膀胱移行上皮癌患者尿及癌组织中Survivin表达的临床意义

目的：探讨Survivin对膀胱癌早期发现、常规筛选且无损伤的方法,研究其与肿瘤病理分级（期）的相关性。方法：留取53例膀胱移行上皮癌、20例泌尿系其他疾病、10例健康志愿者新鲜中段晨尿,同上53例术后癌组织。利用巢式RT—PCR、实时定量PCR技术检测Survivin的表达,同时行尿脱落细胞学及膀胱镜病检。结果：53例膀胱癌患者尿及癌组织中Survivin均有表达,敏感性为100％,特异性为90％。与尿脱落细胞学敏感性比较两者差异有统计学意义（P〈0．05）,与膀胱镜检比较差异无统计学意义。三种方法特异性比较差异无统计学意义（P〉0．05）。癌组织中Survivin的量与肿瘤病理分级（期）正相关（P〈0．01）。结论：检测尿脱落细胞中Survivin的表达有望成为临床诊断、筛检膀胱癌的较可靠方法。Survivin在膀胱的演进过程中可能起重要作用,可望作为检测膀胱癌恶化进展的指标。     

检测膀胱癌患者尿液脱落细胞中Survivin的表达及意义

目的：探讨检测膀胱癌患者尿液脱落细胞中Survivin的表达及意义。方法：留取40例膀胱移行细胞癌患者、15例其他泌尿系统疾病患者和8例正常健康成人的新鲜尿液，离心收集脱落细胞，以逆转录多聚酶联反应(RT-PCR)检测膀胱癌患者尿液脱落细胞中Survivin的表达．并行尿脱落细胞学检查。结果：40例膀胱移行细胞癌患者尿脱落细胞中有38例检测出Survivin表达，而15例其他泌尿系统疾病患者和8例正常健康成人的尿脱落细胞中均未检测出Survivin的表达。以RT-PCR反应检测膀胱癌患者尿液脱落细胞中Survivin的方法敏感性为95％，特异性为100％。结论：初步的试验结果显示．RTPCR法检测膀胱癌患者尿液脱落细胞中Survivin的方法可以作为诊断膀胱癌的无创性方法。     

膀胱癌患者尿脱落细胞中Survivin的检测及其临床应用

目的通过对膀胱移行细胞癌（TCCB）患者尿脱落细胞中Survivin蛋白和其mRNA表达的检测，以探讨其在膀胱肿瘤早期诊断中的应用价值。方法分别采用免疫组织化学sP法和巢式逆转录-聚合酶链反应（Nested RT-PCR）方法检测48例TCCB、16例对照组（其中5例膀胱外泌尿系肿瘤患者、5例非肿瘤泌尿系疾病患者及6例健康者）尿脱落细胞Survivin的蛋白和mRNA表达，同时行尿脱落细胞学检查。结果48例TCCB患者中尿脱落细胞Survivin蛋白与mRNA阳性表达率分别为42例（87．5％），47例（97．9％）；对照组仅1例BPH患者mRNA阳性表达（3．1％）。TCCB组与对照组Survivin阳性率比较差异有统计学意义（P〈0.01）。免疫组织化学和RT—PCR法检测尿液中Survivin的敏感性和特异性分别为87．5％、97．9％和72．7％、93．8％。而尿脱落细胞学检查阳性率为28例（58．3％），其敏感性和特异性分别为58．3％和100．0％。结论尿脱落细胞Survivin检测诊断TCCB敏感性和特异性均较高，且无创，无痛苦，可作为早期诊断TCCB的敏感指标，其中RT-PCR检测方法敏感性更高。     

联合检测尿液中Survivin和MUC7在膀胱癌诊断中的临床应用

目的探讨检测尿液中Survivin和mucin 7（MUC7）在诊断膀胱癌中的临床价值。 方法对75例膀胱肿瘤患者、38例泌尿系统良性疾病患者及20例健康自愿者在行膀胱镜检前分别留置3份尿液标本,通过检测尿液中Survivin、MUC7和尿脱落细胞学的敏感性和特异性,分析比较3种方法在临床诊断膀胱癌的临床应用价值。 结果Survivin诊断膀胱癌的敏感性和特异性分别是93.3%和98.3%,MUC7诊断膀胱癌的敏感性和特异性分别是80%和100%;尿脱落细胞学诊断膀胱癌的敏感性和特异性分别是66.7%和100%;Survivin联合MUC7的敏感性和特异性分别是98.7%和100%;Survivin联合MUC7、Survivin、MUC7与尿脱落细胞学的敏感性比较差异均有统计学意义（P<0.05）。Survivin联合MUC7、Survivin、MUC7与尿脱落细胞细胞学的准确性分别是99.2%、95.5%、88.7%、81.2.3%,与脱落细胞学组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。 结论联合检测两种肿瘤标记物Survivin及MUC7可以提高膀胱癌诊断的敏感性和准确性。     

膀胱移行细胞癌患者尿脱落细胞中生存素的检测及其意义

目的:探讨膀胱移行细胞癌(TCCB)患者尿脱落细胞生存素(Survivin)蛋白和mRNA表达及其临床意义。方法:采用免疫组化SP法和巢式逆转录聚合酶链反应方法,对TCCB患者32例(TCCB组)、非TCCB16例(对照组)尿脱落细胞Survivin的蛋白和mRNA进行检测,同时行尿脱落细胞学检查。结果:TCCB组尿脱落细胞Survivin的蛋白、mRNA阳性表达率分别为28例(87.5%),32例(100%);对照组仅1例mRNA阳性表达(6.2%)。两组Survivin阳性率比较差异有统计学意义(P<0.01);尿液中Survivin的敏感性和特异性,分别为87.5%,80%和96.9%,93.8%。而尿脱落细胞阳性率为18例(56.2%),其敏感性和特异性分别为56.2%和100%。结论:尿脱落细胞Survivin检测诊断TCCB的敏感性和特异性均较高,且对患者无创、无痛苦,可作为早期诊断TCCB的敏感指标,其中RT-PCR检测敏感性更高。     

ImmunoCyt在膀胱移行细胞癌早期诊断中的应用

目的评价ImmunoCyt检测在膀胱癌早期诊断和随访中的作用. 方法膀胱癌患者86例,其中38例为膀胱肿瘤行经尿道膀胱肿瘤电切术后至少3个月的随访患者,48例有肉眼(镜下)血尿,分别进行标准尿脱落细胞学和ImmunoCyt检测.86例均行膀胱镜检查,对可疑组织进行活检. 结果膀胱镜检和病理证实28例为膀胱移行细胞癌.ImmunoCyt敏感性为82%,与尿脱落细胞学检查(39%)相比差异有显著性意义(P<0.05).两种检查方法相结合的敏感性为89%.ImmunoCyt和细胞学的特异性分别为78%和94%. 结论 ImmunoCyt较细胞学对膀胱肿瘤更敏感,二者联合使用可在保持高特异性的前提下提高诊断的敏感性,早期检测膀胱肿瘤.     

尿Cox-2蛋白与CK20 mRNA诊断膀胱移行细胞癌的临床价值

目的：评价尿环氧化酶-2（Cox-2）蛋白、CK20 mRNA诊断膀胱移行细胞癌的临床价值。方法：选择78例膀胱移行细胞癌和30例非膀胱肿瘤患者,同时行尿Cox-2蛋白、CK20 mRNA和尿脱落细胞学检查,比较各种方法的敏感性、特异性和Youden指数。结果：尿Cox-2蛋白、CK20 mRNA和尿脱落细胞学的敏感性分别为89.7％．66.7％．26.9％;特异性分别为93.3％、86.7％和100％;Youden指数分别为83.1％、53.4％和26.9％。尿Cox-2蛋白和CK20 mRNA的敏感性和Youden指数均高于尿脱落细胞学（P＜0．05）,同时尿Cox-2蛋自的敏感性和Youden指数高于CK20 mRNA（P＜0．05）。结论：尿Cox-2蛋白和CK20 mRNA检测的高敏感性、高特异性为膀胱癌提供了一个简单无创的检测方法,非常适合于复发率很高的膀胱癌的诊断与随访。     

人膀胱移行细胞癌T24细胞中CK20mRNA表达检测方法的建立

目的建立巢式RT—PCR方法检测人膀胱移行细胞癌T24细胞中CK20。RNA表达进行分析的实验方法。方法培养人膀胱移行细胞癌T24细胞,利用普通RT—PCR及巢式RT—PCR方法分别检测其CK20mRNA的表达。结果1．5％琼脂糖凝胶电泳发现普通RT—PCR及巢式RT—PCR结果均出现与预期结果一致的阳性条带。结论巢式RT—PCR方法检测人膀胱移行细胞癌T24细胞中有CK20mRNA的表达。为进一步利用巢式RT—PCR方法研究临床膀胱移行细胞癌患者尿脱落细胞及肿瘤组织中CK20mRNA的表达、提高检测敏感性及可靠性打下基础。为膀胱癌早期诊断和术后监测提供一种新的有效手段。     

人膀胱移行细胞癌T24细胞中CK20 mRNA表达检测方法的建立

目的 建立巢式RT-PCR方法检测人膀胱移行细胞癌124细胞中CK20 mRNA表达进行分析的实验方法.方法 培养人膀胱移行细胞癌124细胞,利用普通RT-PCR及巢式RT-PCR方法分别检测其CK20mRNA的表达.结果 1.5%琼脂糖凝胶电泳发现普通RT-PCR及巢式RT-PCR结果均出现与预期结果一致的阳性条带.结论 巢式RT-PCR方法检测人膀胱移行细胞癌T24细胞中有CK20 mR-NA的表达.为进一步利用巢式RT-PCR方法研究临床膀胱移行细胞癌患者尿脱落细胞及肿瘤组织中CK20 mRNA的表达、提高检测敏感性及可靠性打下基础.为膀胱癌早期诊断和术后监测提供一种新的有效手段.     

荧光原位杂交技术在膀胱移行细胞癌诊断中的应用

目的 应用荧光原位杂交技术对膀胱癌患者尿液中脱落细胞染色体基因异常做出判断,从而探究其在诊断膀胱癌中的应用价值,为膀胱癌患者寻求一种无创的诊断膀胱癌的新方法.方法 应用荧光标记的3、7、17号染色体着丝粒探针及定位于p16基因的探针检测膀胱癌患者尿液中脱落细胞的染色体基因变化,从而对膀胱癌作出诊断,同时将FISH诊断膀胱移行细胞癌敏感性与尿细胞学结果进行比较.结果 FISH和尿细胞学诊断膀胱癌的总敏感性分别为85.5%和34.2%.FISH诊断膀胱癌的总敏感性高于尿细胞学(P<0.05).在肿瘤的各种分期分级中,FISH诊断膀胱癌的敏感性也高于尿细胞学.且FISH敏感性随肿瘤病理级别的增高而增高(P<0.05),但不随肿瘤临床分期的增高而增高(P＞0.05).结论 FISH对于膀胱移行细胞癌的诊断有较高的敏感性,有可能成为在中国人群中检测膀胱移行上皮癌的有效手段.     

增生性瘢痕中凋亡相关基因转录的变化

目的　探讨凋亡相关基因bcl -2、bax、p5 3和c- myc在不同形成时期的增生性瘢痕中的基因转录变化。方法　提取 16例不同发生时期的增生性瘢痕和 8例正常皮肤的总RNA后 ,分离mRNA ,用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测bcl- 2、bax、p5 3和c -myc基因在不同组织中的表达。结果　在增殖期的瘢痕中 ,凋亡促进基因bax、c- myc和 p5 3的表达量分别是正常皮肤的(62 .8± 14 .7) %、(78.0± 17.0 ) %和 (4 9.8± 4.3 ) % ,基因表达明显降低 (P <0 .0 5 ) ,而在成熟期的瘢痕中 ,这 3种基因的表达量都明显高于增殖期的瘢痕 ,恢复到正常皮肤水平。在正常皮肤中 ,bcl- 2基因表达水平较低 ,而在增殖期和成熟期的增生性瘢痕中表达量都显著升高 (P <0 .0 5 )。结论　bax、c- myc和 p5 3基因表达降低 ,bcl- 2基因表达增强可能是瘢痕中细胞凋亡减少 ,形成增生性瘢痕的机制之一 ,而bax、c- myc和 p5 3基因表达增强可能与瘢痕达到成熟状态有关。     

骨肉瘤组织中p16基因的缺失突变及CDK4基因的扩增

目的 确定在原发性骨肉瘤中是否有Ｐ１６基因的异常及Ｐ１６基因异常与ＣＤＫ基因扩增之间的关系。方法 应用定量Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ方法分析确定Ｐ１６基因的缺失及ＣＤＫ基因的扩增。用ＰＣＲ＝ＳＳＣＰ方法检测Ｐ１６基因突变,结果：在６０例分析Ｐ１６基因的标本中有５例（９％）存在Ｐ１６基因的重排或缺失。均发生于原发肿瘤。在６７例分析ＣＤＫ４基因的标本中,有６例（９％）存在ＣＤＫ４基因的扩是有包括３例,     

基因芯片技术在缺血再灌注损伤研究中的应用进展

缺血再灌注损伤是一种由多基因表达改变引起的病理生理过程,随着动脉阻断再通和涉及血管的手术如溶栓疗法、器官移植和心脏外科体外循环等等的发展,已经越来越受到重视.基因芯片技术以其高通量、高效率、大规模的独特优势,为缺血再灌注损伤的发生和防治机制的系统研究提供了强有力的系统研究手段,近年来逐渐受到重视,在各器官组织中得到广泛应用,并取得了一定的进展.该文对近几年来基因芯片技术在各组织器官缺血再灌注损伤及其防治研究中的应用进行一定的综述.     

P16、Rb、C—myc基因在肾癌中的表达及其与细胞凋亡的关系

目的探讨P16、Rb、C-myc基因在肾癌中的表达以及肾癌组织中细胞凋亡的发生,了解两之间的相互关系。方法采用免疫组织化学法检测肾癌组织中的P16、Rb、C—myc基因的表达情况,同时用TUNEL法观察肾癌中细胞凋亡现象。结果在肾癌中,P16总阳性率为61．3％,Rb总阳性率为64．5％,C—myc总阳性率为48．4％,它们的阳性表达与细胞凋亡有相关性。结论肾癌中P16、Rb、C—myc基因促进肾癌细胞凋亡的发生,在机体抗肿瘤机制中起积极作用。     

胆囊结石病家系的基因多态性研究

目的 从胆囊结石病多发家系角度来探讨胆石症发病的分子基础并研究部分胆石病易感基因在胆石病家系成员中的分布及与胆石病的关系。方法 收集调查上海地区93个胆石病家系,通过胆囊B超检查证实每个家系至少有2名胆石病患者,对333名家系成员（其中患者239人）进行临床调查并检测血脂水平,应用 PCR-RFLP（PCR-限制性多形性碎片长度）法来检测胆石病易感基因载脂蛋白 B（Apo B）基因Xbal和载脂蛋白E（Apo E）基因Hha I的多态性位点基因型,分析各基因型和等位基因在家系成员中的分布情况。结果 （1）Apo B基因 Xba　I多态性 X+/-基因型频率在胆石组为5.9％,非胆石组为10.6％,分布无显著性差异。不同的Apo　B基因型,其血液生化指标无显著性差异。（2）Apo E基因多态性各等位基因ε2、ε3和ε4的分布频率在胆石组分别为:6.9％、81.4％和11.7％,在非胆石组分别为:9.0％、81.4％和9.6％,分布无显著性差异。年龄段为≤40岁的家系成员中,Apo E4/x（Apo E3/4,Apo E4/4）基因型在胆石组的分布频率（20.6％）显著高于非胆石组（0％）（P=0.04）。不同的Apo E基因型对血脂水平有着不同的影响,总体上看,E2/x（Apo E2/2,Apo E2/3）基因型者的血清TG和HDLC显著升高,LDLC显著降低（P<0.05）;而E4/x基因型者的TC、LDLC、Apo     

金黄色葡萄球菌耐药性及mecA、qacA／B和pvl基因检测

金黄色葡萄球菌是临床上最常见的致病菌之一,可产生多种毒素和酶,包括凝固酶、葡萄球菌溶血素、杀白细胞素、肠毒素和表皮溶解毒素等。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）具有多药耐药特征,是导致医院感染的主要革兰阳性菌,已成为临床抗感染治疗的难题。监测金黄色葡萄球菌的耐药现状,了解金黄色葡萄球菌的耐药和致病机制,以及分析感染的危险因素与治疗对策具有重要的临床意义。     

pcDNA3/AFP/TK/Angio融合基因靶向性治疗人原发性肝癌的实验研究

目的研究pcDNA3/AFP/TK/Angio融合基因对人肝癌细胞系SMMC-7721裸鼠移植瘤模型的靶向性治疗作用。方法建立人原发性肝癌裸鼠皮下移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分成肿瘤对照组、空质粒组、丙氧鸟苷（GCV）组、pcDNA3/TK/Angio组及pcDNA3/AFP/TK/Angio组5组。于瘤体内分别直接注射不同的质粒,同时于裸鼠腹腔内注射GCV,观察不同时段皮下肿瘤的生长情况并做病理学检查,免疫组化法检测肿瘤微血管密度（MVD）以及血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达量,原位末端标记（TUNEL）法检测细胞原位凋亡。放免法检测裸鼠血清甲胎蛋白（AFP）的变化,透射电镜观察肿瘤细胞超微结构的变化。结果裸鼠皮下成瘤率100%;pcDNA3/TK/Angio组及pcDNA3/AFP/TK/Angio组的肿瘤体积、血清AFP含量、肿瘤MVD和VEGF表达强度均明显低于对照组、空质粒组和GCV组（P〈0.05）,细胞凋亡指数都明显高于后3组（P〈0.05）,可见较多的凋亡细胞。而pcDNA3/AFP/TK/Angio组的肿瘤体积、AFP、MVD及VEGF表达强度又明显低于pcDNA3/TK/An-gio组（P〈0.05）,凋亡指数高于后者（P〈0.05）。结论pcDNA3/AFP/TK/Angio融合基因系统可显著抑制肿瘤的生长,有望成为治疗原发性肝癌的新型生物制剂之一。     

骨质疏松受体基因研究方向

骨质疏松症(osteoporosis)是一种以骨量低下、骨组织微结构损坏,导致骨脆性增加,易发生骨折为特征的全身性骨病。骨质疏松是多因素、多基因疾病,是遗传和环境因素交互作用的结果。笔者论述了降钙素受体基因、甲状旁腺素受体基因、雌激素受体基因、肿瘤坏死因子基因、胰岛素样生长因子1受体基因、骨保护素基因、转化生长因子基因、维生素D受体基因、Ⅰ型胶原蛋白基因的生物学特征及其与骨密度、骨质疏松、骨质疏松性骨折的关联,为骨质疏松的发病机制、预防治疗、新药开发研究提供分子生物学依据。     

尿道下裂患者SOX9基因突变的研究

目的：探讨SOX9基因在尿道下裂发病中的作用。方法：收集96例先天性尿道下裂患者外周静脉血，提取DNA，采用PCR扩增直接测序的方法检测SOX9基因全部外显子序列。结果：在实验组尿道下裂患者和对照组的SOX9基因外显子片段中，我们未发现任何位点的突变。只是在外显子3的3’UTR发现了1个SNPA／C，经分析没有统计学意义。结论：SOX9基因在性别分化的初期起作用，其变异直接影响性剐取向，结果导致两性畸形或性反转，而非单纯性尿道下裂。