因子的分泌、减轻髓鞘脱失并促进轴突修复和神经元发育有关。     

黄芪糖蛋白对佐剂性关节炎大鼠脾细胞增殖与凋亡的影响研究

目的：探讨黄芪糖蛋白（HuangQi Glycoprotein,HQGP）对佐剂性关节炎（adjuvant arthritis,AA）大鼠脾细胞增殖与凋亡的影响。方法：建立大鼠AA模型,1周后无菌取脾,制备细胞悬液,按浓度梯度给药处理,MTT法检测HQGP对体外培养的AA大鼠脾细胞增殖的影响。大鼠分组建模,1周后按浓度梯度给药治疗,3周后取各组大鼠脾组织,HE法观察各组大鼠脾组织形态学变化,TUNEL法检测大鼠脾组织原位细胞凋亡水平,免疫组织化学法检测大鼠脾组织中凋亡蛋白Bax、Bcl-2与核内转录因子Foxp3的表达水平。结果：MTT检测结果显示HQGP可显著抑制AA大鼠脾T细胞的增殖（P〈0.01）。TUNEL检测结果显示HQGP显著提高AA大鼠脾组织的凋亡细胞比例,免疫组化显示HQGP可回调脾组织中Bax、Bcl-2的蛋白表达水平,上调转录因子Foxp3的表达水平。结论：HQGP主要通过抑制脾T淋巴细胞的增殖来抑制机体的细胞免疫功能,同时通过调节Bax、Bcl-2的表达水平来诱导AA大鼠脾细胞凋亡,上调Foxp3的表达以提高机体的免疫耐受水平。     

当归注射液对辐射损伤小鼠脾细胞增殖的作用

在放射肿瘤治疗过程中 ,机体的正常免疫功能常有不同程度的损伤。因此 ,临床常采用一些相应的拮抗辐射损伤的药物 ,但大多为口服制剂。而针剂具有显效快 ,作用强等特点 ,很有应用价值。本文报道当归注射液在体内外对小鼠脾淋巴细胞增殖的作用以及对辐射损伤小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。1　材料和方法1 .1　动物昆明小鼠♂ 1 86只 ,体重 (2 0± 2 ) ｇ ,广东医学院实验动物中心提供。1 .2　药物5 %当归注射液 (江西青峰制药厂生产 ,批号为0 0 1 0 1 0 )。1 .3　试剂及仪器ＣｏｎＡ(Ｓｉｇｍａ公司生产 )、小牛血清 (杭州四季青生物材料有限公…     

黄芪糖蛋白对博莱霉素诱导小鼠肺纤维化的治疗作用及机制

目的:观察黄芪糖蛋白(Huang Qi Glycoprotein,HQGP)对肺纤维化小鼠的治疗作用,并初步探讨其作用机制。方法:选取60只健康ICR小鼠,随机分为对照组、模型组及观察组,每组20只。采用鼻腔滴入博莱霉素建立小鼠肺纤维化模型,造模次日起观察组每天每只小鼠腹腔注射HQGP,连续14 d,模型组及对照组腹腔注射等体积的生理盐水;给药后第7、28天每组分别处死5只动物,取肺组织,评价HQGP对肺组织病理形态、肺系数、肺组织羟脯氨酸(Hyp)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及转化生长因子-β_1(TGF-β_1)表达的影响。结果:与模型组比较,第7、28天HQGP观察组小鼠的肺纤维化程度减轻,肺组织的TGF-β_1、Hyp、MDA水平显著降低,差异有统计学意义(P0.05),肺组织SOD水平及肺系数显著升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论:HQGP可能通过降低胶原合成,提高机体的抗氧化能力,对肺纤维化的发生发展起到治疗作用。     

黄芪和当归配伍对小鼠造血干细胞衰老模型细胞增殖的影响

研究黄芪和当归配伍对小鼠造血干细胞衰老模型细胞增殖能力的影响及其作用机制。大鼠灌胃给药制备含药血浆后,体外培养小鼠造血干细胞,实验设空白对照组、模型组、空白血浆组、芪归1∶1血浆组、芪归10∶1血浆组、单用当归血浆组、单用黄芪血浆组,以三丁基过氧化氢(t-BHP)诱导小鼠造血干细胞衰老,以含药血浆作用于造血干细胞衰老模型。SA-β-半乳糖苷酶染色法检测细胞衰老率,流式细胞术检测细胞周期分布,RT-PCR检测Cyclin D1,P21,P53 mRNA表达,Western blot检测Cyclin D1蛋白表达。结果显示,t-BHP作用于造血干细胞后,可使衰老细胞增加,细胞增殖能力降低,G0/G1期细胞增多,G2/M+S期细胞减少,同时伴Cyclin D1表达降低,P53,P21表达增强。黄芪、当归、芪归1∶1配伍、芪归10∶1配伍含药血浆可降低衰老细胞阳性率,使G0/G1期细胞减少,G2/M+S期细胞增加,细胞增殖能力增强,并使Cyclin D1基因和蛋白表达增强,P53,P21基因表达降低。以上效应以芪归1∶1配伍的作用为强。结果表明,t-BHP可使造血干细胞衰老,细胞增殖能力降低。黄芪、当归及其配伍可抑制造血干细胞衰老,促进造血干细胞增殖和细胞周期转换,以芪归1∶1配伍的作用为强。其作用机制可能与其上调细胞周期正性调节因子表达,下调细胞周期负性调节因子表达,从而促进细胞由静止期进入增殖期有关。     

银杏达莫注射液配伍时颜色变化的探讨

<正>银杏达莫注射液(又称杏丁注射液)是由银杏总黄酮(ginkgo flavonoides)和双嘧达莫(diphyridamole)组成的复方制剂,具有扩张冠脉及抗血小板聚集、降低血黏度作用[1],临床用于治疗稳定型心绞痛[2]。银杏达莫注射液为黄色至棕黄色澄明液体,在临床使用中与地塞米松磷酸纳注射液,5%     

黄芪注射液对宫颈永生化上皮细胞生长的作用

目的:观察黄芪注射液对人宫颈永生化上皮细胞(H8细胞)的生长抑制作用,分析其细胞周期调控机制。方法:采用MTT法检测黄芪注射液对H8细胞生长的作用,光学显微镜观察药物作用后细胞形态,利用流式细胞仪(FCM)分析黄芪注射液作用后H8细胞的周期。免疫荧光分析的第一抗体为细胞周期蛋白(cyclin)Dl,B1,细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)1,4和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子(CDKI)p21蛋白,第二抗体采用荧光素标记,应用FCM检测黄芪注射液作用后H8细胞荧光强度。结果:黄芪注射液对H8细胞的生长有抑制作用,其中20 g·L-1作用最明显。黄芪注射液处理组可见细胞生长稀疏、死亡或凋亡,细胞固缩成深染圆形小体。黄芪注射液作用于H8细胞时,S,G2期细胞减少,使细胞阻滞于G1期。H8细胞cyelin D1蛋白表达降低极显著;cyclin B1,CDK4蛋白,p21蛋白表达略降低,无统计学意义;CDK1蛋白表达显著降低。结论:黄芪注射液有可能作为一种细胞周期调控剂来预防或辅助治疗宫颈癌前病变。     

HQ0805对小鼠淋巴细胞体外活化的抑制作用

目的:研究中药提取物HQ0805对小鼠脾淋巴细胞增殖及细胞因子IL-2的影响.方法:无菌制备小鼠脾淋巴细胞,分别用不同浓度的HQ0805作用于静止状态及ConA活化的脾淋巴细胞,用MIT法测定HQ0805对淋巴细胞增殖的影响;用流式细胞仪检测HQ0805对脾细胞培养上清液中细胞因子IL-2的影响.结果:HQ0805明显抑制静止状态与活化状态T淋巴细胞的增殖,并呈剂量依赖性;抑制IL-2的分泌.结论:HQ080抑制小鼠脾淋巴细胞的增殖,可能与抑制IL-2有关.     

从免疫角度探讨黄芪桂枝五物汤对小鼠衰老皮肤瘙痒模型的影响

目的:研究黄芪桂枝五物汤对小鼠衰老皮肤瘙痒的作用,并从免疫学角度探讨衰老皮肤瘙痒的发病机制。方法:昆明种小鼠84只,随机分为7组,每组12只,分别为正常组,皮肤衰老组,皮肤衰老瘙痒模型组,苯海拉明组(0.65 mg·kg~(-1)),黄芪桂枝五物汤低、中、高剂量组(3.25,6.5,13 g·kg~(-1)),除正常组外,其余各组采用D-半乳糖125 mg·kg~(-1)连续颈背部皮下注射42 d建立皮肤衰老小鼠模型,在此基础上,行尾静脉注射右旋糖酐注射液1.25 mg·kg~(-1),复制出衰老皮肤瘙痒模型。观察黄芪桂枝五物汤ig给药7 d后对小鼠皮肤瘙痒反应的瘙痒潜伏时间及瘙痒次数。酶联免疫吸附法测定血清白细胞介素1β(IL~(-1)β),IL-4,蛋白酶激活受体-2(PAR-2),P物质(SP),显微镜下计数肥大细胞数目。结果:与正常组比较,皮肤瘙痒组及皮肤衰老瘙痒模型组瘙痒潜伏时间降低,及瘙痒次数明显升高,小鼠血清IL~(-1)β,PAR-2,P物质表达明显升高,PAR-2含量明显降低(P0.05);黄芪桂枝五物汤能明显延长衰老皮肤瘙痒小鼠瘙痒潜伏搔抓时间(P0.05),减轻皮肤瘙痒小鼠搔抓次数(P0.05)。用药后,各用药组小鼠血清IL~(-1)β,PAR-2,P物质表达较衰老皮肤瘙痒模型组降低(P0.05),IL-4水平较衰老皮肤瘙痒模型组显著升高(P0.05),肥大细胞较衰老皮肤瘙痒模型组显著性减少(P0.05)。结论:黄芪桂枝五物汤对衰老皮肤瘙痒模型作用显著,其减轻皮肤瘙痒的作用与调节免疫失衡状态有关。     

雷公藤甲素对小鼠淋巴细胞体外活化的抑制作用

目的:研究雷公藤甲素(TRD)对小鼠T淋巴细胞活化标志CD69、CD25及细胞因子IL-2及IFN-γmRNA表达的影响,为阐明其免疫抑制作用提供分子药理学依据.方法:无菌分离小鼠淋巴结细胞,加入不同浓度的雷公藤甲素预先孵育1 h,用多克隆刺激剂刀豆蛋白(ConA)刺激T细胞活化,利用荧光标记的单克隆体双染技术,流式细胞仪检测TRD对小鼠T细胞CD69、CD25表达的影响;采用半定量RT-PCR技术从mRNA水平检测TRD对细胞因子IL-2、IFN-γ mRNA的表达的影响.结果:TRD能抑制T细胞早期活化标志CD69和CD25,同时TRD也能抑制IL-2及IFN-γmRNA的表达.结论:TRD对T细胞早期活化分子及细胞因子表达的抑制作用可能是其发挥免疫抑制作用的机制之一.     

5种海洋动物多糖对体外小鼠脾淋巴细胞及大鼠睾丸支持细胞增殖作用的比较

 目的研究脉红螺、隔贻贝、角蝾螺、福氏玉螺、纵条肌海葵5种海洋动物粗多糖对体外小鼠脾淋巴细胞转化率和大鼠睾丸支持细胞增殖率的作用。方法5种粗多糖分别以100,1 000 mg·L^-1两个浓度组,体外对小鼠脾淋巴细胞和大鼠睾丸支细胞作用72 h后,用MTT法对小鼠脾淋巴细胞的转化率和大鼠睾丸支持细胞的增殖率进行测定。结果角蝾螺(P<0.05),玉螺(低浓度组P<0.05;高浓度组P<0.001)、海葵(P<0.001)多糖能显著提高小鼠的脾淋巴细胞转化率和大鼠睾丸支持细胞的增殖率。结论角蝾螺、玉螺、海葵粗多糖有促进体外小鼠脾淋巴细胞转化和大鼠睾丸支持细胞增殖的作用。     

炮制对黄芪中糖含量的影响

目的:探讨炮制对黄芪中糖含量的影响。方法:用硫酸-苯酚法测定了黄芪及其炮制品还原性糖、水溶性糖和多糖的含量。结果:酒制黄芪中多糖含量最高,其余炮制品均较生品高。结论:不同炮制方法对黄芪中糖类含量有显著影响,这对阐述黄芪的炮制理论有一定意义。     

黄芪对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响

目的:研究黄芪水煎剂(HQD)对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响。方法:取18~22 g昆明小鼠100只,随机分10组,每组10只。分别为对照组,灌服不同剂量黄芪水煎剂组,同剂量不同给药途径组,黄芪与地塞米松并用组。各处理组每天给药1次,连续6 d。结果:在不同剂量灌服给药组中,高、中、低剂量试验组吞噬百分率和吞噬指数均高于对照组(P<0.01),其中以高剂量组效果最好;在不同给药途径组中,吞噬百分率以腹腔注射的效果优于皮下注射和灌服(P<0.01),但各组间的吞噬指数差异不明显(P>0.05);在黄芪与地塞米松并用组中,黄芪能明显对抗地塞米松的免疫抑制作用(P<0.01)。结论:黄芪不同剂量、不同给药途径给药对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力均有不同程度的增强作用,并能对抗地塞米松对其抑制作用。     

苦参碱抑制人卵巢恶性畸胎瘤细胞株PA-1体外增殖的研究

目的探讨苦参碱(matrine,MAT)对人卵巢恶性畸胎瘤细胞株PA-1体外增殖的影响。方法体外培养人卵巢恶性畸胎瘤细胞株PA-1,分组予不同浓度苦参碱作用。MTT法检测0.25、0.50、1.0 mg/mL不同浓度苦参碱对细胞增殖的抑制作用以及药物作用的量效和时效关系;流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期;半定量RT-PCR检测bcl-2/bax mRNA表达水平的变化。结果MTT法显示药物作用后,细胞有明显的抑制增殖作用,且呈时间依赖性和剂量依赖性;流式细胞仪检测不同浓度的苦参碱作用后PA-1细胞的凋亡率依次上升,并与作用时间正相关;细胞周期结果显示苦参碱对PA-1细胞具有明显的G_1期阻滞作用,且具有剂量依赖性。结论苦参碱能使PA-1细胞bcl-2 mRNA和bax mRNA的比值下调,产生G_1期阻滞,从而调节细胞周期,最终导致PA-1细胞在体外的增殖受到明显抑制。