层粘蛋白对雪旺细胞在三维网架上迁移的影响

用２０只ＳＤ大鼠的坐骨神经片段培养在涂有层粘蛋白的聚酯纤维上，对照组培养在无层粘蛋白的聚酯纤维上。培液由２０％小牛血清和８０％ＤＭＥＭ组成，３７℃，５％二经碳培养箱培养２周。在培养２４，４８，７２小时，观察雪旺细胞迁移情况，测量迁移最远的雪旺细胞离组织块边缘的距离。结果显示：实验组和对照组相比较，雪旺细胞从组织中迁出的时间早，速度快，数量多。在体外培养条件下，显示了层粘蛋白对雪旺细胞在三维网架上迁     

缺氧对体外培养的雪旺细胞形态和迁移的影响及EGb 761抗缺氧研究

为了探讨缺氧对体外培养在三维结构上的雪旺细胞的影响和ＥＧｂ７６１ 对缺氧雪旺细胞的保护作用,将在聚酯纤维上迁移的ＳＤ 大鼠的雪旺细胞进行缺氧培养,抗缺氧组培液含ＥＧｂ７６１。正常组常规培养。结果显示,缺氧组：缺氧３ ｄ,细胞停止迁移,细胞体由梭形变成半球形或球形;缺氧５ ｄ,细胞开始死亡,从聚酯纤维上脱落。抗缺氧组：缺氧３ ｄ 和正常组比较,细胞迁移和形态无明显改变;缺氧５ ｄ,少数远离植块的细胞呈半球形和球形;缺氧７ ｄ,少量死亡细胞脱离聚酯纤维。结果表明：缺氧将引起雪旺细胞迁移能力和方式及形态的改变,最后导致细胞死亡;ＥＧｂ７６１ 对缺氧的雪旺细胞有明显的保护作用。     

缺氧对体外培养的雪旺细胞形态和迁移的影响有EGb761抗缺氧研究

为了探讨缺氧对体外培养在三维结构上的雪旺细胞的影响和ＥＧｂ７６１对缺氧雪旺细胞的保护作用，将在聚酯纤维上迁移的ＳＤ大鼠的雪旺细胞进行缺氧培养，抗抗氧组幸事液ｂ７６１ｘ。正常组常规培养，结果显示，缺氧组：缺氧３ｄ，细胞停止迁移，细胞体由梭形变成半球形或球形，缺氧５ｄ，细胞开始死亡，从聚酯纤维上脱落。     

雪旺细胞无血清条件培养液中的神经营养蛋白活性

目的　进一步探测雪旺细胞无血清条件培养液中神经营养蛋白活性 .方法　收集成年大鼠坐骨神经雪旺细胞无血清条件培养液 (Schwanncellserum -freecondionedmedium ,SC -SFCM ) ,通过PM10超滤获取 >10Kd浓缩液 ,再经Disc -PAGE分离和Biotrap电洗脱 ,从SC -SFCM中分离出A、B、C、D四组蛋白带 ,选择其最佳活性浓度 ,四组蛋白带按照 7种不同组合加入脊髓前角神经元 (SAHN)培养液中 ,通过MTT法进行神经营养活性检测 .结果　含D蛋白带的各组 ,其OD值均显著高于对照组 p <0 .0 1) ,而不含D蛋白带的其它各组 ,其OD值与对照组比较无显著性差异 (p >0 .0 5 ) .结论　来自于SC -SFCM中的D蛋白带具有明显促进SAHN体外存活的神经营养活性     

成骨细胞增殖和钙盐沉积能力:在接骨七厘片药物溶液中的反应

背景:接骨七厘片是促进骨折愈合、临床疗效较好的复方中药,但其作用机制尚不十分清楚。目的:观察接骨七厘片药物溶液对成骨细胞增殖和钙盐沉积能力的影响。方法:以体外培养的MC3T3-E1成骨细胞为研究对象。1常规培养24 h更换无血清DMEM培养液,饥饿培养24 h同步化细胞周期,弃去培养液,实验组每孔加入100μL含接骨七里片药物溶液的DMEM完全培养基,对照组加入DMEM完全培养基,于培养24 h和48 h使用MTS一步法检测细胞增殖活力。2以1×105密度接种MC3T3-E1细胞于96孔板,培养4 h更换成骨诱导培养液,诱导21 d进行茜素红染色观察MC3T3-E1细胞的钙盐沉积能力,对照组细胞不进行成骨诱导。结果与结论:在培养24 h和48 h,接骨七厘片药物实验组细胞增殖程度均较对照组上调(P0.05);成骨诱导21 d后,茜素红染色发现接骨七厘片药物实验组钙盐结节生成明显多于对照组(P0.01)。以上结果表明接骨七厘片药物溶液能够明显促进成骨细胞增殖和钙盐沉积能力。     

雪旺细胞在聚酯纤维上的迁移及对神经突起的引导作用

用组织培养技术，将ＳＤ大鼠的坐骨神经段及脊髓经节培养在聚酯纤维上，最长培养时间为３０天，对雪旺细胞的行为进行了研究。用倒置相差显微镜、扫描电镜及透射电镜对雪旺细胞的行为作了观察。结果显示：雪旺细胞沿聚酯纤维作螺旋式迁移；雪旺细胞支持并引导脊神经节突起的生长；聚酯纤维对神经段和脊神经节有良好的生物相容性。实验为非神经移植体研究提供了新的材料。     

骨髓间质干细胞培养液上清对肝星状细胞增殖及纤维化的影响

背景：利用骨髓间质干细胞治疗肝纤维化的研究取得了一定的效果,但研究其培养液上清治疗肝纤维化的并不多。 目的：观察大鼠骨髓间质干细胞培养液上清抑制肝星状细胞增殖及活化的可能性。 方法：实验组1,2将骨髓间质干细胞培养液上清加入6孔板内处理肝星状细胞,分别为2 mL培养液上清/孔,1 mL培养液上清+1 mL完全培养基/孔;对照组为肝星状细胞单独培养(2 mL完全培养基/孔)。流式细胞仪分析细胞周期并观察抑制效果,RT-PCR检测肝星状细胞内转化生长因子β、金属蛋白酶抑制因子2、胶原蛋白ⅠmRNA的表达情况。 结果与结论：加入骨髓间质干细胞培养液上清后,实验组1中的肝星状细胞增殖与对照组相比受到抑制,且抑制率随处理时间的延长而增多(处理72 h>处理48 h>处理24 h,P < 0.05); 实验组的肝星状细胞内转化生长因子β、金属蛋白酶抑制因子2、胶原蛋白Ⅰ mRNA的表达较对照组均下调,且下调程度随培养液上清增多而增大(实验组1>实验组2>对照组)。     

降钙素对体外培养的小鼠胚泡发育、分化的影响

目的：探讨降钙素(CT)与小鼠胚泡发育及植入的关系。方法：将孕D4小鼠胚泡随机分组并接种到添加不同成分的培养液内进行体外培养。于培养24、48h后在倒置显微镜下观察、记录胚泡的孵化、粘附及扩展生长情况。结果：培养24h后,添加10nmol/L CT组与联合培养组胚泡的粘附率分别为31．71％、32．35％,和对照组(16．30％)相比,均有明显增加。培养48h后,添加10nmol/L CT组与联合培养组胚泡的孵化率、粘附率、扩展率均比对照组有非常显著增高。结论：CT可明显地促进体外培养的小鼠胚泡孵化、粘附及扩展生长,与植入过程密切相关。     

多发性骨髓瘤细胞条件培养液对人脐带间充质干细胞增殖和分化的影响

背景：近年来,在肿瘤微环境中干细胞与肿瘤的相互作用已成为研究热点,但是多发性骨髓瘤细胞条件培养液对人脐带间充质干细胞影响的实验鲜有报道。目的：探讨多发性骨髓瘤细胞条件培养液对人脐带间充质干细胞增殖、迁移及分化能力的影响。方法：以组织块贴壁法提取人脐带间充质干细胞,同时培养并提取人多发性骨髓瘤RPMI8226和U266细胞上清液制备条件培养液。按培养基的不同进行细胞分组：对照组人脐带间充质干细胞仅用L-DMEM完全培养液培养;实验组人脐带间充质干细胞用20%RPMI8226细胞条件培养液或20%U266细胞条件培养液和80%L-DMEM完全培养液培养。培养24 h,通过CCK-8、EDU、结晶紫染色观察细胞增殖情况,划痕法评估细胞迁移情况,成骨成脂诱导实验检测细胞分化能力,Real-time PCR检测细胞中周期蛋白基因p16、p21 mRNA表达。结果与结论：实验组细胞的增殖数量多于对照组(P <0.05),迁移率高于对照组(P <0.05),矿化结节染色面积小于对照组(P <0.05),脂滴阳性染色面积大于对照组(P <0.05);实验组的细胞周期基因p16、...     

重组白细胞介素13促进成纤维细胞增殖及胶原合成

目的：观察重组白细胞介素13（rIL-13）对3T3细胞的作用，探讨肺纤维化的发生机制。 方法： 3T3细胞分为实验组和对照组，分别加入rIL-13 (80 μg/L)及DMEM培养液, 作用24 h、48 h，利用透射电镜观察成纤维细胞的超微结构，用Hoechst 试剂盒观察细胞DNA形态；用MTT法测细胞增殖率，用Western blotting检测成纤维细胞分泌Ⅰ型胶原以及用放免法检测细胞上清中IL-6、IL-8水平。 结果： 实验组细胞DNA合成增加，细胞核增大，细胞质中可见较多核糖体及线粒体；rIL-13呈剂量依赖方式刺激成纤维细胞增殖，当rIL-13浓度在40-160 μg/L时，细胞增殖率几乎呈直线式增长。对照组及实验组均可检测到Ⅰ型胶原（CoⅠ），对照组分泌胶原的量显著高于对照组（P<0.01）。细胞培养上清中，实验组IL-6、IL-8含量显著高于对照组（P<0.01）。 结论： rIL-13通过促进成纤维细胞增殖及分泌炎性介质和Ⅰ型胶原，可能在肺纤维化的发病机制中发挥关键作用。