急性胰腺炎患者血清miR-551-5p和miR-126a-5p水平与病情严重程度的相关性

目的:探讨急性胰腺炎(AP)患者血清微小RNA-551-5p(miR-551-5p)、微小RNA-126a-5p(miR-126a-5p)表达水平与AP严重程度的相关性。方法:收集127例AP患者的临床资料,根据病情严重程度分为轻症AP(MAP组) 63例和重症AP(SAP组) 64例;另选取健康体检者60例为对照组。采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测3组血清miR-551-5p和miR-126a-5p水平,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清白介素6(IL-6)、白介素18(IL-18)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)、淀粉酶(AMS)及脂肪酶(LPS)水平;利用Pearson法分析血清miR-551-5p及miR-126a-5p水平与患者Ranson评分、急性生理与慢性健康评估(APCHEⅡ)评分、血清生化指标的关系;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,评估血清miR-551-5p及miR-126a-5p水平对AP的诊断价值;采用Logistic回归分析评估影响AP的危险因素。结果:与对照组比较,SAP组血清TNF-α、IL-6、IL-18、CRP、AMS、LPS水平、Ranson及APCHEⅡ评分显著升高(均P 0. 05),MAP组血清IL-6、IL-18、AMS、LPS水平、Ranson及APCHEⅡ评分显著升高(均P 0. 05);与MAP组比较,SAP组血清TNF-α、IL-6、CRP水平、Ranson及APCHEⅡ评分显著升高(均P 0. 05)。Pearson相关性分析显示,血清miR-551-5p与TNF-α、IL-6、AMS、LPS水平、Ranson及APCHEⅡ评分呈正相关(r值依次为0. 755,0. 684,0. 531,0. 519,0. 712,0. 679,均P 0. 05);血清miR-126a-5p与IL-6、IL-18、AMS水平及Ranson评分呈正相关(r值依次为0. 711,0. 678,0. 628,0. 701,均P 0. 05);血清miR-551-5p、miR-126a-5p诊断SAP的ROC曲线下面积(AUC)分别为0. 809、0. 800,截断值分别为2. 01、1. 54,敏感度分别为73. 1%、85. 3%,特异性分别为82. 8%、72. 4%;二者联合诊断的AUC为0. 965,敏感度为96. 5%,特异性为82. 4%;多因素Logistic分析结果显示高水平血清AMS、LPS、miR-551-5p、miR-126a-5p是AP的危险因素。结论:血清高水平miR-551-5p及miR-126a-5p可能反映AP患者病情严重程度,是评估SAP患者预后的潜在指标。     

新生儿急性呼吸窘迫综合征患儿血清miR-877-5p表达变化及其与病情严重程度和预后的关系

目的 探讨新生儿急性呼吸窘迫综合征（NARDS）患儿血清微小RNA-877-5p(miR-877-5p)表达变化及其临床意义。方法 选择NARDS患儿95例（观察组），病情严重程度：轻度38例、中度35例、重度22例，28 d内临床结局：死亡21例、存活74例，同期选择健康新生儿40例作为对照组。采集所有研究对象外周静脉血，离心留取血清，采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测血清miR-877-5p表达，采用酶联免疫吸附试验检测血清IL-1β、IL-6、TNF-α。采用Spearman相关分析法分析NARDS患儿血清miR-877-5p表达与氧指数和血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平的关系。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清miR-877-5p表达对NARDS诊断和预后的预测价值。结果 观察组血清miR-877-5p表达低于对照组，血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平高于对照组（P均<0.01）。随着病情严重程度增加，NARDS患儿血清miR-877-5p表达逐渐降低，血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平逐渐升高（P均<0.01）。Spearman相关分析显...     

miR-19a-3p靶向上调SOCS3参与急性川崎病病理发展的机制研究

目的:探讨微小RNA-19a-3p(miR-19a-3p)/细胞因子信号抑制物3(SOCS3)信号轴在川崎病(KD)病理发展过程中的调控机制。方法:采集我院川崎病患儿、川崎病治疗后患儿血清,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)及蛋白质印迹(Western Blot)法检测miR-19a-3p、SOCS3 mRNA及蛋白表达变化。小鼠腹腔注射白色念珠菌水溶物(CAWS)建立川崎病模型,分为正常对照组、模型组、si-miR-19a-3p组、ad-SOCS3组、si-NC组、ad-NC组,每组10只。取小鼠冠状动脉组织,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、血管内皮素(ET)水平;苏木素-伊红(HE)染色法观察冠状动脉病理变化;免疫组化法检测SOCS3阳性表达水平;RT-qPCR及Western Blot法检测miR-19a-3p、SOCS3 mRNA及蛋白表达变化;Western Blot法检测Janus酪氨酸蛋白激酶2(JAK2)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、磷酸化STAT3(...     

sPE患者血清miR-199a-5p、miR-142-3p表达变化及与产妇血管内皮损伤、围产儿结局的关系

目的 观察重度子痫前期（sPE）患者血清微小核糖核酸-199a-5p(miR-199a-5p)、微小核糖核酸-142-3p(miR-142-3p)表达变化，并分析其与产妇血管内皮损伤、围产儿结局的关系，为围产儿结局的改善提供参考。方法选取sPE患者200例（观察组）和产检健康孕妇200例（对照组），采用RT-PCR法测算两组血清miR-199a-5p、miR-142-3p，酶联免疫吸附试验检测两组血清可溶性细胞内皮因子（sEng）、可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFlt-1)、内皮素-1(ET-1)、血管内皮生长因子（VEGF）,Pearson相关分析法分析观察组血清miR-199a-5p、miR-142-3p与血管内皮功能相关指标的相关性。根据围产儿结局将观察组分为结局不良组（29例）和结局良好组（171例），采用单因素分析法及多因素Logistic回归分析法分析患者血清miR-199a-5p、miR-142-3p表达与围产儿结局的关系。结果 与对照组比较，观察组血清miR-199a-5p表达及VEGF水平降低，血清miR-142-3p表达及sEng、sFlt-1、ET-1水平升高...     

类风湿关节炎患者血清LncRNA MEG3、miR-141水平变化及意义

目的 探讨类风湿关节炎(RA)患者血清长链非编码RNA(LncRNA)母系表达基因3(MEG3)、微小RNA-141(miR-141)水平变化及临床意义。方法 选取211例RA患者,根据病情分为活动期组(n=109)和缓解期组(n=102),另选取同期72例体检健康者为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测LncRNA MEG3、miR-141;采用酶联免疫吸附法测定血清TNF-α、IL-6、MMP-3。比较三组血清LncRNA MEG3、miR-141、MMP-3、TNF-α、IL-6水平,Pearson相关性分析RA患者血清LncRNA MEG3、miR-141与MMP-3、TNF-α、IL-6水平的相关性,多因素Logistic回归分析RA发生的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清LncRNA MEG3、miR-141水平对RA的诊断价值。结果 对照组、缓解期组、活动期组血清LncRNA MEG3水平逐渐降低,miR-141、MMP-3、TNF-α、IL-6水平逐渐提升(P均<0.05)。Pearson相关性分析显示,RA患者血清LncRNA MEG3与miR-...     

急性心肌梗死病人PCI术后血清miR-135b-3p、miR-375-3p相对表达水平及其与主要不良心血管事件发生的关系

目的:分析急性心肌梗死(AMI)病人行经皮冠状动脉介入(PCI)术后血清miR-135b-3p、miR-375-3p相对表达水平及其与主要不良心血管事件(MACE)发生的关系。方法:选取2018年1月—2021年1月我院收治的150例因患AMI进行PCI术的病人,同时选取同期100名健康体检者为对照组。采用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测血清miR-135b-3p、miR-375-3p表达水平;采用Pearson法分析血清miR-135b-3p、miR-375-3p水平及其与临床资料的相关性;受试者工作特征(ROC)曲线评价血清miR-135b-3p、miR-375-3p对AMI病人PCI后发生MACE的预测价值。结果:相较于对照组,试验组血清miR-135b-3p、miR-375-3p水平显著升高(P<0.05)。与非MACE组相比,MACE组C反应蛋白(CRP)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、miR-135b-3p、miR-375-3p水平显著上升(P<0.05)。AMI病人血清miR-135b-3p与miR-375-...     

帕金森病患者血清miR-103a-3p、miR-486-5p水平变化及临床意义

目的 探讨帕金森病(PD)患者血清miR-103a-3p、miR-486-5p水平变化及临床意义.方法 选取183例PD患者为PD组,根据Hoehn-Yahr分级分为重度组(n=53)、中度组(n=71)、轻度组(n=59),另选取75例体检健康者为对照组.采用qRT-PCR检测血清miR-103a-3p、miR-48...     

miR-186-5p基于JAK/STAT3通路对三叉神经痛模型大鼠胶质细胞活化的影响

目的 基于酪氨酸蛋白激酶/信号传导与转录激活因子(JAK/STAT)3通路探讨微小RNA-186-5p(miR-186-5p)对三叉神经痛模型大鼠胶质细胞活化的影响。方法 选取50只健康雄性大鼠，随机选取10只为正常组，剩余40只建立三叉神经痛模型，最终39只建模成功，随机分为三叉神经痛组、上调组、下调组各13只。建模完成后上调组注射10μl miR-186-5p过表达慢病毒悬液，下调组注射10μl miR-186-5p沉默慢病毒悬液，正常组、三叉神经痛组不做处理。对比各组体质量、机械痛阈，酶标分析仪检测白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-6、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)水平，Western印迹法检测非受体型JAK2、STAT3表达。结果 与正常组比较，其他3组GDNF、GFAP、TNF-α、IL-1β、IL-6表达水平显著较高(P<0.05)。与三叉神经痛组比较，上调组GDNF、GFAP表达水平较低，TNF-α、IL-1β、IL-6表达水平较高，下调组GDNF、GFAP表达水平较高，TNF-α、IL-1β、IL-6表...     

基于IL-6/STAT3信号通路探讨miR-34a-5p过表达对溃疡性结肠炎的影响及小檗碱的干预作用

目的 基于白细胞介素6(IL-6)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路探讨微小RNA-34a-5p(miR-34a-5p)过表达对溃疡性结肠炎（UC）的影响及小檗碱（BBR）的干预作用。方法 体外传代培养人结肠癌HT-29细胞。取传3代、对数生长期、生长状态良好的HT-29细胞,随机分为空白对照组、NC mimics组、miR-34a-5p mimics组,NC mimics组和miR-34a-5p mimics组分别转染NC mimics、miR-34a-5p mimics,空白对照组不予转染。转染6 h更换新鲜培养基继续培养48 h,收集细胞,采用RT-qPCR法验证转染效率。收集三组转染后细胞,采用CCK-8法检测细胞活力;分离三组培养上清液,采用ELISA法检测IL-6、IL-1β、TNF-α含量;收集三组转染后细胞,分别采用RT-qPCR法、Western blotting法检测IL-6、STAT3 mRNA和蛋白表达。取HT-29细胞,加入LPS刺激48 h,建立UC细胞模型。取UC细胞,分别加入0、2.5、5、10、20、40、80、160、320μg/mL ...     

阿尔茨海默病患者血清miR-98-5p和miR-142-5p水平变化及其意义

目的 探讨阿尔茨海默病（AD）患者血清微小RNA-98-5p(miR-98-5p)、微小RNA-142-5p(miR-142-5p)水平变化及其临床意义。方法 选择AD患者103例（观察组）、体检健康的志愿者50例（对照组）,采集两组清晨空腹外周静脉血,离心留取血清,采用RT-qPCR法检测血清miR-98-5p、miR-142-5p,采用ELISA法检测血清Aβ1-40、Aβ1-42,同期采用简易精神状态检查量表（MMSE）评分评估认知功能。采用Pearson/Spearman相关分析法分析AD患者血清miR-98-5p、miR-142-5p水平与血清Aβ1-40、Aβ1-42水平和MMSE评分的关系。采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清miR-98-5p、miR-142-5p水平对AD的诊断价值。结果 观察组血清miR-98-5p、miR-142-5p水平均显著高于对照组（t/Z分别为7.557、5.827,P均<0.01）。观察组血清Aβ1-40水平显著高于对照组（Z=7.519,P<0.01）,血清Aβ1-42水平和MMSE评分均显著低于对照组（t/Z分别为5....     

血浆miR-1228-5p、miR-34a-5p、miR-192-5p和miR-30a-3p水平与早发冠心病的相关性及其初筛价值

目的]探讨血浆miR-1228-5p、miR-34a-5p、miR-192-5p和miR-30a-3p水平与早发冠心病(PCAD)的相关性及其对PCAD的初筛价值。[方法]根据纳入标准及排除标准,纳入6例明确诊断的PCAD患者作为PCAD组,纳入6例健康受试者作为对照组,收集PCAD组和对照组血液,提取血清样本并保存,使用DNBseq平台检测两组血清中miRNA水平,筛选差异水平显著的miRNA。根据纳入标准及排除标准,收集78例PCAD患者、75例晚发冠心病患者和69例健康对照者的血液并对筛选的miRNA进行实时荧光定量PCR验证。分析PCAD患者冠状动脉造影报告,采用Gensini评分评估冠状动脉病变的严重程度。Spearman相关性检验分析有关miRNA水平与冠状动脉狭窄程度的相关性。ROC曲线分析血浆miR-1228-5p、miR-34a-5p、miR-192-5p及miR-30a-3p水平对PCAD的诊断价值,多因素Logistic回归分析PCAD发生的影响因素。[结果]DNBseq平台分析显示,差异表达miRNA 33个,其中上调miRNA 17个,下调miRNA 16个,差异水平最为显著的5个miRNA分别为miR-1228-5p、miR-34a-5p、miR-192-5p、miR-424-3p和miR-30a-3p;实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,PCAD患者血浆miR-1228-5p升高1.7倍,miR-34a-5p升高1.4倍,miR-192-5p升高0.7倍,miR-30a-3p升高2.5倍(P＜0.05),两组间血浆miR-424-3p水平差异无统计学意义(P＞0.05);血浆miR-1228-5p和miR-34a-5p水平与PCAD患者冠状动脉狭窄程度均呈正相关(r＝0.307,P＝0.004;r＝0.238,P＝0.036);ROC曲线分析显示,miR-1228-5p、miR-34a-5p、miR-192-5p和miR-30a-3p诊断PCAD的ROC曲线下面积分别为0.903、0.832、0.731及0.798,其联合诊断PCAD的ROC曲线下面积为0.990,95%CI为0.976～1.000。[结论]PCAD患者血浆miR-1228-5p、miR-34a-5p、miR-192-5p和miR-30a-3p水平显著升高,其联合检测诊断PCAD具有较高的准确性,有望成为初筛PCAD的新型生物标志物。     

miR-127-3p在动脉粥硬化中的表达及干扰miR-127-3p对PDGF-BB处理的HAoSMC增殖迁移的影响

目的探讨miR-127-3p对血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)诱导的人主动脉平滑肌细胞(HAoSMC)增殖、迁移的影响。方法收集动脉粥硬化患者及正常者血清,将HAoSMC分为对照组(未作任何处理)、模型组(25μg/L PDGF-BB)、anti-miR-NC组(转染miR-127-3p抑制剂对照+25μg/L PDGF-BB)、anti-miR-127-3p组(转染miR-127-3p抑制剂+25μg/L PDGF-BB)。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-127-3p和NF-κB mRNA表达水平;流式细胞仪检测细胞周期;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞增殖活力;Transwell检测细胞迁移;蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞增殖核抗原Ki67(Ki67)、神经钙粘蛋白(N-cadherin)、上皮钙粘蛋白(E-cadherin)的表达。结果与正常对照组相比,动脉粥硬化患者血清中miR-127-3p表达水平升高(P<0.05)。与对照组相比,模型组miR-127-3p表达水平升高,G0-G1期细胞所占比例降低,S期细胞所占比例升高,细胞OD值升高,迁移细胞数增加,Ki67、N-cadherin表达水平升高,E-cadherin表达水平降低(P<0.05)。与antimiR-NC组相比,anti-miR-127-3p组miR-127-3p表达水平降低,G0-G1期细胞所占比例升高,S期细胞所占比例降低,细胞OD值降低,迁移细胞数减少,Ki67、N-cadherin表达水平降低,E-cadherin表达水平升高,NF-κB mRNA表达水平降低(P<0.05)。结论干扰miR-127-3p表达可抑制PDGF-BB处理的HAoSMC增殖、迁移,其机制可能与NF-κB信号通路有关。     

结核潜伏感染者全血miR-144-3p、miR-146a-5p的表达

目的探讨结核潜伏感染者全血miR-144-3p、miR-146a-5p的表达及其与活动性肺结核患者的差异。方法收集结核潜伏感染者30例,活动性肺结核患者30例。收集全血,提取总RNA,利用反转录-荧光定量PCR方法检测miR-144-3p、miR-146a-5p的表达。两组间比较采用t检验。结果结核潜伏感染者全血中miRNA144-3p的表达(2.014±1.48)比活动性肺结核患者(1.056±0.746)明显提高,差异有统计学意义(P<0.05),而结核潜伏感染者全血中miR-146a-5p的表达(1.937±1.109)与活动性肺结核患者(1.469±0.693)相似,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 miR-144-3p可能成为诊断结核潜伏感染者的标志物。     

Hydroxychloroquine effects on miR-155-3p and miR-219 expression changes in animal model of multiple sclerosis

Metabolic Brain Disease - Multiple sclerosis (MS) is a chronic inflammatory disease of the central nervous system which causes chronic demyelination. Hydroxychloroquine (HCQ) possess...     

Concomitant dysregulation of microRNAs miR-151-3p and miR-126 correlates with improved survival in resected cholangiocarcinoma

Background

MicroRNAs (miRNAs) are small non-coding genes which become dysregulated in cancer and may predict survival. The role of miRNAs in outcomes in cholangiocarcinoma (CC) has not been reported.

Methods

RNA was extracted from 32 resected CCs along with adjacent uninvolved bile duct epithelium. A total of 43 miRNAs were quantified using NanoString™. Clinicopathologic characteristics and outcomes were captured and compared. Overall survival curves were created using the Kaplan–Meier method; factors, including miRNA expression, were compared by log-rank, chi-squared or Cox regression analyses.

Results

Absolute expression of each miRNA was compared with overall survival after excluding perioperative deaths (n= 3). One upregulated (miR-151-3p; P= 0.003) and one downregulated (miR-126; P= 0.023) miRNA in resected CC relative to adjacent normal bile duct epithelium correlated with survival on univariate analysis. Clinical factors and these miRNAs were compared. Dysregulated miR-151-3p and miR-126, respectively, were the only factors that correlated with improved overall survival [41.5 months vs. 12.3 months (P= 0.002) and 21.9 months vs. 15.1 months (P= 0.02), respectively]. In eight patients, both miRNAs were dysregulated. In the remainder, only one or neither showed dysregulation. Concomitant dysregulation correlated with the best overall survival (58.7 months vs. 15.1 months; P < 0.000; n= 8); clinicopathologic factors in these groups were otherwise similar.

Conclusions

In resected CC, the concomitant dysregulation of both miR-151-3p and miR-126 was the factor related to the greatest improvement in overall survival. Further analysis of the targets of these miRNAs may yield potential therapeutic targets or prognostic biomarkers.