ADVIA Centaur XP全自动免疫分析仪常见问题及处理对策

ADVIA Centaur XP系统是西门子公司研发生产的全自动化学发光免疫分析仪,利用吖啶酯标记抗原（抗体）,和相应抗体（抗原）反应后,在NaOH和H2O2递质中,瞬间发出光子,通过捕获光子数量,从而得到待检物含量[1]。ADVIA Centaur XP属于直接化学发光,以其自动化程度高、测试速度快而著称,首个结果时间仅需15 min,每小时可进行240个测试。具有超大的样本容量,30个冷藏主试剂位和25个辅助试剂位的设计,使其具有连续3.5 h的离机时间,且在添加耗材和撤卸废物时无需暂停仪器。被广泛用于甲状腺激素、生殖激素、垂体激素、皮质激素、肿瘤标志物、贫血因子、心肌标志物、感染性病原体标记物、糖尿病指标、过敏性疾病指标及治疗药物监测中,充分满足了临床在疾病诊断、治疗、预防、疗效和预后判断方面所需。但在实验室操作仪器过程中,难免也会出现一些问题,以致影响仪器正常运转。我们把使用仪器中遇到的问题及处理过程总结如下,供同行借鉴。     

检测乙型肝炎两对半三种常见方法的比较

<正>乙型肝炎是乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)引起的全球性传染病,全世界乙型肝炎携带者达5亿人之多,而我国是HBV流行地区,HBV携带者占总人口的10%以上,是一种严重危害人类健康的疾病,血清学标志物检测为临床医师提供了可靠的依据[1],其防治的关键是早诊断、早接种、早治疗。目前较为广泛采用的是酶联免疫吸附试验(ELISA)法,其方法简便、价廉,适合一般实验室推广,它常用聚苯乙烯为固相载体,使其与待测标本中的相应抗体或抗原结合,然后加酶标记的抗原或抗体,再加底物显色,最后根据色泽深浅来推算待测抗原或抗体的含量。此方法特异性高,有效测定     

放射免疫分析法原理及操作注意事项

放射免疫分析的原理[1]:就是利用放射性核素标记抗原或抗体,然后与被测的抗体或抗原结合,形成抗原抗体复合物的原理来进行分析的。它又分为两种方法。1竞争性RIA,又称传统RIA主要特点:标记的是抗原。其原理:未知抗原Ag+标记抗原Ag*+已知定量抗体Ab标记抗原与抗体复合物Ag*Ab+未知抗原与抗体复合物Ag Ab+游离标记抗原Ag*(去除)(未知抗原多,标记抗原与定量抗体结合的复合物就少,表现为负相关)。临床上甲胎蛋白(AFP),癌胚抗原(CEA),β2-微球蛋白(β2-MG),铁蛋白(Fer),人绒毛膜促性腺激素β亚单位(HCG-β)等的检测都是竞争性RIA法原…     

免疫组织化学方法在眼眶肿瘤病理诊断中的应用及其前景

免疫组织化学方法是将一些可视性物质 ,如荧光素染料、碱性磷酸酶、辣根过氧化物酶等与组织和细胞中的特异性抗原相结合 ,利用抗原与抗体的特异性反应来检测组织中的未知抗原或者抗体 ,借以判断检测组织的来源和分化程度 ,协助病理诊断和鉴别诊断[1-4 ] 。免疫组织化学技术一般分为两大类 :一为直接免疫组织化学方法 ,即用标记有可视性物质的特异性抗体证实抗原的存在。二为间接免疫组织化学方法 ,即用标记可视性物质的第二抗体来检测初级抗体 -抗原反应复合物的存在[2 ] 。传统使用的荧光素染料标记特异性抗体的方法 ,称为免疫荧光技术。此…     

冠心病患者血清中TT3与FT3的变化

1 临床资料 在我院心内科住院的冠心病患者的血液检查中，有部分病人血清中的T3或FT3出现了不同程度的减低，以往对于血清甲状腺功能的检测多用放射免疫法，其在线性范围检测的准确性较低。目前我院是使用美国BECKMAN公司的Access化学发光仪，用化学发光法检测血清T3，FT3等甲状腺素。Access对T3检测是一种竞争抑制的酶免疫方法，样品和用以破坏T3与血清中蛋白结合的消化剂被加入到反应管中，样品中的T3与和生物素结合的T3类似物质竞争的与抗T3碱性磷酸酶标记的酶结合物相结合，形成两种抗原抗体复合物。     

心肌损伤标志物在不同仪器上测定结果的比对试验

近年来我国心血管疾病患者逐年上升,急诊心血管患者数也大为增加,2006年中华医学会检验分会明确指出,对疑为急性冠状动脉综合征(ACS)或其他原因引起的心肌损伤患者应进行心肌损伤标志物的检测[1]。我科对2台分析仪的检测结果进行比对试验,现报告如下。1材料与方法1.1材料:①仪器与试剂:全自动化学发光仪贝克曼Access及其配套试剂盒;贝克曼库尔特UniCel DxI 800及其配套试     

CHEMCLIN 600化学发光仪筛查梅毒抗体假阳性分析

梅毒是由苍白螺旋体引起的慢性、系统性性传播疾病，绝大多数是通过性途径传播。我国自20世纪80年代梅毒开始复燃以来，发病率逐年升高[1]。目前，实验室常用的检查方法主要有两类：一类是非梅毒螺旋体抗原血清学试验，该类试验对早期、晚期和潜伏期梅毒的诊断存在假阴性；另一类是梅毒螺旋体抗原血清学试验，检测血清中抗梅毒螺旋体IgG或IgM，具有高敏感性和高特异性，一般用作确认试验[2]。微粒子化学发光免疫测定法（CLIA)是用于检测微量抗原或抗体的一种标记免疫检测技术，具有操作简便，自动化程度高，结果易于保存，高敏感度和高特异度等优点[3]。我院2014年引进北京科美生物技术有限公司生产的CHEMCLIN 600全自动化学发光仪，2015年全年共检测31023例标本，发现316例阳性标本，但使用明胶颗粒凝集试验(TPPA)法复查，其中61例为假阳性，为了探查原因，进行分析研究如下。     

EIESA试剂盒中显色液应用于HRP逆行神经束路追踪实验染色的尝试

ELESA即酶联免疫吸附试验，是免疫学检测的常用方法。其原理为：标记有HRP(辣根过氧化物酶)的抗体或抗抗体与待检样品中的抗原或抗体进行抗原抗体反应，再利用HRP与酶反应底物发生呈色反应，以此来判断样品中待检抗原或抗体的有无及多少。酶反应底物包括H202和DAB或TMB。DAB(二氨基联苯胺)和TMB(四氨基联苯胺)均为呈色反应的供氢体，它们在H2O2存在时与HRP发生反应，前者的反应产物呈棕色，后者的反应产物呈蓝色。但由于DAB     

化学发光免疫法在肿瘤生物标志物检验中的应用

恶性肿瘤严重威胁人类健康,肿瘤生物标志物检验对于恶性肿瘤筛查、早期诊断、预后、疗效评估具有重要意义。化学发光免疫法指利用标记在抗体上物质发光检验的方法,灵敏度高,选择性好,通常包括酶标化学发光和无酶标记化学发光方法。化学发光免疫法广泛应用于肿瘤生物标志物检验。随着纳米金、石墨烯和多碳纳米管等纳米材料,核酸适配体,磁性微球,脂质体,人工模拟酶等的应用［1‐3］,肿瘤生物标志物化学发光免疫法检验取得了较大的进步。本文就近年来化学发光免疫法在肿瘤生物标志物检验研究进展进行综述。     

ELESA试剂盒中显色液应用于HRP逆行神经束路追踪实验染色的尝试

ELESA即酶联免疫吸附试验,是免疫学检测的常用方法。其原理为:标记有HRP(辣根过氧化物酶)的抗体或抗抗体与待检样品中的抗原或抗体进行抗原抗体反应,再利用HRP与酶反应底物发生呈色反应,以此来判断样品中待检抗原或抗体的有无及多少。酶反应底物包括H2 O2 和DAB或TMB。DAB(二氨基联苯胺)和TMB(四氨基联苯胺)均为呈色反应的供氢体,它们在H2 O2 存在时与HRP发生反应,前者的反应产物呈棕色,后者的反应产物呈蓝色。但由于DAB具有致癌性,所以目前TMB较为常用,有逐步取代DAB的趋势。为了使操作简便,许多厂家生产ELESA试剂盒。E…     

化学发光法与ELISA法检测乙型肝炎病毒指标比较

目的：比较化学发光免疫测定（CL）与酶联免疫吸附试验（ELISA）2种方法检测乙型肝炎病毒标志物的优缺点。方法：用上述2种方法对乙型肝炎病毒五项标志物分别进行检测,然后进行结果分析。结果：化学发光法检测乙型肝炎表面抗原和核心抗体,与ELISA法比较有统计学意义（P〈0．05）,而对表面抗体、e抗原及e抗体的检测与ELISA法比较无统计学意义。结论：化学发光法检测乙肝标志物较ELISA法准确、可靠,少见模式出现几率较小。     

ELISA试验临床常见错误结果的原因及处理办法

酶免疫技术是继荧光免疫技术和放射免疫技术之后建立的一种非放射性免疫标记技术，其主要特点是以酶作为示踪剂标记的抗体(或抗原)用于免疫检没，并以相应底场被酶分解的显色反应，来对细胞和组织标本中的抗原(或抗体)进行定位分析和鉴定，亦可根据酶催化底物显色的深浅程度，定量测定样品待测抗原或抗体的含量。     

固相间接免疫测定中酶标二次抗体非特异反应的排除

直接点滴法或免疫转印(Immuno-transfer blot)法在硝酸纤维素膜上检测某一抗原时,常用间接法来进行。单克隆抗体的广泛应用,使得到具有较高特异性的一次抗体不再困难,而待测物与过氧化物酶标记的二次抗体试剂大都为多种物质的混合体。因此,酶标记的抗体中的某些成分     

WALLAC-VICTOR~2型时间分辨荧光仪性能评价

<正>时间分辨荧光法(TRFIA)是以稀土元素(钐Sm、铕Eu等)标记抗原、抗体、核酸探针和活细胞等为特征的超灵敏检测技术,它克服了酶标记物的不稳定、化学发光标记仅能一次发光及一般荧光标记受环境干扰的难点,使非特异性信号降低到可以忽略的程度,达到了极高的信噪比,从而显著地超过放射性同位素所能达到的测定灵敏度.本科室从芬兰EG＆G公司引进WALLAC—VICTOR~2型时间分辨荧光仪,为了解其性能和可信度,我们参考有关仪器评价内容和要求的文献进行仪器评价,结果表明,该仪器的精密度、准确性较好,线性范围宽,不受溶血、RF因子的干扰,现报告如下.     

耳血法铁蛋白放射免疫测定

血清铁蛋白的放射免疫测定,越来越普遍地应用于缺铁性贫血的诊治。目前,此测定大多采用静脉采血法。为了减少患者的痛苦,特别是方便婴、幼儿患者的标本采集,我们对37例患者应用塑料管进行耳垂采血,分离血清后仅用25μl血清,按放射免疫顺序饱和加样程序,使待测血清先同铁蛋白抗体工作液在没有竞争的标记抗原存在下,经一定时间充分反应     

自动激光散射比浊仪及其初步应用

多年来,应用免疫沉淀反应来检测血清或体液中的抗原成分已成为常规方法,但到七十年代末期人们的注意力开始集中在用分析仪器来直接测量抗原与抗体之间的反应,出现了许多免疫化学自动分析仪器,BLN 激光比浊仪(Behring LaserNephelometer)就是其中之一。该仪器由检测器、自动输送系统、稀释器和电子计算机四部分组成,采用氦-氖激光为光源,波长632.8mm。其测定原理是当抗原和抗体在稀溶液中反应时,迅速地形成     

罗氏Cobas e411电化学发光仪残余试剂回收再利用探讨

<正>电化学发光免疫分析技术因其标志物为非放射性物质,而且具有迅速、方便、灵活、灵敏度及特异度高等优点,已广泛地用于各种激素、肿瘤标志物及其他微量活性物质的测定[1,2]。但配套的试剂均需要进口,测定成本较高。为充分有效利用资源,对罗氏Cobas e411电化学发光仪残余试剂混合再     

免疫荧光直接法在肾穿中的应用体会

免疫荧光技术又称荧光抗体法,是利用荧光色素标记抗体与组织切片或细胞涂片中相应抗原反应,形成抗原与抗体的复合物,借助紫外光激发荧光色素,在荧光显微镜下观察发出荧光的抗原抗体复合物,检测出抗原.免疫荧光直接法对肾小球疾病的病理诊断和研究是不可缺少的方法之一.     

液相芯片技术一步反应法联合定量测定人血清CEA、AFP和tPSA

目的 建立用液相芯片技术同时定量测定人血清中癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)和总前列腺特异性抗原(tPSA)水平的一步反应法,并对该方法进行评价.方法 制备抗体交联微球及生物素标记抗体,用双抗体夹心法测定临床血清标本.结果 联合测定CEA、AFP和tPSA的线性范围分别为0.063～200 ng/ml、0.052～66.6 ng/ml、0.016～20 ng/ml;最低检测限分别为31.3 pg/ml、26.0 pg/ml、7.8 pg/ml;批内精密度<10 %,批间精密度<14 %;血清标本CEA、AFP和tPSA检测值与化学发光免疫分析法(CLIA)测值的相关系数为0.920～0.940,与液相芯片两步反应法测值的相关系数为0.952～0.979.该方法仅需1 μl标本,2 h即可完成检测.结论 液相芯片一步反应法具有高通量、检测范围广、灵敏度高、重复性好、节省样品和时间等优点,具有较大临床应用潜力.     

用Hela细胞检测Bip抗体间接免疫荧光法的建立

目的 建立抗免疫球蛋白结合蛋白(Bip)抗体检测的间接免疫荧光法(IIF),为探讨其在类风湿关节炎(RA)中的意义做出方法 学准备.方法 以Hela细胞为抗原基质固定于载片上,加入待测稀释血清温育,待抗原抗体特异结合后加入荧光素标记的抗人IgG与待测Bip抗体结合,最后置荧光显微镜下观察Hela细胞胞浆有无特异荧光出现.结果 RA患者血清检测中可见到Hela细胞胞浆中出现特异性荧光,而健康献血员血清检测中未发现Hela细胞胞浆中的特异性荧光,实验所见荧光模式与文献报道相符.结论 以Hela细胞为抗原基质的间接免疫荧光法能够对血清中Bip抗体进行检测.