慢性乙型肝炎患者肝组织Fas表达与血清可溶性Fas水平的关系

目的探讨患者肝组织中Fas的表达与血清可溶性Fas水平的关系。方法用免疫组化方法检测60例慢性乙型肝炎患者肝组织Fas的表达,同时用酶联免疫吸附试验检测血清可溶性Fas。结果重度慢性乙型肝炎患者血清中sFas水平>中度>轻度,各组间差异有显著意义(P<0.01);慢性乙型肝炎患者肝组织Fas表达的程度和血清sFas水平与肝组织病变的活动性一致。结论 1.肝组织炎症程度与肝组织Fas抗原的表达有关;2.Fas介导的肝细胞凋亡在慢性乙型肝炎的发病机制中起重要作用,抑制肝细胞Fas表达有助于减轻肝细胞损伤程度。     

丁型肝炎患者肝组织中Fas/FasL和肝细胞凋亡表达

目的探讨Fas/FasL及肝细胞凋亡在丁型肝炎患者肝组织中的表达及作用.方法采用免疫组化双重染色和TUNEL技术,检测79例丁肝患者肝组织HDAg,Fas/FasL表达,以及肝细胞凋亡,以54例乙型肝炎作对照.结果Fas以肝细胞浆表达为主,HDAg以核浆型表达为主,二抗原表达及分布有相关性.FasL主要表达在浸润淋巴细胞浆、肝细胞核,与HDAg表达及分布不全一致.HDAg,Fas/FasL和肝细胞凋亡在各型肝炎中的表达强度有显著性差别意义.结论HDV感染可诱导肝细胞Fas/FasL表达,增强Fas/FasL途径介导的肝细胞凋亡,这一机制在丁型肝炎发病机制中可能有一定的重要作用.     

慢性乙型肝炎肝组织中HLA-DR和HSP70的表达意义

目的探讨HLA-DR抗原和热休克蛋白70(HSP70)在慢性乙型肝炎肝组织中的表达及其意义.方法采用免疫组化技术对36例慢性乙型肝炎和20例正常肝组织中HLA-DR抗原和HSP70的表达进行检测.结果正常肝组织中肝细胞未见HLA-DR表达.慢性乙型肝炎肝细胞HLA-DR表达阳性率为28%,其中,中重度肝炎HLA-DR阳性率明显高于轻度肝炎(阳性率分别为38%和20%,χ2=13.6,P＜0.01).慢性乙型肝炎和正常肝组织中肝细胞HSP70表达阳性率分别为45%和15%,两者相比差异显著(χ2=6.3,P＜0.05).中度和重度肝炎HSP70阳性率明显高于轻度肝炎(阳性率分别为63%和30%,χ2=3.9,P＜0.05).结论肝细胞HLA-DR和HSP70的异常表达在慢性乙型肝炎免疫损伤和免疫保护中起重要作用.     

丁型肝炎病人肝组织HDAg和 Fas表达及其相互关系

目的 研究丁型肝炎病人肝组织Fas和HDAg表达及其相互关系,了解Fas在HDV致病机制中的作用。方法 应用免疫组化单、双标记技术,检测48例丁型肝炎病人肝组织Fas、HDAg表达,以54例乙型肝炎病人肝组织Fas表达作对照。结果 Fas以肝细胞浆表达为主,HDAg以肝细胞核和胞浆表达为主,二抗原表达及分布呈一致性。各型肝炎中Fas和HDAg表达有统计学差别,两种抗原的分布和表达强度与肝细胞炎症活动和病理损害程度相关。结论 Fax和HDAg表达及分布密切相关,与肝组织炎症活动和病理损害相关,此提示HDV感染可诱导肝细胞表达Fas,Fas及其所介导的肝细胞凋亡在HDV致病机制中可能有重要作用。     

HDV/HBV感染树鼩肝组织Fas/FasL表达与肝细胞凋亡

目的 探讨HDV感染树鼩肝组织中Fas/FasL表达与HDV感染之间的关系,以及Fas/FasL在丁型肝炎肝细胞凋亡中的作用。 方法 采用免疫组化和原位杂交技术对45份HDV感染树鼩肝组织中HDAg,Fas/FasL和Fas/FasL mRNA的表达进行了检测;应用原位末端标记技术对肝细胞凋亡进行了检测;并应用免疫组化双重染色对HDAg,Fas/FasL的表达以及肝细胞凋亡进行了检测。 结果 45份肝组织中有39份可检出Fas/FasL(阳性率87％),有41份可检出凋亡细胞(阳性率91％),HDAg表达与Fas/FasL表达之间有显著相关性(X_1~2=29.2,X_2~2=27.9,P<0.05),HDAg表达越强,Fas和FasL表达也越强,凋亡在HDAg阳性和阴性细胞中均可发生,以HDAg阳性细胞发生为主,Fas/FasL表达与肝细胞凋亡之间有显著相关性(X_1~2=35.1,X_2~2=40.2,p<0.05),Fas和FasL表达越强,凋亡阳性细胞越多。 结论 丁型肝炎病毒感染和未感染的肝细胞均可发生凋亡,但凋亡只在少数细胞发生;肝细胞内的病毒抗原表达可诱导Fas/FasL的表达;Fas/FasL肝细胞凋亡中起重要作用。     

Fas/FasL在丁型肝炎发病机理中的作用

目的检测丁型肝炎病人肝组织Fas/FasL和HDAg表达,了解Fas/FasL在丁型肝炎致病机理中的作用。方法采用免疫组化单、双标记技术,检测48例丁型肝炎病人肝组织Fas、FasL和HDAg表达,以54例乙型肝炎作疾病对照。结果 Fas以肝细胞浆表达为主,HDAg以肝细胞核和胞浆表达为主,二抗原表达及分布呈一致性。FasL主要表达在浸润淋巴细胞浆、肝细胞核,与HDAg表达及分布不全一致,丁型肝炎组Fas、FasL检出率及表达强度较对照组高,三成分在各型肝炎中的表达强度有显著性差别意义。结论 Fas、FasL和HDAg均与肝组织炎症活动和病理损害相关,HDV感染可诱导肝细胞大量表达Fas,CTL通过Fas/FasL途径介导的肝细胞凋亡与HDV致病可能有关。     

海珠益肝胶囊对HepG2215细胞Fas、Bax、Bcl-2的影响

目的应用2215细胞株作为体外抗乙型肝炎病毒(HBV)的实验模型,在观察海珠益肝胶囊对乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg),表面抗原(HBsAg)抑制作用的基础上,从细胞凋亡和凋亡相关基因表达影响的角度,探讨该药抗HBV的药物作用机制.方法细胞染色采用S-P免疫组化法,通过图像分析仪测定阳性细胞染色的平均光密度,并应用流式细胞仪检测药物诱导细胞凋亡情况,观察药物对2215细胞调控蛋白Fas、Bsa、Bcl-2以及对2215细胞本身凋亡诱导的影响.结果(1)海珠益肝胶囊对Fas、Bsx基因蛋白的表达与正常对照组相比有显著性差异(P＜0.05),即能诱导Fas、Bax的高表达;同时能下调bcl-2的表达,与正常对照组比亦有显著性差异(P＜0.05).(2)用海珠益肝胶囊处理过的2215细胞的单细胞悬液,经流式细胞仪检测其DNA含量,呈现典型的凋亡图谱.结论海珠益肝胶囊通过调节肝细胞凋亡、调控蛋白基因表达,并诱导被感染的肝细胞凋亡是其抗病毒机制之一.     

慢性肝病肝组织凋亡蛋白TNF-α、TNFR、Bcl-2家族表达的研究

探讨凋亡蛋白TNF -α、TNFR及Bcl- 2家族在慢性肝炎、肝硬化及肝癌发生、发展中对凋亡的调节作用。 94例慢性肝病患者 ,慢性肝炎 2 8例 ,肝硬化 2 2例 ,肝癌 4 4例 ,采用原位杂交法检测TNF -α、TNFR及免疫组化SP法检测Bcl- 2家族凋亡蛋白及Fas、FasL在其肝组织中的表达。肝硬化TNF -α、TNFR表达率为 90 9%、95 5 % ,明显高于慢性肝炎组 (5 3 6 %、4 6 4 % )及肝癌组 (43 2 %、38 6 % ) ,P <0 0 5或 <0 0 1;Fas在慢性肝炎和肝硬化与肝癌组表达分别为 (10 0 0 %、81 8%、5 6 8% ) ;前二者与肝癌相比P <0 0 1表达明显高于肝癌组。HAI记分越高TNF-α、TNFR和Fas表达越明显 ,而Bcl- 2表达越低。说明在慢性肝病时 ,TNF -α、TNFR、Bcl- 2各凋亡蛋白家族参与了肝组织凋亡的调节 ,引起不同程度的肝组织损伤     

电针对大鼠脊髓损伤细胞凋亡相关因子的影响

目的探讨电针干预大鼠脊髓损伤(SCI)细胞凋亡相关因子Fas、肿瘤坏死因子受体(TNFR)1蛋白表达的影响。方法随机将大鼠分为模型组、空白对照组、西药组、电针组,采用改良式的Allen打击法制备SCI模型,并分别于脊髓损伤后不同时段(6 h、1、7 d)进行取材,检测损伤脊髓组织内Fas、TNFR1的表达。结果与模型组比较,西药组和电针组Fas、TNFR1表达水平均下降(P0.05);电针组与西药组效果相当(P0.05)。结论电针治疗SCI可能是通过降低损伤脊髓中的Fas、TNFR1的表达水平,进而阻止细胞凋亡进程、促进脊髓组织损伤的恢复等来实现的。     

乙型肝炎病毒X抗原表达与肝细胞凋亡的相关性

目的 探讨乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)在HBV感染相关性肝病患者病情进展和癌变过程中的作用. 方法 用免疫组织化学方法检测38例HBV慢性感染者(HBV携带者14例及慢性乙型肝炎患者24例)、20例乙型肝炎肝硬化(LC)和20例HBV相关性肝细胞癌(HCC)患者肝组织中HBxAg、Fas及其配体(FasL)的表达,分析HBxAg与Fas、FasL表达的相关性及其与患者病毒学指标和肝脏病理学改变的关系.肝脏炎症分级及纤维化分期按照Knodell标准.计数资料用x2检验及Fisher精确概率法,多个样本间的两两比较用x2分割法,等级资料用秩和检验,相关性分析采用Spearman等级相关分析. 结果 HBV慢性感染者、LC及HCC患者肝组织中HBxAg阳性率分别为71.1％、60.0％、65.0％,差异无统计学意义(x2=0.754,P＞0.05).肝细胞中Fas和FasL阳性率分别为28.9％、20.0％、5.0％和36.8％、50.0％、60.0％,各组间差异均无统计学意义(x2值分别为4.667和2.988,P值均＞0.05).三组患者肝组织淋巴细胞Fas表达的阳性率分别为68.4％、60.0％和90.0％,其中,肝癌患者的表达强度显著高于HBV慢性感染者(Z=-4.360,P＜0.01).在LC重症炎症区域及部分HCC患者中可见HBxAg与FasL在同一区域表达.相关性分析显示,HBV慢性感染和LC患者中,HBxAg与Fas、FasL表达强度均具有相关性(r值分别为0.304和0.368,P值均＜0.05),Fas与FasL的表达也存在相关性(r=0.448,P＜0.01).HBxAg阳性率在高、中病毒载量组(分别为88.9％和69.2％)均明显高于低病毒载量组(为26.7％,P＜0.05). 结论 HBxAg在HBV感染各期均起重要作用,早期主要上调肝细胞Fas表达并诱导肝细胞凋亡,使肝脏炎症坏死加重;后期主要上调肝细胞FasL表达并诱导免疫逃避.HBxAg和高病毒载量在HBV慢性感染者病情发展和癌变中起重要作用.     

Immunohistochemical detection of Fas and apoptosis in type-1 autoimmune hepatitis

BACKGROUND/AIMS: Although Fas expression has been reported in liver with chronic viral hepatitis and primary biliary cirrhosis, little is known about Fas expression and apoptosis in type-1 autoimmune hepatitis. The aim of this study was to investigate whether the expression of Fas and apoptosis are found in liver with autoimmune hepatitis. The relationship between Fas expression and clinicopathological findings including the occurrence of apoptosis was also investigated. METHODOLOGY: Fas expression and apoptosis were immunohistochemically examined in liver tissues from 20 patients with autoimmune hepatitis and five control subjects using specific antibodies against Fas and single-stranded DNA. The grade of expression of Fas and apoptosis was evaluated and compared with histological findings and the results of liver function tests in each patient. RESULTS: Fas expression in hepatocytes was detected in all patients with autoimmune hepatitis, while Fas expression was not detected in control livers. The Fas-positive hepatocytes were particularly abundant in those areas facing piecemeal and confluent necrosis. In 30% of autoimmune hepatitis cases, bile-duct cells were faintly stained for Fas. A few hepatocytes positive for single-stranded DNA were found in the areas facing piecemeal necrosis and confluent necrosis. In 95% cases, many bile-duct cells were positive for single-stranded DNA. No relationship between the expression of Fas and single-stranded DNA was found in hepatocytes or bile-duct cells. However, the degree of Fas expression in hepatocytes significantly correlated with serum transaminase concentrations and was increased in parallel with the grade of activity but not with the stage of fibrosis. CONCLUSIONS: We have demonstrated that Fas expression is detected in hepatocytes of the liver with autoimmune hepatitis and that the level of Fas expression reflects the severity of inflammation in autoimmune hepatitis.     

Expression of Fas antigen in liver tissue of patients with chronic hepatitis B and C

OBJECTIVES: Cells infected with the hepatitis B or C virus can be eliminated by an immune response mediated by cytotoxic T cells. Recently, the Fas Ligand has been detected on the surface of cytotoxic T cells, and is thought to induce cells to apoptosis by adhering to the Fas antigen. METHODS: To evaluate the role of the Fas antigen and apoptosis in chronic hepatitis B or C, we used immunohistochemistry to study Fas antigen expression in liver samples obtained from 30 patients infected with chronic hepatitis B and 32 patients with chronic hepatitis C. RESULTS: In samples from patients with chronic hepatitis C and B, Fas antigen was mainly expressed in the cytoplasm (partly at the membrane) of hepatocytes, and these positive cells were detected especially at the periportal region near 'piecemeal necrosis'. According to Knodell's scoring system for the histological activity index, the scores of periportal inflammation and necrosis were higher in cases that were positive for Fas antigen than in cases that were negative for the antigen (n = 62, P < 0.001) and there was a positive correlation between these scores and the degree of Fas antigen expression (r = 0.621). There was also a positive correlation between the scores of intralobular inflammation and necrosis and the degree of Fas antigen expression (n = 62, r = 0.522, P = 0.001). Fas antigen was not detected in patients without hepatitis infection. CONCLUSIONS: These findings suggest that apoptosis of hepatocytes is induced via the Fas antigen and contributes to the elimination of infected cells.     

肝组织Fas抗原表达和细胞凋亡在乙型肝炎发病机理中的意义

目的：探讨肝组织中Ｆａｓ抗在表达和细胞凋亡的关系及其在乙型病毒性肝炎发病机理中的意义。方法：应用Ｆａｓ抗原免疫组织化学染色和原位末端标记技术（ＴＵＮＥＬ试验）。原位观察８４例乙型肝炎肝组织中Ｆａｓ抗原表达强度和分布及凋亡细胞密度。结果：８例正常肝组织未见有Ｆａｓ抗原表达,慢性重型肝炎的Ｆａｓ抗原阳性表达率为１００％,明显高于慢性肝炎中重度的６６．７％（Ｐ〈０．０１）;而慢性肝炎中重度的Ｆａｓ阳性率     

慢性病毒性肝炎肝细胞凋亡与Fas抗原和病毒表达的相互关系

为探讨病毒性肝炎肝细胞凋亡及其与病毒和Ｆａｓ抗原表达的关系，应用原位末端标记技术检测一组慢性乙、丙型肝炎患者肝组织中细胞凋亡状况，并以免疫组化方法检测病毒和Ｆａｓ抗原表达。结果３１例患者中，２５例肝组织中检出末端标记阳性细胞，散布于肝小叶和肝窦内，部分炎症坏死灶中和胆管上皮细胞也可检出阳性细胞；组织炎症活动度较大者和病毒抗原阳性者凋亡指数较高；凋亡细胞可为病毒抗原阳性和阴性；Ｆａｓ抗原阳性与阴性组间凋亡程度无显著差异。提示病毒性肝炎患者感染和未感染病毒的肝细胞均可发生凋亡，其机制有待进一步研究。     

Fas／Fas—L在重型肝炎患者肝组织中的表达及其在肝细胞凋亡中的意义

目的 研究Fas/Fas-L系统在重型肝炎患者肝细胞中的表达情况及在肝细胞凋亡中的意义。方法 采用免疫组织化学方法对20例住院的重型肝炎病人之活检肝组织进行了Fas抗原及Fas配体表达的检测,并运用末端转移酶标亡技术（TUNEL）同时检测细胞原位凋亡的情况。结果 所检测20例重型肝炎肝组织中,Fas抗原在肝细胞中呈强阳性表达;浸润的淋巴细胞上大量表达Fas-L,肝细胞中也有散在分布;敏例标本均见凋亡细胞,分布在炎症坏死区及周边和小叶内。结论 Fas/Fas-L系统过量表达,引起大量肝细胞死亡,参与重型肝炎的发病,Fas途径引起的细胞凋亡可能是重型肝炎发病过程中的重要机制之一。所检标本中,凋亡和坏死同时存在,这两种不同的死亡方式有重型肝炎的发病上存在着关联性。     

Fas、FasL在慢性乙型肝炎患者肝细胞和外周血淋巴细胞上的表达

探讨慢性乙型肝炎患者肝细胞及外周血淋巴细胞上Fas、FasL的表达与乙型肝炎病毒（HBV）复制水平及肝组织炎症程度的关系。对30例慢性乙型肝炎患者进行肝穿刺肝组织病理检查及免疫组化SP法检测肝细胞中Fas、FasL表达强度。并采用单克隆抗体经流式细胞仪检测外周血淋巴细胞上Fas、FasL表达阳性百分率;同时,采用荧光实时标记法测定血清中病毒复制指标HBV DNA水平;采用Beckman全自动生化分析仪检测肝功能并研究其相关性。慢性乙型肝炎患者肝细胞中Fas、FasL表达强度随肝组织炎症活动度加重而增强（P均〈0．001）,与白蛋白及丙氨酸转移酶（ALT）呈负相关（P〈0．005,P〈0．001）,与球蛋白、总胆红质无明显相关性（P均〉0．05）。外周血淋巴细胞上Fas、FasL的表达阳性率与血清中肝炎病毒复制指标HBV DNA水平呈正相关;与慢性肝炎分度无明显的相关性。乙型肝炎病毒感染可诱导肝细胞及外周血淋巴细胞上Fas、FasL的表达。肝细胞Fas、FasL的表达随炎症活动度加重而表达增强,但其介导的凋亡并不引起肝细胞炎症损伤即ALT活性并不升高,相反减少;同时在某种程度上影响白蛋白的合成。提示Fas—FasL介导的肝细胞凋亡是以非细胞损伤方式参与慢性乙型肝炎的发病过程。同时,随血清HBV DNA水平增高,外周血淋巴细胞上Fas、FasL的表达亦增强,淋巴细胞的凋亡因而增多,是导致乙型肝炎慢性化的原因之一。由此可见,Fas、FasL介导的凋亡参与了慢性乙型肝炎的发病机制,且在慢性乙型肝炎的发生发展中起重要作用。     

乙型肝炎患者肝组织中FasL的检测

目的探讨乙型病毒性肝炎患者肝组织中Ｆａｓ配体（ＦａｓＬ）的表达与分布及其与Ｆａｓ抗原的相互关系。方法应用免疫组织化学双标记技术，以免抗－ＦａｓＬ及兔抗一Ｆａｓ多克隆抗体，对４６例慢性肝炎及活动性肝硬化患者石蜡包埋肝组织中的ＦａｓＬ及Ｆａｓ进行了检测。结果Ｆａｓ及ＦａｓＬ的检出率分别为７１．７％（３３／４６）及６５．２％（３０／４６），Ｆａｓ于肝细胞胞浆内表达；ＦａｓＬ多在肝组织中浸润的淋巴细胞胞浆内表达（２３／３０，７ｔｉ，７％），也见于肝细胞浆中（２０／３０，６６．７％）。ＦａｓＬ阳性淋巴细胞主要分布于汇管区，肝小叫内很少见，ＦａｓＬ阳性肝细胞的分布类同Ｆａｓ阳性肝细胞：即多集聚于碎屑样坏死灶和假小叶的周边。免疫组化双标记染色显示Ｆａｓ及ＦａｓＬ可在同一或不同肝细胞胞浆内表达，但多分布于同一区域。结论病毒性肝炎肝组织中ＦａｓＬ的分布与Ｆａｓ抗原密切相关，Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统在肝细胞损伤中起了重要的作用，肝细胞内ＦａｓＬ表达的意义尚待进一步研究。     

细胞间粘附分子－1在乙型肝炎中的表达及意义

为观察细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）在乙型肝炎肝组织内的表达状况，探讨ＩＣＡＭ－１在乙型肝炎肝细胞免疫损伤中的作用。采用链菌素亲生物蛋白法（ＬＳＡＢ），以ＩＣＡＭ－１的单克隆抗体，检测１０４例急、慢性乙型肝炎，９例无症状携带者，１０例正常肝组织标本内ＩＣＡＭ－１抗原表达情况。结果发现：ＩＣＡＭ－１在正常肝细胞无表达，肝窦内皮细胞弱表达；ＨＢＶ感染后肝细胞呈不同程度的表达，肝窦内皮表达增强；中、重度慢性肝炎，活动性肝硬化肝细胞ＩＣＡＭ－１表达较急性肝炎，轻度慢性肝炎显著增强（Ｐ＜０．０１）；急性肝炎较轻度慢性肝炎显著增强（Ｐ＜０．０１）；轻度慢性肝炎较无症状携带者，正常肝组织显著增强（Ｐ＜０．０１）。表明ＩＣＡＭ－１在乙型肝炎肝细胞内表达与肝细胞损伤有关，对ＨＢＶ的清除可能起着重要作用，ＩＣＡＭ－１在肝窦内皮的表达有助于淋巴细胞向肝组织内浸润。