3种治法对RSV诱导的肺炎小鼠炎性细胞因子的表达及TLR-4/NF-кB信号通路调控研究

目的:探讨3种治法代表方剂对呼吸道合胞病毒(RSV)诱导引起肺炎的小鼠血清IL-6、IL-8及肺组织Toll样受体4(TLR4)、细胞核转录因子(NF-кB)的影响,揭示其治疗机制。方法:将Wister小鼠随机分为正常组、模型组、利巴韦林组、银翘散组、玉屏风散组、银屏散组。于感染前3 d,玉屏风散组、银屏散组连续给予玉屏风散(7.5 g·kg·d-1)3 d;除正常组以外,50μL 10 LD50病毒液滴鼻建立呼吸道合胞病毒感染的小鼠RSV肺炎模型。感染2 h后,银翘散组、银屏散组继续给予银翘散治疗(10 g·kg·d-1),连续给药3 d;采用ELISA法检测各组小鼠血清中IL-6、IL-8含量,免疫组化法检测分析肺组织TLR4、NF-кB P65蛋白的表达。结果:与正常组比较,RSV感染诱导小鼠肺组织中TLR4蛋白表达上调,增加NF-кB的活化(P<0.05),使血清中IL-6、IL-8水平升高(P<0.05)。银翘散组、玉屏风散组、双表法组测得IL-6、IL-8含量以及TLR4、NF-κB P65表达相较于模型组显著减弱(P<0.05)。与利巴韦林组比较,双表法组减弱尤为突出(P<0.05)。结论:3种治法对于治疗RSV肺炎均有显著疗效,尤其以双表法疗效更佳。其作用机制可能与抑制炎症因子IL-6、IL-8分泌及阻断TLR4/NF-κB信号通路有关。     

3种治法对RSV诱导的肺炎小鼠炎性细胞因子的表达及TLR-4/NF-кB信号通路调控研究

目的:探讨3种治法代表方剂对呼吸道合胞病毒(RSV)诱导引起肺炎的小鼠血清IL-6、IL-8及肺组织Toll样受体4(TLR4)、细胞核转录因子(NF-кB)的影响,揭示其治疗机制。方法:将Wister小鼠随机分为正常组、模型组、利巴韦林组、银翘散组、玉屏风散组、银屏散组。于感染前3 d,玉屏风散组、银屏散组连续给予玉屏风散(7.5 g·kg·d-1)3 d;除正常组以外,50μL 10 LD50病毒液滴鼻建立呼吸道合胞病毒感染的小鼠RSV肺炎模型。感染2 h后,银翘散组、银屏散组继续给予银翘散治疗(10 g·kg·d-1),连续给药3 d;采用ELISA法检测各组小鼠血清中IL-6、IL-8含量,免疫组化法检测分析肺组织TLR4、NF-кB P65蛋白的表达。结果:与正常组比较,RSV感染诱导小鼠肺组织中TLR4蛋白表达上调,增加NF-кB的活化(P<0.05),使血清中IL-6、IL-8水平升高(P<0.05)。银翘散组、玉屏风散组、双表法组测得IL-6、IL-8含量以及TLR4、NF-κB P65表达相较于模型组显著减弱(P<0.05)。与利巴韦林组比较,双表法组减弱尤为突出(P<0.05)。结论:3种治法对于治疗RSV肺炎均有显著疗效,尤其以双表法疗效更佳。其作用机制可能与抑制炎症因子IL-6、IL-8分泌及阻断TLR4/NF-κB信号通路有关。     

喘可治注射液对甲型H1N1流感病毒FM1株致小鼠肺炎的影响

目的:评价喘可治注射液对甲型H1N1流感病毒FM1株致小鼠肺炎模型的药效作用。方法:将ICR小鼠随机分为正常组、模型组、达菲组(27.5 mg·kg~(-1)·d~(-1))、喘可治注射液组(1.5 m L·kg~(-1)·d~(-1))。除正常组外,其余各组采用甲型H1N1流感病毒FM1株滴鼻感染ICR小鼠造成病毒性肺炎模型,分别进行死亡保护实验、治疗性给药实验和预防性给药实验。死亡保护实验中每组20只小鼠,以2倍半数致死量(LD_(50))流感病毒液滴鼻感染,感染后当天开始给药,每天1次,连续4 d,观察感染后14 d内动物的死亡情况,并计算死亡率、死亡保护率;治疗性给药实验中每组10只小鼠,以0.8倍LD_(50)流感病毒液滴鼻感染,感染后当天开始给药,每天1次,连续4 d,于实验第5天处死小鼠,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测肺组织中白细胞介素-8(IL-8)含量及脑组织内发热介质前列腺素E_2(PGE_2),精氨酸加压素(AVP)的含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肺组织内相对病毒载量;预防性给药实验中每组10只小鼠,分组当天开始给药,每天1次,连续5 d,末次给药1 h后,除正常组外,其余各组以0.8倍LD_(50)流感病毒滴鼻感染ICR小鼠,感染后第4天称重后处死小鼠,计算各组肺指数、脾指数、胸腺指数及肺指数抑制率,Real-time PCR检测肺组织内相对病毒载量。结果:与正常组比较,模型组小鼠IL-8,PGE2含量,肺指数及肺组织内流感病毒株病毒载量均显著升高(P0.01);与模型组比较,治疗性给予喘可治注射液可明显降低感染后小鼠的死亡率、肺组织内IL-8含量、脑组织内PGE_2含量及肺组织中流感病毒病毒载量(P0.05,P0.01);预防性给予喘可治注射液可显著提高感染小鼠的胸腺指数(P0.01),明显降低感染小鼠肺指数及肺组织中流感病毒病毒载量(P0.05);两种给药方式均可明显减轻支气管、血管周围及肺泡间质等组织炎性细胞浸润,减少管腔内红细胞渗出。结论:喘可治注射液对甲型H1N1流感病毒感染所致病毒性肺炎小鼠模型有较好的治疗和预防作用,其作用机制可能与减轻炎症反应和抑制病毒复制有关。     

银翘散不同煎煮时间对甲型流感病毒感染小鼠肺组织病毒载量的影响

目的 研究银翘散的抗病毒作用及最佳煎煮时间。方法 72只BALB/c小鼠随机分为银翘散3、6、12分钟组及空白对照组、模型对照组、阳性对照组,每组12只。除空白对照组外,其他各组小鼠以15LD50甲型流感病毒鼠肺适应株FM1滴鼻感染,每只0.05 ml。银翘散3、6、12分钟组在感染当天灌胃给予相应的银翘散煎煮液(分别煎煮3、6、12分钟),每天1次,每次0.5 ml,给药7天;阳性对照组灌胃给予磷酸奥司他韦胶囊27.5 mg/(kg·d);空白对照组、模型对照组小鼠灌胃给予0.2 ml/10 g蒸馏水。比较各组小鼠第3、7天时肺指数、肺指数抑制率及脾指数,并检测小鼠肺组织中相对病毒载量。结果 与空白对照组比较,模型对照组第3天、第7天时肺指数及肺组织病毒载量均明显升高(P0.05);与模型对照组比较,第3天时阳性对照组和银翘散3、6分钟组肺指数均明显降低,第7天时阳性对照组和银翘散各组小鼠肺指数、病毒载量明显降低(P0.05)。各组小鼠第3天和第7天脾指数比较差异均无统计学意义(P0.05)。第3天和第7天,银翘散3分钟组肺指数抑制率、病毒抑制率与阳性对照组最为接近。结论 银翘散对甲型流感病毒鼠肺适应株FM1感染小鼠具有较好的抗病毒作用,煎煮时间以3~6分钟效果最佳。     

预防性中药防治流感病毒作用及其免疫调节机制探讨

目的:研究预防性中药抗流感病毒及其黏膜免疫调节机制。方法:56只雌性SPF级BALB/C小鼠,随机分为造模组(48只)和正常组(8只),建立小鼠流感病毒H1N1/FM/1感染模型,造模成功后随机分为模型组、病毒唑组(0.1 g·kg-1),银翘散组(40 g·kg-1),玉屏风散组(60 g·kg-1),冰香散雾化组(0.6 g·kg-1),冰香散滴鼻组(0.03 g·kg-1),ig给药,5 d后处死小鼠,测定病毒载量,同时进行肺组织病理学检查;检测对气管黏膜树突状细胞(DC)数量(OX-62),成熟度:以CD80,趋化因子激素受体7(CCR7)阳性表达面积表示及抗原识别受体Toll样受体2(TLR2)和TLR4的影响;对鼻通道淋巴组织细胞CD4+,CD8+进行相应的检查。结果:与模型组比较,预防性中药对病毒载量及肺组织病理学有显著的抑制作用,流感病毒感染小鼠气管黏膜OX-62增加,冰香散(雾化)能使流感病毒感染鼠DC数降低,CD80和CCR7明显下降,而病毒唑和银翘散制剂能提升CCR7阳性表达面积,流感病毒感染鼠黏膜TLR2,TLR4表达增强,冰香散能抑制流感病毒感染鼠TLR2的表达,冰香散滴鼻给药能提高CD4+,CD8+的水平,均具有明显的统计学差异(P0.05,P0.01)。结论:三类防治流感的中药均有较好的抑制流感病毒作用,其作用可能与其调节呼吸道黏膜免疫作用有关。     

金柴抗病毒胶囊对甲型H1N1流感病毒FM1株感染免疫低下小鼠肺炎的影响

目的 :观察金柴抗病毒胶囊对H1N1流感病毒FM1感染免疫低下动物的防治作用。 方法 :采用环磷酰胺注射造成免疫低下模型,经滴鼻感染甲型H1N1流感病毒FM1株造成肺炎模型,分别经预防给药5 d和治疗4 d,取各组小鼠肺组织,称重,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测肺组织中相对病毒载量,观察金柴抗病毒胶囊对小鼠肺指数、病毒载量的影响。 结果 :模型组小鼠经流感病毒FM1株感染后,肺指数明显升高,肺组织中相对病毒载量显著高表达,金柴抗病毒胶囊各剂量组均可明显降低流感病毒感染免疫低下小鼠肺指数以及肺组织中相对病毒载量,降低动物模型肺指数、相对病毒载量的作用与达菲比较无显著性差异。 结论 :金柴抗病毒胶囊对流感病毒感染免疫低下小鼠有较好的治疗和预防作用。     

小儿肺热咳喘口服液防治甲型H1N1流感病毒感染免疫低下小鼠的研究

目的:评价小儿肺热咳喘口服液对免疫低下小鼠感染甲型H1N1流感病毒的防治作用。方法:ICR小鼠sc环磷酰胺造成免疫低下,以甲型H1N1流感病毒滴鼻感染造成肺炎模型,造模同时及造模前ig 20,10,5 mL·kg-1小儿肺热咳喘口服液4 d后观察肺部炎症、计算肺指数,死亡率和生命延长率,Real-time RT-PCR法检测肺组织中病毒载量,酶联免疫法检测血清中免疫因子的含量。结果:小儿肺热咳喘口服液治疗性给药或预防性给药后能明显降低流感病毒FM1株和PR8株感染后免疫低下小鼠的肺指数、降低死亡率、延长平均存活天数、显著降低小鼠肺组织中的病毒载量,明显升高小鼠血清中CD4/CD8的比值。结论:小儿肺热咳喘口服液对甲型H1N1流感病毒感染免疫低下小鼠造成的病毒性肺炎具有明显的防治作用。     

双表法对流感病毒感染小鼠肺组织TLR4/NF-κB信号通路的调控作用

目的:研究扶正祛邪双表法对流感病毒感染小鼠肺组织TLR4/NF-κB信号通路的调控作用。方法:将昆明种小鼠随机分为模型组、正常组、解表法代表方剂银翘散(YQS)组、固表法代表方剂玉屏风散(YPF)组、双表法代表方剂(YPS)组以及利巴韦林组。采用流感病毒滴鼻方法建立病毒感染模型,根据给药量制备相应浓度药物并灌胃给药,正常组和模型组给予同体积生理盐水。采用RT-PCR、免疫组化法检测给药后1、3、5、7天各时间点各组小鼠Toll样受体4(toll like receptors 4,TLR4)和核转录因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)蛋白及其m RNA动态表达情况。结果:YQS、YPF及YPS在不同时点均能不同程度阻断流感小鼠肺组织中TLR4、NF-κB蛋白及其m RNA的高表达,并且YPS组表达最低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:双表法对流感病毒感染小鼠的防治作用与抑制流感病毒感染小鼠肺组织TLR4/NF-κB信号通路过度活化有关。     

双表法对RSV诱导的肺炎小鼠TLR-4、IL-4动态调控研究

目的探讨双表法对RSV感染小鼠血清中IL-4以及肺组织中TLR-4动态表达的影响。方法将Wister小鼠随机分为正常组、模型组、解表组(银翘散,YQS)、双表组(银翘散+玉屏风散,YPS)和利巴韦林组(RBV)。于感染前3 d双表组,连续给予玉屏风散(7.5 g·kg·d-1)3 d;除正常组以外,50μl 10 LD50病毒液滴鼻建立呼吸道合胞病毒感染的小鼠RSV肺炎模型。感染后2h,正常组和模型组予以双蒸水灌胃,解表组及双表组给与YPS(10 g·kg·d-1)治疗,连续给药3 d;于末次给药后1、3、5、7 d取材,测定不同时间点小鼠肺指数;采用免疫组织化学方法检测小鼠肺组织中TLR-4蛋白的动态表达;ELISA法测定血清中IL-4的含量。结果 YQS、YPS可明显降低小鼠感染后肺指数(P0.05);治疗后第3天,与模型组相比,YQS、YPS组小鼠血清中IL-4的含量和肺组织中TLR-4蛋白的表达水平有所降低(P0.05);第5天后较模型组显著降低(P0.01)。与YQS相比,YPS治疗效果差异显著(P0.05)。结论双表法对RSV诱导的病毒性肺炎疗效显著,其可能通过抑制TLR-4的蛋白表达,降低血清中IL-4水平,从而达到减轻RSV感染所致的肺损伤的治疗目的。     

喘可治注射液对甲型H1N1流感病毒FM1株感染免疫低下小鼠肺炎的影响

目的:观察喘可治注射液对甲型H1N1流感病毒感染免疫低下小鼠肺炎模型的预防和治疗作用。方法:采用腹腔注射环磷酰胺联合甲型H1N1流感病毒FM1株滴鼻感染ICR小鼠造成免疫低下小鼠肺炎模型,分别经治疗性给药4 d和预防性给药5 d后,取各组小鼠肺组织称重,计算肺指数、肺指数抑制率, RT-PCR法检测各组小鼠肺组织中相对病毒载量。结果:采用甲型H1N1流感病毒FM1株感染免疫低下小鼠后,肺指数明显增高,脾、胸腺指数降低,三者与环磷酰胺对照组比较差异有显著统计学意义(P0.01)。治疗性给予喘可治注射液4d后,小鼠肺指数有所降低,与模型对照组比较差异无统计学意义(P0.05);脾指数和胸腺指数均升高,其中脾指数与模型对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)。预防性给予喘可治注射液5 d,肺指数明显降低,与模型对照组比较差异有显著统计学意义(P0.01);小鼠肺组织中FM1株流感病毒病毒载量也明显降低,与模型对照组比较差异有统计学意义(P0.05),病毒载量抑制率可达58.68%。结论:喘可治注射液对流感病毒感染免疫低下小鼠肺炎模型有较好的防治作用。     

论病毒性心肌炎的治疗

病毒性心肌炎是感染病毒引起的心脏急、慢性炎症,临床不但可以引起心律失常、心功能不全等并发症,少数病例可猝死或演变为心肌病,是危害青少年身心健康的一种常见而多发的疾病。由于本病为病毒感染引起,目前西医无特效疗法,而中医药在防治本病方面有一定的优势。近年来,多数医家认为本病的病机关键是“虚”、“瘀”、“毒”三个字,气虚阴虚为本,热毒血瘀为标,气阴两虚不仅是本病发病的内因,还是病变发展的必然结果,存     

病毒性肺炎治疗研究

病毒性肺炎是由多种病毒感染引起的支气管肺炎,并且具有发病急、症状重、并发症多的特点,严重的可危急患者生命.临床上,仅用抗病毒药物或是单纯使用中药对治疗病毒性肺炎效果不明显.本文在分析病毒性肺炎的病理、种类、临床表现、检查及诊断分析的基础之上,对病毒性肺炎的治疗方法进行研究.     

著名中医专家李德新教授学术经验之一 乙型病毒性肝炎的中医疗法

李德新教授治疗乙肝临床经验丰富 ,认为乙肝的治疗要以“补肝体和肝用”为总则 ,辨证论治 ,方从法出 ,用药随证加减 ,灵活权变 ,疗效显著     

敷胸膏对大鼠呼吸道合胞病毒肺炎肺形态学改变及肺组织病毒载量的影响

目的:探讨敷胸膏对大鼠呼吸道合胞病毒肺炎的治疗作用。方法:以呼吸道合胞病毒滴鼻感染大鼠,治疗组予敷胸膏干预。每日观察大鼠的生存状态,在合胞病毒感染后3、5、7 d,计算肺指数,苏木素-伊红染色(HE染色)法观察病理改变,实时荧光定量PCR(real time RT-PCR)检测大鼠肺组织中病毒载量。结果:治疗组在感染后第3、5、7天全身症状减轻,肺指数下降;肺病变范围及肺泡腔渗出物减小;肺组织病毒载量降低。结论:敷胸膏对大鼠呼吸道合胞病毒肺炎有一定的治疗作用。     

炎症复合体与流感病毒感染

炎症复合体可识别和感受多种微生物产物及细胞内自身代谢性应激而活化胱天蛋白酶,诱导白介素-1β、白介素-18、白介素-33等促炎性反应细胞因子的分泌及多种炎症递质的释放,在抗流感病毒感染过程中发挥着重要作用。这可能为调控流感病毒介导的免疫反应提供新的作用靶点。     

流感病毒裂解效果研究

目的 不同时间裂解甲乙型流感病毒，测定血凝效价，找出最佳裂解条件。方法 甲乙型单价病毒液中分别加入0．5％—0．6％TritonN—101，室温振荡一定时间后取样，电镜观察结果。结果 经过观察Al和A3型流感病毒在3—4h、乙型流感病毒在4—5h效果较好。结论 流感疫苗生产中甲乙型流感病毒的裂解应采取不同时间以获得最佳效果。     

与流感病毒NP互作的宿主靶点及栀子环烯醚萜苷抗流感病毒的机制

目的 探索与流感病毒核蛋白（NP）相互作用的宿主因子,研究其对流感病毒复制的影响,以及栀子环烯醚萜苷（IGE）抑制流感病毒的作用机制。方法 利用酵母双杂交系统筛选与流感病毒NP相互作用的宿主因子;通过免疫共沉淀实验对异质核糖核蛋白（HNRNPD）、氨基葡萄糖6磷酸脱氨酶1（GNPDA1）、Poly/rC结合因子1（PCBP1）、激活信号转导和转录激活因子（STAT）蛋白1抑制因子（PIAS1）进行验证;通过双荧光素酶实验比较PIAS1和HNRNPD对流感病毒复制的影响,并检测在转染核糖核蛋白体复合物（RNP）及PIAS1敲低的情况下,给予栀子环烯醚萜苷对流感病毒复制的影响。将ICR小鼠随机分为正常组、模型组、达菲组和IGE高、中、低剂量组,每组10只。除正常组外各组滴鼻感染甲型流感病毒FM1株建立病毒性肺炎模型。IGE高、中、低剂量组分别给予50、25、12.5 mg?kg^-1 IGE灌胃,达菲组给予27.5 mg?kg^-1达菲灌胃,正常组和模型组灌服等体积蒸馏水,连续4 d。实验结束后,蛋白免疫印迹法检测肺组织中PIAS1、NP、磷酸化（p）-STAT3、STAT3、p-STAT1、STAT1的蛋白表达。结果 在酵母双杂交实验中,发现了16个流感病毒NP的潜在互作宿主靶点;免疫共沉淀实验发现HNRNPD和PIAS1可以与流感病毒NP相互作用;双荧光素酶报告实验中PIAS1敲低和过表达都可明显影响IAV RNP活性（P<0.05,P<0.01）,HNRNPD对IAV RNP的影响差异无统计学意义;IGE高、低剂量组均可使流感病毒复制减少（P<0.05）,并可逆转PIAS1敲低导致的流感病毒复制增加（P<0.05,P<0.01）。IGE各剂量组不同程度地降低感染小鼠肺组织PIAS1、NP、p-STAT3、p-STAT1、STAT1的表达量（P<0.05,P<0.01）。结论 PIAS1和流感病毒NP相互作用,并能够抑制流感病毒的复制,栀子环烯醚萜苷可能通过PIAS1/STAT1通路抑制IAV RNP的活性,从而发挥抗病毒作用。     

乙型肝炎病毒选择性抑制剂的研究进展

 目的综述了近年来乙型肝炎病毒(HBV)选择性抑制剂的研究现状及发展趋势。方法查阅最新国外相关文献,按照化合物结构的不同分别对核苷类和非核苷类化合物的抗HBV活性、选择性和作用机制进行分析、归纳和总结。结果与结论抗HBV药物的设计主要应寻找新的药物作用靶点,设计作用机制不同的药物,从而有利于遏制单独应用核苷类药物引起的耐药性HBV变种的增长。     

神经氨酸酶抑制剂抗流感病毒的研究进展

  神经氨酸酶(NA)是流感病毒表面一种蘑菇云状四聚体结构的包膜糖蛋白,其抑制剂对高致病性流感病毒的各亚型均具有抑制作用,且其安全性和耐药性良好,可用于流感病毒的预防和治疗。笔者在归纳总结近年来该领域国内外文献的基础之上,对神经氨酸酶及其抑制剂的分类、构效关系以及国内外研究现状进行总结,有助于我们更好地利用现有条件设计并合成出活性更好、选择性更高的抗流感药物。     

慢性乙型肝炎中医证型与病毒核酸指标的关系

目的:探讨慢性乙型病毒肝炎(CHB)中医证型与乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)水平关系.方法:对260例CHB患者进行中医辨证分型及HBV-DNA定量检测,进行统计处理.结果:各中医证型的HBV-DNA水平有一定规律性,按肝郁脾虚、湿热中阻、肝肾阴虚、脾肾阳虚、瘀血阻络顺序呈递减趋势.结论:CHB患者HBV-DNA水平与中医证型密切相关,可为中医辨证分型提供部分客观的依据.