酶偶联放大法测定血清总胆汁酸

目的建立简便的酶偶联放大法,直接检测血清总胆汁酸(TBA).方法基于脱氢酶-辅酶体系的原理,用丙酮酸钠作乳酸脱氢酶(LDH)的阻止剂,在Tris-HCl缓冲溶液中,由NAD+-NBT-Brij-98组成酶偶联放大系统.用自动生化分析仪测定血清TBA.结果线性范围0～180μmol/L;精密度批内CV＜2.7%,日间CV＜4.3%,总CV＜5.4%.与日本ENZABILE.AUTO(X)比较r=0.990,Y=1.114X-2.137,与朗道BILEACIDS(Z)比较r=0.997,Y=1.032Z+0.906.LDH＜3 kU/L,乳酸＜20 mmol/L,维生素C＜0.5 mmol/L,胆红素＜300μmol/L,血红蛋白＜5 g/L时,对结果无显著干扰.结论该法简便、灵敏,试剂稳定,适用于血清TBA的常规和自动分析.     

酶循环法测定血清总胆汁酸

目的　建立血清总胆汁酸 (TBA)测定的酶循环法。方法　基于用脱氢酶 辅酶体系循环底物的原理 ,建立了本法。结果　本法灵敏度 5 0 μmol/L ,A40 5nm ,1cm>0 .15 ;线性达 180 μmol/L ;批内CV <1.87% ,日间CV <2 .94 % ,总CV <3 .64% ;与普通酶显色法比较 :Y =0 .92 1X - 1.4 2 6,r=0 .9982 ,n =64。胆红素 <85 0 μmol/L、血红蛋白 <5 g/L、抗坏血酸 <2 .84mmol/L、乳酸 <2 4mmol/L、乳酸脱氢酶 <10 0 0 0U/L时 ,对结果无显著干扰。结论　本法灵敏度高 ,线性、精密度好 ,几乎无干扰 ,是一种理想的TBA测定方法。     

酶循环法检测血清总胆汁酸的方法学评价

目的通过对方法学评价试验,选择一种检测血清总胆汁酸的方法.方法ThioNADH黄色发光系统酶循环法检测血清总胆汁酸.结果本法线性达150μmol/L,精密度高,批内CV分别为0.98%和0.85%,批间CV为4.58%和4.13%.本法与普通酶显色法比较,r=0.903x-1.45,r=0.995 5,n=50,配对t检验P＞0.05,胆红素＜830μmol/L,血红蛋白＜5g/L,肝素钠＜120mmol/L,枸椽酸钠＜120mmol/L,乳酸＜30mmol/L,抗坏血酸＜28mmol/L,对测定结果无显著性干扰.结论本法线性好,精密度高,结果无明显干扰,对仪器管道比色杯基本无色素沉着污染,是测定血清总胆汁酸的一种理想方法,值得扩广应用.     

酶循环法测定血清总胆汁酸的实验评价

血清总胆汁酸（TBA）能敏锐反映肝、胆疾病的病变恶化与恢复过程,测定方法虽然很多,但缺点是受酯血、溶血、胆红素和抗凝剂等影响而产生负干扰,且易污染比色杯和仪器管道系统;笔者选用日本第四代酶循环法试剂盒测定TBA。一年来,十分满意,现将实验评价结果报告如下： 1 测定原理 NAD及胆汁酸通过酶的循环反应,微量胆汁酸被扩增,Thio－NADH在405nm附近被吸收,吸光度的增加速率与样品中的TBA浓度成正比。 2 材料和方法 2．1 仪器：日立7060型自动生化仪。 2．2 试剂 2．2．1 日本第一化学株式会社第四代酶循环法测TBA试剂盒（…     

酶循环法测定血清总胆汁酸

采用氧化型β－硫烟酰胺腺苷二核苷酸（Ｔｈｉｏ－ＮＡＤ）底物酶循环法测定血清总胆汁酸（ＴＢＡ）,对其方法学进行初步研究。该法灵敏度：试剂空白△Ａ４０５ｎｍ（１ｃｍ）０．００４／ｍｉｎ;５０μｍｏｌ／Ｌ△Ａ４０５ｎｍ（１ｃｍ）０．０５０／ｍｉｎ;平均回收率９９．２％;线性０￣１５０μｍｏｌ／Ｌ;精密度：批内ＣＶ〈１．０％;批间ＣＶ〈４．５％;该法（Ｙ）和偶联黄递酶比色法（Ｘ）比较：Ｙ＝０．８８Ｘ－１．     

血清总胆汁酸在肝脏疾病诊断中的应用

目的探讨常见肝病中血清总胆汁酸（TBA）及4种肝酶的差异。方法 152例肝病患者为肝病组,128名健康志愿者为对照组。比较2组患者血清TBA、AST、ALT、γ‐谷氨酰转移酶（GGT）、碱性磷酸酶（ALP）水平及其异常率。比较肝病组血清TBA与AST、ALT、GGT、ALP异常率。结果肝病组患者血清TBA、AST、ALT、GGT、ALP水平、异常率均明显高于对照组（P〈0.01）。肝病组患者血清TBA异常率明显高于4种肝酶异常率（P〈0.05）。结论在急慢性肝炎、肝硬化、肝癌疾病中,TBA异常率高于4种肝酶指标,且对潜在性肝细胞损害有早期诊断价值。     

血清总胆汁酸测定的临床意义

目的：探讨血清总胆汁酸测定在肝病诊断治疗中临床意义。方法：罗氏配套总胆汁酸试剂盒，用罗氏自动生化分析仪测定。结果：总胆汁酸在下列各组肝病：急性肝炎、慢性活动性肝炎、慢性迁延性肝炎、肝硬化和肝癌的阳性率依次为100％、96％、14％、100％和100％，与同时测定ALT对比，其阳性率依次为100％、62％、25％、28％和35％；与AST对比其阳性率依次为100％、42％、8％、21％和22％；与ALP对比其阳性率依次为51％、11％、4％、36％和61％；与r—GT对比其阳性率依次为62％、23％、2％、43％和67％。结论：总胆汗酸（TBA）测定是一项高敏感性肝功试验项目，在肝病诊断治疗中有较大临床意义。     

新生儿高胆红素血症血清总胆汁酸测定的临床价值探讨

目的探讨血清总胆汁酸(TBA)测定对新生儿高胆红素血症患儿肝功能损伤的临床价值。方法采用循环酶速率法检测187例新生儿高胆红素血症患儿血清TBA水平。结果新生儿高未结合胆红素血症组与对照组差异无显著性;高结合胆红素血症组的血清TBA水平明显高于对照组。回顾性病例分析显示,高未结合胆红素血症患儿无肝功能损伤,病情转归良好(100%痊愈);高结合胆红素血症患儿存在肝功能损伤或胆汁淤积,病情转归不佳,68.18%好转,31.82%未愈。结论当常规肝功能指标改变不明显时,血清TBA检测是一项新生儿病理性黄疸患儿较为灵敏的肝实质损伤的指标。     

血液透析对血清胆汁酸水平的影响

目的 了解血液透析对尿毒症病人血清胆汁酸(TBA)水平的影响。方法 分别对60例普通透析(HD)患者、20例血液滤过透析(HDF)患者透析前后,血清胆汁酸水平进行测定、比较。结果血液透析患者较正常对照血清TBA水平高(P<0.05);HD、HDF透析后血清TBA水平升高(P<0.05),这种变化以HDF为著;乙型肝炎患者透析前血清 TBA比非乙型肝炎患者高(P<0.05);老年患者透析前血清TBA比较中青年患者高(P<0.05)。结论 不同透析方式对透析患者血清TBA水平有影响,HDF影响较HD大;乙型肝炎透析患者、老年透析患者较非乙型肝炎患者、中青年透析患者血清TBA水平高。     

肌酐酶法试剂对总胆汁酸测定的干扰作用

目的探讨肌酐酶法试荆对总胆汁酸测定的干扰,指导全自动生化分析仪测试项目顺序的编排。方法①取lO管血清,每管血清均平分为2份,测试组为血清＋肌酐酶法试剂,对照组为血清＋生理盐水,比较两组血清的总胆汁酸测定结果。②取1份血清,首先连续10次单独测定其总胆汁酸,然后连续10次交替测定肌酐与总胆汁酸．比较单独测定组与交替测定组的总胆汁酸测定结果。结果①测试组的总胆汁酸测定结果显著大于对照组,两组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。②交替测定组的总胆汁酸测定结果显著大于单独测定组,两组比较差异有统计学意义（P〈0,01）。结论在全自动生化分析仪上编排测试项目时应注意肌酐酶法试剂总胆汁酸测定的干扰,可将总胆汁酸设置在肌酐之间,或者在肌酐与总胆汁酸之间插入其他项目。     

酶偶联法测定血清血管紧张素转换酶

目的建立一种测定血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）的酶偶联法。方法血清与底物马尿酸双甘肽（ＨｉｐＧｌｙＧｌｙ）混合温育３０分钟，生成马尿酸（Ｈｉｐ）与双甘肽（ＧｌｙＧｌｙ），再加入Ｌγ谷氨酰３羧基４硝基苯胺（ＧＧＣＮ）和γ谷氨酰基转移酶（ＧＧＴ），催化ＧＧＣＮ与ＧｌｙＧｌｙ偶联，产生的３羧基４硝基苯胺于４１０ｎｍ波长测定其吸收度。结果当底物ｐＨ８０，ＧＧＣＮ１０ｍｍｏｌ／Ｌ，ＧＧＴ６７ｋＵ／Ｌ时，ＡＣＥ活性与吸收度值有良好线性。５５份健康人血清ＡＣＥ（ｘ±ｓ）２８９±８３Ｕ／Ｌ，ＣＶ：批内４６％；批间４８％。１０份肉样瘤患者血清ＡＣＥ（ｘ±ｓ）７４８±３４９Ｕ／Ｌ，批内ＣＶ３９％，回收率９６％～１０３％。结论酶偶联法测定ＡＣＥ活性具有操作简便、迅速、重复性好，适用于手工操作或自动化分析，可用于诊断早期肺损伤和人类免疫缺陷病毒感染。     

血清总胆汁酸和胱抑素C的检测对肾脏疾病诊断意义

目的探讨血总胆汁酸和胱抑素C（cystatin C,Cys C）联合检测对肾脏疾病的诊断价值。方法分别测定肾病综合征组86例、肾功不全组95例、肾衰综合征组79例,和健康对照组202例受试者血清总胆汁酸（TBA）、胱抑素C（CysC）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TCH）、载脂蛋白AI（APoAI）、载脂蛋白B（APoB）的水平,并进行统计分析。结果各组患者血清TBA、CysC水平均高于健康对照组（P〈0．05）,且肾衰综合征组含量明显高于肾病综合征组和肾功不全组,差异均有统计学意义（P〈0．05）;肾病综合征组的TG、TCH、APoB均高于肾功不全组,且TG、APoB亦高于肾衰综合征组,而肾功能不全组的TCH低于肾衰综合征组,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论血清总胆汁酸和胱抑素C水平可作为肾脏损害的敏感指标,对肾病诊断有重要的临床参考价值。     

吸毒者血清总胆汁酸检测与临床意义

目的通过检测吸毒者戒毒治疗前血清总胆汁酸（total bile acids，TBA）水平，以探讨TBA与吸毒的关系。方法在BECKMAN COULTERCX4PRO全自动生化分析仪上对286例吸毒者及67例正常对照者血清TBA、腺苷脱氨酶（ADA）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）进行测定。结果吸毒各组与对照组相比，血清TBA水平差异均具有统计学意义（均P〈0．05）。与对照组相比，吸毒2个月组血清ADA、ALT活性差异均无统计学意义（均P〉0．05），吸毒6个月及以上各组ADA、ALT活性差异均具有统计学意义（均P〈0．05）。在155例吸毒〉12个月者中，注射组与混合组、烟吸组相比，TBA水平差异均有统计学意义（均P〈0．05）；混合组与烟吸组相比，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论TBA检测较ADA、ALT更早反映吸毒者肝实质损害；可作为判断吸毒者肝实质损害程度、评估其吸毒时间及吸毒方式的指标之一。     

循环酶法试剂盒测定血清总胆汁酸的差异

目的　探讨循环酶法胆汁酸 (TBA)试剂盒的差异及其基质效应。方法　 6种TBA试剂盒 (以A～F表示 )各自用其所带校准品定标 ,测定其批内与批间精密度和部分试剂的线性 ,并检测 2 0份浓度介于 2 .85～10 4 .6 μmol/L之间的新鲜血清与 4个厂家生产的 9种质控品 ;其中 3种试剂再改用日本第一化学药品株式会社(简称日本一化 )的校准品进行定标并测定前述标本 ,以日本一化的结果作为参照体系 ,比较其结果的差异。结果　 6种试剂中有 4种试剂的批内与批间精密度 <5 .0 % ,B、D试剂的批间精密度分别达 6 .90 %和 7.4 8% ;A、C、D、F 4种试剂的线性范围均比其说明书标示值有所降低 ;C、D、E、F测定新鲜血清TBA的结果与日本一化差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,而B相差较大 (P <0 .0 0 1)。用日本一化的校准品为C、D、F定标后重新检测 2 0份新鲜血清 ,C测定结果与日本一化差异无显著性 ,但F测定结果与日本一化差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,而D测定结果平均上升 4 0 % (P <0 .0 0 1)。B、D、F测定 9个质控品的结果 ,其中 7个均比日本一化高出 1倍。结论　各厂家的第 5代循环酶法TBA试剂盒质量参差不齐 ,部分试剂的基质效应明显 ,校准品靶值转移亦可能存在问题。应选用质量较好的试剂盒 ,避免出现严重的系统误差。     

HPLC测定血清中七种结合胆汁酸

ＳＥＰ－ＰＡＫＣ１８小柱预处理血清后，采用反相ＨＰＬＣ结合紫外检测，定量测定脂肪肝患者与对照组血清中七种结合胆汁酸，结果显示，血清结合胆汁酸为一种敏感的实验检测指标，为临床检验提供了简便、快速的方法。