环氧树脂半薄切片肾小球基底膜六胺银染色法

环氧树脂半薄切片肾小球基底膜六胺银染色法肖莎陈浦辉郭琳琅在肾脏疾病的研究中，肾小球基底膜银染色技术具有重要意义。如若采用半薄切片染色，在光镜下观察则可获得比石蜡切片更为清晰的结果。但因树脂包埋块为非水溶性质，故其半薄切片的特殊染色就较为困难。我们运用...     

几种半薄切片染色法的比较与改进

半薄切片是超薄切片前的一个重要步骤。光镜检查半薄切片,可确定电镜观察部位,判断组织固定和包埋的质量。半薄切片染色法很多,我们对几种常用方法进行了一些比较和改进,现将实践中的体会介绍如下,供参考。一、方法及结果:用Epon812包埋的组织块切成1微米或1.5微米厚的半薄切片,捞到滴有蒸馏水的载片上,在烘箱内烤干,待染色。1.甲苯胺兰染色法:将染液滴于切片上,在酒精灯上加热数秒钟,勿煮沸,流水冲洗,自然干燥,树胶封固后观察。不必经酒精及二甲苯,免切片皱缩不平。如染色适度,组织染成兰色,结构清楚,而树脂无色。2.苏木精—伊红染色法:锇酸固定、树脂包埋的组织,用此法难于着色,一般须先用氢氧化钾溶液脱去树脂,然后染色.为避免氢氧化钾液对组织可能产生的损伤,我们参考Chang法改用2.5%高碘酸处理切片,并用滴     

两种横纹肌染色方法的比较

<正>横纹肌包括骨骼肌和心肌,常规的H-E染色方法对正常横纹肌中横纹显示不清楚,所以为了显示与观察横纹,常常需要用到特殊的横纹肌染色方法。传统的横纹肌染色包括Mallory磷钨酸苏木精染色法(PTAH)和Heidenhain氏铁苏木素染色法等。作为医学检验方法,以简单快速为首选,而要制作教学切片,则对染色的效果,切片存放时间等要求高。为了寻求一种稳定的,效果好的,适合制作大量教学切片的染色方法,我们将上述2种横纹肌的染色方法做了比较。     

改良半薄切片多色性染色方法

半薄切片有助于电子显微镜超薄切片的准确定位。现有的半薄切片有各种不同的染色方法,但在观察时往往组织结构、细胞核及细胞浆分辨不够清楚。我们在半薄切片中改进染色液的配制和染色方法,并     

肾穿刺活检组织切片制备技术的改进

肾穿刺活检组织切片的制备是病理技术工作中一项特殊的技术,其制备质量的优劣在一定程度上关系到临床肾病诊治工作的开展。为提高肾穿刺活检组织切片制备技术、准确把握肾脏疾病的诊断与治疗,作者收集141例肾穿刺活检组织标本,在组织标本的切割分配与固定、半薄切片的制备以及常规染色、特殊染色和免疫组化染色方面,对肾穿刺活检组织切片的制备进行改良,效果良好,现介绍如下。     

一种改良包埋模具和改良载玻片的设计与应用

在常规病理技术中[1,2],石蜡切片是诸多操作环节中非常重要的关键技术,能够为常规HE染色、特殊染色、免疫组化染色[3]及分子筛查等检测技术提供不同规格要求的组织切片。若宫腔刮出物、小脑占位组织、椎管内取出物等组织中的小灶组织疑有恶变或性质不能确定,可通过对原组织蜡块深切、连切、薄切等方式再进行常规HE染色,也可对重新切片的组织进行特殊染色、免疫组化染色等检测方法,以明确小灶组织的性质。     

用于胃幽门螺杆菌检查的改良 Giemsa 染色法

幽门螺杆菌（ＨＰ）是一种革兰氏阴性菌，已经证明ＨＰ与一些胃炎和消化性溃疡有较密切的关系。ＨＰ也是胃窦炎最常见的病因之一，并与远端胃癌和低度恶性胃淋巴瘤的发生有关。所以，越来越引起人们的重视。在临床病理工作中，胃粘膜活检不要仅局限于胃粘膜本身的病变检查，还需要进一步检查有无ＨＰ感染。ＨＰ是一种较弱的噬苏木素菌，对ＨＥ染色着色较淡，在观察时有一定的困难。为了明确有无ＨＰ感染常借助于特殊染色。用于ＨＰ特殊染色的方法有Ｇｉｅｍ－ｓａ染色法和银染色法等。我们采用改良的微波Ｇｉｅｍｓａ染色法，即在原Ｇｉｅｍｓａ染色法的基础上，加入了表面活性剂ＴｒｉｔｏｎＸ－１００，在染色过程中经微波炉加温处理。应用改良的Ｇｉｅｍｓａ染色法，可缩短染色时间。染色结果表明，胃粘膜组织和ＨＰ着色良好，细微结构清楚，结果明确。微波Ｇｉｅｍｓａ染色法用于胃粘膜石蜡切片染色，具有常规ＨＥ染色和特殊染色的双重效果，能同时清楚地显示出胃粘膜组织和ＨＰ的结构。     

电镜半薄切片应用于光镜研究的探讨

电镜半薄切片通常用于电镜超薄切片前的定位观察 ,我们在定位观察时发现 ,由于切片薄 ,结构显示清晰 ,可用于光镜研究 ,其观察结果优于石蜡切片。多年来 ,我们已将电镜半薄切片应用于实验研究和研究生课题实验。方法 :取材后将组织修为 1立方毫米左右 ,常规电镜样品处理 ,环氧树脂 6 18包埋 ,修块 ,L KBV型超薄切片机切片 ,切片厚度 1微米 ,脱树脂后 ,苏木精染色 ,H· E或甲苯胺兰染色 ,37℃温箱烤干 ,封片 ,观察。结果 :苏木精染色显示 ,细胞核呈紫兰色 ,胞浆淡兰色 ;H·E染色显示 ,细胞核为紫兰色 ,细胞质淡粉红色 ,但伊红染色较石蜡…     

提高组织切片标本质量的要点

组织切片标本的制作技术既是组织学,也是病理学、法医学、生物学等用来观察和研究组织细胞正常形态结构和病理变化最常用的方法[3-4].要制作1张组织切片标本并不难,但要制作1张优质满意的组织切片也并非那么容易.因此,笔者以教学、科研、临床病理检验工作中应用最广泛、最常用而又最有价值的石蜡切片苏木精、伊红染色法(简称H-E染色)为例,从实用角度出发,对该方法的基本操作程序和主要步骤的技术操作要点及相关事项,谈一点自己的见解.     

肾穿刺石蜡切片厚度对肾小球系膜区及基膜PASM染色的影响

<正>肾穿刺活检组织病理诊断中，过碘酸六胺银染色(periodic acid-silver metheramine,PASM)是重要的检查方法，主要用于显示肾小球系膜区范围和基膜增厚以及“钉突”、“梯状”等病理变化，是肾小球疾病鉴别的重要手段之一^[1]。PASM染色质量对诊断有一定程度的影响。切片过厚肾小球结构重叠，难以分辨，半薄切片制片时不仅切片难度增加，且切片过薄高温孵育容易掉片。本实验经过多年研究找到一种最佳PASM染色的切片厚度，现报道如下。     

不同染色方法对人脑垂体细胞显示效果的比较

目的改进人脑垂体的染色方法,更清晰地显示腺垂体内各种细胞的形态特点,提高实验课教学质量。方法应用苏木精-伊红染色法和改良染色液染色法显示脑垂体的组织结构。结果用传统的苏木精-伊红染色法不易区分各种细胞,而采用改良染色液显示脑垂体组织结构效果好,既能观察脑垂体的结构,又能区分嗜酸性细胞、嗜碱性细胞和嫌色细胞。结论改良染色液染色法能够很好地显示脑垂体组织结构,使3种细胞的形态特点清晰可辨,可为实验教学提供优质的切片标本。     

过碘酸-Schiff染色法与苏丹黑B双重染色在肌病诊断中的应用

在肌病病理诊断过程中,对骨骼肌活检标本冰冻切片进行H-E染色后,观察时发现有空泡现象的组织切片,除排除冰晶以外,一般考虑是否有糖原累积或脂质沉积,需要分别进行糖原染色与脂肪染色,以做进一步的鉴别诊断.过碘酸-Schiff染色法(periodic acid schiff,PAS),是一种常用的糖原染色方法;苏丹黑B是常用脂肪染色方法之一.笔者尝试将这2种染色方法在同一张切片上先后进行染色,实验结果表明,方法可行、结果满意;并且给观察提供方便.     

小肠肠腺细胞特殊染色方法的尝试

小肠是人体消化和吸收的重要器官,也是实验教学重点学习的内容。但小肠腺的细胞种类多,结构复杂,常规H-E染色只能观察到吸收细胞和杯状细胞,其中的潘氏细胞和内分泌细胞经常用特殊染色方法在另外的片子中观察,不利于实验课教学和学生学习与鉴别。采用不同染色方法,能在1张切片上同时观察潘氏细胞、内分泌细胞和杯状细胞的形态结构,目前国内还鲜见报道。本实验采用特殊染色方法,同时显示3种细胞的形态结构,此方法具有可重复性,并且此方法染色的切片,可长期保存不掉色,为实验课教学提供方便条件,提高了实验课教学质量。     

显示大鼠下颌下腺颗粒曲管细胞方法的探讨

本应用几种方法观察研究了大鼠下颌下腺颗粒曲管（GCT）细胞，包括石蜡切片Malory染色，树脂包埋半薄切片甲苯胺蓝染色，石蜡切片、半薄切片免疫组织化学法（PAP法，免疫金银法），和透射电镜观察。应用这些方法进行比较与印证，对GCT细胞的形态结构、功能及异质性特征等提出可靠的见解。本对上述几种方法步骤的具体条件和要领进行了探讨。     

HE染色在环氧树脂半薄切片中的应用

目前 ,对Ｅｐｏｎ812包埋的半薄切片进行光镜观察 ,其染色多数采用盐基性染料如美蓝、甲苯胺蓝、结晶紫、硫堇和碱性品红等无需脱脂的单色染色法。虽然方法简单、时间短 ,但效果很差 ,细胞核、细胞质、细胞膜与细胞间质的区别不明显 ,有时结构不清、难以定位 ,而且染色后的切片易褪色 ,不易做长期保存。笔者应用ＨＥ染色法 ,染色效果比较理想 ,特别对临床肾活检超微病理诊断定位有重要意义。现将方法和体会介绍如下。1　染色方法1.1　常规环氧树脂Ｅｐｏｎ812包埋 　组织经 3%戊二醛前固定 2ｈ ,1%锇酸后固定 1 5ｈ ,梯度乙醇 (5 0 %、70 %…     

内耳切片标本制作

内耳制片的方法在有关组织切片技术的书籍中均有介绍,以火棉胶或石火棉胶双重包埋为主,多选用含汞的固定液,H-E片染,手续繁杂,不易切出较薄的标本。1984年曾小鲁等用抽气等办法实现了常规石蜡包埋和H-E整块染色,效果较理想。多年来,我们应用了此方法,并做了些研究和改进,现介绍如下:     

微波骨髓活组织快速半薄石蜡切片的制备

骨髓穿刺活组织检查（骨髓活检）是确诊血液疾病的主要技术之一。微波骨髓活检组织快速半薄石蜡切片的制备，把微波辐射应用到骨髓活检组织的固定、脱水、透明、浸蜡及其切片染色等主要步骤中，结果仅需２～３ｈ即可完成切片制作，而且制片质量近似骨髓组织塑料包埋切片技...     

基于冷冻切片的直接免疫组化染色法在甲状腺乳头状癌中的诊断价值

目的探讨基于冷冻切片的直接免疫组化染色法在甲状腺乳头状癌中的诊断价值。方法收集手术中送检的甲状腺良性病变组织、乳头状癌组织各30例,采用直接免疫组化染色法、石蜡切片免疫组化染色法检测CK19、Galectin-3的表达,对比两种染色法的时间、质量、阳性率及诊断准确率。结果直接免疫组化染色法耗时15 min,石蜡切片免疫组化染色法耗时280 min,前者大幅缩短了时间。两种染色结果显示,CK19、Galectin-3在甲状腺乳头状癌中的阳性率基本一致,直接免疫组化法的质量稍差。在诊断甲状腺前哨淋巴结转移癌中,冷冻切片的直接免疫组化染色法正确诊断率为100%,单纯HE染色正确诊断率为60.00%,诊断准确性显著提高。结论基于冷冻切片的直接免疫组化染色法较石蜡切片免疫组化染色法大幅缩短了染色时间,染色质量近似,阳性率一致,在判断甲状腺不典型病变性质及甲状腺前哨淋巴结转移癌中具有重要价值。     

H-E染色制作整块脊髓切片

正制片技术已相当广泛地应用于众多的学科领域~([1])。生物医学领域在制作脊髓切片时,通常选用强还原剂(硝酸银)进行染色制片。因为神经组织是动物体内比较柔软的组织,其结构和功能较为复杂特殊~([2])。强还原剂硝酸银能很好地将神经组织脑和脊髓内的灰质和白质进行染色上的区分,也可将神经元与神经胶质细胞更好地显示清楚,这就是脊髓切片制作时常选用硝酸银染色的原因所在。制作石蜡组织切片时一般选用H-E染料,即苏木精和伊红染料。这2种染液配制简捷方便,价格低廉,染色效果佳,     

骨髓活检塑料半薄切片的染色

半薄切片的操作过程及方法简单 ,尤其适用于骨髓活体检查 ,切片中的各系统细胞形态接近于涂片形态。因ＨＥ染色不能完全显示骨髓中的一些特殊成分 ,故导致分辨率不够理想。作者针对这一问题建立一种适用于作骨髓半薄切片的染色方法。1　配制方法1 1　染色液的配制　 (1)苏木精、姬姆萨　根据Ｈａｒｒｉｓ苏木精和Ｇｉｅｍｓａ染液的配制方法。 (2 )酸性品红溶液　 1 2 %浓度。1 2　染色方法及步骤　 (1)将骨髓塑料半薄切片 (2 μｍ)附贴于载玻片上在加热板上使充分干燥。 (2 )Ｈａｒｒｉｓ苏木精染色 5ｍｉｎ ,自来水或蒸馏水冲洗。 (3)Ｇｉ…