顺铂联合卡铂对骨肉瘤细胞株毒性的实验研究

目的探讨半量顺铂、卡铂联合对骨肉瘤细胞株(OS-732)的细胞毒性强度,为临床应用提供实验依据.方法采用MTT法细胞毒性试验,先分别获取顺铂、卡铂对骨肉瘤细胞株的半数抑制浓度(IC50),再分别用IC50的顺铂、IC50的卡铂、1/2IC50的顺铂 1/2IC50的卡铂作用骨肉瘤细胞株48h和72h,比较3组药物对骨肉瘤细胞株的细胞毒性.结果根据相应实验结果制作生长曲线求得顺铂、卡铂对骨肉瘤细胞株的IC50分别为7.6μg/ml和199.0μg/ml.分别用8.0μg/ml顺铂、200.0μg/ml卡铂、4.0μg/ml顺铂 100.0μg/ml卡铂作用48h时,对骨肉瘤细胞株的细胞毒性指数(CI)值依次为(54.7±5.3)%、(56.9±6 3)%、(57.5±5.7)%,3组比较差别无显著性意义(P＞0.05);作用72h时CI值依次为(65.7±4.5)%、(69.4±2.2)%、(68.4±3.6)%,含卡铂的两组与单独顺铂组比较差别均有显著性意义(均P＜0.05).结论半量顺铂、卡铂联合应用能产生单独顺铂或卡铂对骨肉瘤细胞株相似的细胞毒性作用.     

顺铂与卡铂对骨肉瘤细胞株作用的分子机制

目的探讨顺铂与卡铂对骨肉瘤细胞(MG-63)作用的分子机制。方法骨肉瘤细胞混悬液与不同浓度顺铂和卡铂分别作用24、48、72 h后,用倒置显微镜观察细胞生长情况。用噻唑蓝法测定每孔的吸光度值,制作生长曲线,并求出顺铂和卡铂的半抑制浓度(IC_(50))。用IC_(50)顺铂、卡铂作用于骨肉瘤细胞24、48、72 h后用流式细胞仪进行细胞周期分析。免疫印迹技术观察细胞的增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2和Bax的表达。结果相同浓度顺铂和卡铂作用的骨肉瘤细胞死亡数量随时间增加而增加。不同浓度顺铂和卡铂对骨肉瘤细胞分别作用24、48、72 h后,对细胞的生长均起到抑制作用,相同时间内,药物浓度越高,生长抑制作用越明显(P<0.05)。骨肉瘤细胞与IC_(50)顺铂和卡铂作用24、48、72 h后,在细胞各期均未见明显凋亡峰,但随着时间增加,G_1、S、G_2期所占比例逐渐下降;顺铂和卡铂作用后不同时间点凋亡细胞所占比例比较差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,顺铂组和卡铂组PCNA表达下降,Bax表达增加,Bcl-2表达略减少。结论顺铂和卡铂对肿瘤细胞生长各期均有抑制作用,对于骨肉瘤细胞来说,卡铂的浓度约需25倍于顺铂才能产生相似的生长抑制效应。顺铂、卡铂与骨肉瘤细胞作用后存在凋亡现象,但是未能形成凋亡峰,这可能与铂类化合物能够对处于任何生长周期的细胞均能产生杀伤作用有关。     

康莱特联合顺铂高效杀伤骨肉瘤细胞

目的 研究康莱特联合顺铂对骨肉瘤细胞的杀伤作用及其相关机制，探寻骨肉瘤的中西医结合化疗方案。方法 免疫组化及RT—PCR方法检测不同浓度康莱特作用下骨肉瘤OS732细胞的Fas表达，并将康莱特与顺铂单独及联合应用于OS732细胞，采用MTT法检测细胞毒性作用，流式细胞仪定量分析凋亡细胞所占比例，相差显微镜及荧光显微镜下观察凋亡细胞形态改变。结果 康莱特可上调OS732细胞的Fas表达并诱导凋亡，10μL／mL康莱特与1μg／mL顺铂合用于OS732细胞的抑制率与各自单用时相比明显提升（P〈0．01）。细胞形态观察及凋亡率测定也显示，康莱特与顺铂联用可诱导更多OS732细胞凋亡。结论 康莱特可协同顺铂高效杀伤骨肉瘤细胞，这可能与康莱特上调Fas表达诱导骨肉瘤细胞凋亡有关。     

局部短时间应用高浓度蒸馏水顺铂溶液对骨肉瘤细胞作用的实验研究

目的 研究局部短时间应用高浓度蒸馏水顺铂溶液对骨肉瘤细胞的杀伤作用.方法 培养骨肉瘤细胞U2-OS.按照作用于骨肉瘤细胞药物的不同,分为蒸馏水组(DW组),质量浓度分别为31.25(DW31.25组)、62.5(DW62.5组)、125(DW125组)、250(DW250组)、500μg/mL(DW500组)的蒸馏水顺...     

苏拉明联合顺铂杀伤人骨肉瘤细胞MG-63的实验研究

目的探讨苏拉明单独及联合顺铂杀伤人骨肉瘤细胞MG-63的作用。方法采用四甲基偶氮唑盐细胞毒性试验检测苏拉明单独及联合顺铂作用48h后对骨肉瘤细胞MG-63的杀伤作用，并观察苏拉明单独作用48h后细胞形态变化。结果苏拉明单独作用能够抑制骨肉瘤细胞MG-63的增殖并且呈剂量依赖性，其中100、200、400μg/ml苏拉明作用后细胞毒性指数（CI）分别为11．21％、28．95％、30．44％，与对照浓度比较差异均有统计学意义（均P〈0．01）；100、200μg／ml的苏拉明作用48h后能够使MG-63细胞发生明显的形态学变化，细胞周缘伸出较多细长突起，细胞密度减低。苏拉明与1．25、2．50ttg／ml的顺铂联合作用后存在交互作用（P〈0．05），1．25、2．50μg/ml顺铂作用后CI为13．59％、16．18％，顺铂1．25μg／ml＋苏拉明100μg/ml、顺铂1．25μg／ml＋苏拉明200μg／ml作用后CI为25．90％、34．89％，顺铂2．50μg／ml＋苏拉明100μg／ml、顺铂2．50μg／ml＋苏拉明200μg／ml作用后CI为39．94％、43．65％。结论苏拉明可以单独用于骨肉瘤治疗，且可增强顺铂对骨肉瘤细胞MG-63的杀伤作用。     

咖啡因在骨肉瘤顺铂化疗中增效作用的实验研究

目的探讨咖啡因在骨肉瘤细胞株(OS-732)顺铂化疗中的增效作用.方法骨肉瘤细胞株分别经咖啡因、顺铂、咖啡因 顺铂作用72h,采用MTT法体外细胞毒性试验观察三者的细胞毒性;应用流式细胞仪分析咖啡因、顺铂及两者配伍对骨肉瘤细胞株细胞周期的影响.结果骨肉瘤细胞株与浓度分别为0.2、2.0、5.0、10.0、20.0mmol/L的咖啡因作用时,细胞毒性指数(CI)分别为12.50%、27.88%、30.77%、56.73%、84.62%;与浓度为0.1、1.0、10.0、100.0μg/ml的顺铂作用时,CI分别为24.04%、54.80%、65.38%、88.46%;而与低浓度咖啡因与顺铂联合作用,其CI明显增加,随着各自浓度的升高,CI明显增加.流式细胞仪分析显示咖啡因对细胞周期也有明显的影响,使G0与G1期细胞比例明显增加,G2与M期细胞比例明显减少,S期细胞比例无明显改变.结论咖啡因在骨肉瘤细胞株顺铂化疗中有显著的增效作用,并能改变骨肉瘤细胞的细胞周期.     

顺铂、卡铂和双环铂细胞毒作用及小鼠血液系统毒副作用的比较

顺铂和卡铂均为高效、广谱的抗癌药 ,对头颈部癌、非小细胞肺癌、小细胞肺癌、肝胚细胞瘤、子宫癌、卵巢癌等具有很好的疗效[1] 。双环铂 (又名安托可金 )是新近开发研究的铂类抗癌药物 ,是含有两个羧酸的二氨合铂 ,具有较强的抗肿瘤活性[2 ] 。本实验利用体外培养的小细胞肺癌株 (NCI H4 46 )观察了三种铂类药物的细胞毒作用 ,并通过实验小鼠对三者的血液系统毒副作用进行了比较。1　材料与方法1.1动物与瘤株　健康BALB/C小鼠 ,体重 19±2 g ,由中国医科大学实验动物部提供。小细胞肺癌株 (NCI H4 46 )购自中国科学院上海细胞生物学…     

紫杉醇联合卡铂或顺铂治疗老年晚期NSCLC

目的比较紫杉醇（TAX）联合卡铂（CBP）方案与紫杉醇联合顺铂（DDP）方案治疗老年晚期非小细胞肺癌（NSCLC）的临床疗效。方法88例老年晚期NSCLC随机分为两组TAX＋CBP组（TC组）44例和TAX＋DDP组（TP组）44例。观察治疗后两组有效率及毒副反应的情况。结果TC组与TP组的总有效率分别为24．0％和26．0％,差异无统计学意义（P〉0．05）;TC组胃肠道反应、肝肾功能异常、周围神经病变等毒副反应轻于TP方案组（P〈O．05）。结论TC方案和TP方案治疗老年晚期NSCLC的疗效相似,但TC方案的毒副反应较轻,为较理想的方案。     

褪黑素联合顺铂、甲氨蝶呤对骨肉瘤SaOS-2细胞增殖的影响

目的探讨褪黑素(Mel)联合顺铂(DDP)、甲氨蝶呤(MTX)对骨肉瘤细胞系Sa OS-2增殖的影响,以及Mel与DDP、MTX是否具有协同抗肿瘤作用。方法 Mel、DDP、MTX、Mel+DDP、Mel+MTX作用于Sa OS-2细胞后,CCK-8法检测药物对细胞活性的影响,应用Compusyn软件分析药物的合并效应,流式细胞术分析细胞周期分布及细胞凋亡率。结果与对照组相比,Mel、DDP、MTX单独均能显著降低Sa OS-2细胞活性(P均<0.05),且呈剂量-效应关系。与单用DDP或MTX相比,Mel与DDP或MTX联合应用能显著降低Sa OS-2细胞的活性(P均<0.05)。1 mmol/L的Mel与6.67、16.67、33.33、66.66μmol/L的DDP合用时,联合用药指数(CI)分别为1.18、1.21、1.09、0.84,与0.1、0.5、1、2、4 mmol/L MTX合用后,CI分别为0.88、0.88、0.83、0.78、0.81。与对照组相比,Mel组与Mel+MTX组的G1期细胞比例显著增多(P均<0.05),S期细胞比例显著减少(P均<0.05);MTX组的S期细胞比例显著增多(P均<0.05)。药物作用组的细胞凋亡率均显著高于对照组(P均<0.05),联合用药组的细胞凋亡率显著高于单药组(P均<0.05)。结论 Mel在体外能抑制Sa OS-2细胞的活性,阻滞细胞周期于G1期,诱导凋亡,发挥抗肿瘤效应,与较低浓度DDP呈拮抗效应,而与MTX、较高浓度DDP联合应用时呈协同抗肿瘤效应。     

人成骨肉瘤顺铂耐药细胞系的建立

目的建立顺铂诱导的人成骨肉瘤多药耐药细胞系(MG63/R)并观察其生物学特性。方法以顺铂为诱导剂,采用大剂量冲击与逐步增加剂量相结合的方法诱导人成骨肉瘤MG63细胞,建立多药耐药系MG63/R。MTT法检测药物敏感性;光镜、透射电镜观察MG63、MG63/R细胞形态及超微结构变化;生长曲线、克隆形成试验检测细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞周期、凋亡指数、P-pg、bcl-2、P53蛋白表达。结果经顺铂186d的诱导,建立了MG63/R,其对顺铂的耐药指数为83.557±4.841,对阿霉素、长春新碱、氨甲基蝶呤、环磷酰氨亦产生不同程度的交叉耐药;光镜观察可见MG63/R细胞排列不规则,形态呈三角形、多角形及多核现象;透射电镜显示MG63/R细胞表面突起增加,粗面内质网丰富;细胞周期分析显示细胞增殖能力明显增加而细胞凋亡明显降低;MG63/R细胞P-pg、bcl-2阳性表达较MG63细胞明显增加,P53表达则明显降低。结论本研究建立了稳定的人成骨肉瘤多药耐药细胞系MG63/R,为进一步研究顺铂的多药耐药机制和耐药治疗提供了一种新的实验模型。     

顺铂热化疗对骨肉瘤细胞株细胞毒性的实验研究

目的：研究顺铂热化疗对骨肉瘤细胞株(OS-732)细胞毒性的影响，探讨热疗在骨肉瘤顺铂化疗中增效作用的机理。方法：OS-732细胞株分别经不同温度的热疗、不同浓度顺铂化疗、43℃热疗 顺铂联合作用各1h，采用体外细胞毒性试验(MTT法)、流式细胞仪(FCM)分析及电子显微镜观察其对细胞毒性和细胞周期的影响，以及诱导细胞凋亡的情况。结果：41℃、43℃、45℃热疗对OS-732细胞株有明显的细胞毒性作用。在37℃恒温条件下，细胞株单独与不同浓度的顺铂作用1h，随着顺铂浓度的升高，其细胞毒性作用明显增加。43℃热疗 顺铂共同作用1h，其细胞毒性作用进一步增加，细胞毒性指数最高达72．37％；FCM分析显示对细胞周期有明显的影响，S期细胞比例明显增加，G2与M期细胞比例明显减少。43℃热疗、43℃热疗 顺铂联合作用各1h均出现凋亡细胞峰(亚G1峰)，细胞凋亡比例最高达56．47％；透射电镜观察有典型的细胞凋亡特征性变化。结论：顺铂热化疗有明显的增强OS-732细胞株的细胞毒性作用。43℃热疗、43℃热疗 顺铂均可诱导骨肉瘤细胞凋亡。43℃热疗诱导骨肉瘤细胞凋亡可能是热疗在骨肉瘤顺铂化疗中增效作用的潜在机制之一。     

快中子及混合线照射人成骨肉瘤 OS-732 细胞系的实验观察

目的：观察快中子及光子对人成骨肉瘤细胞系OS-732的杀伤作用。方法：用快中子、光子及混合射线照射OS-732细胞系，检测各组细胞受照射后的集落形成率。结果：单次照射后第10天，混合线组对该细胞系集落形成的抑制作用明显弱于单中子及单光子组。结论：单次照射后第10天，单纯快中子及单纯光子对该细胞系集落形成的抑制作用明显强于混合线组，对临床上应用快中子治疗骨肉瘤有一定指导意义。     

大剂量甲氨蝶呤、表柔比星联合顺铂新辅助化疗骨肉瘤的疗效分析*

目的:观察大剂量甲氨蝶呤(MTX)、表柔比星(EPI)联合顺铂(PDD)新辅助化疗治疗Ⅱb期骨肉瘤的疗效和不良反应。方法:分析25例经病理诊断、初治、Ⅱb期肢体骨肉瘤患者接受大剂量甲氨蝶呤(10～12 g/m²)、表柔比星(80 mg/m²)、顺铂(75 mg/m²)联合化疗的疗效和不良反应。结果:保肢成功率为76 %,5年PFS率达到72 %:5年复发转移率28 %,5年生存率72 %。最常见的不良反应为血液学毒性中性粒细胞减少、贫血、血小板下降、肝功能损害,非血液学毒性脱发、恶心呕吐、腹泻、口腔黏膜炎,多为轻到中度;Ⅲ-Ⅳ级的恶心、呕吐、中性粒细胞减少、脱发、肝功能损害发生率分别为32 %、36 %、68 %和4 %。结论:大剂量甲氨蝶呤、表柔比星、顺铂联合方案新辅助治疗Ⅱb期骨肉瘤保肢成功率高,5年生存率高、复发转移率低,疗效确切,不良反应轻,耐受性良好,值得临床推广使用。     

原代人骨肉瘤细胞药敏试验方法研究

本文用ＭＴＴ法对１２例骨肉瘤患者的瘤细胞数与光密度（ＯＤ）值的关系以及不同细胞数的原代骨肉瘤细胞对ＨＤＭＴＸ、ＶＣＲ、ＣＢＰ、ＭＭＣ、ＶＰ１６、ＰＭＢ的敏感性进行了考查，结果表明当肿瘤细胞数为９×１０４～１２×１０４个／孔时，ＯＤ值在０．１５以上，ＨＤＭＴＸ、ＭＭＣ、ＰＭＢ对瘤细胞的抑制率≥５０％。     

紫杉醇、卡铂联合治疗非小细胞肺癌

目的：评价紫杉醇联合卡铂化疗治疗晚期非小细胞肺癌的临床疗效和不良反应。方法：32例晚期非小细胞肺癌患者d1使用紫杉醇135mg／m^2，d2使用卡铂300mg／m^2，3周为一个周期，均治疗2个周期。结果：32例晚期非小细胞肺癌中，CR4例，PRl6例，NC9例，PD3例，复治者有效率57．1％(4／7)。主要毒副反应为脱发、皮肤过敏反应、肌肉和关节酸痛、胃肠道反应、骨髓抑制。结论：紫衫醇联合卡铂治疗非小细胞肺癌具有很好的疗效，毒副作用可以耐受。