黄芪糖蛋白、雷公藤甲素、雷帕霉素和氢化考的松体外免疫抑制作用的比较研究

目的:比较黄芪糖蛋白与雷公藤甲素、雷帕霉素、氢化考的松的体外免疫抑制作用。方法:不同浓度黄芪糖蛋白、雷公藤甲素、雷帕霉素、氢化考的松作用于小鼠脾细胞,MTT法测定4种药物对ConA、LPS诱导的淋巴细胞增殖的影响,流式细胞仪测定4种药物对脾细胞培养上清液中细胞因子IFN-γ、IL-6含量的影响。结果:4种药物对体外培养的脾细胞增殖均表现出显著的抑制活性(P<0.05),药效强度依次为雷公藤甲素、雷帕霉素、氢化考的松、黄芪糖蛋白。但黄芪糖蛋白主要表现为对T细胞的抑制作用。黄芪糖蛋白促进淋巴细胞分泌IFN-γ、IL-6,而其它3种药物却抑制IFN-γ、IL-6的分泌(P<0.05)。结论:黄芪糖蛋白对于淋巴细胞体外增殖的抑制作用不同于雷公藤甲素、雷帕霉素、氢化考的松,推测其具有独特的作用机制。     

蝉翼藤对小鼠脾细胞体外增殖和淋巴因子分泌水平的影响

目的探讨蝉翼藤醇提取物对小鼠淋巴细胞体外增殖和分泌白细胞介素-2(IL-2)与肿瘤坏死因子β(TNF-β)的影响。方法向小鼠脾细胞加入刀豆蛋白(ConA)和蝉翼藤醇提取物进行培养,以MTT法检测淋巴细胞增殖反应,用ELISA法测定IL-2和TNF-β分泌水平。结果蝉翼藤醇提取物能增强ConA诱导的小鼠脾细胞的体外增殖和分泌IL-2和TNF-β的水平。结论蝉翼藤醇提取物对小鼠淋巴细胞活性有增强作用。     

HQ0805对小鼠淋巴细胞体外活化的抑制作用

目的:研究中药提取物HQ0805对小鼠脾淋巴细胞增殖及细胞因子IL-2的影响.方法:无菌制备小鼠脾淋巴细胞,分别用不同浓度的HQ0805作用于静止状态及ConA活化的脾淋巴细胞,用MIT法测定HQ0805对淋巴细胞增殖的影响;用流式细胞仪检测HQ0805对脾细胞培养上清液中细胞因子IL-2的影响.结果:HQ0805明显抑制静止状态与活化状态T淋巴细胞的增殖,并呈剂量依赖性;抑制IL-2的分泌.结论:HQ080抑制小鼠脾淋巴细胞的增殖,可能与抑制IL-2有关.     

玛咖不同提取物和单体对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生IL-2和TNF-α的影响

目的 通过观察玛咖不同提取物和单体对小鼠的免疫调节作用,探讨其对小鼠脾淋巴细胞增殖及诱生白细胞介素-2（IL-2）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响。方法 用反相硅胶柱（ODS柱）将玛咖甲醇提取物进行分段富集,获得Fr₁, Fr₂, Fr₃, Fr₄, Fr₅和Fr₆ 6个部位及3个单体。设置玛咖不同提取物和单体的不同给药剂量组,采用细胞增殖与活性检测法（CCK-8）检测其对无丝裂原组、刀豆蛋白A（Con A）诱导组、脂多糖（LPS）诱导组模型小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,采用酶联免疫吸附测定试验法（ELISA）测定IL-2和TNF-α的含量。结果 与模型组比较,玛咖提取物Fr₃,Fr₆,单体N-苄基十六碳酰胺和1,2-二氢-4-甲醛-3-苯甲基-N-羟基吡啶对Con A诱导的T淋巴细胞和LPS诱导的B淋巴细胞存在一定促进增殖作用（P<0.01）,增殖作用较弱,玛咖提取物和单体能显著诱导脾淋巴细胞分泌IL-2和TNF-α（P<0.01）。结论 玛咖提取物及单体能够通过增强IL-2和TNF-α的分泌发挥免疫增强作用,同时可以一定程度上促进脾淋巴细胞的增殖。作用药效物质基础推测可能是玛咖酰胺和吡啶类生物碱,具体作用机制仍需进一步探讨。     

克湿灵治疗类风湿性关节炎的作用机制研究

目的:了解克湿灵(KSL)对大鼠佐剂性关节炎动物模型的作用机制。方法:氟氏完全佐剂诱发大鼠佐剂性关节炎;以炎性肿胀足的前列腺素E₂含量、细胞因子、淋巴细胞的功能变化作为观察指标;用紫外分光光度法测定炎性肿胀足的前列腺素E₂含量,采用MTT法检测胸腺、脾淋巴细胞增殖反应;用活化的小鼠脾淋巴细胞MTT比色法检测胸腺淋巴细胞产生的IL-2的活性。结果:克湿灵高(540 mg.kg^-1)、中(270 mg.kg^-1)、低(135 mg.kg^-1)3个剂量均能降低炎性肿胀足前列腺素E2的含量,其降低的量分别为25.6,16.1,10.0(A×1 000);克湿灵高、中2个剂量组可明显抑制刀豆蛋白A(ConA)诱导的T淋巴细胞增殖反应和IL-2的生成,体内给药对T淋巴细胞增殖反应的抑制率分别为32.1%,31.0%,对IL-2生成的抑制率分别为17.5%,14.0%;体外给药对T淋巴细胞增殖反应的抑制率分别为39.0%,22.1%,对IL-2生成的抑制率分别为27.3%,18.2%;脂多糖(LPS)诱导的B淋巴细胞增殖无明显变化。结论:克湿灵对类风湿性关节炎具有抗炎作用。     

黄芪总提物的免疫调节作用

目的:研究黄芪总提物(TAE)的免疫调节作用.方法:以DNFB诱导小鼠迟发超敏(DTH)反应作为模型,用耳肿胀度作为主要的检测指标.以3H-TdR掺入法研究TAE体外对ConA或LPS诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖反应;以活化脾细胞法检测IL-2.结果:TAE3个剂量对Cy降低或升高的小鼠DTH反应均能恢复或接近正常水平;TAE对亚适浓度ConA或LPS诱导小鼠脾淋巴细胞的增殖反应与产生IL-2均有明显的促进作用,量效曲线均呈典型的钟罩型.结论:TAE具有机能和浓度依赖性的双向免疫调节作用.     

黄连解毒汤的抗炎作用机理研究

目的 :研究黄连解毒汤的抗炎机理。方法 :采用小鼠背部气囊内注射角叉菜胶的方法诱导急性气囊滑膜炎症 ;脂多糖腹腔注射造成内毒素血症模型 ;噻唑蓝比色法测定细胞增殖 ;Griess法检测上清中NO^-₂ 的浓度 ;胸腺细胞增殖测定IL 1的活性。结果 :黄连解毒汤能抑制角叉菜胶所致小鼠气囊内白细胞的游出 ,减少PGE2 的生成。在体外实验中 ,黄连解毒汤能显著抑制ConA所致的内毒素血症小鼠脾淋巴细胞的增殖 ,但对正常小鼠淋巴细胞的增殖无影响 ,且不影响正常及内毒素血症小鼠的脾细胞生成IL₂。黄连解毒汤还可抑制脂多糖诱导小鼠腹腔巨噬细胞生成IL-1和NO。结论 :以上结果提示黄连解毒汤的抗炎作用主要与抑制IL-1 ,NO ,PGE₂ 等炎症因子生成有关。     

戴氏虫草胞外水溶性多糖在体外对细胞免疫及细胞因子的影响

 目的 研究虫草属新种戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖在体外对人扁桃体淋巴细胞和水鼠脾细胞免疫功能的影响。方法 采用³H-TdR掺入法测定淋巴细胞增殖,乳酸脱氢酶法(LDH)测定NK细胞活性,L929细胞杀伤法测定肿瘤坏死因子(TNF),MTT法测定白细胞介素-2(IL-2)活性。结果 戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖不仅能够促进人扁桃体及小鼠脾活化T细胞的增殖,而且能恢复环磷酰胺抑制免疫小鼠脾活化T细胞的增殖。它能增高小鼠脾细胞NK活性及分泌IL-2,也能增进人扁桃体活化T细胞分泌TNF β。结论 戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖是具有增强细胞免疫功能的生物免疫反应调节剂。     

鸡血藤煎剂对小鼠细胞分泌细胞因子的影响

 目的　研究鸡血藤对小鼠骨髓细胞增殖的影响及其对小鼠细胞分泌IL-1,IL- 2,IL-3和脾细胞增殖的影响。方法　体外培养骨髓细胞和脾细胞 ,MTT法测定其增殖能力。以分别对IL-1,IL-2,IL-3敏感的细胞作为靶细胞 ,以MTT法测定药物的影响。结果　鸡血藤能显著提高小鼠骨髓细胞增殖能力(P<0.01) ,也能刺激小鼠细胞IL-1,IL-2,IL-3的分泌(P <0.05) ,但对脾细胞增殖没有明显作用。结论　鸡血藤可刺激小鼠骨髓细胞增殖 ,并能提高IL-1,IL-2,IL-3的分泌能力 ,但对脾细胞增殖没有明显影响。     

阿里红多糖体外免疫活性的研究

目的:探讨阿里红多糖(FoP)对小鼠体外免疫的调节作用。方法:采用体外淋巴细胞增殖实验考察FoP对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响;采用磺酰罗丹明B(SRB)法检测不同浓度FoP单独作用及其与有丝分裂原ConA、LPS共同作用对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响;采用酶联免疫吸附实验(ELSA)法检测不同浓度FoP体外刺激对小鼠脾淋巴细胞诱生白介素2(IL-2)、白介素13(IL-13)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)等细胞因子的影响。结果:Fop在25~100μg/m L浓度范围内能显著促进小鼠脾淋巴细胞增殖,并与Con A、LPS协同促进T、B淋巴细胞增殖,还能诱导脾淋巴细胞分泌IL-2、TNF-α。结论:FoP具有免疫促进作用。     

雷公藤甲素对小鼠淋巴细胞体外活化的抑制作用

目的:研究雷公藤甲素(TRD)对小鼠T淋巴细胞活化标志CD69、CD25及细胞因子IL-2及IFN-γmRNA表达的影响,为阐明其免疫抑制作用提供分子药理学依据.方法:无菌分离小鼠淋巴结细胞,加入不同浓度的雷公藤甲素预先孵育1 h,用多克隆刺激剂刀豆蛋白(ConA)刺激T细胞活化,利用荧光标记的单克隆体双染技术,流式细胞仪检测TRD对小鼠T细胞CD69、CD25表达的影响;采用半定量RT-PCR技术从mRNA水平检测TRD对细胞因子IL-2、IFN-γ mRNA的表达的影响.结果:TRD能抑制T细胞早期活化标志CD69和CD25,同时TRD也能抑制IL-2及IFN-γmRNA的表达.结论:TRD对T细胞早期活化分子及细胞因子表达的抑制作用可能是其发挥免疫抑制作用的机制之一.     

山茱萸水溶物对老年小鼠淋巴细胞功能的影响

目的:研究山茱萸水溶物对老年小鼠的免疫调节作用,探讨其延缓衰老的机理。方法:采用氚标记胸腺嘧啶脱氧核苷(~3H-TdR)掺入法测定淋巴细胞的增殖;以 K562细胞为靶细胞测定自然杀伤细胞(NK)细胞活性;~3H-缬氨酸掺入法测定总蛋白合成;以依赖株细胞增殖反应测定法检测白细胞介素-2(IL-2)活性;用32P-IL-2 cDNA 探针,通过胞浆印迹杂交法测定 IL-2 mRNA 含量。结果:老年小鼠中,山茱萸水溶物给药组与对照组比较,淋巴细胞的增殖指数增加18.2%(P<0.01);NK 活性提高30.6%(P<0.01);总蛋白合成率增加13.9%(P<0.01);IL-2活性提高14.9≤(P<0.05);并可影响 IL-2 mRNA 的表达。结论:山茱萸水溶物显著提高老年小鼠淋巴细胞增殖能力、NK 活性、总蛋白合成、IL-2活性以及 IL-2 mRNA 表达水平。山茱萸水溶物能够部分恢复老年小鼠的免疫功能。     

乳猪胸腺肽对小鼠T淋巴细胞增殖和活化的影响

 目的：研究由乳猪胸腺制备的胸腺肽对T细胞增殖和活化的影响。方法：用³H-胸腺嘧啶核苷掺入法检测细胞增殖反应，并以生物素-链霉亲和素系统作免疫细胞化学法测定膜白介素2受体(mIL-2R)阳性细胞百分率。结果：胸腺肽组的细胞增殖反应(cpm值)和mIL-2R阳性细胞百分率均明显高于对照组(P<0.01)。结论：乳猪胸腺肽对小鼠T细胞增殖和mIL-2R的表达均有促进作用。     

白芍总苷对大鼠胶原性关节炎及其免疫功能的影响

 目的研究白芍总苷(TGP)对大鼠胶原性关节炎(CIA)及其免疫功能的影响。方法采用鸡Ⅱ型胶原诱导大鼠CIA模型,关节评分法检测关节炎发生情况,ELSIA法检测大鼠血清中抗CⅡ抗体的水平,MTT法检测T细胞和B细胞增殖反应,IL-1、IL-2活性的测定采用小鼠淋巴细胞增殖法。结果大鼠于致炎后第14天开始出现多发性关节炎症状,体重减轻,血清中抗CⅡ抗体水平升高,TGPig给药,连续14d,能够明显抑制CIA大鼠的AI,促进大鼠体重的恢复,降低血清中抗CⅡ抗体水平。进一步研究表明,TGP体内、外给药均能抑制CIA大鼠增高的T、B淋巴细胞增殖反应,还能显著降低刀豆蛋白A(ConA)诱导的CIA大鼠脾淋巴细胞产生IL-2的能力以及脂多糖(LPS)诱导的腹腔巨噬细胞产生IL-1的能力。结论TGP对CIA大鼠具有治疗作用,其机制可能与其调节CIA大鼠异常的免疫功能,平衡细胞因子的产生有关。     

小柴胡汤及其药群配伍抗小鼠H22肝肿瘤及免疫调节作用

目的:观察小柴胡汤及其药群配伍对小鼠H22肝癌实体瘤的抑制作用及对荷瘤小鼠免疫功能的影响,研究小柴胡汤抗肝肿瘤的作用、量效关系及作用机制,探讨小柴胡汤及药群内在配伍意义。方法:建立小鼠H22肝癌模型,分别灌服高、中、低剂量的小柴胡汤煎剂(27,13.5,6.75 g.kg^-1),腹腔注射5-氟尿嘧啶(5-FU)(20mg.kg^-1)做阳性对照;给药10 d后检测各组的瘤重、体重、脾脏和胸腺指数。进一步观察有效剂量(13.5 g.kg^-1)小柴胡汤药群配伍煎剂(柴-芩、姜-夏、参-枣-草、柴-芩+姜-夏、柴-芩+参-枣-草、姜-夏+参-枣-草,全方)对小鼠H22肝癌模型的上述作用。在此基础上,观察小柴胡汤及其有效药群(参-枣-草)对该荷瘤小鼠自然杀伤(NK)细胞、T淋巴细胞增殖及白细胞介素-2(IL-2)的影响。结果:小柴胡汤高、中、低3个剂量组对小鼠H22肝癌实体瘤均有明显抑制作用,抑瘤率分别为49.66%,48.52%,36.91%,药群配伍研究中参-枣-草组和全方组的抑瘤率为41.55%和43.65%。与正常组比,H22荷瘤小鼠脾脏指数显著升高(P<0.001),小柴胡汤高、中、低剂量组和各药群配伍组脾脏指数均明显升高(P<0.01);胸腺指数除全方组外,不同药群配伍组与正常组比均有显著降低(P<0.05),5-FU组有极显著降低(P<0.001);小柴胡汤各组小鼠体重均无明显变化,而5-Fu组小鼠体重下降明显(P<0.001)。与模型组比,小柴胡汤组小鼠NK细胞、T淋巴细胞增殖及IL-2活性均明显升高(P<0.001);参-枣-草组NK细胞和IL-2活性均升高(P<0.05);5-FU组NK细胞、T淋巴细胞增殖及IL-2活性均显著降低(P<0.01)。结论:小柴胡汤及其方中参-枣-草配伍药群有抑制小鼠H22肝癌实体瘤生长和提高荷瘤宿主免疫功能作用,其抑瘤作用机制与5-氟尿嘧啶的直接抑瘤有所不同,可能与增强荷瘤宿主免疫功能有关,提示该方中的扶正作用药群(人参、大枣和甘草)可能是其抑瘤作用的核心药群。     

大黄素对人胚肺成纤维细胞的影响

目的:探讨大黄素在抗肺纤维化中的作用。方法:采用体外细胞培养、免疫组化、透射电镜和同位素检测等技术,比较大黄素作用下人胚肺成纤维细胞(LF)的增殖和其分泌的白细胞介素(IL)-6的水平,检测大黄素作用下人胚 LF 电镜下的形态学特征。结果:(1)大黄素能够抑制人胚 LF 的增殖,并与其浓度、作用时间有关,大黄素高浓度组的抑制效果明显优于低浓度组,并随着时间延长其作用也明显增强;(2)在 IL-1诱导时,大黄素可以降低人胚 LF 分泌 IL-6的水平;(3)大黄素组人胚 LF 形态上与对照组比较差异无显著性。结论:大黄素具有抑制人胚 LF 增殖和抑制 IL-1刺激人胚 LF 分泌 IL-6作用。     

白藜芦醇抗肝癌Bel-7402及调节荷瘤鼠IL-8分泌机制的研究

目的：探讨白藜芦醇离体与在体对肝癌细胞Bel-7402的抑制作用及可能的效应机制。方法：MTT比色法测定Bel-7402细胞生长抑制率,Western blotting测定Bel-7402细胞Bcl-2水平,流式细胞术分析细胞周期,流式细胞染色检测细胞内IL-8,半定量RT-PCR与双抗体夹心ELISA法检测荷瘤小鼠IL-8 mRNA表达与含量。结果：白藜芦醇可以时间-剂量依赖性抑制Bel-7402细胞增殖,诱导凋亡,影响细胞周期分布。此外,白藜芦醇还能剂量依赖性抑制荷瘤小鼠细胞内IL-8产生及其mRNA与蛋白含量。结论：白藜芦醇离体与在体均能发挥有效的抗肝癌生物学活性和免疫调节作用。