MTX对正常人表皮角质形成细胞体外培养增殖的作用及影响

目的　探讨甲氨蝶呤 (MTX)对表皮角质形成细胞的作用及影响 ,进而了解MTX治疗银屑病的机理。方法　将人体离体角质形成细胞培养、分离传代并测定其自然生长曲线作对照 ;将不同浓度MTX与角质形成细胞混合培养 ,测定在MTX作用下的角质形成细胞生长曲线 ,比较MTX对细胞生长的影响。结果　MTX对角质形成细胞的体外生长具有明显的抑制作用 ,不仅明显抑制角质形成细胞的正常生长 ,而且可以促使细胞的提前凋亡。结论　MTX通过抑制角质形成细胞的DNA及RNA合成调节细胞的生长代谢及自然凋亡过程 ,尤其对银屑病患者生长过度活跃的表皮角质形成细胞产生调节作用 ,使细胞的过度生长受到抑制 ,保持角质形成细胞的自然生长平衡     

中药凉血活血汤对角质形成细胞增殖的影响

凉血活血汤是张志礼教授治疗寻常型进行期银屑病的方剂,临床证明疗效较好^[1]。为进一步探讨该方剂治疗银屑病的机理,我们观察了凉血活血汤对角质形成细胞(KC)增殖的影响。     

角质形成细胞生长因子与银屑病的关系

角质形成细胞生长因子是近年来发现的有着重要生物功能的生长因子,它属于成纤维细胞生长因子家族,由成纤维细胞产生。角质形成细胞生长因子可刺激角质形成细胞的增生、分化、移行,促进上皮细胞的再生、增厚,对银屑病的发病机制及其治疗可能有一定的启示。本文就角质形成细胞生长长因子和的生物学功能及其与角质形成细胞及银屑病的关系做一定综述。     

角质形成细胞生长因子对HaCaT细胞增殖的影响

目的:研究角质形成细胞生长因子(KGF)对HaCaT细胞增殖的影响,探讨KGF与银屑病表皮过度增殖的关系。方法:利用HaCaT细胞体外培养,采用KGF为增殖诱导剂,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测不同浓度的KGF对HaCaT细胞增殖率的影响;检测KGF对细胞生长曲线及细胞集落形成的影响。结果:MTT实验表明,KGF可刺激HaCaT细胞增殖,刺激作用呈浓度依赖性(r=0.981,P<0.05);10 ng/mL KGF作用下HaCaT细胞的生长速度较对照组明显加快(P<0.05),集落形成率较对照组增加(P<0.05),且细胞呈明显的增殖形态,形成的集落较大,集落内细胞多呈星状,胞内染色质丰富。结论:KGF具有显著的促HaCaT细胞增殖作用,银屑病皮损区域KGF表达增加可能是引起表皮过度增殖的重要致病因子。     

角质形成细胞生长因子与银屑病的关系

角质形成细胞生长因子是近年来发现的有着重要生物学功能的生长因子 ,它属于成纤维细胞生长因子家族 ,由成纤维细胞产生。角质形成细胞生长因子可刺激角质形成细胞的增生、分化、移行 ,促进上皮细胞的再生、增厚 ,对银屑病的发病机制及其治疗可能有一定的启示。本文就角质形成细胞生长因子的生物学功能及其与角质形成细胞及银屑病的关系做一综述。     

体外角质形成细胞生长DNA合成动态观测-银屑病细胞动力学探讨

目的 观察银屑病角质形成细胞体外生长合成,探讨其病因。方法 应用体外角质形成细胞培养技术对１８例银屑病患者受累、未受累的表皮角质形成细胞进行了培养,并将其角朊细胞在孵育期中的＾３Ｈ－ＴＤＲ掺入率及标记指数与正常对照做了比较。结果 银屑病病人受累,未受累表皮角质形成细胞＾３Ｈ－ＴＤＲ掺入率在孵育期的第３－４天升高,与正常人相比均有显著差异。     

角质形成细胞的体外培养及NF-κB的表达

目的:检测体外培养角质形成细胞的核因子(NF-κB)的表达,以探讨NF-κB在银屑病炎症反应中的作用.方法:采用无血清培养法获得角质形成细胞,与银屑病患者外周血单一核细胞(PBMC)混合培养,利用流式细胞仪检测NF-κB表达.结果:角质形成细胞在5天可见明显的集落,10天左右可长满单层.与正常对照组相比,银屑病患者混合培养细胞较对照角质形成细胞NF-κB表达显著增高.结论:NF-κB活性增强是银屑病炎症反应的重要因素之一.     

角质形成细胞的体外培养及NF—κB的表达

目的：检测体外培养角质形成细胞的核因子（NF—κB）的表达,以探讨NF—κB在银屑病炎症反应中的作用。方法：采用无血清培养法获得角质形成细胞,与银屑病患者外周血单一核细胞（PBMC）混合培养,利用流式细胞仪检测NF-κB表达。结果：角质形成细胞在5天可见明显的集落,10天左右可长满单层。与正常对照组相比,银屑病患者混合培养细胞较对照角质形成细胞NF-κB表达显著增高。结论：NF—κB活性增强是银屑病炎症反应的重要因素之一。     

一氧化氮、角质形成细胞和银屑病

一氧化氮是一种多效性生物气体分子 ,在皮肤组织的生理和病理过程中均具有重要作用。银屑病皮损区释放的一氧化氮量和诱导型一氧化氮合酶的表达均高于非皮损区和正常皮肤 ,其在银屑病中的作用机理仍不清楚。现综述一氧化氮在角质形成细胞凋亡、增生分化和基因表达调控的研究进展及其在银屑病中的可能作用机制     

紫草素、靛玉红对角质形成细胞凋亡的影响

目的：探讨凉血活血胶囊(liangcuehuoxue capsule)治疗银屑病的机制。方法：采用流式细胞仪分析细胞亚二倍体含量和Annexin V法分析细胞PS膜外化含量，观察凉血活血胶囊及其主要组成药物的主要成分紫草素(shikomn)、靛玉红(indirubin)对角质形成细胞凋亡的影响。结果：一定浓度的凉血活血胶囊及紫草素、靛玉红可诱导角质形成细胞凋亡。结论：诱导细胞凋亡可能是中药凉血活血胶囊治疗银屑病的作用机制之一。     

复方甘草酸苷对体外培养的角质形成细胞的作用

目的观察复方甘草酸苷(CG)对角质形成细胞表达CXCR2及分泌TGF-β1的影响。方法不同浓度CG处理人角质形成细胞株HaCat,MTT法检测CG对HaCat的增殖抑制作用,流式细胞仪分析CG处理后的HaCat细胞的CXCR2表达。培养正常人表皮角质形成细胞,观察CG处理后,培养液中TGF-β1含量的变化。结果50~200μl/m l的CG抑制HaCat细胞的增殖,干预24 h即可见到明显的抑制作用,CXCR2的表达明显低于正常对照组。正常原代角质形成细胞的培养上清中TGF-β1分泌增加。结论50~200μl/m l CG促进素角质形成细胞表达CXCR2和TGF-β1分泌,抑制角质形成细胞的增殖。     

二丁酰环磷腺苷钙联合阿维A治疗寻常型银屑病的疗效及对血cAMP和cGMP的影响

目的：观察二丁酰环磷腺苷钙联合阿维A治疗寻常型银屑病的疗效及对血cAMP和cGMP的含量影响。方法：将64例寻常型银屑病患者随机分为治疗组（32例）和对照组（32例）,治疗组予以二丁酰环磷腺苷钙60mg加入5%葡萄糖注射液250 mL中静滴,1次/天,阿维A胶囊10 mg口服,3次/天,对照组单用阿维A胶囊。并对两组治疗前后血浆中cAMP和cGMP的含量进行测定。结果：治疗组总有效率83.4%,对照组总有效率54.3%,两组综合疗效及治疗后PASI评分比较差异有统计学意义（P〈0.05）;治疗后两组cAMP、cGMP含量比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：采用二丁酰环磷腺苷钙联合阿维A治疗寻常型银屑病效果满意,是一种可供临床选择的治疗方案。     

环磷腺苷治疗寻常性银屑病临床疗效观察

目的：观察环磷腺苷治疗寻常性银屑病的疗效。方法：将70例寻常性银屑病患者随机分为两组,试验组给予环磷腺苷60mg／d静脉滴注,对照组给予复方甘草酸苷40ml／d静脉滴注治疗,2周为1个疗程。结果：2个疗程后环磷腺苷治疗寻常性银屑病的有效率为61．1％,复方甘草酸苷治疗银屑病的有效率为55．8％,两者近期疗效比较差异无统计学意义（P〉0．05）;3个月后试验组有效率为77．8％,对照组有效率为44．1％,两组差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：环磷腺苷治疗寻常性银屑病的远期疗效优于复方甘草酸苷。     

齐墩果酸对阿霉素诱导的培养人皮肤角质形成细胞凋亡的影响

目的探讨齐墩果酸对阿霉素诱导的培养人皮肤角质形成细胞凋亡的影响。方法用MTT法通过比色分析测定吸光度(A)值,检测不同剂量齐墩果酸和阿霉素给药对角质形成细胞增殖的影响,用流式细胞仪检测细胞凋亡。结果阿霉素抑制体外培养的人皮肤角质形成细胞增殖,先给予齐墩果酸处理细胞,然后给予阿霉素,齐墩果酸升高A值(P<0.05),降低细胞凋亡率(P<0.05)。结论先行给予适当剂量齐墩果酸处理细胞,能一定程度减轻阿霉素对细胞的损伤,表现出对阿霉素致凋亡的保护作用。     

rhFGF-7对体外培养人皮肤角质形成细胞增殖的影响

目的建立一种人皮肤角质形成细胞分离和培养的方法,研究重组人成纤维细胞生长因子7(rhFGF-7)对人皮肤角质形成细胞增殖的影响。方法取环切术后包皮,分别用胰酶和dispaseⅡ酶消化法分离表皮,用无血清培养基进行无滋养层培养,采用免疫细胞化学方法对培养的细胞进行鉴定,并用细胞计数法测定细胞的生长曲线,MTT法检测rhFGF-7对人皮肤角质形成细胞增殖的影响。结果与胰酶消化分离表皮相比,dispaseⅡ酶消化获得的表皮,其细胞贴壁率高,增殖速度快,且成纤维细胞污染少;荧光显微镜下细胞胞浆呈黄绿色,为角蛋白阳性染色;培养的角质形成细胞可持续增殖至第8代,10ng/mL的rhFGF-7促角质形成细胞增殖作用最显著。结论所建立的人皮肤角质形成细胞分离和培养方法,可获得高纯度的人皮肤角质形成细胞,rhFGF-7可促进体外培养人皮肤角质形成细胞的增殖。     

凉血消沱汤对角质形成细胞凋亡的影响

目的研究自拟方剂凉血消疕汤对角质形成细胞株HaCaT的增殖凋亡及细胞周期的影响作用。方法用MTT法和Annexin-V/PI双标流式细胞术分别检测自拟方剂凉血消疕汤的水提取液对HaCaT细胞株增殖、凋亡的影响;PI单标流式细胞术测该方的水提取液对HaCaT细胞株细胞DNA分布的影响。结果自拟方剂凉血消疕汤对角质形成细胞株HaCaT具有明显的增殖抑制作用,其抑制增殖作用呈量效关系。凉血消疕汤作用48h可诱导HaCaT细胞凋亡,10mg/mL作用48h时HaCaT细胞凋亡率达(31.77±5.88)%。凉血消疕汤处理组HaCaT细胞株细胞周期发生变化,细胞周期G_1期增加,S期缩短。结论自拟方剂凉血消疕汤可通过调控细胞周期进程、诱导细胞凋亡而有效抑制HaCaT细胞株细胞增殖。     

反义p53寡核苷酸对阿霉素诱导的培养人皮肤角质形成细胞凋亡的影响

目的 探讨反义p53寡核苷酸(ODN)对阿霉素诱导的培养人皮肤角质形成细胞凋亡的影响.方法 用MTT法检测不同浓度脂质体和0.5mg/L反义p53 ODN转染角质形成细胞后对2mg/L阿霉素抑制细胞增殖的影响;RT-PCR方法 测定p53 mRNA水平的变化;用流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 阿霉素抑制体外培养的人皮肤角...     

常见皮肤癣菌代谢产物体外对人角质形成细胞免疫活性的影响

目的探讨常见致病真菌代谢产物对人角质形成细胞(HKC)产生细胞因子的影响。方法红色毛癣菌、须癣毛癣菌、絮状表皮癣菌、犬小孢子菌和白念珠菌常规培养,提取培养上清液后按不同稀释度加入体外培养的HKC中,24h后观察细胞形态变化,ELISA法检测细胞上清液IL-8,IL-6及TNF-α的浓度。结果5个组均使细胞形态发生变化。在红色毛癣菌、白念珠菌、须癣毛癣菌组1∶10,犬小孢子菌组1∶1时,HKC上清液中的IL-8及IL-6均高于空白对照(P<0.01)。结论体外培养的真菌培养上清液对HKC的活性有明显的影响。浓度较高时可直接导致HKC的死亡;浓度低时可明显刺激HKC增加细胞因子的产生,其中红色毛癣菌作用最强。     

白消一号方对黑素瘤细胞与角质形成细胞混合培养模型中黑素合成的影响

目的 体外构建黑素瘤细胞与角质形成细胞直接接触的混合培养模型,观察白消一号方对此模型中黑素瘤细胞的影响,探讨其治疗白癜风的药理作用.方法 分别培养角质形成细胞、黑素瘤细胞;体外构建黑素瘤细胞与角质形成细胞直接接触的混合培养模型,大鼠中药灌胃后不同时间取血清加入此模型中,用MTT法、多巴氧化法、及NaOH法.检测含药血清对黑素瘤细胞增殖、酪氧酸酶活性以及黑素合成的影响.结果 含药血清可促进黑素瘤细胞增殖,上调酪氨酸酶活性.增加黑素合成.结论 成功构建了黑素瘤细胞与角质形成细胞直接接触的混合培养模型,白消一号方作用于此模型对黑素瘤细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑素的合成均呈促进作用.