高效液相色谱法测定淀粉类食品中丙烯酰胺研究

〔目的〕研究检测淀粉类食品中丙烯酰胺的高效液相色谱测定方法 ,用于实际样品测定。〔方法〕用水提取食品中丙烯酰胺 ,采用固相萃取小柱对样品液进行纯化 ,以二极管阵列高效液相色谱法测定其含量。〔结果〕方法检出限为 10ng/g,回收率在 80 .0 %～ 115 .0 %之间 ,精密度为 5 .34% (低浓度 )、3.4 0 % (中等浓度 )和 4 .30 % (高浓度 )。〔结论〕该方法测定食品中丙烯酰胺具有操作简单、干扰少、快速、准确可靠等特点 ,可以用于食品中丙烯酰胺测定的推广应用。     

HPLC法与香草醛比色法测定保健品中的人参皂甙

〔目的〕应用高效液相色谱法和分光光度法分别同时检测保健食品中人参总皂甙的含量。〔方法〕高效液相色谱法采用短色谱柱 ,低乙晴体积分数 ,非线性梯度洗脱对 6种主要人参皂甙Rg1,Rb1,Re,Rb2 、Rc、Rd进行分析。〔结果〕方法回收率 95 .6 %～ 97.7% ,检出限 2 .2ng ,RSD =1.30 %～ 6 .90 %。分光光度法用大孔吸附树脂吸附人参总皂甙 ,经梯度洗脱处理 ,香草醛显色后测定人参总皂甙含量。方法回收率 :95 .6 %～ 10 7.4 % ,检出限 :1.2 5 μg,RSD =3.5 1%～ 4 .17%。两种方法测定人参总皂甙结果有显著性差异 (t=4 .5 1>t( 0 .0 5) =1.895 )。〔结论〕HPLC法适用于单个皂甙的测定 ,比色法适用于总皂甙含量的测定     

保健食品中红景天甙的提取和测定方法研究

〔目的〕建立保健食品中红景天甙样品的前处理和高效液相色谱检测方法。〔方法〕保健食品中的红景天甙经 70 %乙醇超声波提取 ,聚酰胺柱净化后 ,以甲醇 -0 .0 1mol LNH4 Ac为流动相 ( 2 0∶80 ) ,用C1 8柱 ,紫外 2 15nm检测。〔结果〕优化了含红景天保健食品中红景天甙的提取、净化和测定条件 ,有效去除样品中的干扰成分 ,定量检测红景天甙。方法检出限为 0 .5 μg ml,样品测定的相对标准差 (RSD)小于 2 .5 % ,加标回收率为 97.1% -10 2 .4%。〔结论〕本方法操作简便 ,灵敏、可靠 ,适用于红景天原料和保健食品中红景天甙的分析测定。     

高效液相色谱法检测人血清中苦参碱浓度

苦参碱的测定方法有离子对比色法、薄层扫描法〔1〕 及毛细管气相色谱法等〔2〕,这些方法测定准确 ,但样品处理过程复杂 ,不适用于临床常规测定。高效液相色谱法 (HPLC)具有效能高、灵敏度高、分析速度快及应用范围广的特点 ,是一种常用的定量检测分析方法。本文对检测人血清中苦参碱浓度的方法进行了探讨 ,建立了一种简单、快速、灵敏、准确的测定人血清中苦参碱含量的反相高效液相色谱法。1　材料和方法1 1　材料　 (1)仪器 :SHIMADZULC -10AVP高效液相色谱系统 ,LC -10ATVP泵 ,SPD -10AVP紫外检测器 ,772 5型六通进样器 ,CL…     

保健食品中淫羊藿苷测定方法研究

〔目的〕研究保健食品中淫羊藿苷的测定 ,并比较紫外分光光度计法与高效液相色谱法的测定效果〔方法〕采用经乙酸乙酯萃取 ,并经大孔树脂分离提纯 ,分别对固体粉状试样、含油软胶囊试样、口服液试样用二种不同的方法测定淫千藿苷的含量。〔结果〕经问收率试验和实际样品检测 ,方法的回收率分别为 93.0 %～ 98.0 % ,95 .0 %～ 99.0 % ,实际样品测定RSD分别为 1.2 1%～3.37% ,1.2 9%～ 3.92 %。〔结论〕二种方法测定的结果均较为满意 ,可根据实验室条件自行选择 ,但紫外分光光度计更适用于检测成分比较单一的试样。     

离子色谱法测定空气中氯乙酸

作业环境空气中氯乙酸 (ｃｈｌｏｒｏａｅｔｉｃａｃｉｄ)的测定 ,国外报道采用高效液相色谱法〔1〕、气相色谱法〔2〕、离子色谱法〔3～ 5〕、分光光度法〔6〕;近年来国内报道用气相色谱法〔7〕,该法操作简便、实用 ,但灵敏度较低 ,且所用填充柱不能将二氯乙酸、三氯乙酸等微量共存物分离测定。我们参照国内外文献对离子色谱法测定空气中氯乙酸进行了规范化研究。结果报告如下。1　材料与方法1 1　仪器　硅胶管 :7ｃｍ× 4ｍｍ的玻璃管 ,填充 2段 2 0～ 40目硅胶 (前段 2 0 0ｍｇ ,后段 10 0ｍｇ)填后 2段和 2端分别用玻璃棉隔离或衬托。 2…     

高效液相色谱法同时测定植物油中的BHA、BHT和游离棉酚

〔目的〕建立高效液相色谱法同时测定植物油中氧化剂BHA(叔丁基羟基茴香醚 )、BHT(二叔丁基羟基甲苯 )和有毒物质游离棉酚的方法。〔方法〕采用HypersilODS( 2 5 0mm× 4.6mm ,10 μg)色谱柱 ;流动相为甲醇 -磷酸水 ( 3 3 0 0 ) =84 16;流速 :1.2ml min ;检测波长 :2 3 0nm。〔结果〕此三种物质分离良好 ,BHA、BHT和游离棉酚的最低检出量分别为 5ng、10ng和5ng ,回收率为 90 .7%～ 10 5 .1% ,相对标准偏差为 0 .93 %～ 1.7%。〔结论〕该方法简便、快速、准确及重现性好     

高效液相色谱法同时测定牙膏中苯甲酸和4种对羟基苯甲酸酯

苯甲酸和对羟基苯甲酸酯类是常用防腐剂 ,化妆品卫生标准规定了其使用限量 〔1〕,测定方法亦有相关报道 〔2～ 4〕,多采用高效液相色谱法 ,薄层和气相色谱法 ,但对牙膏中此类防腐剂的检测国内还未见报道。国外有文献〔5〕采用气相色谱法测定牙膏中苯甲酸及对羟基苯甲酸酯类 ,但     

保健食品中大豆异黄酮的测定方法研究

〔目的〕检测保健食品中黄豆甙、黄豆甙元、染料木甙和金雀异黄素 ,建立保健食品中四种大豆异黄酮的二极管阵列检测器高效液相色谱法。〔方法〕样品用甲醇 水 (80 2 0 ,v/v)超声提取 3 0min ,定容后过 0 .45 μm滤膜 ,上 2 5 0×4.6mm ,粒径 10 μm的C18柱 ,以甲醇 0 .0 5 0mol/L ,pH4.6醋酸铵 (4 6 5 4,v/v)作流动相 ,二极管阵列检测器测定。测定时间只需 2 0min左右 ,黄豆甙 ,染料木甙 ,黄豆甙元和金雀异黄素可得到良好分离。〔结果〕黄豆甙 ,染料木甙 ,黄豆甙元和金雀异黄素的加标回收率分别为 90 .4%～ 10 2 % ,88.9%～ 10 2 % ,93 .0 %～ 10 2 % ,89.3 %～ 10 4% ,加标回收相对标准偏差均小于 6% ,最底检出浓度均为 0 .10 μg/ml。〔结论〕本方法适用于保健食品中大豆异黄酮的测定     

面粉中过氧化苯甲酰的高效液相色谱测定法

过氧化苯甲酰又称面粉增白剂。我国食品添加剂使用卫生标准GB2760中规定过氧化苯甲酰在小麦粉中的最大使用量为0.06g/kg〔1,2〕。目前在疾病控制系统采用的检测依据有卫生部卫法监发〔2001〕159号文〔3〕,以及国家质量监督检验检疫总局发布的GB/T18415-2001〔4〕。实际应用中发现气相色谱法的样品前处理太烦琐,液相色谱法由于还原剂碘化钾用量太大、流动相配比不合理导致过高的溶剂峰,影响样品峰的有效分离,为此我们做了相应的改进研究。1实验方法1.1原理样品中过氧化苯甲酰用无水乙醇溶解,经碘化钾还原为苯甲酸后进行高效液相色谱测定,反…     

镁对镍、钴、锌、镉离子致蟾蜍胚胎毒性的影响

[目的 ]用FETAX设计 ,研究Mg2 对Ni2 、Co2 、Zn2 和Cd2 致Xenopus胚胎的胚胎毒性与致畸作用的影响。 [方法 ]在 7次检测中 ,分别于含Mg2 5个等级浓度 (0、6 2、62、62 0、62 0 0 μmol/L)的FETAX培养液中 ,设空白对照与加入NiCl2 (5 6μmol/L)、CoCl2 (180 0 μmol/L)、ZnCl2 (3 0 0 μmol/L)和CdCl2 (18μmol/L)的 2 5个组 ,每个组内的受精卵均经 5～10 1h孵育。在该检测中限定Mg2 (62 0 μmol/L)为标准浓度。在该浓度时Ni2 、Co2 、Zn2 和Cd2 组胚胎死亡率 <10 % ,畸形率 >95 %。 [结果 ]对照组于标准浓度时平均畸形率为 (5 4± 1 3 ) % ,低于该等级的 62 μmol/L为 (3 2± 7) % ,≤ 6 2μmol/L为 10 0 %。表明Mg2 不足与补加可极显著地增强与降低胚胎畸形率及其严重程度与胚胎毒性 (P <0 0 0 0 1,ANO VA分析 )。 [结论 ]对此 ,推测这可能与涉及在两价金属离子转运之间的金属吸收、细胞通道或对关键性分子靶 (即DNA聚合酶 )结合的竞争有关。     

重铬酸钾标定硫代硫酸钠标准溶液浓度值不确定度的评定

重铬酸钾标定的硫代硫酸钠溶液是一种常用化学定量参比物质。文章首先以GB/T601-2002标准为依据,对重铬酸钾标定的硫代硫酸钠溶液浓度(0.1mol/L)的标定结果的不确定度进行评定。最后给出溶液浓度的合成不确定度及扩展不确定度,并对各因素影响进行分析。     

Porcine circovirus type 2a or 2b based experimental vaccines provide protection against PCV2d/porcine parvovirus 2 co-challenge

With the discovery of Porcine circovirus type 2d (PCV2d) in the USA in 2012 and subsequent genotype shift from the previously predominant PCV2b to PCV2d in the face of widespread PCV2a vaccination, concerns over PCV2 vaccine efficacy were raised. The objective of this study was to evaluate the efficacy of two similarly produced PCV2 vaccines, one containing the PCV2a capsid and the other one containing the PCV2b capsid, in the conventional pig model against PCV2d/porcine parvovirus 2 (PPV2) co-challenge. A co-challenge was added since there is evidence that PPV2 may exacerbate PCV2 infection and since PCV2 only rarely causes disease in experimentally infected pigs, hence vaccine efficacy can be difficult to assess. In brief, sixty 3-week-old-pigs from a PCV2 seropositive farm without evidence of active virus replication (no PCV2 viremia, low antibody titers with no evidence of increase after two consecutive bleedings) were blocked by PCV2 antibody titer and then randomly divided into three groups with 20 pigs each, a non-vaccinated group (challenge control), a PCV2a vaccinated group (VAC2a) and a PCV2b vaccinated group (VAC2b). Vaccinations were done at 4 and again at 6 weeks of age. At 8 weeks of age, all pigs were challenged with a PCV2d strain via intranasal and intramuscular routes of inoculation followed by intramuscular administration of PPV2 one day later. PCV2 vaccination, regardless of PCV2 genotype, resulted in significantly higher humoral and cellular immunity compared to non-vaccinated challenge control pigs as evidenced by increased numbers of interferon (IFN) γ secreting cells after PCV2d stimulation of peripheral blood mononuclear cells collected prior to challenge. Furthermore, PCV2a and PCV2b vaccinations both reduced PCV2d viremia and PCV2-associated pathological lesions. Under the study conditions, the PCV2a and PCV2b vaccine preparations each induced immune responses and clinical protection against a heterologous PCV2d/PPV2 co-challenge.     

A PCV2 vaccine based on genotype 2b is more effective than a 2a-based vaccine to protect against PCV2b or combined PCV2a/2b viremia in pigs with concurrent PCV2, PRRSV and PPV infection

The predominant genotype of porcine circovirus (PCV) in the pig population today is PCV2b yet PCV2a-based commercial vaccines are considered effective in protecting against porcine circovirus associated disease. The objective of this study was to compare the ability of PCV2a- and PCV2b-based vaccines to control PCV2b viremia in a challenge model that mimics the U.S. field situation. Sixty-three pigs were randomly assigned to one of eight groups. Sixteen pigs were vaccinated with an experimental live-attenuated chimeric PCV1-2a vaccine based on genotype 2a and another 16 pigs with a chimeric PCV1-2b vaccine based on genotype 2b. Challenge was done 28 days post vaccination (dpv) using PCV2b (or a combination of PCV2a and PCV2b), porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV), and porcine parvovirus (PPV) to mimic what commonly occurs in the field. The experiment was terminated 21 days post challenge (dpc) or 49 dpv. Pigs vaccinated with the chimeric PCV1-2b vaccine had significantly higher levels of PCV1-2b viremia and shedding of the PCV1-2b vaccine virus in feces and nasal secretions but also a more robust humoral immune response as evidenced by significantly higher ELISA S/P ratios compared to the PCV1-2a vaccination. Regardless of challenge, the PCV1-2b vaccination significantly reduced the prevalence and amount of PCV2 viremia compared to the PCV1-2a vaccination. Interestingly, in the non-vaccinated pigs concurrent PCV2a infection resulted in clinical disease and increased macroscopic lung lesions compared to pigs challenged with PCV2b alone, further supporting the idea that concurrent PCV2a/PCV2b infection is necessary for optimal PCV2 replication.     

一起急性CO2、H2S中毒死亡事故及教训

某厂职工违章清洗滤酒池，致吸入CO2、H2S气体而中毒，又因救助人员无应急救援知识，盲目下池救人，导致事故扩大。加强职工防毒知识教育至关重要，同时应建立严格的安全操作规程。     

不同分期肝癌患者血清IGF-2及IGFBP-2水平与肝癌侵袭能力的相关性分析

目的探讨不同分期肝癌患者血清胰岛素样生长因子-2(IGF-2)及胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP-2)水平与肝癌侵袭能力的相关性。方法对来我院就诊的124例肝细胞癌患者分为I期、II期、III期及IV期,分别有29、31、36、28例,对各期患者血清IGF-2、IGFBP-2、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其抑制剂TIMP-2进行检测。结果Ⅱ期患者IGF-2、IGFBP-2水平较Ⅰ期显著升高(P0.05);Ⅲ期患者IGF-2、IGFBP-2水平较Ⅰ、Ⅱ期均显著升高(P0.05);Ⅳ患者IGF-2、IGFBP-2水平较Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期均显著升高(P0.05)。Ⅱ期患者MMP-2/TIMP-2较Ⅰ期显著升高(P0.05);Ⅲ期患者MMP-2及TIMP-2与Ⅰ期比较差异均有显著性(P0.05);MMP-2/TIMP-2较Ⅰ、Ⅱ期患者均显著升高(P0.05);Ⅳ期患者MMP-2、TIMP-2水平及MMP-2/TIMP-2水平与Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期比较差异均有显著性(P0.05)。IGF-2与TIMP-2、MMP-2/TIMP-2呈显著相关(P0.05),IGFBP-2与TIMP-2、MMP-2/TIMP-2呈显著相关(P0.05)。结论 IGF-2及IGFBP-2水平与细胞外基质重构密切相关,是反映肝细胞癌进展的重要因子。     

溴氰菊酯对大鼠脑中苄氧基试卤灵O-脱烷基化酶活力及CYP2B1/2B2蛋白水平的影响

目的　研究溴氰菊酯 (deltamethrin ,DM)对大鼠脑组织中苄氧基试卤灵O 脱烷基化酶(benzyloxyresorufinO dealkylatase,BROD)活力及CYP2B1 / 2B2蛋白水平的影响。方法　采用荧光分光光度法 ,在体内、体外研究了DM对大鼠脑组织中BROD活力的影响 ,并用Western blot法检测了DM对CYP2B1 / 2B2蛋白水平的影响。结果　大鼠连续 5d腹腔注射DM 1 2 .5mg·kg- 1 ·d- 1 染毒后 ,其全脑、大脑皮层及小脑BROD活力明显被抑制 ,其抑制率分别是 2 6 .7%、2 3 .8%和 33 .3 % ,差异均有显著性(P <0 .0 5) ;在体外 ,DM浓度在 2× 1 0 - 8～ 2× 1 0 - 4mol/L范围内对BROD活力无明显影响 ;DM在体内明显降低小脑中CYP2B1 / 2B2蛋白水平 ,其酶蛋白合成抑制率为 42 .6 %。结论　DM在体内能明显抑制脑内BROD活力 ,其机制与抑制该酶蛋白合成有关     

FGFR2、VEGFR2在乳腺癌组织中的表达和临床意义

[目的]本研究探讨成纤维细胞生长因子2型受体(FGFR2)和血管内皮细胞生长因子2型受体(VEG-FR2)在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。[方法]应用免疫组化SABC法,检测两种蛋白的表达情况。[结果]FGFR2和VEGFR2在乳腺癌组织中的积分光密度(IOD)表达率平均为分别为78.38±16.4和83.42±18.1。FGFR2、VEGFR2蛋白表达与病理分期和淋巴结转移有关,在乳腺增生病、乳腺癌癌旁组织、乳腺癌中的阳性表达率依次递增(P﹤0.05),而与年龄及分化程度无关。[结论]FGFR2和VEGFR2在乳腺癌中高表达;FGFR2及VEGFR2蛋白的表达强度与乳腺癌病理分期均呈正相关;     

血管生成素-2及其受体Tie-2在子宫内膜异位症中的表达

目的:探讨Ang-2及受体Tie-2在子宫内膜异位症(EMs)患者的在位内膜和异位内膜中的表达。方法:选取病理证实为EMs患者60例为研究组(异位内膜组、在位内膜组),选取同期因不孕症等行腹腔镜手术患者的子宫内膜组织36例为对照组。采用免疫组织化学染色方法检测Ang-2及受体Tie-2的表达。结果:①Ang-2主要表达于腺上皮细胞和血管内皮细胞,少数表达于间质细胞。Ang-2在EMs异位内膜、在位内膜的阳性表达率明显高于对照组(P<0.05);在位内膜同异位内膜间比较差异无显著性(P>0.05);EMs在位内膜组分泌期的阳性表达率高于增殖期(P<0.05);对照组增生期的阳性表达率高于分泌期(P<0.05)。Ang-2在EMs在位内膜组、正常对照组的表达均随月经呈周期性改变,差异均有显著性。②Tie-2主要表达于腺上皮细胞和血管内皮细胞,EMs组异位内膜和在位内膜Tie-2的表达明显高于对照组(P<0.05);EMs患者异位及在位内膜比较差异无显著性(P>0.05);Tie-2在正常子宫内膜、EMs在位内膜中的表达具有周期性,均为增生期高于分泌期(P<0.05)。结论:EMs患者异位及在位内膜中血管生成活跃,导致异位病灶组织中的血管数增加。异位内膜和在位内膜可能具有组织同源性。分泌期内膜更易在盆腹腔等处种植生长,增生期血管生成更为活跃。     

镉暴露对HepG2细胞NRF2信号通路影响

目的 探讨镉暴露对HepG2细胞转录因子NF-E2相关因子2（NRF2）信号通路的影响。方法 采用甲臢比色法测定CdCl₂（0、1、2.5、5、10、25、50、100、200 μmol/L）处理24 h后,HepG2细胞活力变化;应用蛋白免疫印迹法检测CdCl₂（1、2、5、10、20 μmol/L）处理细胞6 h后,NRF2蛋白水平;采用RT-qPCR方法检测10 μmol/L CdCl₂处理细胞2、4、6、12、24 h后,GCLC、GCLM、HO1 和 AKR1C1 mRNA水平变化,检测CdCl₂（1、2、5、10、20 μmol/L）处理细胞6 h后,GCLC、GCLM、HO1和AKR1C1 mRNA水平变化。结果 HepG2细胞活力随镉处理剂量升高而降低（P<0.05）;与对照组（0.60±0.01）比较, 1、2、5、10、20 μmol/L镉处理组HepG2细胞NRF2蛋白表达水平[分别为（0.65±0.01）、（1.37±0.04）、（1.94±0.05）、（2.24±0.07）、（2.22±0.05）]均明显升高（P<0.05）;与对照组比较,镉处理6 h时,HepG2细胞内GCLC、GCLM、HO1和AKR1C1 mRNA水平[分别为（45.76±7.04）、（114.21±5.23）、（59.52±1.50）、（674.13±27.12）]明显升高（P<0.05）;与对照组比较,5 μmol/L镉处理组HepG2细胞内GCLC和GCLM mRNA水平[分别为（24.77±2.16）、（29.93±0.67）]升高,2 μmol/L镉处理组HepG2细胞内HO1和AKR1C1 mRNA水平[分别（28.55±2.02）、（186.32±12.63）]升高（P<0.05）。结论 镉暴露能激活HepG2细胞系中NRF2信号通路。