荧光原位杂交技术在泌尿生殖肿瘤中的应用

随着分子细胞遗传学的快速发展,荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术已广泛应用于临床和科学研究.FISH技术综合了荧光信号的高度灵敏性、无放射性、直观性及原位杂交的准确性,通过检测样本中基因或染色体的异常改变而应用于遗传性疾病、肿瘤的研究及临床诊断和治疗监测.本文就荧光原位杂交技术在常见的泌尿生殖肿瘤中的应用进行综述.     

恶性浆膜腔积液细胞块在分子病理诊断中的应用

目的 探讨恶性浆膜腔积液细胞块技术在分子病理诊断上的应用价值。方法 85例恶性浆膜腔积液分层离心获取肿瘤细胞并制作成石蜡细胞块,应用常规病理染色、免疫组化染色、荧光原位杂交（FISH）、基因测序等方法对其进行检测。结果 细胞块切片中肿瘤细胞丰富、集中,细胞结构清晰,并保持部分组织学形态特征,免疫组化染色能够辅助肿瘤确诊及明确分型,荧光原位杂交和基因测序可提供基因扩增及突变情况。30例非小细胞肺癌样本中10例EGFR基因的FISH阳性,8例EGFR基因突变。结论 恶性浆膜腔积液细胞块技术对于疾病的诊断有重要临床意义,可以帮助肿瘤确诊并查找原发灶,有效指导肿瘤分子靶向治疗。     

荧光原位杂交检测尿路上皮癌分子细胞遗传学变异的临床应用研究*

目的:探讨荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization,FISH）在检测尿路上皮癌患者尿液中脱落细胞核染色体畸变的临床应用价值。方法:采用3 号、7 号及17号染色体着丝粒特异性探针及p16位点特异性DNA探针对20例正常人尿液进行FISH检测,建立阈值。对115 例疑似尿路上皮肿瘤血尿患者的尿液进行FISH检测,以至少两种探针检测结果超过阈值或一种探针检测结果存在至少两种异常为诊断阳性。同时采用常规HE染色法进行尿脱落细胞形态学分析。结果:荧光原位杂交（FISH）技术和尿脱落细胞学诊断尿路上皮癌的灵敏度分别为86.7%（78/90）和10.0%（9/90）（P<0.001）;特异度分别为96.0%（24/25）和100%（25/25）（P>0.05）;阳性预测值分别为98.7%（78/79）和100%（9/9）（P>0.05）;阴性预测值分别为66.7%（24/36）和23.6%（25/106）（P<0.05）。 FISH技术诊断尿路上皮癌的灵敏度与尿路上皮癌的病理分级及分期无关,低级别和高级别尿路上皮癌FISH技术诊断的阳性率分别为85.7% 和87.5%（P>0.05）;非肌层浸润性和肌层浸润性尿路上皮癌的阳性率分别为84.2% 和88.4%（P>0.05）。 结论:尿脱落细胞荧光原位杂交技术诊断尿路上皮癌灵敏度高,特异度强,无创伤性,可作为尿路上皮癌早期诊断的一项重要方法,并可在预测肿瘤生物学行为及预后关系上具有重要的临床意义。      

下一代测序在肿瘤个体化治疗中的应用

目的探讨下一代测序(NGS)技术应用于肿瘤个体化治疗的可行性。方法选取2016年1月至2017年7月间中山大学肿瘤防治中心收治的20例肿瘤患者的临床样本,采用Illumina Next Seq500平台,利用靶向捕获建库技术,检测20例肿瘤样本中295个与肿瘤发生机制及靶向治疗密切相关的基因,采用传统PCR技术如荧光原位杂交(FISH)、飞行质谱(Sequenom MassARRAY)、一代测序(Sanger)或扩增阻滞突变系统(ARMS-PCR)等技术进行验证。结果 NGS检测技术参数稳定,与传统PCR技术检测结果符合率为100. 0%。结论与传统方法相比,NGS技术在临床应用中可同时检测多个可能的药物靶点,推动精准分子诊断及个体化治疗发展。     

伴有复杂核型的急性早幼粒细胞白血病的临床及实验研究

目的：探讨伴有复杂核型的急性早幼粒细胞白血病的临床和实验室特征。方法：应用常规细胞遗传学,间期荧光原位杂交技术（FTSH）,多重荧光原位杂交技术,检测2例急性早幼粒细胞白血病。结果：常规细胞遗传学检测发现2例具有复杂核型,间期FISH证实2例均含有PML／RARA融合基因,多重FISH明确复杂核型性质。2例预后均较差。结论：联合常规细胞遗传学,间期FISH,多重FISH可以准确明确复杂核型的性质。具有复杂核型的急性早幼粒细胞白血病患者预后较差。     

伴有复杂核型的急性早幼粒细胞白血病的临床及实验研究

目的:探讨伴有复杂核型的急性早幼粒细胞白血病的临床和实验室特征.方法:应用常规细胞遗传学,间期荧光原位杂交技术(FTSH),多重荧光原位杂交技术,检测2例急性早幼粒细胞白血病.结果:常规细胞遗传学检测发现2例具有复杂核型,间期FISH证实2例均含有PML/RARA融合基因,多重FISH明确复杂核型性质.2例预后均较差.结论:联合常规细胞遗传学,间期FISH,多重FISH可以准确明确复杂核型的性质.具有复杂核型的急性早幼粒细胞白血病患者预后较差.     

FISH技术在淋巴瘤分子特征中的研究和应用进展

荧光原位杂交（FISH）技术是一种用荧光素标记的核酸探针和特定片段杂交,通过荧光信号变化对染色体或基因异常进行定性、定位及相对定量分析的方法。淋巴瘤作为常见的恶性肿瘤之一,其分类复杂,不同种类的淋巴瘤常涉及某些特定基因和染色体的改变,并且不同分子特征的淋巴瘤其预后差异也较大。弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）、黏膜相关淋巴组织（MALT）淋巴瘤、滤泡淋巴瘤（FL）、间变性大细胞淋巴瘤（ALCL）等均具有特征性的染色体和基因异常,且不同分子亚型的淋巴瘤也涉及不同的染色体异常。目前FISH技术已被广泛应用于淋巴瘤的分子遗传学研究,并为临床诊断和预后监测提供了较为客观科学的依据。本文对FISH技术在不同类型淋巴瘤分子特征的研究和应用进行综述。      

双色荧光原位杂交技术在膀胱尿路上皮肿瘤诊断中的应用价值

 目的 探讨双色荧光原位杂交技术（FISH)诊断膀胱尿路上皮肿瘤的临床应用价值。方法 标记为3,7,17号染色体着丝粒及9号染色体p16位点9p21区带探针,采用FISH对80例膀胱尿路上皮肿瘤患者尿液间期细胞核进行荧光原位杂交,同时选取20例健康体检者作为正常对照组,建立阈值,以组织病理结果作为诊断“金标准”,统计染色体畸变情况,分析其与病理分期、分级的关系以及染色体畸变组合诊断膀胱尿路上皮肿瘤的敏感性。结果 3、7、17号染色体和9p21的畸变率分别为47.5%（38/80）、60.7%（49/80）、51.3%（41/80）和58.8%（47/80）,3、7、9和17号染色体联合检测膀胱癌的阳性率为76.3%(61/80),畸变和肿瘤分期无相关性,3、7、17号染色体与肿瘤病理分级有显著相关性（P﹤0.05）。 结论 膀胱尿路上皮肿瘤的进展可能与染色体的畸变有关,FISH可以作为膀胱尿路上皮肿瘤诊断的一项重要方法,并可能在术后监测复发以及预后判断中具有重要临床意义。     

FISH技术在恶性淋巴瘤诊断中的应用

荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization,FISH）已经成为诊断和评估恶性淋巴瘤的一项确定技术,其结果快速准确,较传统的细胞遗传学诊断技术有明显的优越性,在临床应用中有广泛的前景。     

FISH技术在恶性淋巴瘤诊断中的应用

荧光原位杂交( fluorescence in situ hybridization,FISH)已经成为诊断和评估恶性淋巴瘤的一项确定技术,其结果快速准确,较传统的细胞遗传学诊断技术有明显的优越性,在临床应用中有广泛的前景.     

非鳞非小细胞肺癌基因检测技术研究进展

随着分子生物学技术的日益发展,基于基因检测指导下的精准医疗已成为非鳞非小细胞肺癌的主要诊治模式.目前临床应用较广的基因检测技术大致分为:基因芯片(gene chip)技术、二代测序技术(next generation sequencing technologies,NGS)、扩增阻滞突变系统(amplification...     

荧光原位杂交（FISH）辅助诊断胰胆管癌的技术及判读方法

目前对于临床上怀疑为胰胆管癌的患者,主要通过内窥镜下逆行胰胆管造影术（ERCP）和细胞刷检进行术前诊断。细胞刷检病理诊断虽然特异度高,但灵敏度较低。采用荧光原位杂交（FISH）方法检测胆管脱落细胞中3、7、17号染色体和p16缺失,可以作为临床胆管癌辅助鉴别诊断新的方法。此项技术虽然在国外的应用和研究已超过10年,但是我国尚未见应用于临床胰胆管癌的报道。我院已开展此项技术用于胰胆管癌的辅助诊断,并已发表相应的文章,但是很多希望开展此项技术的医院尚对此项技术的操作和判读存在疑问。本文详细讲解了运用FISH检测胆管脱落细胞中3、7、17号染色体和p16缺失来辅助诊断胰胆管癌的技术和判读方法。     

荧光原位杂交技术在肺癌痰细胞学诊断中的应用

目的 探讨荧光原位杂交技术（ＦＩＳＨ）在肺癌痰细胞学诊断中的应用。方法 用７号、１１号、１７号、Ｘ染色体特异的着丝粒ＤＮＡ探针,对３０例肺癌痰标本进行双色ＦＩＳＨ。结果 ３０例痰标本中,有２３例为阳性痰,７号、１７号、Ｘ、１１号染色体出现超二倍体改变者分别为６５．２％（１５／２３）、６０．９％（１４／２３）、５２．２％（１２／２３）和３９．１％（９／２３）。在７例细胞学诊断为可疑癌的痰标本中,出现７号染色体超二倍体改变者达到５７．１％（４／７）。结论 ＦＩＳＨ不仅可以检测痰标本中的异倍体肿瘤细胞,而且也可以作为痰细胞学诊断的辅助技术。     

FISH检测乳腺癌HER-2基因扩增及17号染色体多体状况及其临床病理学意义的分析

目的:总结分析临床应用荧光原位杂交(FISH)技术检测诊断乳腺癌大样本的经验和临床病理学意义。方法:用FISH技术诊断1 699例乳腺浸润性导管癌HER-2基因扩增和17号染色体多体状态,并分析HER-2基因扩增与其他重要生物指标及临床病理的关系。结果:乳腺癌HER-2基因扩增阳性率为52.6%(894/1 699);乳腺癌17号染色体多体阳性率为12.7%(216/1 699)。HER-2基因扩增与HER-2表达状况和17号染色体多体呈正相关,P值分别为0.000 1和0.009;乳腺癌HER-2基因扩增与肿瘤大小(P=0.008)、病理学分级(P=0.025)、淋巴结转移(P=0.015)和Ki-67(P=0.004)呈正相关,与ER(P=0.002)、PR(P=0.001)和Bcl-2(P=0.028)呈负相关。HER-2基因扩增的乳腺癌赫赛汀用药组预后明显优于未用药组(Log-rank=38.5;P=0.000 1);17号染色体多体的乳腺癌赫赛汀用药组患者较未用药组复发率低(P=0.022)。结论:临床应用FISH技术诊断HER-2基因扩增靶标来指导乳腺癌的分子靶向治疗可以明显改善患者的预后,值得进一步推广应用。     

应用荧光原位杂交技术诊断尿路上皮癌的临床研究

背景与目的：尿路上皮癌是一种最常见的泌尿系统肿瘤,尿细胞学检查是诊断尿路上皮癌的经典方法,虽然特异度较高,但是敏感度偏低。目前荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization,FISH）计数分裂间期细胞的染色体倍数已成功应用于遗传学和肿瘤学研究领域。本研究旨在评价FISH在诊断尿路上皮癌中的诊断价值。方法：采用FISH检测100例血尿患者尿脱落细胞中3、7、9和17号染色体数目异常,以组织病理确诊为尿路上皮癌为金标准,评估FISH诊断的特异度和敏感度,并与尿细胞学检查结果做比较。结果：FISH诊断尿路上皮癌特异度为92.3%,敏感度为74.7%;尿细胞学诊断特异度为100%,敏感度为46.0%。两者相比,敏感度差异有统计学意义（P〈0.05）,而特异度差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：与尿细胞学相比,FISH诊断尿路上皮癌具有较高的特异度和相似的特异度敏感度,可作为诊断尿路上皮癌的新方法。     

FISH结合组织芯片技术检测不同进展阶段肺癌组织中Survivin mRNA的表达和意义(英文)

目的用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)方法检测肺癌进展组织芯片中Survivin mRNA的表达,并探讨其在肺癌发生、发展中的作用和意义。方法利用FISH方法和组织芯片技术,检测肺原发癌89例,淋巴结转移肺癌12例,肺癌前病变12例和正常肺标本10例中Sur- vivin mRNA的表达情况。结果原发肺癌中有69．7％表达Survivin mRNA,显著高于正常组(P<0．05);癌前病变组Survivin mRNA的表达显著高于正常组 (P<0．05);Survivin mRNA的表达与分化程度、淋巴结转移和临床分期相关(P<0．05)。结论 FISH敏感性强,荧光标记物稳定;组织芯片技术具有高效率、高信息量等优点,在病理学中有很好的应用前景;Survivin mR- NA在肺癌和癌前病变组织中高表达,与进展程度和恶性行为相关,对肺癌的发生、发展起促进作用,为早期诊断、预后估计和治疗提供一定的依据。     

FISH结合组织芯片技术检测不同进展阶段肺癌组织中Survivin mRNA的表达和意义

Objective： To investigate the expression of Survivin mRNA in lung cancer progression tissue microarray by FISH （fluorescence in situ hybridization） method and determine its role and significance in lung cancer genesis and progress. Methods： The expression of Survivin mRNA was detected by FISH method and tissue microarray technology. 89 cases of primary lung cancer, 12 cases of lymph node metastasis of lung cancer, 12 cases of precancerous lesion and 10 cases of normal lung tissue were examined. Results： 69.7% of primary lung cancer express Survivin mRNA; the positive ratio of primary lung cancer and precancerous lesion were both significantly higher than that of normal lung tissue （P〈0.05）; the expression of Survivin mRNA was related to the differentiation degree, lymph node metastasis and clinical stages （P〈0.05）. Conclusion： FISH has good sensitivity and stability. Tissue microarray technology has many advantages, such as high efficiency, high throughput, etc; it may have good prospect in pathology. Survivin mRNA was highly expressed in lung cancer and precancerous lesion; it was related to the progress and malignant behavior; it may play a promotion role in lung cancer genesis and progress and offer basis to early diagnosis, prognosis estimate and treatment.     

荧光原位杂交技术在膀胱尿路上皮肿瘤病理学诊断中的初步应用

目的应用荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization,FISH）技术,了解膀胱尿路上皮肿瘤细胞核染色体畸变情况及其对病理诊断及鉴别诊断的应用价值。方法采用3、7、17号染色体着丝粒及p16基因探针,对33例不同级别膀胱尿路上皮肿瘤组织和10例正常对照膀胱组织进行FISH检测。结果 3、7、17染色体及p16扩增率与缺失率,浸润性尿路上皮癌与其他5组比较均有统计学意义（P〈0.01）;而其他各组间比较无统计学意义（P〉0.05）,4种探针联合检测≥2个指标出现异常,浸润性尿路上皮癌占100%,与其他5组比较有统计学意义（P〈0.01）;该指标对浸润性尿路上皮癌诊断敏感性为81.82%、特异性为91.67%。结论应用FISH技术,可以了解膀胱尿路上皮肿瘤组织3、7、17染色体及p16基因的畸变情况,FISH技术还可作为尿路上皮肿瘤病理学诊断与鉴别诊断及术后监测的重要手段。     

Application and interpretation of FISH in biomarker studies

Emerging genomic and proteomic data is creating new opportunities to identify novel biomarkers that will have pathway-specific therapeutic impact on cancer progression. Molecular cytogenetic and fluorescence in situ hybridization (FISH) methods have been primarily used in discovery genetic research laboratories until recently. New automated analytical platforms based on FISH technologies and tissue microarray methods are providing a rapid means to determine the impact of consistent genomic aberrations in clinical trials, and in studies designed to investigate differential chemotherapeutic response.