体外试验评价甘草对肠黏膜P-糖蛋白的影响

目的 :观察甘草对P-糖蛋白(P-gp)底物经大鼠不同区段肠黏膜透过性的差异,以评价其对肠黏膜P-gp功能的影响。方法:通过对大鼠口服甘草煎液、生理盐水一周后,使用体外扩散池(Ussing Chamber)技术评价罗丹明123(R123)和荧光素钠(CF)经大鼠空肠回肠结肠黏膜的经时吸收方向和分泌方向的透过量和表观渗透系数。R123和CF在接受室的浓度用荧光分光光度计检测。结果:R123的透过性比较中,甘草组与生理盐水组组内比较,差异有统计学意义(F=5.602,P=0.000)。CF的透过性比较中,甘草组组内比较,差异有统计学意义(F=20.140,P=0.000)。结论:甘草对底物药物R123的影响可能与存在于肠黏膜的P-gp有关,这可能是甘草与药物产生协同作用的机制之一。     

基于Ussing Chamber技术的红景天苷大鼠肠黏膜透过性研究

[目的]研究红景天苷在大鼠离体肠黏膜中的透过情况。[方法]采用Ussing Chamber技术,考察不同浓度红景天苷于大鼠肠黏膜透过情况,并考察维拉帕米(Ver)和十二烷基硫酸钠(SDS)对红景天苷大鼠肠黏膜透过的影响。[结果]不同浓度红景天苷在大鼠不同肠段的单位时间转运速率(Flux)随浓度升高而增大,不同肠段表观渗透系数(P_(app))无统计学差异(P0.05)。Ver加入一定量的SDS后,红景天苷在回肠和结肠的P_(app)显著增加(P0.01或P0.05),当SDS浓度为2 g/L时,回肠P_(app)增加为对照组的2.76倍。[结论]红景天苷在大鼠全肠段均有吸收,且吸收具有浓度依赖性,以被动吸收为主,Ver对红景天苷大鼠各肠吸收无影响,SDS促进了红景天苷回肠和结肠吸收。     

应用Ussing Chamber技术评价芹菜素与柚皮素经大鼠肠黏膜透过特征

 目的 研究芹菜素与柚皮素经大鼠空肠、回肠与结肠黏膜的区段透过特征。方法 采用体外Ussing Chamber方法,分别评价50 μmol·L-1芹菜素及柚皮素经空肠、回肠和结肠黏膜经时吸收方向（M-S）与分泌方向（S-M）的累计透过率和表观渗透系数（P_app）,芹菜素与柚皮素在接收池的样品浓度用HPLC测定。结果 芹菜素与柚皮素在结肠的透过性显著高于空肠（P<0.01）和回肠（P<0.05）。比较M-S方向和S-M方向的透过性发现,芹菜素空肠与回肠经两个方向的透过性无显著差异,但经结肠透过时,吸收方向的透过性显著高于分泌方向的透过性（P<0.01）;柚皮素在空肠、回肠及结肠黏膜经两个方向的透过性均无显著差异。结论 芹菜素与柚皮素在大鼠肠黏膜中的透过性存在区段性差异,结肠部位吸收最好。芹菜素与柚皮素除被动扩散外,可能受到肠黏膜转运体的调控。     

应用Ussing chamber技术建立大鼠肠黏膜P-糖蛋白与药物相互作用实验模型的相关因素考察

目的:建立研究药物与肠道内P-糖蛋白相互作用的Ussing chamber实验验证模型,并对相关影响因素进行总结。方法:应用Ussing chamber技术评价P-糖蛋白抑制剂维拉帕米对底物地高辛经肠转运吸收方向(M-S)与分泌方向(S-M)累积透过量、表观渗透系数及外排转运率的影响。采用LC-MS液-质联用法测定样品中地高辛含量,比较抑制剂组与对照组计算结果之间的差异。结合文献分析总结实验过程中相关影响因素。结果:对照组,地高辛经大鼠十二指肠、空肠、回肠及结肠外排转运率分别为3.23±0.73、4.78±0.52、5.18±0.81及2.77±0.20。与对照组相比,浓度为100μg/ml的维拉帕米减少了地高辛在各肠段的外排转运率,其中空肠(0.73±0.10)与回肠(1.38±0.38)有统计学差异,结肠段无统计学差异。浓度为200μg/ml的维拉帕米能降低结肠段(1.28±0.30)外排转运率,且有统计学差异。结论:建立了运用Ussing chamber技术研究药物与肠道内P-糖蛋白相互作用的实验验证模型,总结了相关影响因素,为优化实验方案,推进该技术在国内药物肠道转运机制研究领域中的应用提供理论指导。     

海藻与甘草的配伍应用

海藻与甘草的配伍应用梁理平（山西省平遥火柴厂职工医院平遥０３１１００）关键词海藻甘草配伍应用近年来，笔者借鉴古训，通过实践，验于临床，对海藻与甘草伍用的主治范围及临床治疗，稍有心得，浅叙于下。海藻，味苦咸性寒，《本经》云：主“瘿瘤结气，散颈下硬核痛，...     

海藻与甘草的配伍应用及研究进展

海藻与甘草是中药十八反中相反药对之一。从其相反之说出现以来,医界将其视为配伍禁忌。但在临床上,海藻与甘草出现于同一方中也不乏其例,如《外科正宗》之海藻玉壶汤,《疡医大全》中的内消瘰疬丸等,一直为人们所习用。近年来,随着对中药十八反研究的深入开展,海藻与甘草伍用的验例及对其探索研究的报道也愈来愈多,本文就十年来的有关报道简述如下。     

海藻与甘草的配伍应用及研究

海藻反甘草属中药十八反范畴,医界将其视为配伍禁忌,《中华人民共和国药典》85版规定:“海藻不宜与甘草同用”。但古今对此均存异议,并大胆用海藻伍甘草治病,古人方书及医案多有记载,近年来应用更是广泛,几乎涉及临床各科,诸如治疗乳癖、瘰疬、瘿瘤等均获满意疗效。现代研究也表明,二者     

海藻与甘草配伍临床应用探析

海藻与甘草药对是中药“十八反”中相反药之一.古今医籍,同用海藻、甘草的方剂屡见不鲜,在临床多用于治疗瘿瘤、乳癖、瘰疬等病.现代临床观察其配伍同用的疗效和毒副作用报道不一.临床可否配伍应用海藻、甘草值得探讨.回顾古代海藻、甘草配伍应用实例,并总结现代医家临床应用海藻、甘草配伍治疗疾病的疗效与不良反应报道,探析海藻、甘草配伍的功效、适用范围及作用机理,以期在临证时灵活应用“十八反”中海藻、甘草药对,发挥其独特功效,扩大中药应用范围.     

不同比例海藻与甘草配伍对大鼠的毒性研究

目的：研究不同比例海藻与甘草配伍对大鼠的毒性作用。方法：32只Wistar大鼠,体重(123±15.3) g,随机分为4组,每组各8只,分别为 正常组(A)和配伍用药组(B,C,D)。正常组用蒸馏水灌胃,B,C,D组用海藻-甘草(1∶1)、海藻-甘草(2∶1)、甘草-海藻(3∶1)灌胃,给药剂量为生 药20 mg·g^-1体重,共35 d,期间观察大鼠的毛色、进食、活动等情况。第36天处死大鼠,对大鼠体重,脏器系数,血常规,血液生化指 标及肝药酶进行检测。结果：海藻与甘草配伍对大鼠毛色、进食、活动、体重、脏器系数无影响,对血液系统、肝功能、心肌酶、肾功能、肝药 酶会产生一定的影响,且与配伍比例有关。结论：海藻甘草不同比例配伍后,对大鼠脏器具有选择毒性作用,并与配伍比例有关。     

海藻玉壶汤中海藻与甘草之配伍浅析

"海藻玉壶汤"中海藻与甘草同用属中医"相反"之配伍禁忌,但该方在临床应用并无发生不良反应的记载。现从传统中医药理论及现代科研方法分析论证海藻与甘草配伍在该方中应用的合理性。     

甘草与芫花对P-糖蛋白底物罗丹明123经 空肠黏膜透过性的影响

目的：观察甘草与芫花合用前后对P-糖蛋白(P-gp)的调控作用，探讨甘草、芫花及其合用影响药物经胃肠道渗透的可能作用机制。方法：将25只Wistar大鼠分为5组，分别给大鼠口服甘草液、芫花液、甘草芫花合煎液、合并液以及生理盐水，1周后用体外扩散池法(ussing chamber)评价各种药液对罗丹明123(R123)和荧光素钠(CF)经空肠黏膜透过性的影响，用荧光分光光度法测定R123和CF的浓度，并分析各组表观渗透系数(Papp)差异。结果：4种药液均具有增加R123经吸收方向的透过性，与生理盐水组比较，P<0.05，且芫花液、合煎液以及合并液还可减少分泌方向的透过(P<0.05，与生理盐水组比较)，甘草对分泌方向透过影响无统计学意义。甘草对CF透过无影响，而其他3组药液则可减少CF吸收和分泌方向的透过性。结论：甘草和芫花对P-gp均有抑制作用，但后者作用较强。芫花某些化学成分抑制P-gp，而另一些成分可能使细胞之间紧密连接加强，引起旁细胞途径药物CF渗透的降低。甘草与芫花合用后对P-gp抑制作用增强，可能是甘草对芫花有协同作用，使一些毒性成分吸收增加，这可能是两者配伍产生毒性的机制之一。     

新疆甘草多糖的超声提取及含量测定

目的　从甘草中提取多糖并测定其含量。方法　采用超声法提取 ,分光光度法测定多糖含量。结果　用超声法提取测得甘草多糖含量为 3.2 6 % ,较常规法高出 36 %。结论　甘草多糖提取可优选超声法。     

胀果甘草根精油的化学成分

目的分析胀果甘草根精油的化学成分。方法采用水蒸汽蒸馏法提取,运用毛细管气相色谱-质谱联用法结合计算机检索对其精油的化学成分进行分析和鉴定,用气相色谱面积归一化法测定各组分的相对百分含量。结果经毛细管色谱分离出76个峰,并且确认了所含的73种化合物。所鉴定化合物的含量占精油总量的96.1%。结论化学成分主要为3-甲基庚烷(8.27%),4-甲基庚烷(7.95%),2-甲基庚烷(7.38%),庚烷(6.99%),辛烷(6.45%),2,4-二甲基己烷(6.22%),3-乙基戊烷(5.39%),3-甲基己烷(5.17%),2-甲基己烷(4.52%),甲基环己烷(4.33%),2,3-二甲基己烷(4.17%),2,5-二甲基己烷(3.23),2,3-二甲基戊烷(3.00)等,上述十三种化合物的含量占精油总量的73.67%。首次报道了胀果甘草根精油的化学成分,为进一步开发利用提供了科学依据。     

黄连黄芩配伍对大鼠肠黏膜P-gp活性的影响

目的:评价连续ig黄连、黄芩提取液及其黄连-黄芩合煎液对大鼠肠黏膜上P-糖蛋白( P-glycoprotein,P-gp)活性的影响,探讨黄连-黄芩药对配伍的机制.方法:将大鼠随机分为5组.连续ig黄连、黄芩提取液及其合煎液1周诱导后,采用非翻转肠囊和翻转肠囊实验,以累计渗透率和表观渗透系数(Papp)为考察指标,体外评价P-gp底物罗丹明123( rhodamine123,R123)和非P-gp底物荧光素钠(fluorescein sodium,Fs)经大鼠空肠黏膜吸收方向(M-S)和分泌方向(S-M)的转运变化.结果:黄连提取液能减少R123经空肠M-S方向的转运(P＜0.05),对S-M方向转运没有显著影响.黄芩及其黄连-黄芩合煎液均能不同程度的增加R123经空肠M-S方向的转运,同时可不同程度的降低S-M方向的转运.在评价各组药液对旁细胞转运药物FS影响的实验中,黄连、黄芩和黄连-黄芩合煎液(2∶1)组在M-S和S-M双活性方向对FS的透过性均无显著影响,而黄连-黄芩合煎液(1∶1)组可同时降低双方向的透过性.各组的泵出比较生理盐水组无显著差异.结论:黄连提取液连续ig可增加大鼠肠黏膜上P-gp的活性,而黄芩对P-gp的活性具有一定的抑制作用,合煎液与黄芩相似,但抑制作用更强.与生理盐水组相比,三者抑制作用强弱顺序为1∶1合煎组最强,2∶1合煎组次之,黄芩组最弱.     

海藻甘草对甲状腺肿模型大鼠甲状腺激素及其抗体的影响

目的 观察海藻，甘草单煎液及其不同比例合煎，单煎后混合液对甲状腺肿模型大鼠甲状腺激素及其抗体的影响。方法 每日给大鼠ig丙基硫氧嘧啶（0.15g/kg)，连续造模10d。给药组动物在造模的同时分别ig海藻，甘草单煎液及其不同比例合煎，单煎后混合液，15d后采血，处死大鼠，放射免疫法测定血清中三碘甲状腺原氨酸（T3），四碘甲状腺原氨酸（T4）及甲状腺微粒体抗体（TM），甲状腺球蛋白抗体（TG）的含量。结果 海藻单煎液及海藻，甘草不同比例合煎及单煎后混合液均有不同程度降低TM，TG作用，其中TM的降低幅度大于TG，且二者合煎液作用大于单煎后混合液，当二者为1：1合煎时作用最显著。但未见对T3，T4的影响。结论 海藻及海藻，甘草合用可抑制丙基硫氧嘧啶所致甲状腺肿模型大鼠甲状腺抗体升高。     

甘草总黄酮的提取技术及其抑菌活性研究

目的:研究甘草总黄酮的提取技术,并探讨其抑菌活性。方法:对比研究了甘草总黄酮超声提取、酶解提取间的差异、传统搅拌提取及反复冻溶提取,并优化超声提取工艺条件。同时,采用二倍稀释法研究了甘草总黄酮的抑菌效果。结果:超声提取的效果最好,其最优条件为用20倍量30%乙醇提取2次,每次20 m in。此外,甘草总黄酮对金黄色葡萄球菌,大肠埃希氏杆菌,绿脓杆菌和枯草杆菌的最小抑菌浓度(M IC)分别为:0.03125,0.03125,0.125,0.03125 mg/m l。结论:超声提取是适于从甘草中快速高效提取总黄酮的新方法。甘草总黄酮对上述四种致病菌均有明显的抑制作用。     

羊栖菜提取物的体外抗病毒作用

目的:探讨羊栖菜提取物的体外抗病毒作用。方法:对羊栖菜的提取物进行了常见的第三类病原体病毒呼吸道合胞病毒(RSV)、单纯疱疹病毒1型(HSV-1)、肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A_(16)、柯萨奇病毒B_2、柯萨奇病毒B_3、柯萨奇病毒B_5(CVA_(16)、CVB_2、CVB_3、CVB_5)等7种病毒的抗病毒效应研究,显微镜下观察细胞存活率。结果:羊栖菜提取物对上述7种病毒的抑制能力远远优于广谱抗病毒药物利巴韦林,尤以对EV71的抑制效果最为明显,抑毒指数极高。结论:羊栖菜提取物对这7种病毒均具有良好的抑制作用,为进一步研究羊栖菜提取物对第三类病原体病毒的广谱抗病毒作用奠定基础。     

甘草提取物及其主要成分对Caco-2细胞膜上P-gp功能和表达的影响

 目的 初步考察甘草提取物及其主要成分（甘草甜素、甘草次酸和甘草苷）对Caco-2细胞膜上P-糖蛋白（P-gp）功能和表达的影响,以备进一步探讨甘草新的解毒机制。方法 利用流式细胞术检测Caco-2细胞内罗丹明123（Rho-123）的荧光强度和细胞膜上P-gp的表达,以考察P-gp外排功能和表达水平的变化。结果 经过60 min的干预,甘草提取物(1, 10, 100 μg·mL-1)、甘草甜素(1, 10, 100 μg·mL-1)和甘草苷(1, 10, 100 μg·mL-1)Caco-2细胞内Rho-123的荧光强度较阴性对照组分别降低了34.66%、28.90%、24.56%、27.89%、26.29%、37.33%、19.51%、21.86%和19.03%（P＜0.05）。经过72 h的干预,甘草提取物中质量浓度(10 μg·mL-1)组,甘草甜素低、中、高质量浓度(1, 10, 100 μg·mL-1)组,甘草次酸中、高质量浓度(1, 10 μg·mL-1)组Caco-2细胞膜上P-gp表达的阳性率较阴性组分别增加了31.18%、61.67%、70.32%、77.43%、37.58%和49.14%（P＜0.05）。结论 甘草提取物、甘草甜素和甘草苷可能增强Caco-2细胞膜上P-gp的功能,而中质量浓度的甘草提取物,低、中、高质量浓度的甘草甜素和中、高质量浓度的甘草次酸则可能上调P-gp的表达。甘草甜素既能增强Caco-2细胞膜上P-gp的功能,又能上调其表达,可能是甘草影响P-gp的有效成分。     

甘草抗病毒有效部位(GD4)体外抑制呼吸道合胞病毒作用的研究

目的：观察甘草抗病毒有效部位（GD4）抑制呼吸道合胞病毒（RSV）作用。方法：采用煎煮法、二氯甲烷萃取法和柱层析法提取分离得到甘草抗病毒有效部位（GD4）。采用细胞病变抑制实验，观察GD4在Hela细胞中对RSV的抑制作用。结果：GD4半数中毒浓度（TC50）为0．23mg／ml，抑制RSV的半数有效浓度（EC50）为28．73μg／ml，治疗指数（TI）为8．0；GD4对RSV的抑制作用存在量效关系；在感染后至少12h以内给药，GD4能够有效地抑制RSV的复制。GD4不含有甘草酸。结论：甘草抗病毒有效部位（GD4）在Hela细胞中对呼吸道合胞病毒有明显的抑制作用。     

比色法测定甘草中总皂苷的含量

目的建立甘草中甘草总皂苷含量的测定方法。方法用香草醛-高氯酸试剂,在589 nm处有最大吸收,并对比色条件进行了优化。结果该法精密度高,1 h内稳定,平均加样回收率为99.03%。结论此法简便、准确、稳定性、重复性好,可用于甘草总皂苷的测定。