人细小病毒B19感染与习惯性流产的关系探讨

目的:探讨人细小病毒B 19(Human parvovirus B 19,HPVB19)感染与习惯性流产(Recurrent pregnancy loss,RPL)的关系。方法:建立人细小病毒B 19巢式聚合酶链反应(Nested Polymerase chain reaction,NestedPCR)检测方法,采集习惯性流产孕妇流产组织和正常妊娠人工流产组织,用巢式PCR方法检测流产组织中HPV B 19 DNA。结果:56例RPL孕妇流产组织中HPVB 19 DNA有16例阳性,阳性率28.6%,50例正常妊娠人工流产组织中HPVB19 DNA有2例阳性,阳性率4.0%,2组HPV B19感染率有显著性差异(χ2=12.38,P<0.01)。流产次数与HPV DNA阳性率无显著性关系(χ2=0.03,P>0.05)。结论:RPL孕妇HPV B 19感染率显著高于正常孕妇,HPV B 19感染可能导致习惯性流产的发生。     

糖尿病患者活动性人巨细胞病毒感染监测及临床意义

目的 临测糖尿病患者活动性人巨细胞病毒(HCMV)感染,并探讨其临床意义.方法 在HCMV pp65基因内自行设计一对引物,建立RT-PCR检测727例糖尿病患者及230名健康献血者外周血白细胞HCMVpp65 mRNA转录水平,同时应用抗体捕获酶联免疫法检测HCMV pp65-IgM.结果 糖尿病患者HCMV-IgM及mRNA阳性率分别为11.14%和16.64%,与对照组(0.87%、2.17%)相比均差异有统计学意义(P<0.01);比较不同年龄段HCMV感染率,结果发现发病年龄<30岁的患者中HCMV-mRNA阳性率明显高于其他年龄组,从病程来看,病程<1年的糖尿病患者HCMV-mRNA阳性检出率最高.结论 糖尿病患者易发生活动性的HCMV感染,RT-PCR检测HCMV pp65和抗体捕获HCMV pp65特异性IgM可快速有效地确诊HCMV活动性感染的发生.     

糖尿病患者外周血白细胞HCMV pp65基因表达状态研究

目的 建立检测人巨细胞病毒（HCMV）感染的聚合酶链反应／逆转录-聚合酶链反应（PCR／RT-PCR）方法，并探讨糖尿病与HCMV感染的关系。方法 在HCMV65kD低基质磷蛋白基因（pp65）内设计一对引物，建立PCR／RT-PCR法检测727例糖尿病患者及230名健康体检人员（对照组）外周血白细胞HCMVpp65DNA及其mRNA转录水平，同时应用间接免疫荧光法分析外周血白细胞HCMVPP65抗原。结果 糖尿病患者HCMVpp65DNA，mRNA及PP65抗原阳性率分别为36．04％，16．64％和10．04％，与对照组4．78％，2．17％及1．30％相比，差异均有显著性（P〈0．01）。发病年龄〈30岁患者组中HCMVpp65mRNA和PP65抗原阳性率明显高于其他年龄组（P〈0．05）。病程〈1年的糖尿病患者HCMVpp65mRNA和PP65抗原阳性检出率最高，分别为27．54％与15．94％；而HCMVpp65DNA则相反，其最高检出率分别是年龄≥60岁（42．19％）或病程≥15年患者（44．68％）。结论 糖尿病患者易发生活动性HCMV感染，外周血白细胞pp65DNA，mRNA及PP65抗原检测是临床快速诊断HCMV感染的有效手段，联合使用能更有效地提高诊断水平。     

人巨细胞病毒被膜磷蛋白pp65的检测及其应用

目的:建立一种快速简便诊断肾移植受者人巨细胞病毒(HCMV)活动性感染的方法.方法:运用免疫组织化学的催化信号扩增法检测外周血白细胞中的人巨细胞病毒被膜磷蛋白pp65,巨细胞病毒信使核糖核酸(pp67-mRNA)检.测法作比较.结果:检测105例肾移植受者中,HCMVpp65抗原阳性45例,pp67-mRNA检测阳性40例,pp65抗原阳性细胞数为(70±43)个/2×105个WBC,而有症状的CMV病25例,抗原阳性细胞指数为(85±44)个/2×105个WBC.对照组100名健康人,pp65抗原检测全为阴性.pp65的敏感性、特异性分别是100%、88.9%.结论i该法敏感,简便,可作为肾移植术后HCMV病的早期诊断并可指导抗病毒治疗.     

应用荧光定量PCR技术检测小儿尿液中人巨细胞病毒

目的：探讨荧光定量聚合酶链式反应(FQ—PCR)方法检测尿液中人巨细胞病毒(HCMV)对儿童HCMV活动性感染的检测价值。方法：对收集的175份临床标本分别用FQ—PCR方法及低基质磷酸化蛋白(pp65)抗原血症检测方法进行平行检测比较。结果：71例临床患者尿液FQ—PCR检测阳性59例；血液pp65抗原检测阳性53例。尿液中HCMV DNA检测结果与HCMVpp65抗原血症的一致性为84．2％。结论：FQ—PCR检测敏感性要高于pp65抗原血症检测，可以有效提示体内病毒的活跃程度，具有良好的应用价值。     

贫困山区妊娠妇女HCMV感染与血清IL-8的关系

目的 研究贫困山区孕期人巨细胞病毒感染状况,探讨苓与白细胞介素8 (Interleukin-8,IL-8)的关系.方法 用ELISA和PCR方法 检测贫困山区323例正常孕妇外周血特异性 HCMV IgM、IgG抗体及HCMV DNA,对其中27例孕期HCMV 活动性感染者及48例孕期无HCMV活动性感染者进行随访,检测产后乳汁及新生儿尿液HCMV DNA;并采用双抗体夹心ELISA法检测孕妇及乳母外周血中IL-8水平.结果 孕妇HCMV活动性感染率为8.36%,宫内传播率为25.93%,孕期CMV活动性感染者及宫内传播者其外周血IL-8水平显著高于未感染者(P<0.05),乳汁排毒者和未排毒者间血清IL-8水平没有明显变化.结论 近年来贫困山区孕期HCMV活动性感染率有所下降,但较国内外报道仍高;IL-8在孕期活动性HCMV感染及宫内感染中可能起着重要的免疫调节作用.     

应用原位免疫聚合酶链反应检测活动性巨细胞病毒感染

目的建立一种新的诊断活动性巨细胞病毒感染的方法。方法应用原位免疫聚合酶链反应(PCR)技术检测早、中、晚期孕妇宫颈脱落细胞中巨细胞病毒抗原。结果119例受检标本中有16例出现人巨细胞病毒(HCMV)抗原阳性,孕早、中、晚期孕妇活动性HCMV感染率分别为：9.37%、11.90%、17.77%;检出的HCMV抗原阳性细胞数为2～38／5万宫颈脱落细胞,平均8.5／5万细胞。常规ABC法平行检测,原位免疫PCR法检测敏感性高于ABC法。结论原位免疫PCR方法敏感性高、特异性强,可检出微量HCMV抗原,为临床诊断活动性HCMV感染提供一种新方法。     

pp65和gB抗原检测在造血干细胞移植后人巨细胞病毒感染中的临床价值

目的通过对患者人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)磷蛋白65(Phosphoprotein 65, pp65)和包膜糖蛋白B (Glycoprotein B,gB)的研究,评价其在造血干细胞移植(Hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)后HCMV感染中的临床意义。方法回顾性分析2010年11月-2015年7月于浙江大学医学院附属第一医院行HSCT的17例血液病患者的临床资料,包括患者术后24个月内检测的HCMV pp65、gB抗原、免疫球蛋白M(Immunoglobulin M,IgM)和免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)抗体。选取患者三个时间段的检测数据,采用SPSS17.0软件分析这些指标在HCMV感染中的关系。结果患者移植后24个月内HCMV pp65与gB抗原呈正相关(P=0.001),HCMV gB抗原与HCMV IgG抗体呈正相关(P=0.016)。HCMV pp65、gB抗原、HCMV IgM和IgG抗体阳性率分别为64.71%、39.22%、11.76%、100.00%,其中,pp65抗原阳性率高于gB,IgG抗体阳性率高于IgM,均有统计学意义(P<0.05)。B时间段HCMV gB抗原阳性率高于A时间段,具有统计学意义(P=0.013)。期间,16例患者先后感染HCMV,占94.12%。不同原发病类型HCMV pp65抗原阳性率差异有统计学意义(P=0.039),急性髓细胞白血病(Acute myeloid leukemia,AML)患者最高,为91.67%;骨髓增生异常综合症(Myelodysplastic syndrome,MDS)患者最低,为33.33%。HSCT后未发生急性移植物抗宿主病(acute graft-versus-host disease,aGVHD)的患者HCMV pp65抗原阳性率高于发生aGVHD的患者(P=0.042)。HCMV pp65抗原阳性率在不同性别、不同年龄、不同供者来源、预处理是否应用抗胸腺细胞球蛋白(Anti-thymocyte globulin,ATG)及有无发生慢性移植物抗宿主病(chronic graft-versus-host disease,cGVHD)之间差异均无统计学意义。HCMV gB抗原阳性率在上述临床特征之间差异均无统计学意义。结论 HSCT后定期监测HCMV抗原和抗体可有效地指导临床合理地抗HCMV治疗和使用免疫抑制剂。     

巨细胞病毒的3种检测方法在诊断小儿巨细胞病毒感染中的评价

目的探讨实时荧光定量PCR(FQ-PCR)、化学发光法、HCMV-PP65抗原检测在小儿巨细胞病毒(Human Cytomegalovirus,HCMV)感染诊断上的应用价值。方法分别采用FQ-PCR、化学发光法、HCMV-PP65抗原检测3种检测方法分析52例确诊HCMV感染及48例非HCMV感染患儿的尿液或血液标本,并对敏感性、特异性、总符合率等指标进行对比分析。结果 PP65抗原检测的特异度、阳性预测值、阳性似然比、总符合率均高于尿液FQ-PCR和化学发光,Youden指数与化学发光相同,高于PCR,误诊率最低;化学发光的灵敏度、阴性预测值高于其他2种方法 ,漏诊率最低;尿液FQ-PCR与PP65抗原这2种检测方法所测结果无相关性(χ2=2.401,P=0.121),Kappa值为0.114,P=0.07,结果缺乏一致性;化学发光检测与PP65抗原这2种检测方法所测结果有显著相关性(χ2=10.178,P=0.001),Kappa值为0.226,P=0.062,结果缺乏一致性;尿液FQ-PCR与化学发光这2种检测方法所测结果有显著相关性(χ2=11.802,P=0.001),Kappa值为0.342,P=0.104,结果缺乏一致性;化学发光检测、尿液FQ-PCR和PP65抗原检测的ROC曲线下面积分别为:0.743、0.695和0.676。结论 PP65抗原阳性细胞数能反映HCMV的数量,可监测早期活动性HCMV感染及疗效观察,检测方法特异、灵敏、操作简单,且与化学发光检测有显著相关性,应为临床实验室首选。     

pp67-mRNA在肾移植术后人巨细胞病毒感染中的诊断价值

目的探讨pp67对。肾移植术后人巨细胞病毒（HCMV）活动性感染及指导抗病毒治疗上的作用。方法采用NASBA测定32例肾移植术后患者外周血中的pp67,同时通过免疫荧光技术（IFA）对早期抗原pp65（CMV-Agpp6S）的检测来判断HCMV活动性,术后第3周,第7周分别用ED-TA管采血5-7rnl,每人每次两管做实验样本,立即送检并将二者结果相比较。其中检测结果有一项阳性的患者,选择更昔洛韦进行对症抗病毒治疗,对pp67-mRNA和pp65抗原检测双阳性患者,在选择更昔洛韦对症治疗时,并随访观察每周采血行pp67检测CMV活动情况,同时CMV抗原血症法检测,将二者结果比较,了解pp67与HCMV活动性感染及CMV病的关系。结果共采集样本128份,其中44份样本CMV-Agpp65阳性,19份样本pp67-mRNA阳性,8例CMV-Agpp65和pp67-mRNA均为阳性。临床诊断为HCMV病患者12例。CMV-Agpp65抗原检测灵敏度（91．7％）高于pp67-mRNA（66．7％）,pp67-mRNA特异性（95．O％）高于CMV．Agpp65（50．0％）抗原检测。而在HCM~临床症状出现感染并治疗后期,随访发现选择以pp67作为抗病毒治疗指标较CMV-Ag更早转阴,可以明显缩短用药时间（P〈0．05）。结论CMV-Agpp65、pp67-mRNA对器官移植术后HCMV感染均具有诊断意义,应用NASBA法能更加快捷准确检测巨细胞病毒,pp67较准确地反映了肾移植术后HCMV的活动性,能更好的指导临床抗病毒治疗并提供了较客观的依据。     

应用荧光杂交定量PCR和ELISA法进行产前TORCH筛查比较研究

目的:比较荧光杂交定量PCR和ELISA法进行产前TORCH筛查的差异,探讨病原微生物拷贝数在临床诊治中的作用。方法:分别用荧光杂交定量PCR和ELISA IgM法筛查272例孕期血标本(妊娠早期102例、晚期170例);121例分娩母血及新生儿脐带血标本;222例不明原因流产血标本,其中66例采集了新鲜自然流产脱膜和绒毛。结果:孕期筛查血CMV DNA和TOX DNA的阳性率分别为1.8％(5/272)和0.36％(1/272)。其中妊娠早期CMV DNA的阳性率为2.9％(3/102),晚期为1.2％(2/170)。不明原因流产者,查出血清CMV感染者22例,TOX4例,CMV DNA和TOX DNA的阳性率分别为9.9％(22/222)和1.8％(4/222)。脱膜和绒毛均感染者3例,1例血清、脱膜感染但未采到绒毛标本,2例孕母血清中查到CMV,而流产组织中未查到。查出血清、脱膜和绒毛均感染TOX者1例。妊娠妇女外周血CMV DNA≥10~3有88％发生流产。结论:荧光杂交定量PCR法不但具有较高的灵敏度和特异性,而且可检测病毒负载量—拷贝数/ml,拷贝数越高发生流产的可能性愈高,应推荐作为妊娠初期筛查的首选方法。     

产前诊断先天性人巨细胞病毒感染安全性和可靠性分析

目的:探究宫内取材进行先天性人巨细胞病毒(HCMV)感染产前诊断的安全性和可靠性。方法:联合应用酶联免疫吸附试验(ELISA)、巢式PCR(N-PCR)和逆转录PCR(RT-PCR)分析武汉、上海和沈阳三地6723例育龄妇女和孕妇HCMV感染状况及妊娠结局。结果:育龄妇女活动性HCMVIgM检出率为6·11%,其中孕妇和非孕妇间无显著性差异。活动性感染孕妇绒毛、脐血HCMV感染率分别为51·52%、66·18%,明显高于对照组。先天性感染儿发生异常妊娠结局的危险性明显高于非感染儿。宫内取材所致妊娠丢失率均无显著增加,其检查结果与出生后的诊断一致。结论:宫内采集绒毛、羊水、脐血进行产前诊断,安全性和可靠性良好,可为胎儿的取舍提供依据。     

孕妇围生期HCMV感染与婴儿先天性疾病关系

目的探讨孕妇人巨细胞病毒（HCMV）活动性感染对婴儿的近期影响。方法采用ELISA和PCR相结合的方法，采集74例HCMV活动性感染孕妇及50例无HCMV活动性感染孕妇的婴儿血进行HCMV—IgM及HCMV—DNA检测．并对感染婴儿定期随访至生后6个月，追踪其近期预后。结果孕期HCMV活动性感染组的婴儿先天性感染率为36．49％，围产期感染率为45．95％，显著高于孕期无HCMV活动性感染组（P〈0．005）；HCMV活动性感染孕妇的婴儿中，先天性感染组症状性感染发病率高于围生期感染组（P〈0．025）；神经系统异常、先天畸形及全身性感染发病例数多于围生期感染组（P〈0．05）；先天性感染组中，症状性感染婴儿治疗后肝功能恢复、HCMVHCMV—IgM和／或HCMV—DNA转阴率及近期预后比围生期感染组差（P〈0．05）。结论孕期HCMV活动性感染与婴儿先天性感染及围生期感染显著相关。孕期HCMV活动性感染引起的先天性感染较围生期感染严重，预后差．故应重视孕期HCMV感染的检测，预防和阻断HCMV先天性感染的发生。     

巨细胞病毒感染与自然流产的关系

目的:探讨人巨细胞病毒(HCMV)感染与自然流产的关系。方法:采用荧光定量PCR(FQ-PCR)对41例自然流产妇女(病例组)的流产组织进行HCMV DNA检测,以及采用免疫组化(IHC)检测HCMV感染阳性者流产组织局部细胞因子(IL-2、IL-10、TNF-α)的变化,并与30例正常孕妇(对照组)进行比较。结果:病例组HCMV DNA的阳性检出率为41.46%,对照组的阳性检出率为13.33%,两组HCMVDNA的阳性率经统计学检验具有显著性差异(P<0.01),HCMV阳性病例组IL-10较对照组升高(P<0.05),IL-2有所降低(P<0.05),TNF-α无显著差异。结论:HCMV感染与自然流产有关,HCMV感染会引起孕妇免疫功能进一步抑制,促进了胎儿宫内感染并可能最终导致流产。     

病毒载量检测在婴幼儿巨细胞病毒感染中的诊断价值

目的 评估全血及尿液巨细胞病毒(CMV)载量检测在婴幼儿巨细胞病毒感染及判断预后的价值.方法 在血清学检测CMV-IgM或者CMV-IgG滴度≥40阳性患儿中筛选PP65抗原阳性CMV活动性感染婴幼儿50例,用更昔洛韦抗病毒治疗,一个疗程前后检测全血及尿液CMV荧光定量及治疗后PP65抗原.结果 治疗前全血CMV荧光定...     

孕期干预减少宫内感染所致出生缺陷的临床意义

目的　探讨孕期干预减少人巨细胞病毒 (HCMV)和弓形虫 (TO)宫内感染所致出生缺陷的效果。方法　采用前瞻性随机对照临床研究方法 ,检测 3 0 95例有异常孕产史的孕妇外周血中的 HCMV和 TO特异性抗体 Ig G和 Ig M,对 HCMV Ig M阳性者再检测 HCMV晚期 m RNA。对 119例 HCMV Ig M和 HCMV m RNA均阳性者服用中药金叶败毒颗粒 ,12 9例作为对照 ;给 13 1例 TO Ig M阳性者服用西药螺旋霉素 ,13 9例作为对照。结果　中药金叶败毒颗粒可使孕妇 HCMV Ig M和 HCMV m RNA转阴率从自然状态下的 42 .64 % (5 5 / 12 9)提高到 71.43 % (85 / 119) (χ2=2 0 .87,P=0 .0 0 1) ,宫内传播率从自然状态下的 47.5 0 % (19/ 40 )下降到 2 0 .0 0 % (15 / 75 ) (χ2 =9.47,P=0 .0 0 1) ,并大大减少了流产、死胎、先天畸形等子代生长发育异常。西药螺旋霉素可使孕妇 TO Ig M转阴率从 3 5 .2 5 % (49/13 9)提高到 72 .5 2 % (95 / 13 1) (χ2 =3 7.63 ,P=0 .0 0 1) ,宫内传播率从自然状态下的 2 4.2 4% (8/ 3 3 )下降到 7.3 5 %(5 / 68) (χ2 =5 .65 ,P=0 .0 0 2 )。结论　筛选孕期 HCMV Ig M和 HCMV m RNA阳性以及 TO Ig M阳性的妇女 ,分别给予金叶败毒颗粒和螺旋霉素可减少因因宫内感染所致的出生缺陷     

反复自然流产孕妇流产组织中人细小病毒B19的检测意义

目的探讨HPV B19感染与反复自然流产(RSA)的关系。方法建立人细小病毒B19巢式PCR检测方法,检测RSA孕妇流产组织和正常妊娠人工流产组织中HPV B19 DNA。结果检测HPV B19的巢式PCR方法具有很好的特异性和敏感性;42例RSA孕妇流产组织中HPV B19 DNA阳性率26.2%(11/42),40例正常妊娠人工流产组织中HPV B19 DNA阳性率2.5%(1/40),两组HPV B19感染率差异有统计学意义(x2=9.20,P<0.01)。不同流产次数组HPV B19 DNA阳性率差异无统计学意义(x2=0.06,P>0.05)。结论HPVB19感染可能与反复自然流产的发生有关。     

孕妇感染HCMV时IgG抗体亲和力与HCMV DNA联合检测的临床意义

目的：本文通过研究HCMV-IgG亲和力指数（avidity index,AI）以及HCMV-DNA的检测,对孕产妇原发性感染及继发性感染进行综合评价。旨在为防止和减少围产期感染、流产及新生儿先天畸形、听力障碍和智力障碍提供有效而准确的检测数据及临床诊断依据。方法：采用德国Virion/serion公司酶联免疫吸附试验（ELISA）定量试剂,检测孕妇血清中HCMV的IgM和IgG抗体、IgG抗体亲和力;采用中山医科大学达安公司RV核酸扩增（PCR）荧光定量检测孕妇血清中HCMV-DNA,并对其结果进行分析。结果：341例孕妇中,HCMV-IgG低亲和力样本孕产史不良孕妇组所占比例显著高于初次妊娠孕妇。孕产史不良孕妇HCMV-DNA阳性例数所占比例显著高于初次妊娠孕妇。结论：341例孕妇中存在一定比例的HCMV现症感染,建议妊娠妇女尤其是有不良孕产史者尽可能同时进行HCMV-IgG亲和力指数及HCMV-DNA检查,以便尽早采取措施,避免由于HCMV感染导致的新生儿出生缺陷的发生。