痴呆病人ApoE基因检测与多态性分析

目的研究痴呆病人与载脂蛋白Ｅ（ＡｐｏＥ）等位基因之间的关系。方法对３０例老年性痴呆（ＡＤ）患者和２５例多发梗死性痴呆患者的ＡｐｏＥ基因进行检测,确定基因型,计算基因频率,验证ＡｐｏＥ与ＡＤ的相关性。结果ＡＤ病人基因型以ε３／４最多,ε３／３型次之;血管性痴呆（ＶＤ）病人以ε３／３型最多,ε２／３次之;从等位基因频率看,ＡＤ病人及ＶＤ均以ε３型等位基因频率最高,ＡＤ病人ε４等位基因频率显著高于ＶＤ病人及正常人群, ＶＤ各型基因频率与上常人群无差别。结论 ＡｏｐＥ基因频率分布在ＡＤ与 ＶＤ及正常人群之间存在异质性,ε４等位基因是ＡＤ的主要危险因素。     

载脂蛋白E基因多态性检测技术的对比性研究

目的建立并比较载脂蛋白Ｅ（ＡｐｏＥ）基因多态性检测技术,为ＡｐｏＥ基因分型提供良好的方法。方法应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）和ＰＣＲ单链构象多态性（ＳＳＣＰ）检测技术对１１０例患者及相同人数的正常人进行ＡｐｏＥ基因型检测和分析。结果应用ＲＦＬＰ、ＳＳＣＰ技术测得正常对照组：ε２／２（０,０．０２０）,ε３／３（０．７００,０．７６０）,ε４／４（０,０．０４０）,ε２／３（０．１００,０．０６０）,ε２／４（０,０．０２０）,ε３／４（０．２００,０．１００）,ε２（０．０５０,０．０６０）,ε３（０．８５０,０．８４０）,ε４（０．１００,０．１００）。经χ２检验,ＡｐｏＥ基因型频率和等位基因频率的差异无显著意义（Ｐ＞０．０５）。上两种检测技术与既往两种检测技术（ＩＥＦ,ＷｅｓｔｅｒｐＢｌｏｔｉｎｇ）的结果经χ２检验,其ＡｐｏＥ等位基因频率的差异也无显著意义（Ｐ＞０．０５）,均符合中国汉族人ＡｐｏＥ基因频率分布。结论ＰＣＲＲＦＬＰ方法是一种稳定可靠的ＡｐｏＥ基因多态性分析方法,多重ＰＣＲＳＳＣＰ技术更加简便有效,使ＡｐｏＥ基因多态性的研究更加完善。     

载脂蛋白E多态性研究的方法学进展

人载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）具有明显的遗传多态性，三种常见的等位基因（ε２，ε３，ε４）分别编码三种主要异构体（Ｅ２，Ｅ３，Ｅ４）。ａｐｏＥ多态性不仅是心血管疾病的一种重要易患因素，而且与Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病及老化密切相关，目前国内外检测ａｐｏＥ多态性的方法主要有两类：一类以极低密度脂蛋白（ＶＬＤＬ）或血清为样品检测ａｐｏＥ蛋白表型，另一类以ＤＮＡ为样品检测ａｐｏＥ基因型，本文仅对ａｐｏＥ基因结构与多     

Alzheimer‘s disease患者载脂蛋白E多态性的检测

人类ＡｐｏＥ基因型存在多态性，这种多态性是老年性痴呆发病的易和危险因子之一，可为临床诊断提供重要的实验指标和信息。方法，本文采用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ技术，Ｈｈａｌ酶切ＰＣＲ扩增产物后的片段经１０％ＰＡＧ电泳和４％琼脂糖电泳，分析了ＡｐｏＥ基因型。在此基础上，我们分析了４０名ＡＤ患者和３５名正常对照者。结果实验显示：ＡＤ组和正常对照组的ＡｐｏＥ基因型有显著的差异，且ＡＤ组中ε４等位基因明显高于对照组，分     

聚合酶链反应限制性片段长度多态性检测载脂蛋白E基因型

目的建立一种简便、准确、实用的人载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）基因型的检测方法。方法应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）特异性扩增ａｐｏＥ基因含编码１１２位和１５８位氨基酸的基因序列，扩增产物用限制性内切酶ＨｈａⅠ酶切，聚丙烯酰胺凝胶电泳后，观察酶切位点的限制性片段长度多态性（ＲＦＩＰ）图谱。结果运用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法检测了１１３名健康人ａｐｏＥ基因型，频率分别为ε３／３６９．０％，ε３／２１６．８％，ε４／３１１．５％，ε４／２１．８％，ε４／４０．９％；ε２、ε３和ε４等位基因频率分别是９．３％、８３．２％和７．５％。结论该方法简单、快速、准确，对人体无害，适合于一般实验室开展及大规模人群调查     

载脂蛋白E外显子4基因多态性与Alzheimer‘s病

探讨了载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）外显子４基因多态性与Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ‘ｓ病的关系。应用聚合酶链反应扩增ａｐｏＥ外显子４基因片段，对扩增片段用ＨｈａⅠ酶切消化后进行基因分型，并用ＤＮＡ测序技术对分型结果予以证实，Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ病组与年龄匹配对照组在ａｐｏＥ外显子４ε３／４基因型频率和ε４等位基因频率分布上的差异有显著性（ｘ＾２＝８．９１，Ｐ〈０．０５，Ｘ＾２＝９．４９，Ｐ〈０．０１），Ａｌｚｈ     

早期复发性脑梗塞患者载脂蛋白E基因多态性分析

目的 探讨载脂蛋白E（apoE)基因多态性与早期脑梗塞复发的关系。方法 将年龄55－75岁之间脑梗塞患分为早期复发性脑梗塞与普通脑梗塞,和对照组三组分别以聚合酶链反应限制性片段长度分析法（PCR－RFLP）检测apoE基因型。结果 对照组apoE基因型以ε3／3最多,其次ε2／3,二组脑梗塞也以ε3／3最多,其次为ε3／4。二组病例ε3／4基因型、ε4等位基因频率均显高于对照组,尤以早期复发性脑梗塞组为突出,且其ε4等位基因频率明显高于普通脑梗塞组。结论 ApoEε4基因是脑梗塞的危险因素,并与脑梗塞早期复发有关。     

广西人群 ｍｉＲ ３６５ 基因 ｒｓ１２１２２４Ｃ ／ Ｇ 和 ｒｓ１７８５５３Ａ／ Ｇ 位点多态性分布

摘要：目的 探讨 ｍｉＲ ３６５ 基因单核苷酸多态性（ＳＮＰ）位点 ｒｓ１２１２２４Ｃ／ Ｇ 和 ｒｓ１７８５５３Ａ／ Ｇ 在广西地区健康人群中的分布，并 与其他不同种族人群进行比较。方法 采用 ＳＮＰｓｃａｎ 高通量技术检测 ２９４ 例广西地区健康人 ｒｓ１２１２２４Ｃ／ Ｇ 和 ｒｓ１７８５５３Ａ／ Ｇ 位点分型，统计分析其基因型和等位基因频率，并与人类基因组单体型图（ＨａｐＭａｐ）公布的 ＨａｐＭａｐ ＣＥＵ （欧洲人）、 ＨａｐＭａｐ ＣＨＢ（北京汉族人）、ＨａｐＭａｐ ＪＰＴ（日本人）、和 ＨａｐＭａｐ ＹＲＩ（非洲人）进行数据比较，统计分析其差异。结果 广西人 群 ｍｉＲ ３６５ 基因 ｒｓ１２１２２４Ｃ／ Ｇ 位点存在 ＣＣ（２７．９％）、ＧＣ（４９．０％ ）和 ＧＧ（２３．１％）３ 种基因型及 Ｃ（５２．４％）和 Ｇ（４７．６％）２ 种等 位基因，其基因型和等位基因频率与 ＣＥＵ、ＹＲＩ 比较，差异均有统计学意义（Ｐ 值分别为 ０．０１５ 和 ０．００４；Ｐ 值均＜０．００１），但与 ＣＨＢ、ＪＰＴ 比较，差异均无统计学意义（Ｐ 值分别为 ０． ５０４ 和 ０． ４４１；Ｐ 值分别为 ０． １４９ 和 ０． ０６７）。ｒｓ１７８５５３Ａ／ Ｇ 存在 ＡＡ（２２．４％）、ＡＧ（４９．０％）和 ＧＧ（２８．６％）３ 种基因型及 Ａ（４６．９％）和 Ｇ（５３．１％）２ 种等位基因，其基因型和等位基因频率与 ＣＥＵ、ＪＰＴ 和 ＹＲＩ 比较，差异均有统计学意义（Ｐ 值均＜０．００１；Ｐ 值分别为 ０．０４６ 和 ０．０１８；Ｐ 值均＜０．００１），但同 ＣＨＢ 比较，差异 无统计学意义（Ｐ 值分别为 ０．５０８ 和 ０．９２１）。此外，在不同性别组间对比发现两位点的基因型和等位基因频率差异无统计学 意义（Ｐ 值分别为 ０．１８５ 和０．４６６；Ｐ 值分别为 ０．１３０ 和 ０．５３２）。结论 ｍｉＲ ３６５ 基因 ｒｓ１２１２２４Ｃ／ Ｇ 和 ｒｓ１７８５５３Ａ／ Ｇ 位点多态性 在不同人群间存在不同程度的差异。     

重组抗原在戊型肝炎病毒感染诊断中的应用

目的探讨重组抗原在戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）感染诊断中的应用。方法用ＨＥＶ重组抗原建立酶免疫试验（ＥＩＡ）检测肝病患者和健康人群血清中抗戊型肝炎病毒抗体（抗－ＨＥＶ）。结果５５份用新加坡ＤＢＬ公司抗－ＨＥＶ诊断试剂盒检测为抗－ＨＥＶ阳性的肝炎患者血清中，５３份（９６．４％）用本方法检测也为阳性；４５份ＤＢＬ试剂盒检测为抗－ＨＥＶ阴性的血清中，本法检测有３份为抗－ＨＥＶ阳性。检测甲、乙、丙型肝炎患者血清各３０份，抗－ＨＥＶ阳性率分别为１３．３％（４／３０）、１３．３％（４／３０）和１０．０％（３／３０）。健康人抗－ＨＥＶ阳性率为５．０％（８／１６０）。重组抗原与合成肽抗原混合用于ＥＩＡ，可以检出两种抗原单独阳性的抗－ＨＥＶ。结论以重组抗原为基础的ＥＩＡ特异性强、灵敏度高、快速简便，是戊型肝炎血清学诊断及流行病学调查的一种可靠方法     

脑梗死患者ACE基因多态性的研究

目的研究血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）基因插入（Ｉ）／缺失（Ｄ）多态性与脑梗死（ＣＩ）的关系。方法用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）技术分别检测２３５例ＣＩ患和１５８例对照人群ＡＣＥ基因型和基因频率。结果ＣＩ组与对照组Ｄ：Ｉ等位基因频率之比差异显（Ｐ＜０．００１）。ＤＤ基因型ＣＩ组明显高于对照组。ＤＤ基因型ＣＩ相对危险性增高。结论ＡＣＥ基因缺失多态性与ＣＩ发生显相关同时有脑卒中和高血压家族史的ＤＤ型ＡＣ     

应用CPR检测载脂蛋白E表型

为探讨壮族人群载脂蛋白（ａｐｏＥ）基因与冠心病之间的内在联系，应用ＰＣＲ方法检测１５８例壮族健康人群和５３例临床确诊的壮族冠心病患者ａｐｏＥ表型和等位基因频率分布，结果健康人群等位基因频率分布是ε０．１０８，ε０．８１３，ε０．０７９，冠心病组为ε０．０７６、ε０．７９２、ε０．１３２。冠心病患者中Ｅ４／３频率明显高于健康人群（Ｐ〈０．０１），提示ε４可能是冠心病的遗传易患因子。     

2型糖尿病患者载脂蛋白B基因型频率分布的初步探讨

目的：研究载脂蛋白Ｂ（ＡｐｏＢ）基因多态性在本地区２型糖尿病患中的分布及其与血脂的关系。方法：运用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）方法检测４１例２型糖病患及６０例正常对照的ＡｐｏＢ基因型。结果：两组Ｘ＾＋和Ｅ＾－等位基因频率分别为０．０８５,０．０１７和－．１１,０．０３３（ｐ〈００１）。糖尿病组血脂总胆固醇（ＣＨ）、甘油三脂（ＴＧ）、低密度脂蛋白脂固醇（ＬＤＬ－ｃｈ）     

保定市中老年人群载脂蛋白E基因多态性与脑梗死遗传易感性关系的研究

目的检测并分析保定市中老年人群中载脂蛋白E（apoE）基因多态性,探讨apoE基因多态性与脑梗死遗传易感性的关系。方法采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）技术,分析92例脑梗死患者和86例健康对照者apoE的3种等位基因ε2、ε3、ε4,做基因频率和基因型多态性分析。结果健康人群组apoE基因呈多态性,有6种基因型,即3种纯合子（ε2／2、ε3／3、ε4／4）和3种杂合子（ε2／3、ε3／4、ε2／4）。健康人群组apoE3种等位基因的基因频率分别为：ε25．8％、ε387．2％、ε47．0％;apoE基因型频率数为ε2／20、ε3／375．5％、ε4／41．2％、ε2／310．5％、ε2／42．3％、ε3／410．5％。脑梗死组apoE等位基因频率：ε24．3％、ε369．6％、ε426．1％;基因型频数：ε2／23％、ε3／342．3％、ε4／410．8％、ε2／311．9％、ε2／42％、ε3／430％。与健康人群组比较,脑梗死组ε3／3基因型频率较健康组明显降低,差异有统计学意义（P〈0．05）,ε4／4、ε3／4基因型频率较健康组明显升高,差异有统计学意义（P〈0．05）,ε2／2、ε2／3、ε2／4基因型频率较健康组差异无统计学意义（P〉0．05）。与健康组比较,脑梗死组ε3等位基因频率明显降低,差异有统计学意义（P〈0．05）,ε4等位基因频率明显升高,差异有统计学意义（P〈0．05）,ε2等位基因频率较健康组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论保定市健康人群组apoEe3基因出现率最高,ε2和ε4频率较低,以ε3／3基因型最多,而ε2／2、ε4／4相对较少,脑梗死患者中ε3／3、ε2／3基因型频率较低,ε3对脑梗死可能具有保护作用。ε4等位基因频率在脑梗死患者中增高,ε4可能是脑梗死的易感因素和风险因素。     

血管紧张素Ⅰ转换酶基因多态性与冠心病的关系

为了探讨血管紧张素Ⅰ转换酶（ＡＣＥ）基因第１６内含子插入／缺失（Ｉ／Ｄ）多态性与冠心病（ＣＡＤ）的关系，应用聚合酶链反应测定了７９例冠心病（ＣＡＤ）及６８名正常人ＡＣＥ基因第１６内含子Ｉ／Ｄ多态性。结果显示，ＣＡＤ病人ＡＣＥ基因Ｉ型、ＩＤ型和ＤＤ型频率分别为２８％（２２／７９）、２９％（２３／７９）和４３％（３４／７９），而正常人则分别为４１％（２８／６８）、３２％（２２／６８）和２６％（１８／６８）。两组的ＤＤ基因型及Ｄ等位基因型均差异显著（Ｐ＜０．０５）。提示ＤＤ基因型可能为ＣＡＤ发生的危险因素之一     

多发性脑梗塞性痴呆与Alzheimer氏痴呆的经颅多普勒研究

用ＴＣＤ对２８例多发性脑梗塞性痴呆（ＭＩＤ）和２４例Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ氏痴呆（ＡＤ）进行了研究。结果表明ＭＩＤ患者的Ｖｍ、Ｖｄ、ＥＰＲ低于对照组，ＰＩ高于对照组；ＡＤ患者的各项指标与对照组无差异，ＡＤ与ＭＩＤ比较，除ＥＰＲ外其余各项指标都没有差异。ＲＤＣ曲线分析表明以－１ｃｍ／ｓｅｃ的ＥＰＲ临界点可鉴别ＡＤ与ＭＩＤ。     

急性淋巴细胞白血病初发和难治复发时基因重排类型改变 …

目的：为进一步了解难治复发急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）基因类型的变化。方法：应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测５６例初治及其中２２例难治复发ＡＬＬ患者ＩｇＨ，ＴＣＲＶγＩ－Ｊγ和ＴＣＲＶδ２－Ｄδ３基因重排。结果：７１．４％（４０／５６），８０．４％（４５／５６）及５８．９％（３３／５６），初始ＡＬＬ存在ＩｇＨ，ＴＣＲＶγＩ－Ｊγ和ＴＣＲＶδ２－Ｄδ３基因重排，４０例ＩｇＨ基因重排阳性病人中，１７     

ROC曲线评价血清脂类在冠心病及脑血管病患者中的检测意义

测定了６０以上健康老年人６８例，２８例冠心病（ＣＨＤ）和２６例脑血管病（ＣＶＤ）患者血清ＴＧ、ＴＣ、ＨＤＬ－Ｃｈ、ＡｐｏＡＩ、ＡｐｏＢ、Ｌｐ（ａ）、ＬＤＬ－Ｃｈ／ＨＤＬ－Ｃｈ（Ｌ／Ｈ）、ＡｐｏＢ／ＡｐｏＡＩ（Ｂ／Ａ）等九项脂类指标。应用ＲＯＣ曲线对其在ＣＨＤ和ＣＶＤ中的检测意义进行评估。筛选出ＣＨＤ的优选检测指标依次为Ｂ／Ａ〉ＡｐｏＢ〉Ｌｐ（ａ）〉ＡｐｏＡＩ〉ＴＧ；ＣＶＤ的优选指标依次为Ｂ／Ａ〉Ｈ     

采用ARMS分析口腔脱落细胞ApoE基因型

以口腔脱落细胞ＤＮＡ为模板,采用扩增不应突变系统（ＡＲＭＳ）,设计了等位基因４个特异性寡核苷酸引物和一个公共引物,分析了７４例个体ＡｐｏＥ３个常见共显性等位基因∈２、∈３和∈４。这一系统扩增出１８１ｂｐ和３１９ｂｐ两种ＡｐｏＥ基因顺序,当携某一等位基因的模板ＤＮＡ与相应的等位基因特异性寡核着酸引物及公共引物反应时,扩增出相应的基因顺序。省略了限制性核酸内切酶的消化或等位基因特异性寡核苷酸探针的杂交。方法简单、可靠、非放射性。     

中国汉族健康群体多巴胺D1受体-48A／G基因多态性分布

目的：了解中国汉族健康群体多巴胺D1受体-48A／G基因的多态性。方法：随机收集2004—03／07武汉大学人民医院门诊体检中心健康汉族人188名，其中男112名，女76名。用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法，分析限制性酶切位点-48A／G的多态分布。结果：188名健康人的测试结果进入分析。①多巴胺D1受体-48A／G基因型在中国汉族健康人群中的分布特点；以AA纯合子型最多见（0．71），AG杂合子型次之（0．28），GG纯合子型最为罕见（0．01）；等位基因频率的分布以A等位基因最多见（0．85），其次为G等位基因（0．15）。在男女性别之间，基因型频率（x^2=1.582，P〉0．05）相等位基因频率（x^2=0.606，P〉0．05）分布差异无显著性。②不同种族间多巴胺D1受体-48A／G基因型分布的比较；中国汉族健康群体多巴胺D1受体-48A／G等位基因的分布与高加索、德国及日本人群相比差异有显著性（P〈0．01）；在基因型的分布上，与日本人群也存在显著性差异（P〈0.01）。结论：中国汉族健康群体多巴胺D1受体-48A／G以AA纯合子基因型最多，等位基因频率的分布以A等位基因最多；在男女性间的基因型频率和等位基因频率分布无差异。中国汉族健康群体与高加索、德国及日本报道的人群多巴胺D1受体-48A／G等位基因分布和基因型的分布不同     

载脂蛋白E基因型分型方法

目的建立载脂蛋白Ｅ基因型分型聚合酶链反应限制性片段长度多态性方法。方法用特异的探针对氨基酸１１２和１５８多形基因区基因组的ＤＮＡ扩增，产物用ＨｈａⅠ酶消化，其片段在４％琼脂糖凝胶分离。结果经消化的载脂蛋白Ｅ片段在琼脂糖上，ε２／ε２为９１、８３、３８ｂｐ，ε３／ε３为９１、４８、３８ｂｐ，ε４／ε４为７２、４８、３８ｂｐ，ε２／ε３为９１、８３、４８、３８ｂｐ，ε２／ε４为９１、８３、７２、４８、３８ｂｐ，ε３／ε４为９１、７２、４８、３８ｂｐ。３００名献血员其载脂蛋白Ｅ基因分布频率分别为ε２／ε２０％，ε３／ε３７４％，ε４／ε４０％，ε２／ε３１６％，ε２／ε４２％，ε３／ε４８％。结论以聚合酶链反应限制性片段长度多态性方法进行载脂蛋白Ｅ基因型分型，具有清晰、简便、快速等优点