马鞭草C部位对人绒毛膜癌JAR细胞体外抑制作用的研究

目的 探讨马鞭草提取液C部位对人绒毛膜癌JAR细胞体外抑制作用。方法 MTT法测定不同浓度C部位在不同时段对JAR细胞的增殖抑制率；HCG单克隆酶免定量法检测马鞭草C部位对JAR细胞分泌HCG的影响；透射电镜观察细胞超微结构变化。结果 JAR细胞经马鞭草C部位作用后，细胞增殖抑制率随着时间的延长和浓度的增加逐渐增大，72h的40g／L剂量组抑制最明显，抑制率为65％；HCG分泌受到明显抑制，呈剂量和作用时间依赖性；马鞭草C部位可引起细胞数目减少并萎缩；电镜下见到明显的凋亡小体。结论 马鞭草提取液C部位对人绒毛膜癌JAR细胞增殖及分泌HCG有明显抑制作用，并可诱导JAR细胞凋亡。     

蛋白激酶C在人绒毛膜癌JAR细胞中作用的研究

目的：研究蛋白激酶C(protein kinaseC，PKC)对人绒毛膜癌JAR细胞分泌人绒毛膜促性腺激素(hCG)的影响，进一步探讨PKC在调控JAR细胞hCG分泌中的作用。方法：不同浓度的PKC激动剂phorbol 12—myristrate l3—acetate(PMA)急性和慢性刺激、PKC抑制剂chelerythrine chlorine(CHEL)分别作用JAR细胞，用ELASA法测定hCG分泌量变化，以及蛋白印迹(Western blot)法测定细胞内磷酸化丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)的改变。结果：不同浓度PMA急性刺激时，抑制JAR细胞hCG分泌，在200nmol/L时，其抑制作用最强；不同浓度PMA慢性刺激时，JAR细胞hCG分泌量增加，在200nmol／L时，其作用最强。CHEL作用JAR细胞时，hCG分泌量升高，在600nmol/L时，其作用最强。对照组及各实验组都有活性的MAPK的表达，与对照组相比，PMA慢性刺激组、CHEL组MAPK磷酸化水平升高;PMA急性刺激组MAPK磷酸化水平降低。结论：PKC参与调节JAR细胞hCG的分泌，活性升高时，下调MAPK磷酸化，使JAR细胞hCG分泌减少，而活性降低时，增强MAPK磷酸化，JAR细胞hCG分泌量增加。MAPK通路激活是PKC介导的JAR细胞分泌hCG的重要机制。     

马鞭草醇C部位抗人绒毛膜癌JAR细胞作用机制的研究

应用MTT法及3H -TdR同位素标记细胞增殖抑制实验 ,在马鞭草醇提液中筛出其中一个活性部位 ,命名为C部位。一定浓度的马鞭草C部位能明显抑制JAR细胞的增殖 ,加药后 48h细胞增殖仅为相应对照组的 3 0 0 5 % ;EGFR的表达为对照组的2 7 0 4% ;见明显的凋亡小体 ;琼脂糖凝胶电泳可见典型的“阶梯状”条带 ,流式细胞术出现凋亡峰。马鞭草C部位已确定对绒癌细胞具有明显的促凋亡作用 ,故而该药有望能成为治疗绒毛膜癌或逆转多药耐药的有效药物     

蛋白激酶C在人绒毛膜癌JAR细胞中作用的研究

研究蛋白激酶C对人绒毛膜癌JAR细胞分泌人绒毛膜促性腺激素 (hCG)的影响 ,探讨PKC在调控JAR细胞hCG分泌中的作用。不同浓度的PKC激动剂 phorbol 12 -myristrate 13 -acetate(PMA )急性和慢性刺激、PKC抑制剂chelerythrinechlorine(CHEL)分别作用JAR细胞 ,测定hCG分泌量变化和细胞内磷酸化丝裂原激活的蛋白激酶 (mitogen -activatedproteinkinase ,MAPK)的改变。结果显示不同浓度PMA急性刺激时 ,抑制JAR细胞hCG分泌 ,在 2 0 0nmol/L时 ,其抑制作用最强 ;PMA慢性刺激时 ,JAR细胞hCG分泌量增加 ,在 2 0 0nmol/L时 ,其作用最强。CHEL作用JAR细胞时 ,hCG分泌量升高 ,在 60 0nmol/L时 ,其作用最强。对照组及各实验组都有活性的MAPK的表达 ,与对照组相比 ,PMA慢性刺激组、CHEL组MAPK磷酸化水平升高 ;PMA急性刺激组MAPK磷酸化水平降低。PKC参与调节JAR细胞hCG的分泌 ,活性升高时 ,下调MAPK磷酸化 ,使JAR细胞hCG分泌减少 ,而活性降低时 ,增强MAPK磷酸化 ,JAR细胞hCG分泌量增加     

马鞭草提取液C部位对人绒毛膜癌JAR细胞增殖的影响

目的：探讨马鞭草(Verbena officinalis)提取液C部位对人绒毛膜癌JAR细胞增殖的影响。方法：通过相差显微镜观察活细胞贴壁程度、细胞形态改变；MTT法测定不同浓度C部位在不同时段对JAR细胞的增殖抑制率，结果用方差分析进行统计学检验：流式细胞仪检测细胞阻滞周期。结果：马鞭草C部位可引起细胞数目减少并萎缩；细胞增殖抑制率随着时间的延长和浓度的增加逐渐增大．72h的40mg／ml剂量组抑制最明显，抑制率为65％；流式细胞仪检测结果显示阻滞周期在GJM期之间。结论：马鞭草提取液C部位对人绒毛膜癌JAR细胞增殖有明显抑制作用，其作用机制有待进一步探索。     

5-氟尿嘧啶对人绒毛膜癌细胞株JAR作用的观察

目的:观察5-氟尿嘧啶(5-Fu)对人绒癌细胞株JAR的体外作用。方法:采用MTT比色分析法,观察20、50、100μg/L 3种剂量的5-Fu对人绒癌细胞株JAR细胞的生长抑制情况;通过免疫组化法检测3种浓度5-Fu作用于JAR细胞后增殖细胞核抗原Ki67的表达情况。结果:15-Fu能抑制JAR细胞的生长,并在一定时间及浓度范围内,表现出剂量依赖性,72h内5-Fu浓度在25~100μg/L时抑制作用比较明显;2100μg/L的5-Fu作用于JAR细胞72h后细胞抑制率达73.19%,作用后增殖细胞核抗原Ki67明显下降。结论:15-Fu对人绒癌细胞株JAR细胞的生长具有抑制作用,72h内呈剂量依赖性;25-Fu抑制了人绒癌细胞株JAR细胞的增殖,细胞可能被阻滞于G0及G1期。     

佛波酯对促进人绒毛膜癌AJR细胞侵入机制的研究

目的：探讨佛波酯（PMA）是否通过改变细胞因子的生成而影响滋养细胞的侵袭性。方法：用反转录聚合酶链反应（RT－PCR）检测人绒毛膜癌JAR细胞与侵袭力调节有关的多种细胞因子基因表达的变化。结果：JAR细胞表达肝细胞生长因子（HGF）、胰岛素样生长因子Ⅱ（IGF－Ⅱ）、转化生长因子β（TGF-β）、白细胞介素1β（IL－1β）和血管内皮生长因子（VEGF），且VEGF的表达以VEGF121和VEGF165为主，而不表达IGF－I。100nmol/L PMA处理细胞24h可显著上调IL－1β、HGF、IGFⅡ mRNA的表达，同时抑制TGF－β2、TGF－β3 mRNA的表达，而对TGF－β1、VEGF mRNA的表达未见有明显变化。结论：HGF、IL－1β、IGF－Ⅱ对滋养细胞的侵入起促进作用，而TGF－β2、TGF－β3具有抑制效应。说明丝裂原PMA可能通过调节这几种细胞因子的自分泌机制，从而增强JAR细胞的侵袭能力。     

马鞭草醇提液对绒毛膜癌JAR细胞增殖的影响

目的　探讨马鞭草醇提液 (ae Vo)对绒毛膜癌 JAR细胞株的影响。方法　 JAR细胞株与人肝癌 SMMC- 772 1细胞株及人胚肺 2倍体成纤维细胞株 (2 BS)体外培养比较 ,应用溴化甲噻唑基四唑 (MTT)法、荧光法测得细胞相对生长曲线及增殖抑制率。结果　 ae Vo对 JAR细胞有明显抑制作用 ,于加药后 4 8h,增殖抑制率为 (71.9± 4 .0 ) %及 (69.6± 2 .0 ) % ,MTT法及荧光法所测结果无明显差异 (P>0 .0 5 )。 ae Vo对 SMMC- 772 1细胞及 2 BS细胞无明显影响。结论　 ae Vo具有抗绒癌作用 ,且作用具有特异性 ,有关机制需进一步研究     

丁酸钠对胃癌细胞系生长的抑制作用及其机制

目的:观察丁酸钠(NaB)对体外培养的胃癌细胞系BGC823的生长抑制作用,并进一步探讨其作用机制。方法:应用MTT法检测细胞增殖活性;流式细胞仪检测细胞周期分布;Annexin V-FITC染色法检测细胞凋亡率。结果:不同浓度NaB处理胃癌细胞BGC82324~96h后,细胞增殖显著受到抑制,并呈浓度(P<0.01)及时间(P<0.05)依赖性;1.0,3.0,5.0mmol/L NaB处理72h后,BGC823细胞G0/G1期细胞数量显著增加,S期细胞数量显著降低(P<0.01);各浓度组细胞凋亡率均显著增加(P<0.01)。结论:NaB对胃癌细胞系BGC823具有生长抑制作用,其机制与阻滞细胞周期及诱导凋亡有关。     

马鞭草C部位对人绒癌JAR细胞hCG分泌的影响和作用机制

目的:研究马鞭草C部位对绒毛膜癌JAR细胞绒毛膜促性腺激素(hCG)分泌的影响及其作用机制.方法:不同浓度马鞭草C部位(马鞭草C部位终浓度:10,2040 mg/ml)作用于体外培养的JAR细胞,分别于第12,24,48,72 h取上清液,采用β-hCG单克隆抗体酶免定量法检测hCG含量;琼脂糖凝胶电泳观察用药后细胞DNA断裂情况;流式细胞仪检测细胞周期分布及细胞凋亡率;透射电镜观察细胞超微结构的变化.结果:马鞭草C部位对绒毛膜癌JAR细胞分泌hCG产生明显的抑制作用,呈时间和剂量相关性.在该药物作用下,细胞DNA琼脂糖凝胶电泳出现\     

丁酸钠诱导人脑胶质瘤细胞系SHG-44凋亡的初步探讨

目的:研究短链脂肪酸盐丁酸钠对培养人脑胶质瘤细胞系SHG-44的增殖抑制和凋亡诱导.方法:通过细胞体外培养的方法,以2mmol/和4mmol/L丁酸钠处理SHG-44细胞,用MTT比色试验和PCNA免疫组化染色观察细胞增殖,电子显微镜、线粒体跨膜电位(△ψm)检测以鉴定细胞凋亡.结果:①SHG-44细胞增殖受到明显抑制,PCNA表达减弱;②4mmol/L丁酸钠明显诱导SHG-44细胞凋亡,电镜下可见细胞膜内陷自行分割包裹碎裂的核片段和部分胞浆,脱离细胞主体,形成凋亡小体;罗丹明123染色示凋亡细胞△ψm下降.结论:丁酸钠能抑制人脑胶质瘤SHG-44细胞的增殖,4mmol/L丁酸钠能诱导SHG-44细胞发生线粒体途径凋亡.     

丁酸钠联合电离辐射对肺癌A549细胞凋亡的影响及其机制

研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDACi）丁酸钠（NaBt）单独或联合X射线照射对人非小细胞肺癌（NSCLC）A549细胞凋亡的影响,并阐明其作用机制。     

Growth-inhibiting and apoptosis-inducing effects of Tanshinone II A on human gastric carcinoma cells

Summary To explore the effects of Tanshinone II A on the proliferation, apoptosis and gene expression of p53 and bcl-2 in human gastric carcinoma MKN-45 cells. Cell count and MTT assay were used to study the proliferation-inhibiting effect of Tanshinone II A on MKN-45 cells. The effect of Tanshinone II A on the cell cycle and apoptosis of MKN-45 cells were examined by propidium iodide (PI) staining and flow cytometry. Semi-quantitative RT-PCR was used to further verify the expression of p53 and bcl-2 gene after exposure to Tanshinone A in MKN-45 cells. The results showed that Tanshinone A significantly inhibited the growth and proliferation of MKN-45 cells in a dose-and time-dependent manner (P<0.05). Tanshinone A arrested MKN-45 cells in G₂/M phase which led to an obvious accumulation of G₂/M phase cells while decreased number of G₀/G₁ phase cells. This resulted in apoptosis of MKN-45 cells and the apoptosis rate was as high as 43.91% after treatment with 2.0 μg/mL Tanshinone II A for 96 h. It was also found that Tanshinone II A up-regulated expression of p53 gene and down-regulated expression of bcl-2 gene. The cytostatic and antiproliferative effect of Tanshinone II A makes it a promising anticancer agent for the treatment of gastric carcinoma.     

外源性hCG对子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长的影响

目的 观察外源性hCG对子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长的影响,探讨hCG在子宫内膜癌治疗中的意义.方法 建立子宫内膜癌裸鼠移植瘤模型,用hCG对裸鼠进行皮下注射,计算成瘤率,称量瘤体质量;并对瘤组织进行HE染色,观察肿瘤瘤组织形态及测量坏死面积;Masson染色观察瘤组织纤维化;免疫组织化学染色观察瘤组织Ki-67表达.结果 两组裸鼠成瘤率均为100%(10/10);与对照组相比,hCG处理组裸鼠移植瘤瘤质量有增高趋势;HE染色可见hCG处理组子宫内膜癌细胞呈腺腔样排列,瘤组织内坏死面积较少而范围较小;Masson染色见hCG处理组胶原纤维粗大而致密,而NS组胶原纤维较纤细而稀疏;Ki-67在两组表达无明显差别.结论 外源性hCG在裸鼠体内实验可促进子宫内膜癌细胞的分化.     

亚砷酸对人肝癌细胞凋亡及Caspase-3活性的影响

目的探讨亚砷酸对人肝癌细胞凋亡及半胱氨酸蛋白酶（Caspase）-3活性的影响。方法采用细胞培养技术,以肝癌细胞系SMMC7721为靶细胞,以不同浓度的药物处理细胞72h后,利用WST-8法测定亚砷酸对细胞增殖的影响;利用荧光染料Hoechst33258染色,荧光显微镜观察细胞核碎片;以流式细胞仪分析细胞周期的变化;采用CaspasebE色法检测Caspase-3活性。结果亚砷酸（10umol／L）对SMMC7721细胞有明显抑制作用,可诱导SMMC7721细胞凋亡,并能增强Caspase-3基因的活性。结论亚砷酸能够诱导SMMC7721细胞凋亡,其机制与Caspase-3依赖性凋亡调节信号通路有关。     

奥沙利铂对 K562细胞体外生长的影响

目的:观察奥沙利铂对人白血病K562细胞的作用.方法:检测奥沙利铂对K562细胞作用的时间效应和剂量效应,在电镜下观察奥沙利铂作用后细胞形态变化;用流式细胞仪分析细胞周期的改变.结果:随着作用时间及药物浓度的增加,奥沙利铂对K562细胞的增殖抑制作用就越明显.0.016mmol/L奥沙利铂作用72h,K562细胞生长抑制率达85%,形态学及流式细胞仪分析显示G2/M期阻滞和细胞凋亡.结论:奥沙利铂诱发的人白血病细胞的凋亡与细胞分裂期阻滞密切相关.     

Survivin反义寡核苷酸对人结肠癌细胞HT29增殖和凋亡的影响

[目的]观察survivin反义寡核苷酸(ASODN)对HT29细胞增殖和凋亡的影响。[方法]针对sur- vivin基因序列设计合成survivin反义寡核苷酸并通过脂质体将其转染至HT29细胞中。噻唑蓝(MTT)法观察survivin ASODN对HT29细胞的细胞毒作用,测定IC_(50);Hoechst33342/PI双荧光染色后,观察转染survivin A- SODN后HT29细胞核变化;流式细胞仪检测细胞周期。[结果]200、400、600、800、1 000及1 200 nmol/L survivin ASODN分别处理HT29细胞44 h后,Ic_(50)值为1 000 nmol/L。200、400、600、800和1 200 nmol/L组抑制率分别为(12.38±7.96)%、(22.30±4.49)%、(26.51 4±3.08)%、(38.90±3.66)%和(63.97±4.50)%。1 000 nmol/L survivin ASODN处理HT29细胞36 h后,经Hoechest33342/PI双荧光染色可观察到染色质高度浓缩、边缘化,凝集成明亮的团块。流式细胞仪检测1 000 nmol/L survivin ASODN处理HT29细胞36 h后,G_2期细胞显著增多。[结论]Survivin ASODN可显著抑制HT29细胞增殖,诱导其凋亡。Survivin靶向治疗可能成为结肠癌综合治疗的一种重要方法。     

Growth-inhibiting and Apoptosis-inducing Effects of Tanshinone Ⅱ A on Human Gastric Carcinoma Cells

To explore the effects of Tanshinone ⅡA on the proliferation, apoptosis and gene ex- pression of p53 and bcl-2 in human gastric carcinoma MKN-45 cells. Cell count and MTT assay were used to study the proliferation-inhibiting effect of Tanshinone ⅡA on MKN-45 cells. The effect of Tanshinone ⅡA on the cell cycle and apoptosis of MKN-45 cells were examined by propidium io- dide (PI) staining and flow cytometry. Semi-quantitative RT-PCR was used to further verify the ex- pression of p53 and bcl-2 gene after exposure to Tanshinone ⅡA in MKN-45 cells. The results showed that Tanshinone ⅡA significantly inhibited the growth and proliferation of MKN-45 cells in a dose- and time-dependent manner (P<0.05). Tanshinone ⅡA arrested MKN-45 cells in G2/M phase which led to an obvious accumulation of G2/M phase cells while decreased number of G0/G1 phase cells. This resulted in apoptosis of MKN-45 cells and the apoptosis rate was as high as 43.91% after treatment with 2.0 μg/mL TanshinoneⅡA for 96 h. It was also found that Tanshinone ⅡA up-regulated expression of p53 gene and down-regulated expression of bcl-2 gene. The cytostatic and antiproliferative effect of Tanshinone ⅡA makes it a promising anticancer agent for the treatment of gastric carcinoma.     

鳕鱼皮寡肽对人胃癌细胞BGC-823增殖影响的实验研究

目的探讨鳕鱼皮寡肽（codskinofoligopeptide,CSO）对人胃癌细胞（BGC-823）增殖的影响。方法用不同浓度（20、40、60、80mg/ml）CSO处理体外培养的BGC-823,72h后显微镜下观察细胞生长情况;分别于24、48、72h,应用CCK-8法检测细胞增殖情况并计算50%细胞抑制率（IC50）;处理后24h采用流式细胞术测定细胞凋亡及细胞周期的改变情况。结果与对照组相比,经CSO处理后,镜下BGC-823数目减少。CCK-8检测结果显示,BGC-823数目减少呈剂量、时间依懒性（均P＜0.05）,并且CSO对BGC-823作用24、48和72h的IC50分别是87.34、68.14、44.55mg/ml。对照组BGC-823存活率为（86.62±10.32）%,60mg/ml组BGC-823存活率为（24.18±6.59）%,差异有统计学意义（P＜0.05）;对照组BGC-823晚期凋亡率为（1.81±0.35）%,60mg/ml组BGC-823晚期凋亡率为（55.84±5.89）%,差异有统计学意义（P＜0.05）。在G1期,对照组BGC-823细胞分布为（61.13±10.32）%,60mg/ml组BGC-823细胞分布为（79.74±10.21）%,差异有统计学意义（P＜0.05）;在S期,对照组BGC-823细胞分布为（23.04±8.64）%,60mg/ml组BGC-823细胞分布为（10.42±5.36）%,差异有统计学意义（P＜0.05）;在G2期,20mg/ml组BGC-823细胞分布为（9.96±2.68）%,40mg/ml组BGC-823细胞分布为（6.93±1.25）%,60mg/ml组BGC-823细胞分布为（9.84±3.79）%,与对照组BGC-823细胞分布（15.83±5.89）%相比,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论CSO可阻滞BGC-823生长周期,促进BGC-823凋亡,抑制增殖,从而抑制肿瘤细胞的生长。     

苦参碱对人宫颈癌Hela细胞的增殖抑制作用研究

目的探讨苦参碱对人宫颈癌细胞株Hela细胞体外增殖的抑制作用。方法选用人宫颈癌Hela细胞进行体外培养,以0.25～4.0mg/ml的苦参碱分别处理Hela细胞24～72h后,用MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,倒置显微镜和透射电镜进行形态学观察。结果苦参碱对Hela细胞有抑制作用,并呈剂量和时间依赖性;流式细胞仪检测到细胞在苦参碱作用后,细胞凋亡率增加;透射电镜观察发现部分细胞发生凋亡早期改变。结论苦参碱对人宫颈癌Hela细胞具有明显抑制作用,诱导细胞凋亡可能是其机制之一。