温下肠腑方对大鼠大肠癌细胞周期素D1、增殖细胞核抗原表达的影响

目的探讨温下肠腑方对二甲基肼诱导的大鼠大肠癌细胞周期素D1（CyclinD1）、增殖细胞核抗原（PCNA）表达的影响。方法予以大鼠1,2-二甲基肼腹腔注射,建立大鼠大肠癌模型,温下肠腑方灌胃给药干预,在第15、20、23周时间点,分别用免疫荧光组织化学法结合激光共聚焦显微镜扫描和免疫组织化学法观察中药对大鼠肠组织CyclinD1和PCNA表达的影响。结果在第15、20、23周时间点,与对照组比较,模型组大鼠肠组织CyclinD1蛋白和PCNA蛋白表达均显著增高,差异有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）;与模型组比较,温下方组Cyclin D1蛋白和PCNA蛋白表达显著降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论温下肠腑方能够显著降低肠癌动物模型肠组织Cy-clinD1、PCNA表达,提示温下肠腑方可能通过抑制CyclinD1、PCNA的表达而抑制肠癌细胞的增殖。     

p27蛋白、细胞周期素E和增殖细胞核抗原在上皮性卵巢肿瘤的表达及其临床意义

目的探讨p27、细胞周期素E(CyclinE)和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)在上皮性卵巢肿瘤组织中的表达及其与上皮性卵巢癌的临床分期、分化程度和病理类型的关系。方法应用流式细胞技术检测64例上皮性卵巢肿瘤组织中p27、CyclinE和PCNA的表达,并进行对比分析。结果p27在卵巢癌组织中呈低表达(P<0.01),而CyclinE和PCNA在卵巢癌组织中呈高表达(P<0.01,P<0.05);在Ⅲ~Ⅳ期和低分化患者中p27表达下降,而CyclinE和PCNA表达升高。p27与CyclinE和PCNA表达呈负相关(r=-0.532,P<0.01,r=-0.564,P<0.01),CyclinE和PCNA表达呈正相关(r=0.556,P<0.05)。结论p27、CyclinE和PCNA的表达与上皮性卵巢肿瘤的临床分期和病理分级有关,而与病理类型无关。     

增殖细胞核抗原在前列腺癌中的表达和意义

为了了解增殖细胞核抗原与前列腺癌的病理分级，临床分期及预后的关系，我们采用免疫组织化学Ｓ－Ｐ法对４３例前列腺癌组织中ＰＣＮＡ进行检测，并与临床随访结果进行对比。结果显示：前列腺癌ＰＣＮＡ表达与分级、分期及预后均相关（Ｐ〈０．０５），ＰＣＮＡ高表达组（３．４级）术后生存率明显低于低表达组（１，２级）。结果表明：ＰＣＮＡ是判断细胞增殖程度的重要指标，对肿瘤演变，术后随访及治疗有一定的指导意义，对估计前     

BCL—2和增殖细胞核抗原子在子宫肌瘤中的表达

目的：研究bcl-2蛋白和增殖细胞核抗原（PCNA）在子宫肌瘤和正常子宫肌层中的表达及其在肌瘤发生发展中的作用。方法：用免疫组织化学ABC法检测40例子宫肌瘤组织和正常子宫平滑肌组织中的bcl-2蛋白和PCNA的表达。结果：bcl-2和PCNA在肌瘤组织中表达均明显强于正常 子宫平滑肌组织（P＜0．001）。结论：bcl-2和PCNA在肌瘤中过度表达以及两者的共同作用,可能在子宫肌瘤的发生发展过程中起重要作用。     

大肠癌中bcl-2和增殖细胞核抗原的表达及其临床意义

目的　研究大肠癌中ｂｃｌ－２和ＰＣＮＡ的表达及其临床意义,探讨其细胞凋亡和细胞增殖之间的关系。方法运用免疫组化法ＳＰ法检测５６例大肠癌组织中ｂｃｌ－２和ＰＣＮＡ的表达。结果５６例大肠癌中ｂｃｌ－２和ＰＣＮＡ的阳性率分别为６０．７％和１００．０％。ｂｃｌ－２在侵及肌层和Ａ、Ｂ期的表达高于侵及浆膜及浆膜外和Ｃ、Ｄ期（Ｐ＜０．０５）,高、中分化癌高于低、未分化癌但无明显差异（Ｐ＞０．０５）;ＰＣＮＡ增殖指数在低、未分化癌,侵及浆膜及浆膜外和Ｃ、Ｄ期高于高、中分化癌,侵及肌层和Ａ、Ｂ期（Ｐ＜０．０１）;ｂｃｌ－２和ＰＣＮＡ的表达无相关关系（Ｐ＞０．０５）。结论大肠癌中ｂｃｌ－２的表达与浸润深度和Ｄｕｋｅｓ分期密切相关,而与分化程度无关,ＰＣＮＡ增殖指数与肿瘤分化程度、浸润深度和Ｄｕｋｅｓ分期有关。     

山奈酚对CNE-2细胞周期及CyclinB1、Cdk1mRNA表达的影响

目的:观察山奈酚对鼻咽癌CNE-2细胞周期分布及细胞周期素B1(CyclinB1)、细胞周期依赖性蛋白激酶1(Cdk1)表达的影响。方法:分别用0、20、40、60、80和100μmol/L的山奈酚处理CNE-2细胞。处理24、48和72h后,应用MTT法测定CNE-2细胞活力;处理24和48h后用流式细胞术检测细胞周期;处理24h后用RT-PCR技术检测细胞CyclinB1及Cdk1mRNA的表达水平。结果:随山奈酚作用剂量的增加和作用时间的延长,CNE-2细胞活力逐渐降低(F浓度=385.194,F时间=237.324,F浓度×时间=13.757,P<0.001),细胞被阻滞于G2/M期(P<0.05);CNE-2细胞中CyclinB1和Cdk1mRNA的表达量随山奈酚作用浓度的增加而逐渐降低(F=95.682、154.871,P<0.001)。结论:山奈酚可能通过下调CNE-2细胞CyclinB1和Cdk1mRNA的表达水平,诱导G2/M期阻滞,抑制其增殖。     

恶性黑素瘤组织中Bmi-1及增殖细胞核抗原的表达

目的:探讨恶性黑素瘤(MM)组织中干细胞再生因子Bmi-1及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.方法:应用免疫组化sP法检测36例MM(26例皮肤原发性黑素瘤及lO例转移性黑素瘤)、30例皮内痣组织中Bmi-1及PCNA蛋白的表达.结果:MM、皮内痣组织中Bmi-1蛋白的阳性表达率分别为61.1%、20.0%,差异有统计...     

放射治疗对人宫颈癌组织的增殖细胞核抗原表达的影响

目的 探讨放射前，后人宫颈癌组织增殖细胞核抗原（PCNA）表达的变化，方法 在多聚甲醛固定的活检癌组织冰冻切片上，进行PCNA的免疫组织化学染色。结果 放疗前的宫颈癌组织内，多数癌细胞呈PCNA免疫染色阳性；照射（30－40Gy)后，多数癌细胞无PCNA染色，但间质细胞的PCNA免疫染色明显升高，大量间质细胞则呈中等或强阳性染色。结论 放射抑制宫颈癌细胞的PCNA表达的同时，诱导间质细胞的PCNA表达，提示PCNA的表达状态可作为放射治疗中评价宫颈癌细胞增殖和间质组织修复的分子指标之一。     

胃癌增殖细胞核抗原表达的临床意义

为探讨增殖细胞核抗原与胃癌发生发展及预后的关系，采用ＳＰ免疫组化技术对９９例胃癌组织中的ＰＣＮＡ进行测定。结果表明：胃癌组织ＰＣＮＡ标记指数显著高于异型增生胃粘膜；ＰＣＮＡ标记指数与胃癌淋巴结转移，淋巴管及血管侵犯，肿瘤浸润深度，肿瘤分期呈正相关，ＰＣＮＡ标记指数〈５０％的患者术后１，３，５年生存率均显著高于ＰＣＡＮ标记指数≥５０％者。     

模拟IMRT对CNE-2细胞周期及Cyclin D1/Cyclin B1表达的影响

目的 探讨模拟调强放射治疗（IMRT）对人鼻咽低分化鳞癌细胞株(CNE-2)细胞周期及细胞周期素Cyclin D1、Cyclin B1转录水平的影响。 方法 CNE-2分为急速照射（ART）组和模拟IMRT组,两组分别给予6MV X线2、4、6和8 Gy 四个剂量点的照射;ART组的照射时间为1～3 min,模拟IMRT组的完成时间为35 min。另设空白对照组,不接受照射,其余条件相同。照射后12 h,流式细胞术分析细胞周期分布,RT-PCR检测细胞周期素Cyclin D1和Cyclin B1的转录水平。 结果 在相同剂量点,模拟IMRT组G2期细胞比例均低于ART组,两组G2期细胞比例随照射剂量的增加而逐渐增加。模拟IMRT组与ART组在相同剂量点之间比较,Cyclin D1转录水平的差异均无统计学意义（P均＞0.05）;Cyclin B1转录水平的差异均有统计学意义（P均<0.05）,且随照射剂量的增加而下降,模拟IMRT组Cyclin B1的表达高于ART组。 结论 模拟IMRT照射时间延长对G2期阻滞作用下降,细胞周期素Cyclin B1的表达相对升高。     

模拟IMRT对CNE-2细胞周期及Cyclin D1/Cyclin B1表达的影响

目的 探讨模拟调强放射治疗(IMRT)对人鼻咽低分化鳞癌细胞株(CNE-2)细胞周期及细胞周期素Cyclin D1、Cyclin B1转录水平的影响.方法 CNE-2分为急速照射(ART)组和模拟IMRT组,两组分别给予6MV X线2、4、6和8 Gy 四个剂量点的照射;ART组的照射时间为1～3 min,模拟IMRT组的完成时间为35 min.另设空白对照组,不接受照射,其余条件相同.照射后12 h,流式细胞术分析细胞周期分布,RT-PCR检测细胞周期素Cyclin D1和Cyclin B1的转录水平.结果 在相同剂量点,模拟IMRT组G2期细胞比例均低于ART组,两组G2期细胞比例随照射剂量的增加而逐渐增加.模拟IMRT组与ART组在相同剂量点之间比较,Cyclin D1转录水平的差异均无统计学意义(P均＞0.05);Cyclin B1转录水平的差异均有统计学意义(P均<0.05),且随照射剂量的增加而下降,模拟IMRT组Cyclin B1的表达高于ART组.结论 模拟IMRT照射时间延长对G2期阻滞作用下降,细胞周期素Cyclin B1的表达相对升高.     

姜黄素对鼻咽癌CNE—1细胞增殖和周期的影响

目的讨论姜黄素对鼻咽癌CNE-1细胞增殖和周期的影响。方法 MTT法检测增值抑制率,流式细胞术分析细胞周期和细胞凋亡。结果不同浓度的姜黄素作用细胞48h时,抑制率随浓度的增加而增加,流式细胞仪分析证实姜黄素能使CNE-1细胞阻滞在G2/M期,并出现亚二倍体凋亡峰。结论 姜黄素对CNE-1细胞具有增殖抑制作用,并阻滞细胞于G2/M期和诱导细胞凋亡。     

子宫内膜癌PCNA表达的临床意义

目的　探讨增殖细胞核抗原 (Proliferatingcellnuclearantigen ,PCNA)在子宫内膜癌组织中表达的临床意义。方法　采用免疫组化LSAB法检测PCNA在 42例子宫内膜癌组织中的表达。结果　PCNA增殖指数与子宫内膜癌组织学分级及手术分期相关 ,晚期 (Ⅲ、Ⅳ )患者PCNA指数明显高于早期 (Ⅰ、Ⅱ )患者 (P <0 .0 5 ) ,组织学Ⅲ级者PCNA指数明显高于Ⅰ、Ⅱ级者 (P <0 .0 1) ;PCNA高表达者 (增殖指数≥ 30 % )预后明显差于低表达者 (<30 % )。结论　PC NA可作为判断子宫内膜癌恶性程度及预后的指标。     

Cyclin B1与肿瘤发生发展

近年研究表明细胞周期与细胞癌变已不再是人们所认为的两个分割的细胞事件。在细胞发生恶性转化过程中，除了癌基因／抑癌基因的正负调节失控外，细胞周期调控因子也是参与癌变过程的调节位点。肿瘤的发生、发展和恶变与细胞周期的调控失调密切相关。参与细胞周期调控的因子主要有：细胞周期蛋白(Cyclin)、细胞周期蛋白依赖性激酶(Cyclin—dependent     

Cyclin D1调控U87胶质瘤细胞周期研究

目的探讨细胞周期蛋白D1（Cyclin D1,CCND1）在U87胶质瘤细胞周期调控中的作用。方法根据NCBI GenBank中cyclin D1序列设计双链siRNA,利用Western blotting技术验证设计的siRNA序列的有效性,并通过流式细胞术检测抑制CCND1对U87胶质瘤细胞周期进程的影响。结果经Western blotting检测,成功抑制了CCND1的表达。并且抑制CCND1后,U87细胞周期停滞在G1期,抑制了U87细胞的G1／S期转换。结论U87细胞中抑制CCND1可以显著抑制细胞周期进程,使细胞周期停滞在G0／G1期,为进一步研究胶质瘤的靶向治疗奠定了理论基础。     

不同照射模式对人鼻咽低分化鳞癌细胞株CNE-2放射敏感性的影响研究

目的:探索不同照射模式对人鼻咽低分化鳞癌细胞株(CNE-2)放射敏感性的影响。方法:运用克隆形成实验(courtenay assay),检测不同照射模式下CNE-2细胞的存活分数(SF),拟合细胞存活曲线。并运用四氮唑蓝法(MTT)进一步验证克隆形成实验的结果。结果:分别给予CNE-2细胞0、1、2、4、6、8 Gy的照射后,CNE-2细胞的SF值随照射剂量增加逐渐下降,并且在相同的剂量点,模拟调强照射(IMRT)组的SF均高于常规照射组;根据线性二次方程拟合CNE-2细胞存活曲线,α常规>αIMRT,β常规>βIMRT,N常规相似文献   

姜黄素对人鼻咽癌CNE-2细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨姜黄素对人鼻咽癌(NPC)CNE-2细胞增殖及凋亡的影响.方法 不同浓度(0、10、20、40、60 μmol/L)姜黄素处理NPC细胞株CNE-2,利用噻唑蓝(MTT)实验检测CNE-2细胞增殖活性,利用流式细胞仪检测CNE-2细胞周期及凋亡率,利用Hoechest33258荧光染色法观察细胞凋亡情况.结果 姜黄素可明显抑制CNE-2细胞增殖作用,且随姜黄素浓度增加,CNE-2细胞抑制率呈上升趋势(P＜0.05),姜黄素作用CNE-2细胞24、48、72 h的半抑制浓度(IC50)分别为(23.54±0.36)、(18.31±0.42)、(8.56±0.37)μmol/L,即姜黄素可明显抑制CNE-2细胞增殖作用,且呈现明显浓度、时间依赖性;流式细胞检测结果显示,0、10、20、40、60 μmol/L姜黄素处理CNE-2细胞,凋亡率随着姜黄素浓度增加而上升;荧光染色结果可见,CNE-2细胞未给予姜黄素处理,细胞呈圆形或者椭圆形,细胞核大小均匀一致,染色质分布均匀的淡蓝色荧光;10 μmol/L姜黄素处理CNE-2细胞24h后,细胞胞体缩小,细胞核染色质凝聚,呈颗粒状亮蓝色荧光;20 μmol/L姜黄素处理CNE-2细胞24 h后,细胞出现胞体缩小,细胞核浓缩、染色质不均匀,出现凋亡小体,甚至出现核碎裂;40和60 μmol/L姜黄素处理CNE-2细胞24 h后,细胞凋亡小体数量增多,出现大量核碎裂.结论 姜黄素对NPC细胞株CNE-2细胞增殖具有明显抑制作用,且促进CNE-2细胞凋亡.     

温和性高温对鼻咽癌细胞系CNE-2Z的放射增敏作用

目的：探讨温和性高温是否对鼻咽癌细胞系CNE-2Z具有放射增敏作用。方法：CNE-2Z细胞随机分4组：对照组、单纯加热组、单纯照射组和联合处理组。采用平板克隆形成实验观察各温度（39．5℃、41．5℃、43．5℃、45．5℃）对CNE-2Z细胞的放射增敏作用,Western Blotting检测核转录因子κB（NF—κB）的表达。结果：实验所采用的4种高温均显示出对鼻咽癌细胞系CNE-2Z的放射增敏作用。其存活分数SF2值按顺序排列为SF2．37℃〉SF2．395℃〉SF2-415℃〉SF2.43℃〉SF2,45.55℃。NF—κB的表达,从第40分钟起逐渐增加,至第4小时达最高。结论：温和性高温对鼻咽癌细胞系CNE-2Z具有放射增敏作用。在41．5℃、1h作用下,放射诱导的NF—κB的细胞核内表达受抑,可能是增敏CNE-2Z对射线作用的机制。     

熊果酸诱导鼻咽癌细胞株CNE-2Z凋亡的实验研究

目的:探讨熊果酸诱导人鼻咽癌细胞CNE-2Z凋亡的作用机制.方法:用不同浓度的熊果酸处理CNE-2Z细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色检测熊果酸对CNE-2Z细胞的增殖抑制效应;流式细胞术分析细胞周期和凋亡率;应用免疫组织化学SP法检测凋亡相关基因bcl-2,bax和cox-2表达的变化;Western blot检测CNE-2Z细胞内caspase 3的表达.结果:熊果酸对CNE-2Z细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用,并呈浓度依赖性;流式细胞术分析表明S期细胞数减少,细胞主要阻滞在G0/G1期;免疫组织化学检测显示在凋亡过程中bax表达上调,bcl-2、cox-2表达下调;Western blot检测CNE-2Z细胞中caspase 3表达增强.结论:熊果酸在体外对CNE-2Z细胞有诱导凋亡的作用,其作用机制可能是通过促进caspase 3的活化和bax的表达上调、bcl-2、cox-2的表达下调来实现.