不同保存液保存小肠的效果评估

目的 评价乳酸林格（ＬＲ）液、Ｅｕｒｏ－Ｃｏｌｌｉｎｓ（ＥＣ）液、高渗枸橼酸嘌呤（ＨＣ－Ａ）液和武汉医学院器官１号（ＭＷＯ－１）液保存猪小肠的效果。方法 根据不同保存液将动物随机分成４组,每组又根据保存时间不同分成３个亚组,供肠保存２后行自体移植。结果 小肠保存１０小时后移植,术后３周各组受体的存活率均为１００％;保存１８小时,ＬＲ液组、ＥＣ液组、ＨＣ＝Ａ液组和ＷＭＯ－１液组受体的存活率分别为６０     

生长激素和谷氨酰胺对小肠移植受体大鼠蛋白质代谢的影响

目的 观察谷氨酰胺强化的ＴＰＮ和生长激素对异基因小肠移植受体大鼠蛋白质代谢的调节作用。方法 ２４例异基因异位小肠移植受体大鼠（ＳＤ→Ｗｉｓｔａｒ）,根据术后营养支持方案的不同随机分为４组,每组６只大鼠：Ⅰ组;标准ＴＰＮ组（ｓｔａｎｄａｒｄＴＰＮ,ＳＴＰＮ）;Ⅱ组;谷氨酰胺强化ＴＰＮ组（ｇｌｕｔａｍｉｎｅ－ｅｎｒｉｃｈｅｄ ＴＰＮ,ＧＴＰＮ）;Ⅲ组;重组人生长激素（ｒｈＧＨ）加ＳＴＰＮ组（ＧＨ／Ｓ     

保存温度对移植胰腺功能影响的实验研究

目的探讨保存温度对移植胰腺功能的影响,确定大鼠胰腺的最适保存温度。方法采用原位灌注、单纯低温保存及建立同系大鼠异位全胰十二指肠移植模型,按不同保存温度(0℃、4℃、8℃、12℃)进行分组,保存6h后进行移植,通过光镜观察胰腺组织结构变化,高压液相色谱法检测保存6h后移植物ATP和总腺苷核苷酸(TAN)含量。移植24h后,检测血糖、血清中脂肪酶及淀粉酶含量,测定移植胰腺组织中髓过氧化酶(MPO)活性,并进行组织学观察。结果4℃组保存6h后和移植24h后的胰腺组织结构损伤明显轻于其它组。保存6h后胰腺组织中ATP和TAN水平在4℃组、0℃组、8℃组和12℃组依次降低,差异有显著性意义(P<0.05)。移植24h后血糖、血清脂肪酶及胰腺组织中MPO水平在4℃组、0℃组、8℃组和12℃组依次增高,差异均有显著性意义(P<0.05)。结论4℃对大鼠胰腺是最适保存温度,它能够明显减轻大鼠胰腺的冷损伤程度。     

甘氨酰谷氨酰胺二肽对猪自体移植小肠的营养作用

目的 观察甘氨酰谷氨酰胺（Ｇｌｙ－Ｇｌｎ）二肽对猪自体移植小肠的作用。方法 杂种猪１０只,自体小肠移植术后随机分为两组：标准ＴＰＮ组（ＳＴＰＮ组）５只,接受标准ＴＰＮ支持２８天;Ｇｌｙ－Ｇｌｎ二肽组（ＧＴＰＮ组）５只,接受含Ｇｌｙ－Ｇｌｎ的ＴＰＮ支持２８天。分别于术或术后１天和术后２８天测定血浆谷氨酰胺（Ｇｌｎ）,移植小肠粘膜Ｇｌｎ、蛋白质,绒毛ＤＮＡ、ＲＮＡ,肠粘膜绒毛高度、表表面、隐窝深度和肠     

新型器官保存液低温保存猪小肠的实验研究

探讨Lifor器官保存液对猪小肠的低温保存效果.方法 24只白色杂种猪,随机分成Lifor液组和威斯康星大学保存液(University of Wisconsin solution,UW液)组,分别采用4 ℃的Lifor液和UW液灌洗并低温保存移植小肠,每组再根据供肠保存时间的不同随机分成两个亚组,分别为保存6 h、9 h组,每个亚组6只动物.建立猪自体节段性小肠移植模型.比较低温保存小肠结束时Lifor液组和UW液组小肠黏膜的组织病理学及三磷腺苷(ATP)含量的改变,并测定移植小肠造口输注麦芽糖后各时间点的血糖水平,观察移植后小肠吸收功能情况.结果 供肠保存6 h和9 h后,Lifor液组与UW液组的小肠组织病理学改变基本一致,比较差异无统计学意义(均为P>0.05),保存9 h的小肠黏膜形态异常,损伤较保存6 h的小肠黏膜严重.供肠保存6 h和9 h后,Lifor液组与UW液组的小肠黏膜ATP含量比较差异无统计学意义(均为P>0.05),小肠黏膜的ATP含量随保存时间的延长逐渐降低.移植后7、14 d两组小肠吸收功能差异亦无统计学意义(P>0.05).结论 Lifor液低温保存小肠的效果与UW液相当,且成本低廉,具有一定的临床应用前景.     

脂肪酸,二磷酸果糖和谷氨酰胺对大鼠移植小肠粘膜细胞 …

目的 探讨ｎ－３脂肪酸、１,６二磷酸 糖和谷氨酰胺对移植小肠粘膜细胞增殖和凋 的作用。方法 １９６只近交系Ｗｉｓｔａｒ大鼠分别作为供、受体行全小肠民位移植,术前和术后和ｎ－３脂肪酸灌胃、１,６－二磷酸果糖及谷氨酰胺静脉输注１０天,应用流式细胞术和细胞凋亡原位检测的方法分析小肠粘膜细胞增殖和凋亡的变化。结果 移植小肠粘膜细胞增殖低下,凋亡增加,补充外源性ｎ－３脂肪酸、１,６－二磷酸果谷氨酰胺后,移植     

谷氨酰胺二肽抑制小肠移植细菌易位的实验研究

目的 观察甘氨酰答氨酰胺(Gly-Gln)二肽对猪自体节段性小肠移植细菌易位的抑制作用。方法 白色杂种猪10只行自体节段性小肠移植后随机分成2组：STPN组(n=5)，术后行标准全肠外营养TPN28天，GTPN组(n=5)行与STPN组等氮等热量强化Gly-Gln(3％)的TPN28天。观察受体血浆Gln浓度及移植小肠粘膜Gln古量．移植小肠系膜淋巴结、肝、脾细菌数量和移植小肠对乙三胺五乙酸(^99mTc-DTPA)的通透性。结果 术后28天．GTPN受体血浆Gln浓度和移植小肠粘膜Gln含量均高于STPN组，GTPIN组肠系膜淋巴结、肝、脾细菌数量(5．52±1．04．5．96±1．08，5．96±1．43LogCFU／g组织)明显低于STPN组(3．01±1．28,3.16士1．32，3．24±1．27LogCFU／g组织)．术后二组移植小肠通透性均增加．但GTPN组明显高于SIPN(24．01士7．44％Vs7．77±3．04％．P<0．01)。结论 GIy-Gln能提高受体血浆Gln浓度，维持移植小肠粘膜Cln含量，降低肠道通透性和细菌易位。     

谷氨酰胺二肽抑制小肠移植细菌易位的实验研究

目的观察甘氨酰谷氨酰胺(Gly-Gln)二肽对猪自体节段性小肠移植细菌易位的抑制作用。方法白色杂种猪10只行自体节段性小肠移植后随机分成2组:STPN 组(n=5),术后行标准全肠外营养 TPN 28天,GTPN 组(n=5)行与STPN 组等氮等热量强化 Gly-Gln(3%)的 TPN 28天。观察受体血浆 Gln 浓度及移植小肠粘膜 Gln 含量,移植小肠系膜淋巴结、肝、脾细菌数量和移植小肠对乙三胺五乙酸(~(99m)Tc-DTPA)的通透性。结果术后28天,GTPN 受体血浆 Gln 浓度和移植小肠粘膜 Gln 含量均高于 STPN 组,GTPN 组肠系膜淋巴结、肝、脾细菌数量(5.52±1.04,5.96±1.08,5.96±1.43LogCFU/g组织)明显低于 STPN 组(3.01±1.28,3.16±1.32,3.24±1.27Log CFU/g 组织),术后二组移植小肠通透性均增加,但GTPN 组明显高于 STPN(24.01±7.44%Vs7.77±3.04%,P<0.01)。结论 Gly-Gln 能提高受体血浆 Gln 浓度,维持移植小肠粘膜 Gln 含量,降低肠道通透性和细菌易位。     

尸体供肠的获取、保存及临床应用

目的　研究尸体供肠的获取与保存方法。方法　采用原位灌洗、整块切取的方法自 6具尸体获取供肠 ,Euro Collins液保存 ,光镜和电镜下观察供肠的组织学变化 ,其中 2例供肠分别移植至 2例短肠综合征患者。结果　 6例尸体供肠完整切取的时间为 (10 .8± 1.4)min ,热缺血时间为(5 .6± 1.2 )min ;光镜及电镜检查证实保存 10h内的供肠组织损伤轻微 ;第 1例移植的小肠运动和吸收功能逐渐恢复 ,后因肠道和肺部感染死亡 ,第 2例患者恢复无脂饮食。结论　该法实用、有效 ,所获小肠可用于临床移植。     

肠康复治疗对促进移植小肠结构修复作用的观察

目的：观察小肠移植术后应用肠康复治疗（生长激素和谷氨酰胺强化的TP支持）对移植小肠结构修复的促进作用。方法：采用大鼠异基因异位全小肠移植及TPN模型48只，分为4组，每组12只。I组：标准TPN组；Ⅱ组：谷氨酰胺强化TPN组；Ⅲ组：生长激素组，STPN的基础上加用生长激素；Ⅳ组：肠康复治疗组。生长激素用法为术后第1天起每日皮下注射1U／kg,GTPN每日补充谷氨酰胺3．6g/kg,CsA为每日肌注10mg/kg。术后检测各组移植小肠粘膜的形态学参数。结果：I组移植小肠粘膜在术后第8天明显萎缩，其它3组移植小肠粘膜的改变显著轻于I组。术后第14天。I组各参数进一步下降，而其它3组已开始恢复，特别是Ⅳ组，各指标与术前水平已无明显差异并且显著优于I组。结论：联合应用谷氨酰胺和生长激素的肠康复治疗顺应了移植术后机体的代谢特点，能够更为有效地促进移植小肠粘膜结构的修复。     

长征-1号多器官保存液效果的动物实验研究

目的　研究长征１ 号（ＣＺ１） 多器官保存液对肾脏低温保存的有效性及移植存活率的影响。　方法　（１） 采用离体肾脏灌注模型,分别检测了低温延时保存后兔肾线粒体呼吸控制率（ＲＣＲ）、Ｎａ＋Ｋ＋ＡＴＰａｓｅ 活性、皮质线粒体Ｃａ２ ＋ 、皮质ＡＴＰ等含量的变化。（２） 采用ＳＤ 大鼠肾脏移植模型,分别观察了低温延时保存４８ 、７２ 小时后再移植,大鼠存活以及移植肾功能恢复情况。　结果　（１）ＣＺ１ 液组保存７２ 小时,其生化指标肾脏线粒体呼吸控制率、皮质线粒体Ｃａ２＋ 、皮质ＡＴＰ含量的变化均优于ＵＷ 液组;（２）经ＵＷ 液和ＣＺ１ 液低温保存供肾４８ 小时,７ 天之内肾功能恢复正常。保存供肾７２ 小时,１４ 天之内肾功能基本接近正常。　结论　长征１ 号多器官保存液对肾脏低温保存效果基本类同于ＵＷ 液,且部分生化学结果优于ＵＷ 液。     

自制多器官保存液对肾皮质能量代谢的影响

目的寻找理想的器官保存液，以提高器官移植的长期疗效。方法应用高效液相系统（HPLC），检测自制多器官保存液（SMO液）和对照组（HC-A液和UW液）对犬肾低温保存中皮质腺苷酸含量改变的影响。取皮质标本匀浆、沉淀蛋白、离心，HPLC检测上清中腺苷酸含量，根据标准曲线方程和加样回收率计算ATP、ADP、AMP含量、比值和能荷（EC）。结果随保存时间延长，各组皮质腺苷酸含量下降；保存12、36、72h后SMO组皮质ATP含量（3．7±0．5、3．1±0．3、2．3±0．5nmol／mg蛋白）高于HC—A组（2．8±0．2、2．0±0．2、1．5±0．2nmol／mg蛋白），P〈0．05，SMO组EC（0．38±0．04、0．37±0．05、0．35±0．04）高于HCfA组（0．32±0．03、0．30±0．04、0．28±0．03），P〈0．05，在多数保存时点SMO组ADP、ATP／AMP高于HC—A组（P〈0．05），但2组间AMP、ATP／ADP比值差异无统计学意义（P〉0．05）；犬肾保存期间SMO组腺苷酸含量及EC与UW组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论低温保存期间SMO液能够维持皮质内较高的ATP和EC水平，减轻肾脏低温缺血损伤。     

Hypothermic reconditioning after cold storage improves postischemic graft function in isolated porcine kidneys

Delayed graft function still represents a major complication in clinical kidney transplantation. Here we tested the possibility to improve functional outcome of cold stored kidneys a posteriori by short‐term hypothermic machine perfusion immediately prior to reperfusion. A total of 18 kidneys from female German Landrace pigs was flushed with Histidine‐Tryptophan‐Ketoglutarate solution and cold‐stored for 18 h (control). Some grafts were subsequently subjected to 90 min of hypothermic reconditioning by hypothermic machine perfusion with (HR+O₂) or without (HR?O₂) oxygenation of the perfusate. Early graft function of all kidneys was assessed thereafter by warm reperfusion in vitro (n = 6, respectively). Renal function upon reperfusion was significantly enhanced by HR+O₂ with more than threefold increase in renal clearances of creatinine and urea. HR+O₂ also led to significantly higher urinary flow rates and abrogated the activation of caspase 3. By contrast, HR?O₂ was far less effective and only resulted in minor differences compared to control. It is derived from the present data that initial graft function can be significantly improved by 2 h of oxygenated machine perfusion after arrival of the preserved organ in the transplantation clinic.     

腺苷与单磷酯A联合预处理对供心保存的实验研究

目的　探讨腺苷与单磷酯A联合预处理对供心保存的效果。方法　健康大白兔 39只 ,随机分为 4组。A、B组以单磷酯A预处理 2 4h后 ,制成离体心脏 ,A组再用腺苷预处理 ;C组用腺苷作经典预处理 ;D组仅注射生理盐水作对照。各组预处理后 ,用 4℃改良St.Thomas液诱导心脏停搏 ,低温保存 4h ,复灌 1h。观察心功能恢复率、心肌三磷酸腺苷 (ATP)和丙二醛 (MDA)含量、心肌磷酸肌酸激酶 (CK mb)释放量等。结果　A、B、C、D组心功能恢复率 (+dp/dtmax ,% )分别为 :70 .97± 17.92 ,6 5 .5 4± 2 2 .6 2 ,6 4 .36± 16 .10 ,39.0 7± 13.78;A组高于B、C、D组 ,并与D组的差异有显著性 (P <0 .0 1)。A、B、C、D组心肌组织ATP含量 (10 -3 μmol/g湿重 )分别为 :5 .4 6± 1.37,3.97± 1.0 4 ,4 .4 5± 1.2 9,2 .0 7± 0 .74 ;A组高于B、C、D组 ,差异有显著性 (P <0 .0 5orP <0 .0 1)。结论　用单磷酯A和腺苷联合预处理 ,对供心有一定的保护效果。     

小鼠小肠移植模型制作的手术技术

目的：为研究小肠移植排斥反应提供良好的动物实验模型,方法：选用BALB／c小鼠进行同种异体异位节段性小肠移植。结果：在施行的210次手术中,模型稳定后的108次小肠移植的手术成功率为74．07％。结论：精细的显微外科手术技术是减少出血,防止血管吻合口并发症和提高手术成功率的保证,掌握麻醉的深浅度,合理的补液以及加强围手术期的管理也不容忽视。     

冷缺血时间对大鼠胰岛结构和功能的影响

目的 探讨胰腺的冷保存时间对胰岛的获得量、活性、纯度及功能的影响.方法 采用Wistar大鼠,切取其胰腺,然后保存于4℃UW液中,分别于保存3 h(3 h组)、6 h(6 h组)、9h(9 h组)、12 h(12 h组)、15 h(15 h组)、18 h(18 h组)和21 h(21 h组)取出胰腺,采用明尼苏达大学改良方法分离、纯化胰岛,并设不经过冷保存的对照组.分离、纯化所得的胰岛以双硫腙染色,分析胰岛数量与纯度;丫啶橙/溴化乙啶染色分析胰岛活性;测定胰岛在葡萄糖刺激下的胰岛素分泌量.结果 对照组每个大鼠胰腺平均叮获得560当量胰岛,形态完整.纯度达到88%,活性达到94%.3 h组和6 h组的胰岛获得量略有下降,但与对照组相比,差异无统计学意义.9 h组、12 h组、15 h组、18 h组和21 h组的胰岛获得量较对照组、3 h组和6 h组明显下降(P＜0.01,P＜0.05),各组间相比较,差异也有统计学意义(P＜0.01),且随保存时间的延长,各组的胰岛活性和纯度也逐渐下降.9 h组、12 h组和15 h组胰岛细胞形态基本完整,但可见少数细胞被膜不完整,内分泌颗粒外溢.18 h组和21 h组胰岛形态不规则,被膜破裂,大量内分泌颗粒外溢.对照组、3 h组和6 h组对高糖刺激反应良好,三者问的胰岛素释放指数(SI)的差异无统计学意义,保存9 h以后,各组SI均较对照组、3 h组和6 h组明显下降(P＜0.01,P＜0.05),且各组间的差异也有统计学意义(P＜0.01),18 h组和21 h组尤其明显.结论 采用UW液低温保存大鼠胰腺6 h以内,获得的胰岛的数量较多,质量较好;保存6～15 h,获得的胰岛数量及质量有所下降,但仍然可以用于移植;保存时间超过15 h,获得的胰岛数量及质量明显下降,不宜用于移植.