肝细胞生长因子对过氧化氢诱导肝细胞凋亡的影响

背景:肝细胞生长因子对多种细胞具有保护作用。目的:观察肝细胞生长因子对过氧化氢诱导肝细胞凋亡的保护作用及其机制。方法:采用人LO2肝细胞系,随机分成3组:正常对照组为正常培养的LO2细胞;模型组加入100mmol/L过氧化氢作用LO2细胞4h;肝细胞生长因子组加入50mg/L肝细胞生长因子预处理LO2细胞24h,再加入100mmol/L过氧化氢继续培养4h后处理细胞。结果与结论:体外培养的LO2细胞经100mmol/L过氧化氢作用4h后,LO2细胞可出现明显的凋亡现象,表现为细胞存活率降低(P<0.01),Caspase-3蛋白表达增加(P<0.01),Bcl-2蛋白表达降低(P<0.01)。给予质量浓度50mg/L肝细胞生长因子预处理24h后再加入100mmol/L过氧化氢继续培养4h,LO2细胞的凋亡被显著抑制(P<0.01),说明肝细胞生长因子可通过增加LO2细胞Bcl-2的表达来抑制过氧化氢诱导的LO2细胞凋亡。     

肝细胞生长因子对过氧化氢诱导肝细胞凋亡的影响

背景：肝细胞生长因子对多种细胞具有保护作用。目的：观察肝细胞生长因子对过氧化氢诱导肝细胞凋亡的保护作用及其机制。方法：采用人LO2肝细胞系,随机分成3组：正常对照组为正常培养的LO2细胞;模型组加入100mmol/L过氧化氢作用LO2细胞4h;肝细胞生长因子组加入50mg/L肝细胞生长因子预处理LO2细胞24h,再加入100mmol/L过氧化氢继续培养4h后处理细胞。结果与结论：体外培养的LO2细胞经100mmol/L过氧化氢作用4h后,LO2细胞可出现明显的凋亡现象,表现为细胞存活率降低（P〈0.01）,Caspase-3蛋白表达增加（P〈0.01）,Bcl-2蛋白表达降低（P〈0.01）。给予质量浓度50mg/L肝细胞生长因子预处理24h后再加入100mmol/L过氧化氢继续培养4h,LO2细胞的凋亡被显著抑制（P〈0.01）,说明肝细胞生长因子可通过增加LO2细胞Bcl-2的表达来抑制过氧化氢诱导的LO2细胞凋亡。     

葛根素抑制过氧化氢诱导大鼠晶体上皮细胞凋亡的研究

目的 观察葛根素(Puerarin，Pue)对过氧化氢诱导大鼠白内障形成过程中晶体上皮细胞凋亡的抑制作用。方法 大鼠晶状体器官离体培养后用DNA缺口末端原位标记法(TUNEL法)检测Pue对过氧化氢诱导鼠晶体上皮凋亡细胞数量的影响。结果 随过氧化氢损伤时间的延长，H2O2组晶体上皮凋亡细胞数量逐渐增多。培养48h后，Pue处理组与H2O2组比较，晶体上皮凋亡细胞数量和晶体混浊程度均明显降低。结论 Pue可以抑制过氧化氢损伤导致的鼠晶体上皮细胞凋亡，有可能对抗或延缓白内障的发生发展。     

Apogossypolone诱导骨髓瘤细胞凋亡及其机制研究

本研究探讨棉酚衍生物apogossypolone（ApoG2）对多发性骨髓瘤细胞系的抑制增殖、诱导凋亡的作用及其作用机制。应用台盼蓝染色、Hoechst 33258染色、透射电子显微镜检、DNA凝胶电泳法、流式细胞仪分析细胞DNA含量等来判断ApoG2对多发性骨髓瘤细胞的抑制增殖和诱导凋亡作用。以caspase-3、caspase-9以及BCL-2、BCL—XL分析ApoG2诱导骨髓瘤细胞凋亡的可能机制。结果表明：ApoG2对多发性骨髓瘤细胞增殖具有明显的抑制作用,IC50值在U266细胞和Wusl细胞（48小时）分别为0．1、0．2μmol／L。ApoG2可以诱导骨髓瘤细胞凋亡且呈时间和剂量依赖性。ApoG2可以使骨髓瘤细胞周期停止在G2期,U266细胞G2期比例从9．7％增至19．6％。Wusl细胞从9．8％增至31．7％。ApoG2能导致U266、Wusl细胞caspase-9、caspase-3活性增高。U266细胞和Wusl细胞经ApoG2 25μmoL／L作用24小时后,BCL—XL表达分别下降（7．3±1．4）％和（11．2±6．2）％,Wusl细胞BCL-2表达下降84．4±3．4％。结论：ApoG2对多发性骨髓瘤细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用,其作用机制可能和下调BCL-2／BCL—XL表达以及影响细胞周期有关。     

黄芩素对阿霉素肾病大鼠肾小管上皮细胞凋亡的调节作用

目的:探讨黄芩素对阿霉素肾病大鼠肾小管上皮细胞凋亡的调节作用。方法:18只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(正常组,n=6)、阿霉素肾病组(模型组,n=6)和黄芩素治疗组(治疗组,n=6),模型组和治疗组一次性尾静脉注射阿霉素2.0mg/kg诱导阿霉素肾病动物模型,正常组注射等量生理盐水。造模后第1天开始,治疗组予黄芩素300 mg/(kg·d)灌胃,正常组和模型组予等量蒸馏水灌胃,共治疗8周。8周时留取各组大鼠24 h尿液标本及肾脏组织标本,使用TUNEL检测肾小管上皮细胞凋亡,免疫组化检测肾组织中caspase-3表达,western Blot方法检测肾皮质中Bcl-2及caspase-3蛋白水平。结果:与正常组比较,模型组24 h尿蛋白定量明显升高(P0.05),肾小管上皮细胞凋亡数量明显增加(P0.05),肾皮质中caspase-3蛋白水平明显增加(P0.05),Bcl-2蛋白水平明显下降(P0.05)。与模型组比较,治疗组24 h尿蛋白定量明显下降(P0.05),TUNEL阳性肾小管上皮细胞数量明显减少(P0.05),肾皮质中caspase-3蛋白水平明显下降(P0.05),Bcl-2蛋白水平明显增加(P0.05)。结论:黄芩素对阿霉素肾病具有一定的保护作用,其作用机制可能与调节肾小管上皮细胞凋亡有关。     

阿托伐他汀对高糖诱导的系膜细胞凋亡的影响

目的探讨不同浓度阿托伐他汀对大鼠系膜细胞凋亡的影响。方法体外培养大鼠永生系膜细胞,分为5组:对照(C)组;高糖(30mmol/L)(H)组;高糖(30mmol/L)+阿托伐他汀(10-7 mmol/L)(H+A1)组;高糖(30mmol/L)+阿托伐他汀(10-6 mmol/L)(H+A2)组;高糖(30mmol/L)+阿托伐他汀(10-5 mmol/L)(H+A3)组。采用Annexin V-FITC和PI双染法检测细胞凋亡。采用caspase-3活性检测试剂盒检测系膜细胞caspase-3活性。结果与C组相比,H组系膜细胞凋亡率明显增加,caspase-3活性明显增加,差异有统计学意义(P0.05)。与H组相比,高糖加不同浓度阿托伐他汀组细胞凋亡率明显降低,caspase-3活性明显降低,差异有统计学意义(P0.05),且呈浓度依赖。结论阿托伐他汀可以通过caspase途径抑制醛固酮诱导的大鼠系膜细胞凋亡。     

过氧化氢诱导体外损伤性白内障模型的构建及晶状体上皮细胞的凋亡

背景:氧化应激能够诱导晶状体上皮细胞发生凋亡。目的:观察Fas蛋白与过氧化氢诱发白内障中晶状体上皮细胞凋亡的关系以及表没石子儿茶素没食子酸酯对Fas蛋白表达及晶状体上皮细胞凋亡的影响。方法:将健康成年兔透明晶状体随机分为3组:空白对照组仅加入DMEM培养液,过氧化氢组加入DMEM+过氧化氢,表没石子儿茶素没食子酸酯组加入DMEM+过氧化氢+表没石子儿茶素没食子酸酯。结果与结论:各组体外培养72h后过氧化氢组晶状体上皮细胞凋亡率及Fas蛋白阳性表达率显著高于空白对照组(P<0.05)。表没石子儿茶素没食子酸酯组晶状体上皮细胞凋亡率及Fas蛋白阳性表达率显著低于过氧化氢组(P<0.05)。结果显示,过氧化氢可能是通过上调Fas蛋白的表达诱导晶状体上皮细胞凋亡,而抗氧化剂表没石子儿茶素没食子酸酯可下调Fas蛋白的表达而减轻晶状体上皮细胞的凋亡。     

过氧化氢诱导体外损伤性白内障模型的构建及晶状体上皮细胞的凋亡

背景：氧化应激能够诱导晶状体上皮细胞发生凋亡。目的：观察Fas蛋白与过氧化氢诱发白内障中晶状体上皮细胞凋亡的关系以及表没石子儿茶素没食子酸酯对Fas蛋白表达及晶状体上皮细胞凋亡的影响。方法：将健康成年兔透明晶状体随机分为3组：空白对照组仅加入DMEM培养液,过氧化氢组加入DMEM＋过氧化氢,表没石子儿茶素没食子酸酯组加入DMEM＋过氧化氢＋表没石子儿茶素没食子酸酯。结果与结论：各组体外培养72h后过氧化氢组晶状体上皮细胞凋亡率及Fas蛋白阳性表达率显著高于空白对照组（P〈0.05）。表没石子儿茶素没食子酸酯组晶状体上皮细胞凋亡率及Fas蛋白阳性表达率显著低于过氧化氢组（P〈0.05）。结果显示,过氧化氢可能是通过上调Fas蛋白的表达诱导晶状体上皮细胞凋亡,而抗氧化剂表没石子儿茶素没食子酸酯可下调Fas蛋白的表达而减轻晶状体上皮细胞的凋亡。     

普罗布考对过氧化氢诱导新生大鼠心肌细胞凋亡及肿瘤坏死因子-α生成的影响

目的探讨普罗布考对过氧化氢诱导的新生大鼠心肌细胞凋亡及肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α生成的影响。方法培养新生大鼠心肌细胞,随机分为A,B,C,D 4组,A组加入0.2 mmol/L过氧化氢;B,C,D组分别给予1,10,100μmol/L普罗布考预处理6 h后,再分别加入0.2 mmol/L过氧化氢继续孵育6 h。采用流式细胞仪检测细胞凋亡;RT-PCR检测心肌细胞TNF-α mRNA、Bcl-2 mRNA及Bax mRNA表达情况;ELISA法检测细胞培养液中TNF-α水平。结果与A组比较,B,C,D组细胞凋亡率均明显降低,Bax mRNA表达下降,Bcl-2 mRNA表达升高,心肌细胞TNF-αmRNA表达及细胞培养液中TNF-α水平均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。心肌细胞凋亡率与培养液中TNF-α水平呈正相关(r=0.874,P<0.01)。多元线性回归分析结果表明,凋亡率与培养液中TNF-α水平独立相关(β=0.122,P<0.01)。结论普罗布考抑制过氧化氢诱导的心肌细胞凋亡,其作用机制与抑制TNF-α生成有关。     

卡维地洛对大鼠心脏成纤维细胞白介素-6(IL-6)表达的影响

目的 探讨不同剂量卡维地洛对大鼠心脏成纤维细胞IL-6表达的影响.方法 通过体外培养大鼠心脏成纤维细胞(CFs),应用不同剂量卡维地洛干预细胞,MTT法检测细胞增殖,ELISA法检测IL-6的表达,并进行对比研究.结果 卡维地洛有抑制心脏成纤维细胞增殖的作用,并对IL-6的表达有抑制作用,随着卡维地洛浓度的增加,这种作用亦随之增加,且具有统计学意义.结论 卡维地洛有抑制大鼠心脏成纤维细胞增殖及IL-6表达的作用,而且存在剂量依赖效应.     

地黄低聚糖抗过氧化氢诱导的脂肪间充质干细胞凋亡的保护作用

目的观察地黄低聚糖对H₂O₂诱导的人脂肪间充质干细胞凋亡的影响。方法将体外培养的人脂肪间充质干细胞随机分成正常对照组(N组,无特殊处理)、H2O2组(H组)和地黄低聚糖组(R组)。H组加入终浓度0.1mmol/L的H₂O₂;R组加入终浓度0.2g/L的地黄低聚糖和终浓度0.1mmol/L的H₂O₂。三组的干预时间分别为1h、6h和24h,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果干预1h、6h和24h后,H组脂肪间充质干细胞凋亡率明显高于N组和R组(P<0.01);R组脂肪间充质干细胞凋亡率明显低于H组(P<0.01)。结论地黄低聚糖可减轻H₂O₂诱导的人脂肪间充质干细胞凋亡。     

过氧化氢诱导C2C12细胞凋亡的机制初探

[目的]探讨氧化应激诱导小鼠胚胎肌原细胞株C2C12细胞凋亡的分子机制。[方法]采用0．5mmol/L过氧化氢(hydrogen peroxide．H2O2)作用于C2C12细胞；通过Hoechst荧光染色检测C2C12细胞凋亡，Caspase活性定量分析及Western-blot检测Caspase-3，-8，-9活化情况，Western-blot及间接免疫荧光检测细胞色素C在细胞内的分布情况。[结果]本实验发现H2O2能明显诱导C2C12细胞凋亡，同时Caspase-3，-8，-9被激活．而细胞色素C从线粒体释放入胞浆。[结论]氧化应激可通过同时激活线粒体通路与死亡受体通路导致C2C12细胞凋亡．这为临床防治凋亡相关的心血管疾病提供了新的信息。     

氯氧甲苯咪唑诱导白血病细胞凋亡的实验研究

为了研究氯氧甲苯咪唑(econazole)诱导鼠粒单核白血病细胞WEHI-3凋亡的机制，利用Annexin-V／PI双染实验测定细胞凋亡，Fura-2荧光负荷技术检测细胞内游离钙离子浓度([Ca^2 ]i)，并抽取WEHI-3细胞内质网部分蛋白，利用Western blot测定caspase-7、caspase-12的蛋白表达。结果显示ieconazole作用后WEHI-3出现典型的凋亡改变，细胞内游离[Ca^2 ]i较对照明显升高，caspase-12和caspase-7表达随着细胞内钙离子浓度的提高而逐渐增加。结论：econazole能诱导WEHI-3细胞凋亡，caspase-12在此过程中起重要作用。     

双氧水预处理诱导脑缺血耐受的实验研究

目的：探讨双氧水预处理对大鼠局灶性脑缺血（FCI）损伤的保护作用及钠离子通道在双氧水预处理中的作用。方法：40只雄性SD大鼠采用线栓法制作FCI模型，随机分为A组，单纯缺血再灌注组；B组，缺血前24h用微量泵1h内缓慢静脉泵入3％的双氧水1ml；C组，缺血前24h给予利多卡因（5mg／kg，ip）；D组，利多卡因加双氧水预处理组，每组10只。于再灌注后24h行脑功能障碍评分，并处死测量脑梗死容积。结果：B组脑功能障碍评分和脑梗死容积显著低于A组（P〈0．05）；C、D组与A组比较差异无显著性意义。结论：双氧水预处理对大鼠FCI损伤有明显的保护作用，但此作用可被利多卡因阻断，提示钠离子通道参与此效应的形成机制。     

Thrombin induces apoptotic events through the generation of reactive oxygen species in human platelets

BACKGROUND: Thrombin is a major physiological platelet agonist that activates a number of cell functions including aggregation. Platelet stimulation with thrombin has been shown to result in the development of apoptotic events, including activation of caspases-3 and -9, cytochrome c release and phosphatidylserine (PS) exposure; however, the mechanism underlying the activation of apoptosis remains unclear. OBJECTIVES: In the present study, we aim to investigate whether endogenously generated reactive oxygen species upon thrombin stimulation is required for the activation of apoptosis in human platelets. METHODS: Changes in the mitochondrial membrane potential were registered using the dye JC-1; caspase-3 and -9 activity was determined from the cleavage of their respective specific fluorogenic substrates; PS externalization was estimated using annexin V-fluorescein isothicyanate and cytochrome c release was detected by Western blotting in samples from the mitochondrial and cytosolic fractions. RESULTS: Treatment of platelets with thrombin stimulates mitochondrial membrane potential depolarization and endogenous generation of H(2)O(2) . Platelet exposure to exogenous H(2)O(2) results in cytochrome c release and activation of caspases-9. In addition, H(2)O(2) induces the activation of caspase-3 and PS exposure by a mechanism dependent on cytochrome c release and caspase-9 activation. Finally, thrombin-evoked development of apoptotic events was impaired by treatment with catalase. CONCLUSION: Our results indicate that thrombin-induced apoptosis is likely mediated by endogenous generation of H(2)O(2) in human platelets.     

IL-10 对 IL-6诱导外周血单个核细胞组织因子表达的调节作用

为了观察抗炎因子白细胞介素10(IL10)对炎症因子白细胞介素6(IL6)诱导人外周血单个核细胞(PBMNC)组织因子(TF)表达的影响,以探讨抗炎因子在急性冠状动脉综合征(acutecoronarysyndrome,ACS)发病机制的作用,用一期凝固法、ELISA和细胞发色底物分析检测不同浓度的人重组IL10(rhIL10)作用下,人重组IL6(rhIL6)诱导PBMNC的促凝活性(procoagulantactivity,PCA)、TF表达及活性的改变。结果表明:rhIL6培养PBMNC的PCA、TF表达及活性均较对照组显著增加(P<0.01);不同浓度的rhIL10作用PBMNC后,可对PBMNC的PCA、TF表达和活性起不同的抑制作用;在500ng/LrhIL10的作用下,rhIL6诱导的PBMNC的PCA、TF表达和活性均显著降低(P<0.01)。结论:IL10对PBMNC的TF表达和活性抑制可能是ACS重要保护机制,炎症因子和抗炎因子的平衡失调可能是冠状动脉血栓形成的重要因素。     

鸦胆子油乳诱导膀胱癌细胞J82凋亡及其机制的初步研究

目的探讨鸦胆子油乳对膀胱癌J82细胞凋亡的影响及其可能的作用机制。方法四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测鸦胆子油乳对J82细胞增殖的抑制率;通过荧光染色、流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡;应用caspase-3活性试剂盒检测caspase-3活性。结果在0.5～4.0ml/L浓度下,鸦胆子油乳抑制J82细胞的增殖,并呈现剂量-效应关系;鸦胆子油乳2.0ml/L作用24h后可见典型的凋亡现象;鸦胆子油乳处理组细胞样本caspase-3活性与凋亡率高于空白对照组及鸦胆子油乳加Ac-DEVD-CHO处理组。结论鸦胆子油乳能够诱导膀胱癌J82细胞凋亡,caspase-3活化参与了鸦胆子油乳诱导J82细胞凋亡的调控。     

去铁胺激活半胱天冬酶3诱导HL-60凋亡

为了研究铁螯合剂-去铁胺（deferoxamine,DFO）诱导人白血病细胞株HL-60凋亡时半胱天冬酶-3（caspase-3）活性的变化并探讨DFO诱导凋亡的可能机制.HL-60细胞经HE染色,在光学显微镜下观察其形态结构变化,用TUNEL法和流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡,免疫组织化学法检测caspase-3活性,原位杂交法检测凋亡基因bax的转录水平.结果表明,HL-60经去铁胺处理后,典型的细胞形态改变、DNA末端原位标记和FCM检测均证实DFO可诱导细胞凋亡,凋亡率与药物剂量和作用时间呈依赖性.在DFO诱导HL-60凋亡过程中,caspase-3活性明显升高,凋亡基因bax的转录水平均较对照组增高（P＜0.05）.caspase广谱抑制剂Z-AVD可明显降低DFO诱导的细胞凋亡率.结论：DFO通过激活caspase-3和增强bax活性而诱导HL-60凋亡.     

茶碱对哮喘的治疗作用及诱导痰IL-6水平的影响

目的: 观察茶碱治疗前后哮喘患者诱导痰IL-6水平的变化.评价IL-6与哮喘发病的关系.方法: 选择支气管哮喘患者60例随机分为茶碱治疗组和对照组,治疗组早餐及睡前各口服缓释茶碱100mg,吸入沙丁胺醇200μg,每日3次;对照组吸入沙丁胺醇200μg,每日3次;两组疗程均为8周.以诱导痰法收集两组患者治疗前、治疗1月和2月的痰液标本,采用ELISA法测定IL-6水平.结果: 在治疗后1月及治疗后2月,治疗组IL-6水平显著降低,分别为(395±67)pg/ml,(378±69)pg/ml,与治疗前相比有统计意义(P＜0.05).结论: 茶碱具有降低患者诱导痰IL-6水平的作用,此可能为茶碱治疗哮喘作用机制之一.