ELISA法检测HIV抗体弱阳性外部对照室内质控血清的制备和保存

目的 制备ELISA法检测HIV抗体室内质控血清并探讨其保存方式.方法 对HIV抗体阳性混合血清进行倍比稀释,选S/CO值2～3之间的稀释度制备室内质控,分装后分别保存于4℃和-20℃冰箱中备用.结果 两种保存方式的质控血清连续测定3mo并绘制质控图,-20℃冻存质控品结果稳定,4℃保存质控品,第一月稳定,第二、三月出现明显失控.结论 自制HIV抗体弱阳性血清作为室内质控是可行的.     

复合质控血清研制及临床应用评价

目的制备乙型肝炎病毒表面抗原(HBs Ag)、丙型肝炎病毒(HCV)抗体、人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体弱阳性对照复合质控血清,用于日常室内质量控制。方法用HBs Ag、HCV抗体、HIV抗体阳性血清分别与健康人血清进行倍比稀释,选S/CO在2~3之间的稀释度制备室内质控血清。结果自制的复合质控血清变异系数(CV)在15%以内,有很好的稳定性、精密度。结论自制复合质控血清能作为HBs Ag、HCV抗体、HIV抗体实验室检测的弱阳性室内质控血清。     

质量控制数据在室内质控品稳定性期间核查中的应用

目的利用前后两组质量控制数据进行统计学分析,对室内质控品进行期间核查,以确保质控品的稳定性,建立一种适合医学实验室室内质控品期间核查的新方法。方法利用乙型肝炎表面抗原,丙型肝炎抗体,梅毒抗体,HIV抗体室内质控品,使用期内前后各2个时间段的质量控制数据,统计分析前后2组数据差异有无统计学意义,判断室内质控品在2组数据之间时间段内的稳定状态。结果统计分析2组数据,丙型肝炎抗体,梅毒抗体,HIV抗体2个时间段的数据差异无统计学意义(P0.05),说明质控品在使用过程中保持了稳定性。乙型肝炎表面抗原的2组数据差异有统计学意义(P0.05),说明质控品在这段时间内没有保持良好的稳定性,应该采取措施。结论利用从室内质控中获得的质量控制数据计算出的均值(x)和标准差(s),进行统计学分析,判断2个时间段的数据差异有无统计学意义,从而达到对室内质控品期间核查的目的。     

乙肝表面抗原室内弱阳性质控物的制备及其应用评价

目的制备长期使用且稳定性好的HBsAg室内弱阳性质控血清。方法以小牛血清磷酸盐缓冲液按不同稀释倍数1∶2、1∶4、1∶8、1∶16、1∶32等比例梯度稀释HBsAg阳性血清;以2种厂家提供不同批号的检测试剂,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)双抗体夹心法对HBsAg阳性质控血清进行连续6个月检测,以此对HBsAg阳性质控血清稳定性进行评价。结果以吸光度值/临界值(S/CO)1.0~3.0为参考标准,确定该实验室HBsAg阳性质控血清的最佳稀释度为1∶8[其S/CO值为2.42,变异系数(CV)为4.72];且该质控血清在不同试剂使用稳定性较好(其S/CO范围为2.41~2.82,CV范围为4.24%~8.68%);HBsAg阳性质控血清连续6个月检测结果CV范围为8.71%~9.86%(CV10%)。结论自制HBsAg质控血清具有很好的稳定性和精密度,可作为临床常规HBsAg检测中的室内质控血清。     

艾滋病抗体初筛室内质控分析

目的提高HIV抗体检测工作质量,保证HIV抗体初筛实验室检测结果的准确性.方法 用ELISA法检测HIV抗体,对弱阳性质控血清的S/CO值绘制质量控制图.结果 通过HIV抗体检测室内质量控制工作,可以发现检测过程中出现的如水浴箱温度失控,加样不准等一些问题,及时分析和解决.结论 弱阳性外部对照质控品S/CO值可监控HIV抗体初筛实验的重复性和稳定性,对监测实验室结果的准确性和可信度方面起了重要作用.ELISA检测手工操作步骤比较多,操作细节都对实验结果有很大影响,因此需要规范实验操作,并严格按照要求进行.     

巨细胞病毒IgM抗体自制室内质控血清的应用及评价

目的自制巨细胞病毒IgM抗体(HCMV-IgM)弱阳性外部对照质控血清,评价其临床应用的可行性。方法收集我院HCMV-IgM抗体阳性血清分别与健康人血清混合进行倍比稀释,选择S/CO在1.5~3之间稀释度制备室内质控血清,连续检测20批次,采用"即刻法"分析检测结果,20批次后结果绘制Levey-Jennings质控图,监测室内质控动态。结果自制HCMV-IgM质控血清与北京贝尔有限公司提供的质控血清,两者结果进行对比,CV值比较无统计学差异(P0.05),自制HCMV-IgM质控血清变异系数(CV)均小于20%,稳定性符合国家质控物要求。结论自制HCMV-IgM质控血清有很好的稳定性和精密度,可作为实验室检测HCMV-IgM抗体的室内质控血清。     

乙肝抗原、抗体免疫测定室内质控品的制备及使用

免疫测定结果的准确性已日益提高,同时也促进了其在临床上应用于诊断疗效考核和预后评估.所以做好室内质控,保证免疫检验结果的可靠性更显重要.笔者在应用美国Ravto全自动酶免疫分析仪过程中,由于使用的乙肝酶联免疫试剂盒内部不能提供低值血清,做室内质控必须从临检中心购买,所以会因购买不及时、批号过期、质控品为单一项目质控物,造成作室内质控时使用不便,且成本很高等问题.笔者根据实验室检测项目的具体情况,自制了两种复合免疫质控品,用于Ravto系统检测乙肝五项时的室内质控,经过6个月使用,效果满意.     

4项目复合ELISA室内质控品制备方法的建立和评估

目的探讨临界值多项目复合ELISA质控品的制备方法,以控制本实验室ELISA检测的精密度,使实验结果更好地满足血液安全的需要。方法利用乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)、梅毒抗体和人类免疫缺陷病毒抗体(抗-HIV)各单项阳性血浆进行混合,自制临界值4项目复合质控品随每批献血者标本同时检测进行室内质控。结果制备的室内质控品放置-30℃保存1年后,检测结果差异无统计学意义。采用同一厂家、同一批号的各诊断试剂对室内质控品检测,结果差异无统计学意义。不同厂家的诊断试剂进行检测,结果差异无无统计学意义。结论通过多年的实践证明,自制临界值4项目复合质控品进行室内质控,是实验室内部观察精密度敏感的窗口,也是实验结果可靠的保证。     

血站室内质控即刻法在ELISA检测中的应用

目前，血站对献血者进行乙型肝炎表面抗原（HBsAg），丙型肝炎病毒抗体（抗－HCV）及艾滋病病毒抗体（抗－HIV）的筛选，主要采用酶联免疫吸附试验（ELISA）。要保证检测结果的可靠性，保障供血质量，就必须对ELISA检测开展室内质控。我站应用即刻法对ELISA检测进行室内质控，并绘制了即刻法室内质控表。通过二年来的实践证明效果良好，现以抗－HIV为例，将实验方法报告如下：１材料与方法１．１仪器：WellscanMK２型酶标仪及洗板机。１．２试剂：抗HIVELISA试剂盒，由上海科华生物工程有限公司提供，批号２００１０３０。…     

探讨改变酶联免疫吸附试验条件对HBsAg室内质控的影响

目的探讨不同温度平衡和作用时间对室内质控品的影响。方法用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)试剂盒,在设定的温度和不同作用时间下,观察室内质控品吸光度(OD)值。结果与常规实验条件下相比,部分实验条件改变时其吸光度值差异有统计学意义(P0.05)。结论室内质控品在复温时间短、显色时间过长或使用前未充分混匀,均易造成失控;而室内质控品复温时间适度延长对S/CO值影响不大。     

HIV抗体外部对照质控血清的制备及评估

目的 制备HIV抗体弱阳性外部对照质控血清并进行评估.方法 利用HIV抗体试剂盒中的阳性对照与正常人血清按一定比例混合,制备质控血清.ELISA法进行质控效果和稳定性检验.结果 ①在室内质控方面:自制质控血清与万泰公司质控血清有相似的效果.②稳定性检验:质控血清在4℃保存至少稳定2 mo,室温保存稳定1 mo,-20℃冻存至少稳定1 y.③反复冻融和加入硫柳汞对检测结果没有影响.结论 质控血清制备方法简便,易于保存,从质控效果和稳定性两方面评估符合国家质控物要求,可用于HIV抗体检测的室内质控.     

酶联免疫实验质控物的选择

目的 探讨通过酶联免疫(下称酶免)检测实验质控物浓度的选择,监测实验的精确性和重复性,及时发现随机误差,减少系统误差对实验的影响,确保酶免检测实验的有效性和检测结果的精确性及重复性.方法 选用人类免疫缺陷病毒抗体(抗-HIV)试剂对高、中、低值不同浓度的质控血清进行检测,结果用统计学方法处理.结果 不同浓度的质控血清对实验室室内质控的检测结果差异有统计学意义,选择使用S/CO比值1～3的临界值质控血清就可以将实验室的酶免实验结果的变异系数控制在15%的范围内.结论 选择合适浓度的质控血清进行实验稳定性和有效性的监控,才能确保实验室酶免检测实验的有效性和检测结果的精确性及重复性.     

HBsAg冻干质控品复溶剂的探讨

为了提高HBsAg的检测质量，建立乙肝表面抗原（HB-sAg）定量检测的室内质控。用牛清蛋白代替蒸溜水作为溶剂复溶乙型肝炎表面抗原冻干室内质控品，采用同一批号的诊断试剂盒，随标本检测用牛清蛋白和蒸溜水复溶HBsAg冻干室内质控品，同时将质控品放置于不同的温度下保存，观察其稳定性，精密度。以牛清蛋白复溶保存的HBsAg质控品，     

HBsAg冻干质控品复溶剂的探讨

为了提高HBsAg的检测质量，建立乙肝表面抗原（HB-sAg）定量检测的室内质控。用牛清蛋白代替蒸溜水作为溶剂复溶乙型肝炎表面抗原冻干室内质控品，采用同一批号的诊断试剂盒，随标本检测用牛清蛋白和蒸溜水复溶HBsAg冻干室内质控品，同时将质控品放置于不同的温度下保存，观察其稳定性，精密度。以牛清蛋白复溶保存的HBsAg质控品，     

应用Excel 2000管理软件作L-J质控图

在血液免疫检测工作中 ,保证检测结果的可靠性 ,通常采用室内质量控制和参与室间质量评价的方法。酶联免疫吸附法室内质量控制 ,可选择Ｌ Ｊ质控图、免疫即刻法两种方法。在实际工作中 ,我们运用Ｅｘｃｅｌ2 0 0 0计算机软件制作Ｌ Ｊ质控图 ,对血液乙型肝炎表面抗原 (ＨＢｓＡｇ)、丙型肝炎抗体、艾滋病抗体检测进行质量控制 ,取得了良好的效果。现报道如下。1 .配制 :主机 586 ,1 0Ｇ硬盘 ,32Ｍ内存 ,打印机 ,Ｗｉｎｄｏｗｓ98操作系统 ,中文Ｅｘｃｅｌ2 0 0 0电子表格管理软件。2 .Ｅｘｃｅｌ 2 0 0 0软件特点 :该软件是一个功能强大的电…     

自制甲状腺激素血清质控品的临床应用

目的探讨自制血清质控品在临床实验室甲状腺激素检测室内质量控制工作中应用的可行性。方法把甲状腺激素检测结果高值患者血清,按一定比例与健康人群血清混合,配成血清质控品,分装后-20℃保存,每次和原装配套质控品同时检测游离甲状腺素(FT4)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、促甲状腺激素(TSH)、甲状腺球蛋白(TG)、甲状腺微球蛋白抗体(TMA)、甲状腺球蛋白抗体(TGA)等6项甲状腺激素项目,检测前观察质控品外观,连续检测6个月,观察其稳定性;利用EXCELL做J-L图,统计6个月内各项目均值、CV和失控次数,评价其在室内质量控制应用中的价值。结果 6个月内自制血清质控品冻溶后外观澄清透明、无沉淀及浑浊;第1、3、6、10、15、30、45、60、90、120天各项甲状腺激素量值未见明显变化;与原装质控品相比,CV值较低。在应用室内质量控制的6个月中,各项目第1、3、6个月及6个月累计结果无明显差异;项目均值及6个月累积均值间比较,未出现漂移或趋势变化;项目CV和累积CV均在控制允许范围内(CV1/3倍总误差);6个月室内质控工作中出现4次失控:13s2次,22s1次,R4s1次。结论自制甲状腺激素血清质控品冷冻保存有较好的稳定性,可替代其进口质控品;在日常室内质控活动,通过EXCELL作J-L图能检测结果的精密度,发现不稳定因素,及时纠正处理以确保甲状腺功能检测结果可靠,有一定的临床应用价值。     

即刻法室内质控的应用

“即刻法”室内质控因简单、实用而被免疫实验室广泛采用。但本站在应用”即刻法”室内质控的过程中 ,发现一些很少出现但对实际工作有一定影响的问题 ,现报告如下。材料与方法1　材料1.1　所用试剂均为通过“批批检定”的国产ELISA (HBsAg、抗 HCV、抗 HIV)试剂。1.2　自制弱阳性临界值质控血清 ,S/CO值控制在 1.5～ 3.0 (S为质控品双孔测定值的均值 ,CO为阈值 )。1.3　CS 5 0 0 0酶标仪 (北京航天 )。2　方法　依照即刻性室内质控方法 ,当检测完 3次数值后 ,将测定值从小到大排列 :X1、X2 、X3 ………Xn(X1为最小值 ,Xn 为…     

Grubbs法在酶联免疫吸附试验乙型肝炎两对半室内质控的应用探讨

目的探讨Grubbs法结合±3s、±2s和7T规则在乙型肝炎两对半酶联免疫吸附试验(ELISA)定量检测中的临时室内质控的可行性。方法查阅同一质控批号的ELISA乙型肝炎两对半定量检测的连续20批室内质控数据,并对Grubbs法结合±3s、±2s和7T规则应用进行统计分析。结果 ELISA乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎表面抗体(HbsAb)、乙型肝炎E抗原(HbeAg)定量测定中20次测定值均处于在控状态;乙型肝炎E抗体(HbeAb)定量测定中Grubbs法显示20次测定值均处于在控状态,但第13次测定结果违反了±2s规则,判定为警告状态,保留数据,且予以注意,积极分析原因,避免后续的检测继续警告甚至失控;乙型肝炎核心抗体(HbcAb)测定20次测定值均处于在控状态。结论 Grubbs法结合±3s、±2s和7T规则能作为ELISA乙型肝炎两对半定量检测的临时室内质控方法。     

酶联免疫吸附试验0.5倍临界值阴性质控物的自制与评价

目的 配制酶联免疫吸附试验(ELISA)测定的乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)、人类免疫缺陷病毒抗体(抗HIV)、梅毒螺旋体抗体(抗TP)、丙型肝炎病毒抗体(抗H CV)0.5倍临界值左右的阴性质控物,并对其均一性和稳定性进行评价.方法 对弱阳性质控物进行倍比稀释,取吸光度值/临界值(S/CO值)在0.5倍临界值左右的稀释水平作为阴性质控物的目标水平,以此制作阴性质控物.阴性质控物均一性评价:每批次抽检20个质控物,均分为两组,对其S/CO值进行单因子方差分析.稳定性评价:将分装的自制质控物置于-70℃以下冰箱冻存1、3、6个月,按期随机取出10份进行检测,将其S/CO值与均一性评价结果进行比较.结果 阴性质控物的目标水平分别为HbsAg 0.06 IU/mL、HbsAb 5 mIU/mL、HBeAg 0.3 NCU/mL、抗HCV 0.1 NCU/mL、抗HIV 0.05 NCU/mL、抗TP 0.7 mIU/mL.均一性评价:两组6项阴性质控物检测数据比较,差异无统计学意义(P>0.05),均一性评价通过.稳定性评价:6项阴性质控物第1、3、6个月的S/CO值与均一性评价结果比较,第1、6个月的差异无统计学意义(P>0.05),第3个月的差异有统计学意义(P<0.05),稳定性符合要求.结论 自制的HbsAg、HbsAb、HBeAg、抗HCV、抗HIV、抗TP阴性质控物的均一性和稳定性均符合ISO15189:2012质量管理体系CNAS-CL02-A004《医学实验室质量和能力认可准则在临床免疫学定性检验领域的应用说明》要求,可用于临床实验室的质量控制.     

ELISA检测HIV抗体室内质控血清的制备

目的 实验室自制外部质控血清,绘制质控图,满足<全国艾滋病检测技术规范>要求和考评要求.方法 利用试剂盒内的阳性对照血清,用健康人的血清按一定量混合稀释成低值弱阳性,通过比较不同滴度的CO值,筛选出合适混合比例,分装冷冻保存使用.结果 试剂盒内的阳性对照血清与健康人的血清1∶10左右混合比例比较适合.结论 自制质控血清性能稳定,经济、方便,便于推广使用.