色素上皮衍生因子及其治疗视网膜新生血管性疾病的研究进展

视网膜新生血管（RNV）是目前最主要的致盲病因之一,迄今为止,尚无特效治愈方法。色素上皮衍生因子（PEDF）是新近发现的一种有效的眼内新生血管天然抑制剂,对新生血管的形成和发展起着重要的调控作用。有研究结果表明,应用PEDF重组蛋白或PEDF的眼内基因转移可以显著抑制RNV的形成,这为糖尿病性视网膜病变、早产儿视网膜病变及视网膜中央静脉阻塞等视网膜新生血管性疾病的治疗开辟了崭新的途径。因此,有必要就PEDF的生物学概况、对新生血管抑制作用的特点和机制及其在视网膜新生血管防治中的应用前景进行综述。（中华眼科杂志,2007,43：1043．1047）     

重组AAV2-色素上皮衍生因子对人视网膜微血管内皮细胞增殖的影响

目的 体外培养人视网膜微血管内皮细胞,探讨重组rAAV2-色素上皮衍生因子(PEDF)对该细胞在不同氧环境下增殖的影响.方法 实验研究.2%胰蛋白酶和0.1%Ⅱ型胶原酶消化视网膜,获得视网膜微血管内皮细胞;接种于预先包被纤维连接蛋白的培养瓶内,用含10%胎牛血清、内皮细胞生长因子、胰岛素-转铁蛋白-硒添加物的内皮细胞培养基,置于5%CO237 ℃培养箱内培养.相差显微镜观察细胞形态及生长情况.抗第Ⅷ因子相关抗原抗体鉴定内皮细胞.以125 μmol/L CoCl2建立HRCECs化学低氧模型,观察低氧对内皮细胞增殖的影响.按照105病毒基因组数/细胞的剂量进行rAAV2-PEDF病毒转染,分别设空白和阴性对照,激光共焦显微镜下观察EGFP阳性细胞,免疫印迹法检测PEDF蛋白表达.MTT法测定rAAV2-PEDF对不同氧条件下对细胞增殖的影响.流式细胞仪检测rAAV2-PEDF对不同氧条件下对细胞凋亡的影响.两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用方差分析.结果 原代培养的人视网膜微血管内皮细胞48～72 h贴壁,2周左右细胞融合.第Ⅷ因子相关抗原鉴定细胞呈阳性.转染病毒48 h后,激光共焦显微镜下观察可见EGFP阳性细胞,免疫印迹法检测,实验组PEDF表达明显强于其他组.MTT结果显示,单纯低氧处理,正常对照组A值为0.085±0.021,实验组A值为0.166±0.024(t=3.938,P＜0.05).rAAV2-PEDF干预正常氧条件下人视网膜微血管内皮细胞,A值分别为:正常对照组0.171±0.011,rAAV2-EGFP组0.178±0.016,rAAV2-PEDF组0.169±0.017(F=0.01,P＞0.05).rAAV2-PEDF干预低氧条件下人视网膜微血管内皮细胞,A值分别为:单纯CoCl2组0.166±0.013,CoCl2+rAAV2-EGFP组0.155±0.012,CoCl2+rAAV2-PEDF组0.116±0.015(F=6.25,3.50;P＜0.05).rAAV2-PEDF干预正常氧条件下人视网膜微血管内皮细胞,正常对照组凋亡细胞比例为2.3%,rAAV2-EGFP组为3.3%,rAAV2-PEDF组为1.7%.rAAV2-PEDF干预低氧条件下人视网膜微血管内皮细胞,单纯CoCl2组凋亡细胞比例为3.6%,CoCl2+rAAV2-EGFP组为6.7%,CoCl2+rAAV2-PEDF组为36.4%.结论 rAAV2-PEDF转染人视网膜微血管内皮细胞后PEDF可稳定表达,并能显著抑制低氧诱导下内皮细胞的增殖.

Abstract：

Objective To culture human retinal capillary endothelium cells(HRCECs) in vitro and explore the effect of rAAV2-PEDF on proliferation of HRCEs. Methods Retinas were digested by 2. 5%trypsin and 0.1% collagenase Ⅰ in order. The isolated cells were cultured on fibronectin-coated dishes in media of human endothelial-sFM basal growth medium (HE-SFM BGM) with 10% fetal bovine serum,insulin-transferin-selenium (ITS) and endothelial cell growth factor (ECGF). The cultured cells were identified by anti-factor Ⅷ related antigen though immunohistochemistry stain. The effect of hypoxia induced by CoCl2 on proliferation of HRCECs was assessed by MTT assay. After rAAV2-PEDF were transfected into HRCECs, the EGPF positive cells were observed by laser confocal scanning microscop, the protein expression of PEDF were detected by Western blot, and the proliferation of HRCECs were checked by MTT assay. Flow cytometry was used to analyze the apoptosis of HRCECs. Results Cultured HRCECs attached in the bottom of dishes in 48 h-72 h and grew to confluence in 2 weeks after seeding. HRCECs were with a positive brown staining for factor Ⅷ. EGPF positive cells were seen under laser confocal scanning microscop after 48h of rAAV2-EGFP transfection. The expression level of PEDF protein was higher in experimental group than in control group. The results of MTT assay showed the numeric value OA was 0.085±0.021 in normal group and 0.166±0.024 in hypoxia group(t =3.938,P＜0.05). In normal oxygen condition, the numeric value OA was 0.171±0.011 in normal control group, 0.178±0.016 in rAAV2-EGFP treated group, and O. 169±0.017 in rAAV2-PEDF treated group(F=0.01 ,P＞0.05). In hypoxia condition, the numeric value OA was 0.166±0.013 in CoCl2 treated group, 0.155±0.012 in CoCl2 + rAAV2-EGFP treated group, and 0.116±0.015 in CoCl2 + rAAV2-PEDF treated group. In normal oxygen condition, the ratio of apoptosis was 2. 3% in normal contral group,and 3. 3% in rAAV2-EGFP treated group,and 1.7% in rAAV2-PEDF treated group. In hypoxia condition, the ratio of apoptosis was 3.6% in CoCl2 treated group,6.7% in CoCl2 + rAAV2-EGFP treated group, and 36. 4% in CoCl2 + rAAV2-PEDF treated group.Conclusions PEDF gene can stably express in HRCECs after rAAV2-PEDF transfection and can obviously inhibit proliferation of HRCECs in hypoxia.     

腺病毒介导的色素上皮衍生因子抑制大鼠脉络膜新生血管的研究

目的 探讨腺病毒介导的色素上皮衍生因子(AdPEDF)对大鼠脉络膜新生血管(CNV)的抑制作用.方法 实验研究.选取6～8周雌性BN大鼠68只(136只眼),CNV模型建立后,采用单纯随机抽样方法将68只大鼠随机分为5组,空白对照组(N组)4只大鼠(8只眼),其余64只大鼠(128只眼)作为实验组.根据给药方式不同将实验组随机分为玻璃体腔注射实验组(A组)、玻璃体腔注射对照组(B组)、球周注射实验组(C组)、球周注射对照组(D组).A组玻璃体腔注射AdPEDF1 μl;B组玻璃体腔注射腺病毒载体注射液(AdNull)1 μl;C组球周注射AdPEDF 1 μl;D组球周注射AdNull 1 μl.于给药后3、7、14及28 d行组织病理、TUNEL染色、荧光素眼底血管造影(FFA)检查、及CNV中央最大厚度测量.应用SPSS 11.5统计学软件对光凝斑荧光素渗漏行秩和检验;对CNV发生率行X2检验;对CNV中央最大厚度行单因素与析因方差分析.结果 A组(54.7%)和C组(56.3%)给药后比给药前荧光素渗漏减轻(t=2.75,3.15;P＜0.01).给药后7d,A组(57.3%)、C组(57.8%)CNV数量减少;B、D组CNV呈显著纤维血管增殖.给药后A、C组CNV中央最大厚度分别为(44.51±0.53)和(44.37±0.48)μm,较N组减小(F=7.57,8.85;P＜0.01),并且随时间延长而减小(F=4.31,5.25;P＜0.05).给药后3 d A组CNV中央最大厚度为(46.35±0.62)μm,比C组(44.90±0.44)μm大(F=3.55,P＜0.05);给药后14及28 d,A组CNV中央最大厚度比C组减少(F=6.54,P＜0.01;F=4.41,P＜0.05).给药后A、C组CNV内皮细胞出现部分TUNEL阳性细胞.术后并发症为白内障(5只眼).结论 AdPEDF对BN大鼠CNV有抑制作用,治疗后7 d起效,14 d抑制作用最强,可持续至28 d.玻璃体腔注射比球周注射起效慢,但抑制作用强.     

色素上皮衍生因子治疗年龄相关性黄斑变性的研究进展

年龄相关性黄斑变性(AMD)是世界范围内老年人致盲的主要疾病之一,探索治疗AMD的有效方法具有防盲治盲的重要意义.色素上皮衍生因子(PEDF)是最强效的内源性新生血管抑制剂,大量基础研究及I期临床试验的结果表明,PEDF可有效治疗以脉络膜新生血管形成为主要特征的湿性AMD,因此,PEDF已成为目前最具潜能的治疗AMD的首选药物之一.     

色素上皮源性生长因子在低压性缺氧成年大鼠视网膜的表达

目的探讨成年大鼠在低压性缺氧后,色素上皮源性生长因子在其视网膜的表达情况。方法成年Wistar大鼠48只随机分成6组,每组8只,其中正常对照组8只,其余5组在暴露于低氧环境（氧气体积分数为7％～9％）2h后,分别于3h、24h、3d、7d和14d,通过实时荧光定量逆转录聚合酶链反应,蛋白免疫印迹法和免疫组化的方法检测色素上皮源性生长因子（PEDF）在视网膜的表达情况。结果免疫组化显示PEDF在正常及缺氧组大鼠视网膜神经节细胞层、内网层、外网层、内核层和光感受器层有表达;在暴露于低氧性环境后的3h、24h、3d、7d和14d,成年大鼠视网膜PEDF mRNA水平与正常对照组相比,分别减少17．3％、28％、44％、46％和51％（P值均〈0．05）;PEDF蛋白质水平较正常对照组分别减少了21．6％、37．3％、39．8％、42．6％、43．9％（P值均〈0．05）。结论：这次实验结果表明缺氧可以使成年大鼠视网膜PEDF的表达下调。     

脂质体介导基因转染活体眼组织的研究

目的　了解活体内不同途径应用脂质体转染外源基因在眼组织的分布情况。方法　将包有 β 半乳糖苷酶基因质粒的脂质体DOSPER ,分别采用玻璃体腔内注射、尾静脉注射、表面点药及球后注射到小鼠体内 ,2h ,1,2天、1,2 ,4周后用 β gal染色法观察 β 半乳糖苷酶基因在眼组织内的分布情况。 结果　玻璃体腔内注射、尾静脉注射、表面点药及球后注射 4组的小鼠眼球组织包括角膜、虹膜、睫状体、视网膜 ,均有 β 半乳糖苷酶基因表达 ,除表面点药组外 ,其他 3组小鼠脉络膜也有 β 半乳糖苷酶基因表达。用药 1天后开始出现 β 半乳糖苷酶基因阳性表达 ,持续达 1个月以上。 结论　脂质体能有效、稳定地转染外源基因到活体眼组织的角膜、虹膜、睫状体、脉络膜、视网膜。     

高氧诱导小鼠视网膜病变模型中血管内皮生长因子和色素上皮衍生因子的表达及意义

目的 研究高氧诱导小鼠视网膜病变模型中血管内皮生长因子(VEGF)和色素上皮衍生因子(PEDF)的表达和意义,并探讨两者在视网膜新生血管形成过程中的作用.方法 对照实验研究.对新生C57BL-6N系小鼠给予高氧后,置相对低氧环境中饲养,诱导产生视网膜新生血管.在小鼠生后第12、14及17天摘除眼球,通过逆转录聚合酶链反应和免疫印迹法及荧光素灌注造影,分别检测不同时间点全视网膜新生血管组织对VEGF与PEDF的mRNA和蛋白质的表达水平的差异,并观察视网膜新生血管的分布与形态变化,通过血管内皮细胞计数对新生血管进行量化.应用SPSS11.5统计学软件,采用析因设计方差分析,分别比较实验组与对照组mRNA与蛋白质表达水平的差异,以P<0.05作为差异有统计学意义.结果 在高氧环境中(出生第12天小鼠),OIR模型鼠VEGF蛋白质表达A值(0.47±0.12)较正常鼠(1.81±050)下降,PEDF蛋白质表达A值(5.35±0.94)较正常鼠(0.68±0.17)明显升高;而相对低氧环境中(出生第14和17天小鼠),VEGF蛋白质表达A值(2.15±0.46,5.49±0.97)较正常鼠(0.90±0.05,0.88±0.91)明显升高,PEDF蛋白质表达A值(2.07±0.35,1.37±0.48)较正常鼠(2.62±0.68,5.30±0.59)明显下降,尤以第17天下降显著.对不同时间点VEGF和PEDF蛋白质表达水平进行析因方差分析,结果显示各时间点的VEGF蛋白质表达水平差异有统计学意义(F=70.450,P=0.000),各时间点的PEDF蛋白质表达水平差异有统计学意义(F=160.237,P=0.000).出生第12、14及17天小鼠视网膜VEGF蛋白质的表达与正常对照组比较,差异有统计学意义(P=0.009,0.010,0.000),PEDF蛋白质的表达差异也有统计学意义(P=0.002,0.046,0.000);出生第12、14及17天小鼠视网膜VEGF mRNA的表达与正常对照组比较,差异有统计学意义(P=0.001,0.000,0.001),PEDF mRNA的表达差异也有统计学意义(P=0.000,0.001,0.000).伴随着视网膜组织的缺氧,出现了VEGF蛋白质表达水平升高和PEDF蛋白质表达水平降低,导致视网膜组织中VEGF与PEDF蛋白质表达失衡;VEGF与PEDF的mRNA表达亦发生类似变化,且较蛋白质改变提前发生.上述改变均伴随着同期视网膜新生血管的发生、发展及其严重程度而逐渐加重.结论 VEGF和PEDF的mRNA和蛋白质表达失衡可能足造成视网膜新生血管发生的机制之一.(中华眼科杂志,2008,44:734-740)     

阳离子脂质体介导人小梁细胞基因转染实验研究

目的:观察脂质体是否能介导目的基因转移至人小梁细胞及脂质体潜在的毒副作用。方法:通过体外细胞转染实验优化阳离子脂质体与质粒DNA的比例,荧光显微镜观察目的基因的表达。结果:小梁细胞内可见脂质体介导的绿色荧光蛋白表达,高浓度脂质体导致细胞死亡和脱落。结论:阳离子脂质体可有效介导目的基因转移至小梁细胞内。但高浓度对正常的细胞有一定的毒副作用。     

脂质体介导转染神经干细胞行糖尿病大鼠视网膜下移植的研究

目的观察大鼠胚胎神经干细胞(NSCs)阳离子脂质体法转染增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的效果;研究阳离子脂质体Lipofectamine介导转染对大鼠胚胎NSCs糖尿病大鼠视网膜下移植的影响。方法将报告基因pEGFP-N1经Lipofectamine介导转染NSCs(EGFP组),观察EGFP的表达;以同期培养未转染的细胞作为对照组,测定细胞活力、生长曲线和转染效率。将两组NSCs分别行糖尿病大鼠视网膜下移植,RT-PCR、Westernblot分别检测TOLL受体4(TLR4)、NF-κB的mRNA及蛋白质表达。结果被转染的体外培养大鼠胚胎NSCs长期表达EGFP,两组细胞具有相似的形态学变化和生长曲线,流式细胞仪结果显示转染率最高可达35.2%。行视网膜下移植后,TLR4、NF-κBmRNA及蛋白质的表达差异无统计学意义。结论阳离子脂质体Lipofectamine介导转染NSCs效率较高,报告基因表达时间长,不影响糖尿病大鼠NSCs视网膜下移植。     

脂质体介导增强型绿色荧光蛋白基因在鼠视网膜Müller细胞中的表达

目的研究脂质体介导增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因对体外培养的鼠视网膜Müller细胞转染的有效性及安全性。方法采用视网膜组织块法培养鼠视网膜Müller细胞,振荡法分离纯化细胞,并对其进行免疫细胞化学鉴定。用阳离子脂质体Lipofectamine 2000负载pEGFP-N1质粒转染Müller细胞,荧光显微镜检测转染后12、24、48、72h的转染效率。台盼蓝排斥实验检测转染和未转染细胞的活力,明确脂质体Lipofectamine 2000对Müller细胞的毒性作用。结果成功培养视网膜Müller细胞,传代后90%以上的细胞呈神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）染色阳性。Lipofectamine 2000介导质粒pEGFP-N1转染Müller细胞后12、24、48、72h的转染效率分别为（9.7±1.9）%、（18.1±16）%、（17.2±2.5）%、（16.9±1.7）%。台盼蓝排斥实验显示Lipofectamine 2000转染前后活细胞率分别为（98.2±5.6）%、（96.1±6.2）%。结论脂质体Lipofectamine 2000可安全有效地介导Müller细胞的转染,为进一步明确Müller细胞的病理、生理功能及靶向Müller细胞的基因治疗提供了新的手段。     

PEDF-GFP基因转染大鼠视网膜的实验研究

目的将重组表达质粒色素上皮衍生因子-绿色荧光蛋白(pigment epitheliumderived growthfactor-greenfluorescent protein,PEDF-GFP)以脂质体介导转染BN大鼠视网膜组织,观察其表达及定位。方法以脂质体介导的方法将重组表达质粒PEDF-GFP注射到BN大鼠视网膜下,于一定时间内分别用荧光显微镜观察GFP表达情况,用RT-PCR方法检测PEDF表达情况。结果在荧光显微镜下观察GFP表达情况,第1d即可见明显的绿色荧光分布于视网膜全层包括RPE细胞层,第2、3周荧光强度比第1周增强,荧光范围也有所扩大,可以持续表达4周。RT-PCR方法结果类似,转染后第1d即有PEDF mRNA表达,第1、2周表达明显增强,到第4周治疗眼的视网膜组织中PEDF mR-NA仍有较高水平的表达。结论阳离子脂质体可有效将PEDF-GFP基因转染视网膜组织、RPE细胞并得到持续表达,可望用于视网膜、脉络膜疾病的基因治疗。     

高眼压缺血-再灌注中脑组织c-fos的表达及神经营养因子对其表达的影响

目的 观察视网膜缺血再灌注损伤过程中脑组织中c-fos的变化及神经营养因子对c-fos表达的影响，探讨c-fos在脑组织不同部位的改变及可能作用机制，进而为临床实践提供依据。方法 建立眼缺血再灌注损伤动物模型，分为对照组、实验组（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组）。实验Ⅰ组为缺血组（Ⅰ组），实验Ⅱ组为缺血2h＋再灌注组（I／R组），实验Ⅲ组在缺血再灌注前于右侧侧脑室注射神经营养因子（神经营养因子＋I／R组）。采用HE常规染色切片光镜下观察大鼠高眼压脑外侧膝状体、嘴侧丘、视皮质结构神经细胞变化，采用免疫组织化学染色分别测定各组大鼠中脑组织以上三个部位c-fos的变化。结果 （1）脑组织不同部位（外侧膝状体、嘴侧丘、视皮质）中c-fos在对照组、缺血组、缺血再灌注组间无统计学差异（P＞0.05）。（2）在再灌注1d组脑组织不同部位的c-fos与缺血再灌注组有显著性统计学差异（P＜0．01），其中在外侧膝状体中有明显改变。（3）在再灌注1d组与再灌注2d组间两者存在统计学差异。（4）在再灌注后5d组与2d组间c-fos无统计学差异（P＞0．05）。（5）在注射神经营养因子的实验Ⅲ组，脑组织中不同部位的c-fos与对照组无统计学差异。结论 （1）c-fos在脑外侧膝状体、嘴侧丘、视皮质参与损伤的作用。（2）在外侧膝状体中c-fos的变化在中枢调节作用中起着中介作用，c-fos可能参与引起脑组织改变。（3）神经营养因子能明显减轻损伤反应。     

睫状神经营养因子及其受体在正常及变性视网膜中表达水平与分布的变化

目的 观察正常Sprague-Dawley（SD）和遗传性视网膜变性Royal College of Surgeons (RCS)大鼠视网膜发育过程中睫状神经营养因子(CNTF)及其受体(CNTFR)的表达水平与分布特点。 方法 新生至成年(12个月龄) SD和RCS大鼠视网膜石蜡切片，免疫组织化学染色显示睫状神经营养因子及其受体表达水平和分布变化。 结果 出生后0～7 d,SD大鼠神经视网膜全层染色呈阳性，随着周龄增加，节细胞染色明显增强，而其他细胞染色减弱，至28 d时节细胞染色达高峰，并持续至老年；RCS大鼠视网膜CNTF免疫组织化学染色结果与SD大鼠基本相同。出生后0～3 d, SD大鼠神经视网膜全层CNTFR的表达呈弱阳性，节细胞染色稍深，在将来要发育成外节处可见断续阳性染色；随着周龄增加，光感受器外节处阳性染色逐渐增强，14～28 d染色达到高峰；56 d时外节染色减弱，而节细胞染色却明显增强，直至老年。3～14 d RCS大鼠视网膜CNTFR染色基本与同龄SD大鼠一致，但21 d起外节染色明显减弱，28 d时外节染色基本呈阴性，但节细胞仍呈强阳性，一直持续到老年。 结论 CNTF的表达在正常和变性大鼠间无明显差异；CNTFR主要在节细胞和光感受器外节处高水平表达，正常和变性RCS大鼠间存在显著差异，为利用CNTF治疗视网膜变性提供了实验证据。 (中华眼底病杂志, 2006, 22: 120-123)     

NGF在小鸡FDM眼视网膜中表达变化的研究

目的通过研究小鸡形觉剥夺性近视眼视网膜中神经生长因子(nerve growth factor,NGF)表达的变化,以探讨神经生长因子在近视眼形成中的可能作用。方法运用免疫组织化学SP法和原位杂交技术探测神经生长因子及其mRNA在小鸡形觉剥夺性近视(form deprivation myopia,FDM)眼视网膜中的表达。结果正常小鸡眼神经节细胞层、内丛状层和内核层均有NGF蛋白质、mRNA表达,而在FDM眼,内丛状层和内核层变薄,NGF蛋白质、mRNA表达显著上调,与对照组比较,统计学差异均非常显著(P<0.01)。结论NGF极可能作为重要的视网膜信号调控因子参与小鸡FDM的形成。     

大鼠角膜碱烧伤后差异表达基因的变化及相应基因克隆

目的探讨大鼠角膜碱烧伤后差异基因表达情况,克隆目的基因片段并了解其同源性,检测有无新基因产生,从分子角度阐明角膜碱烧伤后变性蛋白产生的分子生物学基础。方法采用异硫氰酸胍法提取大鼠角膜碱烧伤后3d和2周的角膜RNA,合成双链cDNA。分别以正常角膜和碱烧伤角膜的cDNA为模板,应用2种锚定引物和12种随机引物,进行24种不同引物组合的差异显示反转录聚合酶链反应（DDRT—PCR）,对目的基因进行克隆、克隆鉴定、测序及同源性分析。结果在相同PCR反应条件下,同正常角膜相比,碱烧伤2周的角膜产生1条差异性条带,分子量为630bp。对该片段进行克隆和测序,并与Gene Bank进行同源性的比较,发现该基因与大鼠线粒体细胞色素C氧化酶的亚单位Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的基因具有部分同源性。结论大鼠碱烧伤2周的角膜有差异基因产生,与大鼠线粒体细胞色素C氧化酶的亚单位Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ具有部分同源性。该差异基因的产生可能与角膜碱烧伤后招氧自南基的作用有关。（中华眼科杂志．2005,41：905-909）     

糖尿病大鼠视网膜中缺氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子表达的研究

目的:检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)与血管内皮生长因子(VEGF)在糖尿病大鼠视网膜中的表达,探讨其在糖尿病视网膜病变(DR)发生发展中的作用。方法:SD大鼠120只随机分为对照组与DR组,DR组采用链脲佐菌素(STZ)一次性建立糖尿病模型。应用免疫组化SP法和RT-PCR技术分别于1,3,6mo检测视网膜中HIF-1α与VEGF蛋白及其mRNA的表达变化。结果:HIF-1α与VEGF蛋白及其mRNA在对照组视网膜中不表达,在DR组中呈进行性表达增强(P<0.05);DR组中HIF-1α与VEGF的表达呈正相关(r=0.605,P<0.05)。结论:DR视网膜中HIF-1α与VEGF表达增强,与DR的发生发展密切相关。