CK19表达及其在结肠癌淋巴结微转移诊断中的应用

目的：研究用免疫组化方法检测CK19及其在结肠癌淋巴结微转移诊断中的应用与临床病理意义。方法：取材于50例结肠癌病人肿瘤组织及癌周淋巴结255枚，同时进行HE染色组织学检查和抗角蛋白19抗体的免疫组化检测。结果：50例结肠癌组织中CK19表达均为阳性。255枚淋巴结用HE染色检查阳性者56枚(22．0％)，皆同时表达CK19阳性；另20枚淋巴结HE染色阴性，而CK19表达阳性。50例中有12例淋巴结中发现微转移，其中6例常规组织学检查属淋巴结转移阴性而免疫组化染色诊断表现为转移阳性。占常规病理检查淋巴结转移阴性者的21．4％(6／28)。随着肿瘤分期增加,淋巴结CK19表达阳性率亦增加。CK19表达阳性者预后较阴性者为差。结论：CK19免疫组化法是检测结肠癌淋巴结微转移的敏感而便捷的方法，而检测结肠癌微转移有助于判断肿瘤进展程度与预后。特别对在筛选组织学检查淋巴结阴性但存在微转移的病人有实用价值。     

CK20检测散发性结直肠癌淋巴结微转移的临床意义

目的探讨通过细胞角蛋白（CK）20检测散发性结直肠癌淋巴结微转移的临床意义。方法应用RT—PCR方法检测60例结直肠癌根治术所清扫的782枚淋巴结组织中CK20mRNA的表达．从而对淋巴结微转移进行评估．并与常规病理的淋巴结转移情况进行比较。结果常规病理学检出34例（56．7％）患者有淋巴结转移,检出阳性淋巴结数为356枚（45．5％）;CK20法检出45例（75．0％）患者有淋巴结转移．阳性淋巴结总数为436枚（55．8％）;两组比较,差异具有统计学意义（χ^2=16．72,P〈0．05）。结论CK20法能提高散发性结直肠癌转移淋巴结的检出率．有助于术后临床精准分期。     

结直肠癌淋巴结微转移分子诊断的初步研究

目的 探讨淋巴结微转移的分子诊断方法及其预后意义.方法 使用RT-PCR方法来检测45例Ⅰ～Ⅱ期结直肠癌患者277枚区域淋巴结CEA、CK20和MUC2表达情况,三者同时阳性表达定义为淋巴结微转移.结果 本组45例患者277枚受检淋巴结中,32枚淋巴结（11.6%）CEA、CK20和MUC2均呈阳性表达（微转移）,分别来自10例患者（22.2%）.经38个月的中位随访后,10例淋巴结微转移患者中6例（6/10）复发,而35例无淋巴结微转移患者中2例（5.7%）复发,差异有统计学意义（P＜0.05）：两组3年无瘤生存率分别为60%和100%,差异亦有统计学意义（P＜0.01）.结论 CEA、CK20和MUC2的联合检测可用于结直肠癌淋巴结微转移的分子诊断 淋巴结微转移患者预后较差.     

结直肠癌淋巴结微转移分子诊断的初步研究

目的 探讨淋巴结微转移的分子诊断方法及其预后意义.方法 使用RT-PCR方法来检测45例Ⅰ～Ⅱ期结直肠癌患者277枚区域淋巴结CEA、CK20和MUC2表达情况,三者同时阳性表达定义为淋巴结微转移.结果 本组45例患者277枚受检淋巴结中,32枚淋巴结(11.6%)CEA、CK20和MUC2均呈阳性表达(微转移),分别来自10例患者(22.2%).经38个月的中位随访后,10例淋巴结微转移患者中6例(6/10)复发,而35例无淋巴结微转移患者中2例(5.7%)复发,差异有统计学意义(P＜0.05):两组3年无瘤生存率分别为60%和100%,差异亦有统计学意义(P＜0.01).结论 CEA、CK20和MUC2的联合检测可用于结直肠癌淋巴结微转移的分子诊断;淋巴结微转移患者预后较差.     

胃癌阴性淋巴结的微转移检测的临床意义

目的 探讨胃癌淋巴结微转移与临床病理参数的关系及其临床意义。方法 采用免疫组织化学方法，用细胞角蛋白CK19，细胞角蛋白CK20及CD44v6检测53例常规病理检查无淋巴结转移的胃癌周围淋巴结509枚。结果 53例胃癌患者中21例有淋巴结微转移（39．6％）。微转移与浸润深度有关；深层组织的微转移阳性率高于浅层（P＜0．05），PT3，PT4患者阳性率明显高于PT1，PT2患者。低分化癌微转移阳性率明显高于高分化癌（P＜0.05)。结论 对常规检查淋巴阴性的胃癌，微转移检测可能对准确地确定临床分期、指导治疗、判断预后有积极临床意义。     

腹腔镜手术对结直肠肿瘤微转移的影响

目的:探讨腹腔镜手术对结直肠肿瘤淋巴结微转移的影响。方法:回顾分析DukesC期结直肠肿瘤患者40例的临床资料,其中实验组18例行腹腔镜手术,对照组22例行传统开腹手术,免疫组化检测常规病理阴性的淋巴结中CEA的表达,计算两种术式淋巴结转移漏诊情况。结果:实验组清扫淋巴结146枚,平均8.11枚,常规病理阳性88枚,阳性率60.27%,常规病理阴性者表达CEA8枚,漏诊率13.79%;对照组清扫淋巴结182枚,平均8.27枚,常规病理阳性112枚,阳性率61.54%,常规病理阴性者表达CEA19枚,漏诊率27.14%。两组淋巴结清扫情况及常规病理结果差异无统计学意义(P>0.05),漏诊率差异有统计学意义(P<0.01)。结论:两种术式在淋巴结清扫方面无显著差异,但腹腔镜手术淋巴结漏诊率明显低于传统开腹手术,说明此术式对结直肠肿瘤微转移的影响明显小于传统开腹手术。     

MUC1 mRNA和CK19 mRNA在胃癌淋巴结表达的意义

目的 探讨胃癌淋巴结微转移的基因诊断方法,分析CK19 mRNA、MUC1 mRNA作为胃癌微转移检测分子标志物的可行性。方法 应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测52例胃癌462枚常规病理阴性淋巴结中黏蛋白1（MUC1）mRNA、细胞角蛋白19（CK19）mRNA表达;对照组为4例胃良性病变患者的38枚淋巴结。结果 胃良性病变患者38枚淋巴结中CK19 mRNA和MUC1 mRNA表达均为阴性;CK19、MUC1 mRNA在胃癌患者462枚常规病理阴性的淋巴结中223枚（48.3%）阳性表达,其中180枚（39.0%）淋巴结CK19 mRNA阳性表达,136枚（29.4%）MUC1 mRNA阳性表达,CK19 mRNA和MUC1 mRNA均为阳性者有125枚（27.0%）。不同组织类型淋巴结CK19、MUC1 mRNA阳性率差异无显著性（P〉0.05）,不同肿瘤浸润层次、原发肿瘤大小、肿瘤位置的阳性率差异有显著性（P〈0.05）。结论 MUC1、CK19基因均可作为RT-PCR法检测胃癌患者淋巴结微转移的分子标志物。     

中低位直肠癌系膜内淋巴结微转移的临床病理学研究

目的 探讨中低位直肠癌全直肠系膜切除术（TME）后系膜内淋巴结微转移及其与临床病理因素的相关性。方法 31例中低位直肠癌患者接受了TME手术,应用脂肪清除技术获取全部淋巴结。将HE染色无转移的淋巴结标本进一步行抗CK抗体免疫组化染色,检测淋巴结内肿瘤微转移情况,并分析其与临床病理因素之间的相关性。结果 31例标本检出1007枚淋巴结。常规病理发现105枚淋巴结转移,直径为（5．5±3．1）mm;未见癌转移的淋巴结其直径为（2．8±1．5）mm,两组直径差异显著（P〈0．05）。在HE染色无转移的902枚淋巴结中,26枚发现微转移,其直径为（3．3±1．2）nq／n,显著小于常规病理有转移的淋巴结[（5．5±3．1）mm,P〈0．05],与常规病理无转移淋巴结直径差异不明显。有微转移的淋巴结其直径大部分〈5mm（88．5％）。31例患者中14例（38．7％）发现微转移;HE染色淋巴结无转移病例中微转移率为14．3％（2／14）。直肠系膜内淋巴结微转移与病理分期、血清癌胚抗原水平及肿瘤分化程度相关（P〈0．05）。结论 脂肪清除技术综合微转移的检测方法可使TME标本得到更多淋巴结,并能更加准确地判断淋巴结转移情况,有助于对直肠癌患者进行更加准确的临床分期并指导个体化治疗。     

结直肠癌淋巴结微转移病灶中CK20检测方法的比较

目的 比较免疫组织化学和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法对结直肠癌淋巴结微转移病灶中CK20的检测价值.方法 对40例结直肠癌患者共326例经HE染色证实无转移的淋巴结,使用RT-PCR技术检测CK20 mRNA,并与免疫组织化学染色检测方法进行比较,以寻找更为敏感的淋巴结微转移检测方法.结果 免疫组织化学法和RT-PCR分别发现41枚和105枚微转移淋巴结,两种方法发现的微转移阳性率分别为12.8%和32.2%,两者差异有统计学意义(P<0.05).结论 RT-PCR法是比免疫组织化学染色法更为敏感的检测结直肠癌淋巴结微转移的方法.     

胃癌淋巴管生成、淋巴管浸润及淋巴结微转移的临床意义

目的探讨胃癌淋巴管生成、淋巴管浸润及淋巴结微转移的临床意义。方法免疫组化法检测68例胃癌原发灶中D2-40的表达及其中51例胃癌的791枚淋巴结中CK20和CKpan的表达，结合患者的l临床病理特征进行综合分析。结果胃癌HE染色淋巴管浸润（LVI-HE）和D240染色淋巴管浸润（LVI-IM）的阳性率分别为66．2％（45／68）和76．5％（52／68），差异无统计学意义（P=0．118）。LVI-IM阳性率与肿瘤浸润深度（P=0．044）、TNM分期（P=0．003）及存在淋巴结转移（P=0．000）有关。68例胃癌平均淋巴管密度（LVD）为（18．19&#177;7．44）个／HP.LVD升高与LVI-HE阳性（P=0．040）、LVI—IM阳性（P=0．001）、静脉浸润（P=0．037）、TNM分期较晚（P：0．020）及存在淋巴结转移（P=0．001）有关系。LVD值≥15个／HP者近期生存率较LVD值≤14个／HP者明显降低（P=0．032）。51例胃癌HE染色和CK（CK20或CKpan）染色检出淋巴结转移率分别为74．5％（38／51）和88．2％（45／51），791枚淋巴结的转移淋巴结检出率由HE染色的32．0％（253／791）提高到CK染色的41．5％（328／791），P〈0．001。CKpan的微转移检出率明显高于CK20（P=0．003）。微转移淋巴结数量与肿瘤大小（P=0．001）、LVIHE（P=0．040）、肿瘤浸润深度（P=0．018）及TNM分期（P=0．012）有关。微转移淋巴结的检出使淋巴结转移站别及TNM分期迁移：7例N0→N1，6例N1→N2，1例N2→N3；4例Ⅰb→Ⅱ，4例Ⅱ→Ⅲa，3例Ⅲa→Ⅲb，1例Ⅲb→Ⅳ。结论D2-40及CK检测在诊断淋巴管浸润和淋巴结微转移上优于HE检查。CK20和CKpan的联合检查有利于发现微转移淋巴结。肿瘤TNM分期越晚，越易发生淋巴结微转移。LVI-IM、LVD及淋巴结微转移三者都与胃癌淋巴结转移有关。LVD值较高者近期生存率较低。     

细胞角蛋白7、18、19在壶腹周围癌淋巴结微转移灶的检测及临床意义

目的探讨细胞角蛋白对壶腹周围癌淋巴结微转移的检出率,并分析淋巴结微转移与临床预后的关系,为提高临床综合疗效提供理论依据。方法应用细胞角蛋白(CK7、CK18、CK19)单克隆抗体,对45例壶腹周围癌根治术后经病理常规HE染色阴性的186枚淋巴结进行免疫组织化学技术(S P法)检测,结合随访资料进行临床预后分析。结果45例壶腹周围癌根治术后HE染色阴性的186枚周围淋巴结中,有9例(20%、9/45)34枚(18.3%、34/186)淋巴结中检出微小转移灶。免疫组化诊断微转移阳性组和阴性组的1年复发率分别是88.9%(8/9)和16.7%(6/36),两组间有显著性差异(P<0.05)。不同单克隆抗体(CK7、CK18、CK19)检测发现,CK19在壶腹周围癌186枚淋巴结的检出率高达15.6%(29/186),CK19与壶腹周围癌淋巴结微转移关系密切(P<0.05)。结论对常规病理检查阴性的壶腹周围癌淋巴结进行CK7、CK18、CK19检测有助于发现微转移灶,为提高淋巴结微转移诊断的准确性、判断临床分期、估计预后及选择辅助治疗提供理论依据。CK系列单抗联合检测可提高淋巴结微转移阳性检出率。     

CK19mRNA测定在乳腺癌腋淋巴结微转移诊断中的应用

研究敏感的方法检测乳腺癌腋窝淋巴结微转移。方法:对15例乳腺癌者的61个腋淋巴结和5个正常对照淋巴结同时进行HE染色组织学检查和CKl9逆转录-聚合酶链式反应(CK19RT-PCR)检测。结果:15例乳腺癌组织均有CK19mRNA表达,而5个正常淋巴结中均末见表达。61个腋窝淋巴结中7个组织学检查证实转移,其CK19mRNA亦表达阳性。组织学检测无转移的54个淋巴结中有12个CK19RT-PCR表达阳性,42个阴性;提示该12个淋巴结存在微转移只能用CK19RT-PCR方法检测出。经统计学分析,CK19RT-PCR与组织学检查二者有显著差异(X~2检验,P<0.01)。结论:CK19表达于恶性乳腺细胞,正常淋巴细胞无表达,CK19能作为组织特异基因进行RT-PCR扩增以检测乳腺癌腋淋巴结微转移。CK19 RT-PCR方法比组织学方法更敏感,特别对在筛选组织学检查淋巴结阴性而具有高度复发危险性的病人将有实用价值。     

乳腺癌前哨淋巴结活检

目的 评价前哨淋巴结活检预测腋窝淋巴结有无肿瘤转移的准确性及其临床意义。方法 用^99m锝－硫胶体作为示踪剂,用γ探测仪导向,对70例临床分期为T1－2N0M0的乳腺癌患者进行前哨淋巴结活检,所有的患者均同时行腋窝淋巴结清扫,HE染色阴性的前哨淋巴结再切片,用CK8、CK19、KP－1行免疫组织化学染色。结果 70例患者中成功发现前哨淋巴结的有67例,发现率为95.7%（67／70）。前哨淋巴结的数量为1－5枚,平均每例1.6枚。非前哨淋巴结5－20枚,平均例12.3枚。67例前哨淋巴结活检成功的患者中,29例患者（43.3%）有腋窝淋巴结转移,其中前哨淋巴结有转移者24例（35.8%）,前哨淋巴结未发现转移而非前哨淋巴结有转移者5例（7.5%）。7例患者（10.4%）只有有淋巴结为阳性淋巴结,前哨淋巴结活检的准确性为100％。43例患者的65枚HE染色阴性一的前哨淋巴结,CK8及CK19免疫组织化学染色均为阴性。结论 前哨淋巴结检能较准确地预测腋窝淋巴结转移情况,对原发灶为T1的乳腺癌,前哨淋巴结活检的准确性为100％。同一层面切片行免疫组织化学染色并不能提高淋巴结微转移癌的发现率。     

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??Study on sentinel lymph node biopsy by carbon nanoparticles and 99mTc sulfur colloid for rectal cancer TONG Han-xing, ZHAO Gang, LU Wei, et al. Department of General Surgery, Zhongshan Hospital, Fudan University, Shanghai200032,China Corresponding author: LU Wei-qi??E-mail: weiqi_lu@eastday.com Abstract Objective To evaluate the feasibility of sentinel lymph node ??SLN??biopsy (SLNB) after carbon nanoparticles (CNP) and 99mTc sulfur colloid (TSC) injected in rectal cancer patients. Methods Twenty-eight patients underwent radical resection of a primary rectal cancer between October 2004 and September 2006 at Zhongshan Hospital of Fudan University were considered for inclusion. During resection, SLN mapping was performed with CNP and TSC. All lymph nodes were stained with HE. SLNs with negative routine HE staining were further analyzed with cytokratin 20 immunohistochemistical??CK20-IHC??staining. Results Fifty-two nodes ( 2 per patient) were identified as SLNs in 27 of 28 patients. In 18 of 27 patients, with SLNs and nonSLNs proven negative by HE staining, 5 patients showed positive SLNS by CK20-IHC. The accuracy rating and the false-negative rate of HE staining for SLN were 92.59% and 10% respectively. Conclusion SLNB by CNP and TSC for rectal cancer is feasible. Rectal cancer SLNB should apply different mapping method based on the lesion position.     

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目的　研究角蛋白19(Keratin 19)的表达与直肠癌所导致直肠系膜内淋巴结微转移的关系。探讨其在预测直肠癌淋巴结微转移中的应用价值。方法　用免疫组化SP法检测2 0 0 2年3～8月收治的80例DukesA ,B ,C ,D期直肠癌组织及其系膜内12 0枚和直肠系膜外5 1枚转移淋巴结中Keratin 19的表达情况,分析其与直肠癌淋巴结转移的相关性。结果　(1)在80例直肠癌病人中,5 7例腺癌上皮Keratin 19表达强于其正常直肠腺上皮Keratin 19的表达,免疫组化染色转移淋巴结的表达程度强于其癌组织表达(P <0 .0 1) ;(2 )有2 5例直肠癌病人直肠系膜内淋巴结HE染色阴性,而免疫组化Keratin 19蛋白染色于其中9例病人的系膜内和系膜外淋巴结分别有11枚(9. 17% )和5枚(9 8% )染色阳性;(3) 80例直肠癌病人直肠系膜淋巴结内癌细胞免疫组化染色平均灰度值与直肠癌原发灶癌细胞免疫组化染色平均灰度值相关性分析显示有相关性(P <0 . 0 1)。结论　80例直肠癌病人直肠系膜淋巴结内转移癌细胞Keratin 19蛋白表达强于直肠癌原发灶癌细胞的表达,直肠癌细胞Ker atin 19蛋白的阳性表达与直肠癌淋巴结微转移呈正相关关系。Keratin 19在DukesC/D期直肠癌内的表达显著高于其在DukesA/B期内的表达。Keratin 19在直肠癌细胞内的表达与病人年龄无明显关     

术中美蓝染色及抗细胞角蛋白20检测淋巴结及其微转移在直肠癌患者中的临床应用

目的探讨术中经直肠上动脉注射美蓝行直肠系膜及淋巴结染色检测淋巴结及其微转移方法的临床意义。方法对30例行根治性手术治疗的直肠癌患者,术中经直肠上动脉插管注射美蓝6ml(美蓝染色组),使直肠系膜及各组淋巴结染色以统计淋巴结数目,同时行抗细胞角蛋白20(CK20)免疫组织化学(免疫组化)染色,检测其微转移情况;并与同期32例行直肠癌根治术患者术中常规手检法(常规手检组)检出的淋巴结数目进行对比。结果美蓝染色组肠旁淋巴结、肠系膜淋巴结、肠系膜根部淋巴结检出数目均明显多于常规手检组(P均=0.000)。美蓝染色组淋巴结常规病理检查阴性者,经CK20免疫组化染色,其转移阳性率增加17.7%;14例DukesB期患者(46.7%)经淋巴结CK20免疫组化染色需重新确定为DukesC期,11例患者(36.7%)出现跳跃淋巴结微转移现象。结论术中经直肠上动脉注射美蓝行淋巴结染色能提高淋巴结检出率。对常规病理检查阴性的淋巴结行CK20免疫组化染色检查其微转移灶,能提高淋巴结阳性检出率,使病理分期更准确。     

乳腺癌前哨淋巴结活检对腋窝淋巴结转移的预警价值研究

目的探讨乳腺癌前哨淋巴结(sentinel lymph node,SLN)预警腋窝淋巴结转移的价值. 方法对56例乳腺癌行亚甲蓝前哨淋巴结定位、活检和腋窝淋巴结清扫术,标本常规行HE染色、免疫组化病理检查. 结果 SLN成功检出52例(52/56,92.8%),常规病理检查证实SLN转移22例;SLN无转移,但非SLN发现转移者1例,假阴性率为4.3%(1/23).常规病理检查无转移的29例患者,免疫组化检测发现1例CK-19( )、EMA( ),另1例CK-19( ),CEA( ),而所属非前哨淋巴结无肿瘤转移. 结论乳腺癌亚甲蓝前哨淋巴结定位、活检可以预示腋窝淋巴结转移.     

中下段直肠癌E-钙黏附素表达与淋巴结微转移的关系研究

目的:分析中下段直肠癌E-钙黏附素(E-cadherin)表达与淋巴结微转移的关系。方法:应用CK-20免疫组化技术,对56例中下段直肠癌中661枚淋巴结微转移状况进行检测,同时观察肿瘤组织中E-钙黏附素的表达情况。结果:HE染色检测出29例中的190枚淋巴结呈转移,其CK-20免疫组化检测均呈阳性,后者在该29例中另检出12例55枚淋巴结呈阳性;在27例HE染色未检出淋巴结转移者中,有8例12枚淋巴结免疫组化检测呈阳性。20例(36%)67枚(10%)淋巴结检出微转移。中下段直肠癌E-钙黏附素表达阴性率为44.6%(25/56)。中下段直肠癌E-钙黏附素表达阴性与浸润深度(P=0.028)、分化程度(P=0.012)和淋巴结转移(P=0.007)密切相关。20例检测出淋巴结微转移的癌组织中14例(70%)E-钙黏附素表达阴性,而36例未检测出淋巴结微转移的癌组织中仅有11例(30.6%)E-钙黏附素表达阴性;二者差异有统计学意义(P=0.004)。结论:中下段直肠癌E-钙黏附素表达下调参与了淋巴结微转移的发生。     

逆转录-聚合酶链反应检测乳腺癌腋淋巴结微转移的研究

目的探讨乳腺癌患者淋巴结内癌微转移灶的临床意义。方法采用逆转录－聚合酶链反应技术,扩增细胞骨架角蛋白１９（ＣＫ１９）,对１５例乳腺癌患者的癌组织及其６１个腋窝淋巴结进行检测。结果１５例患者乳腺癌组织均有ＣＫ１９ｍＲＮＡ表达,５个正常淋巴结均无表达。６１个淋巴结同时进行逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）及组织学检查,７个淋巴结病理证实有转移,其ＣＫ１９ｍＲＮＡ亦都表达阳性;病理未发现转移的５４个淋巴结中有１２个ＣＫ１９ｍＲＮＡ表达阳性。结论ＣＫ１９ＲＴ－ＰＣＲ方法检测乳腺癌腋淋巴结癌微转移比组织学检查敏感（χ２检验,Ｐ＜０．０１）,特别在筛选组织学检查淋巴结阴性而具有高度复发危险性的患者具有实用价值。