五痹胶囊抗硬皮病模型小鼠实验研究

目的:研究五痹胶囊对硬皮病小鼠模型的影响,并进一步探讨其抗硬皮病的作用机制。方法:用博来霉素皮下注射建立硬皮病小鼠模型,随机将小鼠分为正常对照组、模型对照组、五痹胶囊低、中、高剂量组及薄芝片组,灌胃给予不同剂量的药物,观察各组小鼠皮肤肺组织病理学改变、皮肤厚度、胶原含量的变化,并相互比较。结果:各治疗组小鼠皮肤硬化程度可得到一定的改善,皮肤厚度变薄,胶原含量减少。与模型组比较有显著性差异(P<0.01),其中尤以五痹胶囊高剂量组更为突出。结论:五痹胶囊对皮下注射博来霉素导致局部硬皮病小鼠皮肤的厚度、胶原纤维的增生有明显的改善作用,并随剂量的增大呈剂量—效应关系。五痹胶囊治疗系统性硬皮病与其抑制皮肤的胶原纤维增生、降低胶原含量有关。     

抗硬化复方对硬皮小鼠皮肤Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响

目的：建立硬皮病小鼠模型,探讨抗硬化复方抗博莱霉素所致小鼠皮肤硬变的作用机理。方法：制作硬皮小鼠动物模型：博莱霉素（BLM）200μg/ml每日于C3H小鼠背部（剃毛后）皮下注射,连续3周。药物作用机理研究：运用免疫组织化学法测定硬皮小鼠模型皮肤中Ⅰ、Ⅲ型胶原和转化生长因子-β1（TGF-β1）等的表达,观察抗硬化复方对硬皮小鼠皮肤Ⅰ、Ⅲ型胶原和TGF-β1表达的影响。53只C3H鼠分成6组。①空白对照组;②造模对照组;③早服中药组,造模同时服用中药;④中药组,造模成功后服中药;⑤西药组,造模成功后服青霉胺;⑥中西药合用组。比较研究上述指标在各组中的变化,采用SPSS11.0统计软件进行分析。结果：抗硬化复方能对抗博莱霉素所致的小鼠皮肤硬变,早服中药组、中药组、西药组及中、西药组小鼠皮肤COL-Ⅰ、COL-Ⅲ免疫组织化学指数均明显低于造模对照组小鼠,差异有非常显著意义（P〈0.01）。早服中药组及中西药合用组效果尤佳。早服中药组、中药组及中、西药合用组小鼠皮肤TGF-β1、COL-Ⅲ免疫组织化学指数又明显低于西药组小鼠,差异有非常显著意义（P〈0.01）。结论：抗硬化复方能有效抑制硬皮小鼠皮肤中Ⅰ型胶原、Ⅲ胶原的合成,有抗组织纤维化作用。     

补肾益精法中药复方对硬皮病小鼠皮肤纤维化的影响

目的:研究补肾益精法中药复方对硬皮病小鼠皮肤纤维化表型的影响。方法:使用博来霉素诱导建立硬皮病小鼠模型,分别采用补肾益精法中药复方(中药复方组)、生理盐水(模型组)处理硬皮病模型小鼠,共3周,并设正常对照组。HE染色观察皮肤病理改变;使用实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,测定各组小鼠I型胶原α2(COLⅠα2)基因表达情况。结果:成功建立硬皮病小鼠模型,皮肤病理HE染色显示,中药复方组小鼠皮肤纤维化有不同程度改善。模型组小鼠COLⅠα2基因表达较正常对照组高(P<0.01);经补肾益精法处理后,中药复方组小鼠COLⅠα2基因表达减少,与正常对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。结论:补肾益精法中药复方可改善硬皮病模型小鼠皮肤纤维化程度。     

五痹胶囊治疗系统性硬皮病的药效学研究

目的研究五痹胶囊治疗系统性硬皮病的药理作用。方法用博来霉素皮下注射建立硬皮病小鼠模型,尾静脉注射1∶1000肾上腺素,造成微循环障碍。随机将小鼠分为正常对照组、模型对照组、五痹胶囊低、中、高剂量组及阳性药物对照组,灌胃给予不同剂量的药物,观察各组小鼠皮肤和肺组织病理学改变、皮肤厚度、胶原含量的变化及耳廓微循环动静脉管径、微血管内红细胞(RBC)流速分值并相互比较。结果各治疗组小鼠皮肤硬化程度可得到一定的改善,皮肤厚度变薄,胶原含量减少,与模型组比较差异均有统计学意义(P<0.01),其中尤以五痹胶囊高剂量组更为突出;给药20、40 min后小鼠耳廓微循环动静脉管径、微血管内RBC流速分值均明显较空白对照组增加(P<0.05,P<0.01)。结论五痹胶囊对硬皮病模型小鼠皮肤厚度、胶原纤维增生有明显的改善作用,并随剂量的增大呈剂量-效应关系;可明显增加模型小鼠耳廓微动脉、微静脉管径,加快微血管内RBC流速,改善小鼠耳廓微循环。提示五痹胶囊能有效地防治系统性硬皮病变的发生是通过抑制胶原纤维的增生、解聚降黏、增加血流量及改善微循环等机制实现的。     

蒿甲醚、双氢青蒿素对小鼠硬皮病模型的影响

目的:研究蒿甲醚及双氢青蒿素对小鼠硬皮病模型的影响.方法:随机将60只Balb/c小鼠分为正常组,模型组,溶媒组,阳性药组(青霉胺200mg·kg~(-1)),蒿甲醚低,高剂量组(5,20mg·kg~(-1)),双氢青蒿素低,高剂量组(5,25 mg·kg~(-1)).以0.1 mL 200 mg·L~(-1)博莱霉素对小鼠进行皮下注射,持续3周,制备硬皮病模型.造模同时灌胃给予不同剂量药物4周.给药完成后次日取皮肤和肺进行分析.观察HE染色后小鼠皮肤厚度和真皮纤维化程度,对皮肤羟脯氨酸含量,胶原含量进行测定.结果:与模型组相比,各药高剂量组皮肤厚度,胶原含量显著减少,其他各治疗组小鼠皮肤硬化程度也得到一定的改善.结论:蒿甲醚、双氢青蒿素对预防性治疗硬皮病小鼠有一定的疗效.     

活血除痹汤对硬皮病模型小鼠皮损组织活性氧的影响

目的研究活血除痹汤治疗硬皮病的可能作用机制。方法 30只小鼠分为空白组、模型组和中药高、中、低剂量组,每组6只。除空白组外其余各组小鼠皮内注射盐酸博来霉素400μg连续3周建立硬皮病小鼠模型。第4~7周,空白组、模型组予等量蒸馏水灌胃,中药高、中、低剂量组分别给予活血除痹汤44.8、22.4、11.2g/(kg·d)灌胃,每日1次。观察各组小鼠皮肤、肺组织病理学改变,比较皮肤厚度、胶原指数及皮损组织活性氧(ROS)水平。结果模型组小鼠真皮明显增厚,胶原纤维明显增粗,伴有炎性细胞浸润;肺组织出现肺泡间隔增厚伴大量单核细胞浸润,间隙有成纤维细胞增生。与模型组小鼠相比,中药各剂量组真皮胶原纤维增粗膨大程度及肺泡间隔增厚程度均有所减轻。模型组皮肤厚度、胶原指数、皮损ROS含量较空白组明显增加(P0.01);与模型组比较,中药高、中、低剂量组皮肤厚度、胶原指数均明显降低,中药高、中剂量组皮损ROS含量亦降低(P0.05或P0.01)。结论活血除痹汤可明显降低硬皮病模型小鼠皮肤厚度、胶原指数,其机制可能与降低皮损中ROS水平有关。     

温阳化浊通络方含药血清对硬皮病成纤维细胞 胶原分泌和TGF-β1表达的影响

目的:运用血清药理学方法,探讨温阳化浊通络方对系统性硬皮病(SSc)皮肤成纤维细胞胶原分泌和转化生长因子β1(TGF-β1)的影响。方法:对SSc患者分别采用强的松(每日20 mg)和青霉胺(每日0.25 g)(西药组),温阳化浊通络方每日1剂,分早晚2次服用(中药组),西药加中药(中西药结合组)治疗1个月后,制备含药血清,加入皮肤成纤维细胞培养体系中。培养72 h后,采用比色法和ELISA法分别测定成纤维细胞培养基中羟脯氨酸(Hyp)和TGF-β1含量。结果:与对照组相比,浓度为5%,10%,20%的西药组、中药组、中西药结合组含药血清均能明显抑制正常人和SSc皮肤成纤维细胞胶原分泌(P<0.05或P<0.01);与西药组相比,中西药结合组抑制作用更加明显(P<0.01)。浓度为5%,10%,20%的西药组、中药组、中西药结合组含药血清能显著抑制SSc皮肤成纤维细胞TGF-β1的表达(P<0.01),且中西药结合组比西药组的抑制作用更强(P<0.01)。同时,对照组SSc皮肤成纤维细胞培养基中胶原含量与TGF-β1呈直线正相关性(r=0.895,P<0.05)。结论:温阳化浊通络方能有效减少体外培养的SSc皮肤成纤维细胞胶原和TGF-β1的分泌,可能是其治疗SSc的药理作用机制之一。     

活血除痹汤对硬皮病小鼠皮肤血小板衍生生长因子A和转移生长因子-β表达的影响

目的观察活血除痹汤对硬皮病小鼠皮肤血小板衍生生长因子A(PDGF-A)和转化生长因子-β(TGF-β)表达的影响,探讨其可能的作用机制。方法 30只小鼠随机分为空白组、模型组和中药高、中、低剂量组,每组6只。除空白组外,其余各组小鼠均予皮内注射盐酸博来霉素0.1 m L,连续3周,建立硬皮病小鼠模型。第4~7周,空白组和模型组予等量蒸馏水灌胃,中药高、中、低剂量组分别给予活血除痹汤44.8、22.4、11.2 g/(kg·d)灌胃,每日1次。观察各组小鼠皮肤及肺组织病理学改变,HE染色测量皮肤厚度,免疫组化检测皮损组织PDGF-A、TGF-β和Ⅰ、Ⅲ型胶原(COL-Ⅰ/COL-Ⅲ)的蛋白表达。结果模型组小鼠真皮明显增厚,胶原纤维明显增粗,并有炎性细胞浸润;肺组织可见肺泡间隔增厚,有成纤维细胞形成并伴大量单核细胞浸润;与模型组比较,中药各剂量组皮肤厚度、真皮胶原纤维膨大增厚程度及肺泡间隔增粗程度均有所减轻。模型组PDGF-A、TGF-β、COL-Ⅰ及COL-Ⅲ蛋白表达均较空白组明显增加(P0.01);中药各剂量组上述指标阳性表达均较模型组明显降低(P0.01)。PDGF-A、TGF-β表达与COL-Ⅰ、COL-Ⅲ表达呈正相关。结论活血除痹汤可能通过抑制PDGF-A、TGF-β的表达,抑制胶原表达和成纤维细胞的生成,达到治疗硬皮病的作用。     

七福饮对亚硝酸钠致小鼠学习记忆障碍的影响

目的:采用化学药物亚硝酸钠导致小鼠记忆巩固障碍的损伤模型,研究中药复方七福饮的促智作用。方法:采用亚硝酸钠制作的小鼠记忆巩固障碍模型[1-2]为实验对象,通过跳台实验对小鼠进行学习记忆能力测定,评价七福饮对模型小鼠记忆力的影响;并检测小鼠脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物歧化酶(GSH-PX)和胆碱酯酶(CHE)的活力及丙二醛(MDA)的含量。结果:七福饮各剂量组小鼠错误次数显著减少(P<0.01),中、高剂量组潜伏期显著延长(P<0.05);各剂量组小鼠脑组织SOD、GSH-PX活性明显升高(P<0.01或P<0.05),MDA含量显著性降低(P<0.01);各剂量组CHE活性明显降低(P<0.01或P<0.05)。结论:七福饮可对抗亚硝酸钠致记忆巩固障碍模型小鼠学习记忆能力的下降。     

姜黄素微乳凝胶抗皮肤纤维化作用的实验研究

目的:研究姜黄素微乳凝胶抗皮肤纤维化的作用及机制。方法:小鼠随机分为正常组、模型组、阳性药组、姜黄素凝胶组和姜黄素微乳凝胶低、中、高剂量组,除正常组外其余各组采用博来霉素建立小鼠皮肤纤维化模型。造模成功次日开始,各组分别皮肤给药,正常组、模型组予空白凝胶,阳性药物组予积雪苷软膏,每日给药2次,连续3周。考察对比各组小鼠血清中羟脯氨酸含量、真皮厚度、Ⅰ型胶原蛋白(COLⅠ)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和转化生长因子β(TGF-β)的表达差异。结果:模型组小鼠血清羟脯氨酸含量明显高于正常组(P0.01),真皮厚度大于正常组(P0.01)。姜黄素微乳凝胶和姜黄素凝胶均可明显降低博来霉素致皮肤纤维化小鼠血液中羟脯氨酸含量(P0.01),减小真皮厚度(P0.05,P0.01),且微乳凝胶高剂量组改善优于凝胶组,并呈现一定的剂量依赖性。姜黄素微乳凝胶高剂量能明显减轻模型小鼠真皮纤维化程度,减少炎症细胞的浸润,优于姜黄素凝胶组。模型组COLⅠ、MMP-9和TGF-β表达明显高于正常组(P0.01),姜黄素微乳凝胶和姜黄素凝胶均能不同程度降低上述指标(P0.05,P0.01),姜黄素微乳凝胶改善效果优于姜黄素凝胶(P0.05,P0.01),且呈剂量依赖性。结论:通过改善药物的释药特性,姜黄素微乳凝胶抗皮肤纤维化作用明显优于姜黄素凝胶,为姜黄素进一步的开发及临床应用奠定了基础。     

补肾活血方联合补佳乐对宫腔粘连大鼠YAP1/TGF-β1信号通路的影响

目的:探讨补肾活血方联合补佳乐对宫腔粘连大鼠的疗效及机制。方法:将40只SD雌性大鼠随机分为假手术组、模型组、中药组(补肾活血方)、西药组(补佳乐)、中药+西药组(补肾活血方+补佳乐),每组8只。应用双重感染建立宫腔粘连模型后,灌胃给药4周,HE染色观察子宫内膜病理变化; Masson染色观察子宫内膜纤维化; 免疫组化检测子宫内膜Yes 相关蛋白1(YAP1)及转化生长因子-β₁(TGF-β₁)蛋白表达。最后将每组剩余大鼠与雄鼠合笼,7 d后记录胚胎孕囊数。结果:与模型组相比,中药+西药组的内膜厚度和腺体数明显改善(P<0.05)。与模型组相比,中药组、西药组、中药+西药组纤维化明显减轻(P<0.05),而与西药组或中药组相比,中药+西药组纤维化程度显著降低(P<0.05)。与模型组相比,中药组、中药+西药组YAP1蛋白表达明显降低(P<0.05); 同西药组或中药组相比,中药+西药组子宫内膜YAP1蛋白表达明显降低(P<0.05)。与模型组相比,中药+西药组TGF-β₁蛋白表达明显减少(P<0.05); 同西药组相比,中药+西药组TGF-β₁蛋白表达量减少(P<0.05)。与模型组、中药组、西药组相比,中药+西药组子宫孕囊数明显增多(P<0.05)。结论:补肾活血方联合补佳乐能够有效抑制大鼠宫腔粘连,减轻子宫内膜纤维化,改善妊娠结局,其作用机制可能与调控YAP1/TGF-β₁信号通路有关。     

中西医结合疗法促进柯萨基病毒感染者免疫功能的恢复

目的探索中西医结合疗法对柯萨基病毒感染者免疫功能恢复的促进作用。方法64例柯萨基病毒感染引起的外感风热证患者,被随机分为2组:单纯西医治疗组和中西医结合治疗组。用流式细胞仪分别检测他们入院初和出院前外周血中作为各功能群淋巴细胞标志的几种CD抗原,并将检测结果与当地健康人群和这2组患者之间作对比分析。结果2组患者入院初外周血CD8+淋巴细胞百分率明显高于对照组,而CD4+、CD16+和CD56+淋巴细胞百分率及CD4+/CD8+明显低于对照组(P均<0.01),而2组患者之间无显著性差异。出院前单纯西医治疗组上述各项检测指标仍异于对照组(P<0.01),而中西医结合治疗组上述各项检测指标却与对照组无显著性差异(P>0.05)。结论中西医结合治疗更有利于柯萨基病毒感染患者免疫功能的恢复。     

中西医结合治疗小儿支气管哮喘临床研究

目的:观察中西医结合治疗支气管哮喘的疗效。方法:将两年来诊治的143例哮喘患儿随机分为治疗组和对照组,治疗组采用中西医结合治疗,对照组仅采用西药治疗。观察治疗前后患儿临床症状、体征以及外周血嗜酸性粒细胞(EOS)数。结果:两组近期临床疗效比较无显著性差异(P>0.05);在EOS方面,治疗组治疗后与治疗前比较有显著性差异(P<0.01),而对照组治疗前后比较无显著性差异(P>0.05);两组远期临床疗效比较,临床治愈率有显著性差异(P<0.05),总有效率有极显著性差异(P<0.01)。结论:中西医结合治疗哮喘可明显缓解哮喘发作频率,延长其缓解期,中医药具有抗炎或协同抗炎作用。     

汉防己甲素、维拉帕米治疗肺间质纤维化的实验研究

目的:观察中西药钙拮抗剂对肺间质纤维化的治疗作用。方法:将72只 SD大鼠一次性气管内注入博莱霉素 A_5复制肺纤维化模型,次日随机分组给药,并测定分析各组给药后第7、14、28天肺组织内羟脯氨酸、脂质过氧化物含量、组织病理学变化以及比较各组第28天肺系数。结果:汉防己甲素组及维拉帕米组各期肺组织脂质过氧化物及羟脯氨酸含量均较模型组明显降低(P<0.05或P<0.01),肺系数明显减小(P<0.001或 P<0.01),组织病理学显示肺泡炎及肺纤维化程度均明显减轻,其中汉防己甲素优于维拉帕米。结论:中药钙拮抗剂汉防己甲素治疗肺间质纤维化疗效满意,值得进一步研究。     

中西医结合治疗狼疮性肾炎的临床观察

观察中西医结合四联疗法治疗狼疮性肾炎 (LN)的效果。应用环磷酰胺 (CTX)分阶段静脉冲击、中小剂量激素、大剂量强力宁及中医辨证分型治疗 31例LN ,并与 18例LN对照。结果 :治疗组在症状、实验室检查、病情缓解率、复发率、副作用发生率方面 ,均优于对照组 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。结论 :中西医结合治疗LN ,缓解病情快 ,疗效高 ,副作用少 ,复发率低。     

中西医结合治疗急性脑出血的疗效观察

[目的]观察中西医结合治疗急性脑出血的疗效。[方法]将198例患者随机分为两组,分别采用中西医结合(结合组99例)和常规(对照组99例)治疗,观察相关指标。[结果]与对照组比较,结合组患者治疗30d和90d时神经功能缺损评分均改善(P<0.05);90d时严重致残率加病死率降低(P<0.05),完全康复和轻微残疾率提高(P<0.05),社会功能活动(FAQ)改善(P<0.01)。[结论]中西医结合治疗可明显改善急性脑出血患者的神经功能和生活质量,降低严重致残加病死率。     

活血化瘀、益气养阴法对实验性肺纤维化LPO和SOD的影响

本研究通过小鼠肺纤维化模型的复制及中药复方－肺纤维（ＦＸＫ）对小鼠肺纤维化的防治，动态观察肺组织脂质过氧化物（ＬＰＯ）含量和超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性变化。结果显示：肺泡炎阶段ＬＰＯ含量明显升高（Ｐ＜０．０１），ＳＯＤ活性明显下降（Ｐ＜０．０１）。肺纤维化形成时ＬＰＯ含量无显著变化（Ｐ＜０．０５），而ＳＯＤ活性显著升高（Ｐ＜０．０１）。ＦＸＫ降低ＬＰＯ含量明显优于抗氧化剂维生素Ｅ，并有提高ＳＯＤ     

益肾达络饮对实验性自身免疫性脑脊髓炎MCP-1的影响

[目的]研究益肾达络饮对髓鞘蛋白脂质蛋白多肽(PLP139-151)诱导的实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠中枢神经系统内趋化因子(MCP-1)的影响,探讨益肾达络饮在神经系统炎性脱髓鞘疾病中的作用机制。[方法]采用免疫组化、地高辛标记的寡核苷酸探针原位杂交技术熏测定各组小鼠中枢神经组织中MCP-1蛋白和MCP-1mRNA的含量。[结果]正常组与模型组、激素组、中药组MCP-1蛋白、MCP-1mRNA含量相比较均有极显著性差异(P<0.01),中药组、激素组与模型组MCP-1蛋白、MCP-1mRNA含量相比较均有极显著性差异(P<0.01);中药组、激素组相比较有显著性差异(P<0.05)。[结论]益肾达络饮在蛋白、分子水平能降低MCP-1含量,其对自身免疫性脑脊髓炎小鼠保护作用可能与下调MCP-1熏抑制单个核细胞的趋化性熏减轻炎性浸润,抑制局部炎症有一定关系。