临床分离表皮葡萄球菌相关基因与生物膜表型的关系

目的：分析临床分离表皮葡萄球菌 icaA、aap 、atlE、sarA 基因与生物膜表型的关系。方法收集临床分离的表皮葡萄球菌78株,采用 PCR 法扩增 icaA、aap 、atlE、sarA 基因,组织细胞培养板黏附法检测生物膜表型,χ2检验分析上述基因与生物膜表型的关系,Wilcoxon 符号秩检验分别分析 icaA ＋菌及 icaA -菌在胰酶大豆肉汤（TSB）与TSB＋3％氯化钠中生物膜表型光密度（OD）值的差异。结果78株表皮葡萄球菌 icaA、aap 、atlE、sarA 基因阳性率分别为24．4％（19/78）、79．5％（62/78）、73．8％（57/78）、82．1％（64/78）。产生物膜株阳性率为51．3％（40/78）,其中高产生物膜16株,均携带 icaA 基因;弱产生物膜24株。经统计学分析,上述基因与生物膜表型之间有相关性,icaA 基因与高产生物膜表型有相关性。icaA ＋菌及 icaA -菌在 TSB 与TSB＋3％氯化钠中生物膜 OD 值的差异有统计学意义（P ＜0．05）。结论表皮葡萄球菌生物膜表型涉及多种因子参与,而 icaA 基因有助于高产生物膜表型形成。环境因素也可影响表皮葡萄球菌生物膜表型。     

金黄色葡萄球菌生物膜形成及相关基因分析

目的探讨金黄色葡萄球菌生物膜表型与相关基因的关系。方法收集100株临床分离的金黄色葡萄球菌,用刚果红培养基法进行生物膜筛选;用电子显微镜观察生物膜的形成;用PCR方法检测生物膜相关基因。结果 100株金黄色葡萄球菌中,79株产生生物膜,阳性率为79.0%。ebh、icaA、icaD、fnbA的检出率分别为53.2%、94.9%、94.9%、81%。金黄色葡萄球菌生物膜阳性菌株和生物膜阴性菌株之间生物膜相关基因ebh、icaA、icaD、fnbA的阳性率差异有统计学意义(P0.01)。结论ebh、icaA、icaD、fnbA 4种基因与金黄色葡萄球菌生物膜形成密切相关。     

自溶素基因与表皮葡萄球菌生物膜形成相关性研究

目的研究自溶素(atlE)基因与表皮葡萄球菌生物膜形成的相关性。方法收集2015年6月至2016年6月该院临床分离的表皮葡萄球菌64株进行研究,用生物膜形成试验检测细菌生物膜,采用聚合酶链反应扩增atlE基因,分析atlE基因与表皮葡萄球菌生物膜形成的相关性。结果检出生物膜阳性菌株24株,检出率为37.5%;检出atlE基因菌株31株,检出率为48.4%;atlE基因与表皮葡萄球菌生物膜形成有明显的相关性(P0.05)。结论表皮葡萄球菌有生物膜形成能力,atlE基因与表皮葡萄球菌生物膜形成相关。     

表皮葡萄球菌胞外粘质物检测影响因素的探讨

近年的研究已证明，表应葡萄球菌（以下简称表葡）的致病力与其产生的胞外粘质物（ExtracellularSlimeSubstance，ESS）有关，因此，ESS的检测对于确定菌株毒力以及临床诊治等均具较大的意义。鉴于目前ESS检测中方法、条件颇不统一，不但影响ESS的检测结果，而且相互间缺乏可比性，本文特对表葡ESS检测的影响因素进行探讨，现将结果报告如下．1材料与方法1．且菌株共36林表葡，均获自各种临床标本，经ESS检测，强阳性15株，弱阳性11株，阴性10株。1．2培养基采用自制GNB培养基，配方为：多价蛋白陈（日本产）l％，酵母混音0．3％…     

fbe基因与表皮葡萄球菌感染

表皮葡萄球菌(表葡菌)为人体皮肤和黏膜表面的正常寄生菌群,是致导管、人工瓣膜等植入物相关感染的重要病原菌。以表葡菌为首的凝固酶阴性葡萄球菌也是医院感染的主要病原菌,甲氧西林耐药表葡菌(MRSE)的出现使治疗更复杂[1-2]。研究显示表葡菌致病力的强弱与其进入人体后对植入     

4种方法检测表皮葡萄球菌生物膜形成能力的应用价值探讨

目的比较4种方法检测表皮葡萄球菌体外生物膜形成能力的应用价值,帮助临床选择检测生物膜形成能力的可靠方法。方法用刚果红实验、半定量粘附实验、扫描电镜实验、PCR扩增icaA分别检测临床分离的45株表皮葡萄球菌生物膜的形成能力,经行×列表χ2检验比较阳性检出率,并以扫描电镜检测法为＂金标准＂计算其他3种方法的灵敏度和特异性。结果 4种方法检出表皮葡萄球菌生物膜形成的阳性率分别为31.1%、40.0%、40.0%、28.9%,无统计学差异（χ2=1.80,P〉0.05）。刚果红实验、半定量粘附实验、PCR扩增icaA检测生物膜形成能力的灵敏度分别为77.8%、100%、77.2%,而特异性均为100%。结论 4种方法均可用于体外生物膜检测。     

表皮葡萄球菌生物被膜形成的基因调控机制研究进展

表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis,Se)是临床医疗中重要的条件致病菌,近年来Se的感染率不断上升,已成为医院感染的重要病原菌之一。导致Se致病的主要原因是其形成可黏附于临床常用的聚合物材料上的生物被膜(bio-film),抵抗抗生素的作用并逃避宿主免疫系统的监控,使感染呈现持续性和反复性的特点[1]。本研究就Se生物被膜形     

头孢曲松对表皮葡萄球菌生物膜形成的抑制作用

目的观察头孢曲松等4种抗生素抑制表皮葡萄球菌生物膜的作用,探讨抗生素防治葡萄球菌感染的作用环节。方法用半定量粘附实验筛选出形成生物膜的表皮葡萄球菌15株,观察不同浓度的药物对生物膜形成的抑制作用。结果发现头孢曲松能抑制生物膜形成,而头孢他啶、红霉素无抑制葡萄球菌生物膜的作用,万古霉素对葡萄球菌有很强的杀菌作用,但无抑制生物膜的作用。结论头孢曲松能抑制葡萄球菌生物膜形成,可利用头孢曲松抑制生物膜的作用,通过阻止粘附来阻断葡萄球菌引起的粘附相关感染,达到预防感染的目的。     

头孢曲松对表皮葡萄球菌生物膜形成的抑制作用

目的观察头孢曲松等4种抗生素抑制表皮葡萄球菌生物膜的作用,探讨抗生素防治葡萄球菌感染的作用环节。方法用半定量粘附实验筛选出形成生物膜的表皮葡萄球菌15株,观察不同浓度的药物对生物膜形成的抑制作用。结果发现头孢曲松能抑制生物膜形成,而头孢他啶、红霉素无抑制葡萄球菌生物膜的作用,万古霉素对葡萄球菌有很强的杀菌作用,但无抑制生物膜的作用。结论头孢曲松能抑制葡萄球菌生物膜形成,可利用头孢曲松抑制生物膜的作用,通过阻止粘附来阻断葡萄球菌引起的粘附相关感染,达到预防感染的目的。     

表皮葡萄球菌体外与纤维蛋白原的结合力研究

目的 :比较纤维蛋白原结合基因 (fbe)阳性和纤维蛋白原结合基因阴性的表皮葡萄球菌 (表葡菌 )体外与纤维蛋白原结合力的差异 ,探讨 fbe基因在表葡菌致异物感染中的致病作用。 方法 :采用ATB鉴定临床分离菌 ,聚合酶链反应 (PCR)方法检测有无 fbe基因 ,采用酶联免疫吸附法 (ELISA)测定并比较 fbe基因阳性和 fbe基因阴性表葡菌体外与纤维蛋白原的结合力。结果 :6 2株临床分离菌中有 4 6株为表葡菌 ,表葡菌中 fbe基因阳性的菌株为 34株 ,阳性率为 73.9% ,其他葡萄球菌均不含该基因 ;fbe基因阳性菌株和fbe基因阴性菌株体外与纤维蛋白原的结合力差异有显著性 (P <0 .0 1 )。 结论 :fbe基因阳性菌株和fbe基因阴性菌株体外与纤维蛋白原的结合力存在差异 ,提示 fbe基因可能为表葡菌致异物感染的致病因素之一。     

表皮葡萄球菌icaADBC操纵子检出与细菌耐氨基糖苷类抗菌药物的关系

目的分析临床分离表皮葡萄球菌对不同类型氨基糖苷类抗菌药物的耐药特征;分析icaADBC操纵子在临床分离的表皮葡萄球菌中的检出及与细菌耐药的关系。方法收集2013年1~10月上海市东方医院临床分离的表皮葡萄球菌77株,采用纸片扩散法检测细菌4种氨基糖苷类抗菌药物(庆大霉素、链霉素、奈替米星和阿米卡星)药敏试验特征;构建icaADBC特异性引物,采用聚合酶链反应扩增技术检测77株细菌中icaADBC的分布状况。结果结果77株表皮葡萄球菌对氨基糖苷类抗菌药物耐药率较高,分别为庆大霉素:62.3%,链霉素:61.0%,阿米卡星:22.1%,奈替米星:23.4%。icaADBC操纵子的检出率为20.8%,ica阳性菌株与阴性菌株对氨基糖苷类抗菌药物耐药性比较差异有统计学意义(P0.05)。结论临床分离的icaADBC操纵子阳性表皮葡萄球菌对氨基糖苷类抗菌药物耐药率较高。     

表皮葡萄球菌生物膜形成与细菌耐药性的相关性分析

目的探讨表皮葡萄球菌临床分离株生物膜的形成情况,分析其生物膜形成与细菌耐药性的相关性。方法收集2014年1月至2015年2月住院患者血标本分离出的表皮葡萄球菌62株,采用生物膜形成试验和聚合酶链式反应(PCR)扩增试验检测细菌生物膜,并采用纸片扩散法(K-B法)进行细菌药物敏感性试验。结果利用生物膜形成试验检出生物膜阳性菌株23株,检出率为37.1%;PCR扩增试验检出icaA基因27株,检出率为43.5%,差异无统计学意义(P0.05);两种方法同时阳性的菌株为14株。生物膜阳性菌株对所测抗菌药物的耐药率普遍高于生物膜阴性菌株,其中对庆大霉素、青霉素G、苯唑西林、左旋氧氟沙星、头孢西丁的耐药率比较差异有统计学意义(P0.05),所有菌株对万古霉素、利奈唑胺、奎奴普丁/达福普汀均敏感。结论两种方法对表皮葡萄球菌生物膜的检出率无明显差异,生物膜阳性菌株耐药率普遍高于生物膜阴性菌株。     

表皮葡萄球菌纤维蛋白原结合基因分布的研究

目的：研究不同来源的表皮葡萄球菌(表葡菌)以及其他葡萄球菌中纤维蛋白原结合基因(fbe基因)的分布情况。方法：采用聚合酶链反应(PCR)方法检测表葡菌临床分离株或健康人群寄植株以及其他类型葡萄球菌的fbe基因，并对fbe全基因序列进行了测序。结果：临床分离的表葡菌中fbe基因阳性率达到84．2％，健康人群来源的表葡菌中fbe基因阳性率达92．6％，而其他类型葡萄球菌中均未扩增出fbe基因；表葡菌337#fbe基因全长序列为3457bp，与国外文献报道对比有95％同源性。结论：fbe基因在表葡菌中广泛存在，fbe全基因序列与国外报道的结果相似。     

同源重组构建表皮葡萄球菌纤维蛋白原结合基因缺失突变菌株

目的构建表皮葡萄球菌（表葡菌）纤维蛋白原结合基因（fbe基因）缺失突变菌株，为fbe基因功能研究提供实验工具。方法采用同源基因重组技术。构建质粒△pBT2（含fbe：：ermB基因），将其电转化进入金葡菌RN4220，再次抽提后电转化进入fbe基因阳性表葡菌（HB）中。将含有质粒△pBT2的表葡菌HB在5mg／L红霉素平板42℃经多次传代，使质粒ApBT2裂解，fbe：：ermB基因同源重组到表葡菌HB的染色体上，通过红霉素耐药、氯霉素敏感等特性筛选出含有fbe：：ermB基因的新表葡菌HB-ermB。结果经酶切鉴定后确认质粒△pBT2构建成功以及成功转导入金葡菌RN4220和表葡菌HB中，经PCR方法以及测序确认表葡菌HB的fbe基因缺失突变菌株HB-ermB构建成功。结论采用同源重组的方法完成了表葡菌HB的fbe基因缺失突变菌株的构建。     

IS256与医院感染表皮葡萄球菌耐氨基糖苷类抗菌药物的关系

目的了解医院感染表皮葡萄球菌对不同类型氨基糖苷类抗菌药物的敏感特征,分析插入序列(IS)256与表皮葡萄球菌耐氨基糖苷类抗菌药物的关系。方法收集2007年2月至2007年7月外科病区中引起医院感染的表皮葡萄球菌48株,利用纸片扩散法测定细菌对4种氨基糖苷类抗菌药物(庆大霉素、奈替米星、链霉素和阿米卡星)药敏特征;构建IS256特异性引物,利用聚合酶链反应(PCR)检测48株细菌中IS256分布状况。结果48株临床分离的表皮葡萄球菌对4种氨基糖苷类抗菌药物的药敏特征分别为:对庆大霉素的耐药率为69%,敏感率为31%;对奈替米星的耐药率为8%,敏感率为79%,中介率为13%;对链霉素的耐药率为42%,敏感率为35%,中介率为23%;对阿米卡星的耐药率为15%,敏感率为75%,中介率为10%。全部临床分离株中,有25株细菌检出IS256。在庆大霉素耐药菌株中,IS256检出率高达70%,与敏感菌相比差异具有统计学意义(P<0.01);而对其他3种抗菌药物耐药的菌株中,IS256的检出与耐药无明显相关性(P>0.05)。结论表皮葡萄球菌临床分离株对氨基糖苷类抗菌药物存在不同程度耐药。IS256与表皮葡萄球菌对庆大霉素耐药密切相关。     

表皮葡萄球菌在慢性鼻-鼻窦炎患者中生物膜的表达

目的研究表皮葡萄球菌生物膜在慢性鼻-鼻窦炎（CRS）患者鼻黏膜中的表达情况。方法将临床手术中获取的180例慢性鼻-鼻窦炎患者内镜手术黏膜样本,根据细菌培养结果将其分为4组,分别为表皮葡萄球菌生长组79例,其他葡萄球菌生长组33例,阴性杆菌生长组27例,细菌培养阴性组41例,所有样本均行标准的扫描电子显微镜方法检测。结果表皮葡萄球菌生长组79例全部观察到生物膜的存在,表达率为100%（79/79）,其他葡萄球菌生长组为75.8%（25/33）,阴性杆菌生长组为77.8%（21/27）,细菌培养阴性组为41.5%（17/41）。后3组分别与表皮葡萄球菌组比较,P值均〈0.01。结论表皮葡萄球菌在CRS患者生物膜形成中起重要作用。