部分背根切断对备用背根节神经元Bax、Bcl-2及Caspase-3表达的影响

目的　研究部分去背根对备用背根节 (DRG)神经元 Bax、Bcl- 2、Caspase- 3表达的影响。方法　制作单侧备用背根模型 ,3d、7d和 14 d后取备用背根节分别用兔抗 Bax、Bcl- 2及 Caspase- 3行免疫组化 ABC法染色 ,同时另设一正常对照组。分别计数单位面积内各组大、中小阳性神经元的数量。结果　正常组 Bax、Bcl- 2、Caspase-3阳性反应物主要分布于背根节的中小神经元和少数大神经元。术后 3d,Bax总阳性神经元数较正常组明显增加(P<0 .0 5 ) ,至术后 14 d Bax总阳性神经元数下降并恢复到正常水平。各时间段 Bcl- 2总阳性神经元数无显著性差异。3d组 Caspase- 3总阳性神经元数与正常组比较显著增加 (P<0 .0 5 ) ;7d组、14 d组与 3d组无显著差异。 Bax、Bcl- 2和 Caspase- 3阳性大神经元数在各时间段均无显著性差异 ,阳性中小神经元数的变化规律与总阳性神经元数的变化规律相同。结论　部分去背根主要对备用 DRG中小神经元 Bax、Bcl- 2、Caspase- 3表达有影响 ,三因子表达高峰可能在术后 3～ 7d。     

转录因子AP-2α对脑外伤后蓝斑神经元TH表达的影响

目的 探讨转录因子激动蛋白-2α(activator protein 2α, AP-2α)对脑外伤后蓝斑去甲肾上腺素能神经元中酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase, TH)表达的影响.方法 将90只Wistar大鼠分为对照组和脑外伤组,脑外伤组又分为外伤后1、3、6、24、72 h共5个组(n=15).用Feeney氏法制作机械性脑外伤大鼠模型,分别于脑外伤后各相应时间点取出脑干,对蓝斑(locus ceruleus, LC)所在部位作冷冻切片,用免疫荧光双标检测TH和AP-2的表达,观察二者在外伤后各相应时间点LC神经元中的表达变化.结果 在脑外伤后各时段,LC神经元的TH和AP-2α 阳性细胞数量和荧光强度值均比对照组明显增加(P《0.05),3 h达到高峰,随后逐渐降低,但72 h仍然高于对照组;而且TH和AP-2α的表达变化趋势基本一致,在同一神经元可以共表达.结论 机械性脑外伤使LC去甲肾上腺素能神经元中TH表达增加,使去甲肾上腺素(norepinephrine, NE)合成增多,NE在外伤应激过程中起着重要作用;AP-2α参与了TH的表达调控,AP-2α上调可能是导致了TH表达增加的重要原因.     

经颅直流电刺激对慢性不可预见性应激模型大鼠下丘脑去甲肾上腺素释放的影响

目的:探讨经颅直流电刺激(t DCS)治疗抑郁症的中枢神经系统机制。方法:给予雄性清洁级SD大鼠(180~200 g)7种慢性不可预见性刺激制作抑郁症大鼠模型,通过行为学指标观察,碳纤维电极测量技术和t DCS技术来研究t DCS对抑郁症模型大鼠行为学指标及下丘脑内去甲肾上腺素(NE)释放的影响。结果:给予模型组大鼠慢性不可预见性刺激21 d后,模型组大鼠糖水偏爱百分比减少(P<0.05),旷场实验总分减少(P<0.01)。与对照组相比,模型组大鼠下丘脑NE的释放减少(P<0.05);给予tDCS(2 mA,30 min)刺激后,NE分泌增加(P<0.05)。用t DCS(2 mA,30 min,每天2次,连续4 d)刺激后,模型组大鼠糖水偏爱百分比增大(P<0.05),旷场实验总分增加(P<0.01)。与对照组相比,tDCS(2 mA,30 min,每天2次,连续4 d)组大鼠下丘脑NE的释放差异无统计学意义。结论:tDCS可改善慢性不可预见性应激模型大鼠的抑郁样行为表现,这种作用可能与tDCS增加蓝斑到下丘脑投射系统NE的分泌有关。     

去甲肾上腺素与颈性眩晕发病机制的相关性研究

目的:探讨去甲肾上腺素(NE)在颈性眩晕发病过程中的变化及其意义,研究将其作为颈性眩晕早期诊断指标的可能性。方法:选择成年健康日本大耳白兔30只,随机分为手术组、假手术组和对照组,其中手术组通过行颈前后路手术制作成颈性眩晕动物模型。分别于术前,术后第3天、第30天、第60天、第90天,应用ELISA法测量实验兔去甲肾上腺素在制作颈性眩晕动物模型过程NE表达水平变化,统计学分析NE与颈性眩晕发病机制的相关性。结果:手术组、假手术组和对照组之间存在组间NE表达水平差异,其中手术组NE水平随着颈性眩晕动物模型的建立过程而发生变化,术后3 d因手术应激而表达水平升高,术后90d因颈椎不稳退变等导致手术组表达水平升高,经统计学分析,具有统计学意义(P<0.01)。结论:去甲肾上腺素作为血管活性因子之一,参与了颈性眩晕的发病过程。     

不同月龄自发性高血压大鼠杏仁中央核nNOS免疫阳性神经元的变化

目的 观察自发性高血压大鼠(SHR)杏仁中央核神经元型一氧化氮合酶(nNOS)免疫阳性神经元的变化。方法 取SHR和WKY大鼠各30只,分别于90、180和360 d测血压并处死,ABC法显示nNOS免疫阳性神经元并进行定量分析。结果 WKY大鼠各时期血压无明显差异;SHR血压逐渐升高,而且均高于WKY大鼠(P<0.05),维持在(20.8±1.1~26.3±1.0) kPa (P<0.05)。杏仁中央核nNOS免疫阳性神经元胞体中等大小,呈梭形或三角形,突起较多且长,阳性神经纤维交错呈网状。定量结果显示,90、180和360 d时,WKY杏仁中央核nNOS免疫阳性神经元的数量无显著变化,而SHR大鼠nNOS免疫阳性神经元随着高血压的不断发展呈逐渐减少的趋势,虽然90和180 d之间没有显著性差异,但360 d减少明显(P<0.05)。结论 高血压大鼠杏仁中央核nNOS阳性神经元减少可能通过其对心血管和感觉传递的调节功能参与高血压的发生和发展过程。     

经颅直流电刺激对应激性高血压大鼠下丘脑去甲肾上腺素释放的影响

目的:探讨经颅直流电刺激(tDCS)治疗高血压的中枢神经系统机制。方法:雄性SD大鼠(180～200 g)随机分为对照组和应激性高血压模型组,通过给予模型组大鼠噪声和足底电击刺激制作应激性高血压大鼠模型,采用尾部套管法检测血压,运用碳纤维电极检测技术测定大鼠电刺激蓝斑核,下丘脑内去甲肾上腺素(NE)的释放量,进一步观察麻醉状态下tDCS(正极置于左侧前额叶皮质,负极置于右侧前肢)对NE释放量的影响。结果:高血压模型组大鼠造模后血压升高(P<0.05)。tDCS(tDCS 2 mA/20 min,每天2次,连续5 d)使模型组1大鼠血压下降(P<0.05),而接受假tDCS(tDCS 0 mA/20 min,每天2次,连续5 d)的模型组2大鼠血压没有下降(P>0.05)。长时程tDCS(2 mA/20 min,每天2次,连续5 d),或者在体tDCS(2 mA/20 min)都可使高血压模型组大鼠下丘脑NE的释放信号幅度减小(P<0.05)。结论:tDCS可缓解应激性高血压模型大鼠的血压升高,这种作用与tDCS减少蓝斑到下丘脑投射系统NE的分泌有关。     

人参皂苷Rb1对睡眠剥夺大鼠学习记忆及脑内生长抑素表达的影响

目的：研究人参皂苷Rb1 (ginsenosides Rb1,GSRb1)对睡眠剥夺（sleep deprivation,SD）大鼠学习记忆与海马及额叶生长抑素（somatostatin,SS）表达的影响。 方法：大鼠随机分为睡眠剥夺2 d组、4 d组、6 d组和未睡眠剥夺（SD 0 d）组,每组再分为GSRb1用药组和生理盐水对照组,共8组。采用改良小平台水环境法制作SD大鼠模型。造模前大鼠分别腹腔内注射GSRb1 30 mg/(kg·d）或生理盐水7 d。睡眠剥夺2 d、4 d和6 d后采用Morris迷宫检测各组大鼠学习记忆能力,免疫组织化学法结合图像分析脑内SS阳性神经元数量及SS平均光密度。 结果：与SD0d组大鼠比较,SD各组大鼠游泳平均速度减慢（P<0.01）,逃避潜伏期明显延长（P<0.01）;海马CA4&DG区SS表达下降（P<0.05）;SD 2 d组大鼠额叶SS表达无明显变化（P>0.05）,而SD 4 d、6 d组SS表达减少明显（P<0.05）。与生理盐水对照组比较,SD组同时段的GSRb1用药组大鼠游泳平均速度显著加快（P<0.05）,逃避潜伏期明显缩短（P<0.05）,用药组各时段海马内SS阳性神经元数量均明显增多,SS表达增强（P<0.05）。 结论：人参皂苷Rb1能显著改善SD大鼠认知功能,该作用可能与增加海马内SS密切相关。     

部分背根切断及针刺促进备用背根节c-jun的表达

目的 探讨部分背根切断术及针刺对背根节（DRG）c-jun表达的影响。方法 针成年雄猫15只，分假手术组，手术组和术后针刺组，每组5只。手术组动物行单侧备用根术，术后针刺组动物经单侧备用根术后，针刺后肢手术侧L6脊神经分布区中的两组穴位，足三里和悬中：伏兔和三阴交，每天一次，每次30min，连续针刺7d，通过免疫组化ABC法，用c-jun特异抗体（1:1000,Santa Cruz)对切片进行染色，DAB呈色。观察并测量DRG中c-jun阳性神经元的分布，数量及反应强度。结果 在假手术组DRG中，只有部分神经元染色。手术组c-jun阳性神经元的数值较假手术组显著增多（P＜0．05），其免疫反应水平较假手术组，显著上升（P＜0．05）。术后针刺组较手术组的c-jun免疫反应强度增强，而阳性神经元的数量没有显著差异。结论 部分背根切断后备用DRG神经元中c-jun的表达增加，针刺促使c-jun的表达进一步上调。     

针刺对背根节神经元GDNF表达的影响

目的 研究部分去背根及针刺对背根神经节神经元胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）表达的影响。方法 制作猫备用背根模型并针刺备用根支配区的两组穴位，足三里和悬钟，伏兔和三阴交。针刺7d后取备用背根节用GDNF抗血清（1：1000）行免疫组织化学染色。分别计数各组大，中，小阳性神经元的数值。结果 非手术组GDNF阳性神经元数量为55％。其中大神经元为25％，中神经元为14％，小神经元为16％，术后非针刺组，阳性神经元总数为35％，较非手术组明显下降（P＜0．05），主要为大神经元（5％）减少，而阳性少（13％），小神经元（17％）数量变化不明显，但染色明显加深。针刺组GDNF阳性神经元数量又明显增加至90％，其中阳性大神经元28％，中神经元17％，小神经元45％。结论 背根节GDNF阳性大神经元数量在去部分背根术后7d显著下降，而针刺可逆转这种变化。GDNF阳性中，小神经元数量在术后7d并无明显变化，但针刺后表达显著增加。     

雌激素对慢性脑缺血大鼠海马一氧化氮合酶阳性神经元的影响

目的 :观察雌激素对慢性脑缺血后大鼠海马一氧化氮合酶阳性神经元数目的影响。方法 :雌性SD大鼠 15只 ,分为假手术对照组 (A组 ) ,缺血后治疗组 (B组 ) ,缺血后未治疗组 (C组 )。B、C组行双侧卵巢切除术 ,术后次日行双侧颈总动脉结扎并切断。B组大鼠二次术后腹腔注射苯甲酸雌二醇 (1mg/kg/3d) ,C组予等量煮沸后麻油。假手术对照组仅暴露卵巢和双侧颈总动脉 ,术后予等量煮沸过的麻油。 3 0天后灌注固定取脑 ,NADPH -d组织化学染色。结果 :B组大鼠海马CA1一氧化氮合酶 (NOS)阳性神经元数目较A组明显下降 (P <0 .0 5 )。C组大鼠海马CA1区NOS阳性神经元数目也较A组明显下降 (P <0 .0 1) ,与B组相比C组大鼠海马CA1区NOS阳性神经元数目也明显下降 (P <0 .0 5 )。结论 :慢性脑缺血能使大鼠海马内对缺血最敏感区域CA1一氧化氮合酶阳性神经元数目明显下降 ,缺少雌激素的脑保护作用后这种损伤加重     

大鼠蓝斑至伏核的SP能上行投射

采用ＨＲＰ逆行追踪和免疫细胞化学ＰＡＰ法相结合，对蓝斑至伏核的上行投射通路进行了研究。结果表明：同侧蓝斑有ＳＰ能神经元上行投射到伏核。ＨＲＰ－ＳＰ双标记投射神经元占有ＨＲＰ标记投射神经元的５０％     

不同月龄自发性高血压大鼠杏仁中央核nNOS免疫阳性神经元的变化

OBJECTIVE: To observe the changes of neuronal nitric oxide synthase (nNOS)-immunopositive neurons in the central amygdaloid nucleus of spontaneously hypertensive rats (SHRs). METHODS: Thirty SHRs and 30 Wistar-Koyto rats (WKYs) were sacrificed at the ages of 90, 180, and 360 days respectively to observe the changes of nNOS-immunopositive neurons with ABC immunocytochemical assay. RESULTS: No significant changes were observed in the blood pressure of WKY rats at the specified time points, when SHRs maintained significantly higher blood pressures from 20.8+/-1.1 and 26.3+/-1.0 kPa (P<0.05), gradually increasing during the development of hypertension. The nNOS-immunopositive neurons in the central amygdaloid nucleus were of moderate sizes with long intersected nerve fibers. No significant changes were found in WKY rats. The number of the positive neurons decreased with age in SHRs, especially obvious at 360 days (P<0.05), which was significantly different from that in the WKYs (P<0.05). CONCLUSION: The reduction of nNOS-immunopositive neurons in the central amygdaloid nucleus of SHRs might accelerate the development of hypertension by modulating the cardiovascular function and sensory transmission.     

阿托伐他汀钙对肾性高血压大鼠骨桥蛋白的影响

目的：观察阿托伐他汀钙对肾性高血压大鼠胸主动脉重构及骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的影响。方法：通过两肾一夹方法构建高血压大鼠模型。21只大鼠随机取7只作为对照组(n=7),剩余14只建模后随机分为高血压组(n=7)和他汀组(n=7),术后4周末开始用阿托伐他汀钙30 mg/(kg·d)连续灌胃8周。检测大鼠尾动脉收缩压(SBP)、血脂,光镜下观察血管结构变化并计算胸主动脉中层壁厚与内径之比(MT/LD),免疫组织化学法检测OPN的表达水平,荧光定量PCR检测OPN mRNA表达。结果：高血压组的SBP、MT/LD、OPN及OPN mRNA表达比对照组显著升高,高密度脂蛋白（HDL）水平显著降低。他汀组的MT/LD、OPN及OPN mRNA表达比高血压组显著降低,HDL水平显著升高。结论：高血压可导致动脉血管OPN高表达,阿托伐他汀钙可能通过抑制OPN的过度表达而改善动脉血管重构。     

肾血管性高血压大鼠肾脏A型心房肽受体的表达及意义

目的 研究高血压大鼠肾脏A型心房肽受体（ANPR—A）的蛋白表达并探讨其意义。方法 采用狭窄单侧肾动脉的方法建立二肾一夹（2K1C）肾血管性高血压大鼠模型。用尾套法测血压,免疫组织化学染色法观察缩窄术后不同时期。肾脏组织各部位ANPR—A蛋白的表达,并用计算机图像分析系统半定量检测ANPR—A蛋白的表达水平。结果 肾动脉缩窄术后4周,模型组大鼠肾脏ANPR—A蛋白在肾小球表达增加,在肾小管表达降低,与对照组的差异有统计学意义（P〈0．01）,在髓质集合管表达无明显改变（P〉0．05）。缩窄术后8周．模型组大鼠肾脏ANPR—A蛋白在肾小管和髓质集合管的表达均降低,与对照组的差异有统计学意义（P〈0．01）．在肾小球有微弱表达,与对照组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 随着高血压的发展,肾脏组织中的ANPR—A表达显著减少,提示高血压的发展与肾脏ANPR—A的表达下降有关。     

Experimental model of renovascular hypertension.

ＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｍｏｄｅｌｏｆｒｅｎｏｖａｓｃｕｌａｒｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎＣａｏＸｉｃａｉ曹喜才，ＨｅＮｅｎｇｓｈｕ贺能树，ＷｕＥｎｈｕｉ吴恩惠，ＢａｉＪｉｎｇｗｅｎ白景文，ＹａｎｇＨａｉｘｉａｎ杨海贤ａｎｄＣｈａｎｇＪｉｗｕ畅继武Ｄｅｐ...     

黄芪甲苷对肾血管性高血压大鼠主动脉内皮细胞线粒体损伤的保护研究

[摘要] 目的 研究黄芪甲苷对肾血管性高血压大鼠主动脉内皮细胞线粒体损伤的保护作用。方法 采用两肾一夹制备肾血管性高血压大鼠,术后两周将大鼠随机分为手术组和黄芪甲苷治疗组[5.0mg/(kg?d)],以假手术组为正常对照,治疗两周后,观察大鼠胸主动脉内皮细胞线粒体超微结构的变化,应用免疫组化染色法观察大鼠胸主动脉内皮细胞锰超氧化物歧化酶（SOD2）的表达。结果 术后两周大鼠收缩压明显高于正常对照大鼠。手术组大鼠胸主动脉内皮细胞线粒体内嵴断裂、消失,基质电子密度降低,肿胀、空泡化明显;黄芪甲苷治疗后大鼠胸主动脉内皮细胞线粒体损伤程度明显减轻。手术组大鼠胸主动脉内皮细胞SOD2表达水平较正常对照大鼠明显降低,黄芪甲苷治疗后恢复至正常大鼠水平。结论 黄芪甲苷对肾血管性高血压大鼠主动脉内皮细胞线粒体的损伤有保护作用,上调主动脉内皮细胞SOD2表达可能是其途径之一。     

非洛地平缓释片治疗肾性高血压的临床疗效及对生活质量的影响

目的探讨非洛地平缓释片治疗肾性高血压的临床疗效及对生活质量的影响,以期能为肾性高血压治疗药物的选择提供参考。方法肾性高血压患者60例,按照数字表格法随机分为观察组与对照组各30例,对照组服用福辛普利钠片10mg／次,观察组服用非洛地平缓释片5mg／次,每天1次,治疗8周后评价疗效,采用生活质量核心问卷-30（QLQC-30）调查患者生活质量。结果观察组治疗总有效率（93．33％）高于对照组（86．67％）,但差异无统计学意义（P〉0．05）。2组患者治疗后收缩压、舒张压、尿蛋白、血肌酐均较治疗前下降（P〈0．05）,观察组收缩压、舒张压较对照组下降更明显（P〈0．05）,对照组尿蛋白较观察组下降明显（P〈0．05）;观察组患者QLQC．30评分中躯体功能、角色功能、情绪功能、疲乏、疼痛、失眠及整体生活质量评分高于对照组（P〈0．05）。观察组不良反应发生率（13．33％）低于对照组（20．00％）,但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论非洛地平缓释片治疗肾性高血压降压效果肯定,用药安全,患者生活质量明显得到提高。     

乙酰胆碱、阿托品、毛果芸香碱在痛觉调制中对大鼠蓝斑核神经元形态的影响

目的 研究乙酰胆碱(ACh)、阿托品、毛果芸香碱与正常大鼠蓝斑核(LC)在痛觉调制中的作用及其相互关系.方法 采用电生理学与侧脑室给药的方法,以电脉冲刺激坐骨神经作为伤害性刺激,用玻璃微电极引导LC中痛反应神经元的电变化.观察ACh、阿托品、毛果芸香碱对LC中神经元形态学改变的影响.结果 ACh可使LC内神经元形态发生改变,即神经元体积变大、外形不规则,细胞核轻度水肿等.M受体拮抗剂阿托品能阻断上述作用,使神经元结构基本恢复正常.M受体激动剂毛果芸香碱能产生与ACh相似的效应.结论 外源性ACh不仅能加强大鼠LC中痛反应神经元的电活动,而且使神经元的形态也发生了相应的改变,表现为易化疼痛效应.揭示,ACh的易化疼痛作用主要是通过M受体介导而实现的,LC内神经元形态的改变进一步证实ACh和LC在痛觉调制中起重要作用.     

针刺对卒中后抑郁大鼠5-HTT、5-HT1AR、NEα2 R蛋白表达的影响

目的观察针刺干预卒中后抑郁(PSD)大鼠神经递质及受体的调节和影响,从分子生物水平,阐述针刺干预卒中后抑郁的分子机制。方法将120只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、药物组、针刺组,其中空白组10只,模型组30只,药物组和针刺组各40只,采用大脑中动脉闭塞和慢性不可预见性温和性应激法复合制备卒中后抑郁模型。药物组予以氟西汀2 mg/kg溶入生理盐水灌胃,针刺组选取百会、风府、神门、太冲穴20 min,期间行针1次,以上治疗每日1次,共27d,每7 d之间休息1 d,采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测卒中后抑郁大鼠海马、中缝核、蓝斑核去甲肾上腺素α2受体(NEα_2R)、5-羟色胺1A受体(5-HT_(1A)R)和5-羟色胺转运体(5-HTT)蛋白的表达。结果与空白组比较,模型组海马、中缝核、蓝斑核5-HTT蛋白表达非常显著减少(P0.01),NEα_2R蛋白表达非常显著增加(P0.01);海马、中缝核中5-HT_(1A)R蛋白表达非常显著增加(P0.01),蓝斑核5-HT_(1A)R蛋白表达显著增加(P0.05);与模型组比较,针刺组与药物组海马、中缝核、蓝斑核5-HTT蛋白表达显著增加(P0.01),NEα_2R蛋白表达非常显著减少(P0.01);海马中5-HT_(1A)R蛋白表达非常显著减少(P0.01),中缝核、蓝斑核5-HT_(1A)R蛋白表达显著减少(P0.05)。与药物组比较,针刺组海马、中缝核以及蓝斑核5-HTT蛋白、5-HT_(1A)R蛋白、NEα_2R蛋白表达无显著增加(P﹥0.05)。结论针刺能降低PSD大鼠脑内单胺神经递质5-HT_(1A)R和NEα_2R的表达量,提高5-HTT的含量,进一步提示针刺能调节大鼠脑内单胺类神经递质5-HT和去甲肾上腺(NE)的含量或转运率。从而发挥针刺抗抑郁作用。