慢性乙型肝炎和肝硬化患者血清TLR4、TGF-β1和IL-17水平及其临床意义

目的分析慢性乙型肝炎(CHB)和乙型肝炎肝硬化患者血清Toll样受体4(TLR4)、转化生长因子-β1(TGF-β1)和白细胞介素-17(IL-17)水平变化及其临床意义。方法 2015年6月~2017年4月本院收治的112例CHB、52例乙型肝炎肝硬化患者和选择的33例健康人,采用ELISA法检验血清IL-17、TLR4、TGF-β1水平,常规进行肝活检。结果慢性乙型肝炎、肝硬化和健康人血清IL-17水平分别为(264.42±32.53)pg/ml、(271.54±33.71)pg/ml和(64.18±5.52)ng/ml,血清TLR4水平分别为(5.81±0.83)pg/ml、(37.41±6.05)pg/ml和(1.07±0.13)ng/ml,血清TGF-β1水平分别为(3.67±0.42)pg/ml、(7.82±1.07)pg/ml和(1.61±0.07)ng/ml,差异明显(P0.05);19例Child-Pugh B级血清IL-17、TLR4和TGF-β1水平分别为(231.38±28.67)pg/ml、(18.61±2.87)pg/ml和(5.76±0.52)ng/ml,16例C级患者分别为(301.72±32.72)pg/ml、(39.47±6.82)pg/ml和(9.42±1.27)ng/ml,均明显高于17例Child-Pugh A级患者【分别为(204.53±26.57)pg/ml、(4.72±0.71)pg/ml和(3.18±0.34)ng/ml,P0.05】;肝活检组织学检查发现S0 8例、S1 42例、S2 43例、S3 19例、S4 52例,血清IL-17、TLR4、TGF-β1水平随着肝组织纤维化分期严重而升高。结论乙型肝炎肝硬化患者血清TLR4、TGF-β1和IL-17水平升高,对诊断和指导治疗可能有帮助。     

血清IFN-γ、TGF-β1、IL-10检测对儿童潜伏性结核感染的诊断价值

目的探讨IFN-γ及TGF-β1、IL-10检测在儿童潜伏性结核感染诊断中的意义。方法采用ELISA法检测30例肺结核患儿(肺结核组)、30例潜伏性结核感染患儿及27例健康儿童(对照组)血清中IFN-γ、TGF-β1和IL-10水平。结果潜伏性结核感染组和结核组患儿血清IFN-γ分别为(38.17±10.73)pg/ml和(34.27±9.51)pg/ml,对照组为(48.33±14.51)pg/ml,差异有统计学意义(P<0.05);3组受检者血清TGF-β1、IL-10分别为(5.87±4.35)pg/ml、(13.12±5.40)pg/ml、(5.04±2.15)pg/ml和(49.06±17.89)pg/ml、(359.34±163.72)pg/ml、(46.18±14.53)pg/ml,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清IFN-γ测定有助于儿童潜伏性结核感染的诊断,但血清TGF-β1、IL-10水平对潜伏性结核感染的诊断意义不大。     

肺结核患者血清IL-4、IL-6和TGF-β测定及其临床意义

目的探讨肺结核患者血清IL-4、IL-6、TGF-β水平及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验测定42例肺结核患者及28例健康人血清IL-4、IL-6、TGF-β水平,并进行t检验和线性相关分析。结果肺结核患者血清IL-4为(0.56±0.72)pg/ml,健康对照组为(0.21±0.07)pg/ml,差异有统计学意义(P<0.05);肺结核组血清IL-6、TGF-β为(0.06±0.04)pg/ml、(0.10±0.07)pg/ml,健康对照组为(0.07±0.05)pg/ml、(0.10±0.06)pg/ml,差异均无统计学意义(P>0.05);复治组与初治组TGF-β含量比较差异有统计学意义(t=2.39,P<0.05)。肺结核患者血清IL-4、TGF-β的含量呈正相关(r=0.90,P<0.05)。结论肺结核患者血清IL-4、TGF-β含量升高,可能参与结核病的免疫过程;检测IL-4、TGF-β对肺结核的诊断有一定价值。     

非小细胞肺癌患者外周血调节性T细胞和辅助性T细胞17的平衡表达特征

目的 通过检测辅助性T(Th)细胞17、调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)相关细胞因子及特异性转录因子维A酸相关孤核受体(RORγt)和叉头转录因子3(forkhead box P3,FoxP3) mRNA的表达变化,探讨非小细胞肺癌患者外周血Treg和Th17的平衡表达特征.方法 57例非小细胞肺癌患者作为研究对象,25名健康人作为对照.通过荧光定量PCR方法检测外周血单个核细胞(PBMC)中RORγt和FoxP3 mRNA的表达.应用酶联免疫吸附方法(ELISA)检测患者外周血转化生长因子β(transforming gowth factor-β,TGF-β)和Th17相关细胞因子白介素17 A(IL-17A)、IL-6的表达.结果 Ⅳ期非小细胞肺癌患者PBMC的RORγt mRNA水平[(11.30±4.07)×10-4]高于健康组[(7.50±2.75)×10-4]及Ⅰ～Ⅲ期非小细胞肺癌患者[(5.18±2.10)×10-4](q值分别为7.53、6.82,P值均＜0.01).Ⅳ期患者血浆TGF-β水平[(69.52±10.04) pg/ml]明显高于I～Ⅲ期非小细胞肺癌患者[(42.24±16.64)pg/ml]和健康对照组[(24.51±10.96)pg/ml](q值分别为3.91、3.87,P值均＜0.05).血浆IL-6、IL-17A各组间差异无统计学意义[非小细胞肺癌Ⅳ期组、Ⅰ～Ⅲ期组、健康对照组血浆IL-17A含量分别为(25.20±4.58)pg/ml、(18.58±5.92)pg/ml、(18.93±5.24)pg/ml];[非小细胞肺癌Ⅳ期组、Ⅰ～Ⅲ期组、健康对照组血浆IL-6含量(pg/ml)分别为(39.53±11.30) pg/ml]、(42.41±12.38)pg/ml、(38.15±12.09)pg/ml(血浆IL-17A组间两两比较q值分别为1.21、1.09、1.12;血浆IL-6组间两两比较q值分别为1.19、1.76、1.06,P值均＞0.05).结论 晚期非小细胞肺癌中RORγt mRNA表达增强、外周血TGF-β表达增高,Th17以及Treg细胞可能同时参与了非小细胞肺癌的肿瘤远处转移过程,从而影响肿瘤进程.     

HBV相关慢加急性肝衰竭患者血清IL-32和IL-10水平变化及意义

目的探讨HBV相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)患者血清IL-32和IL-10水平的变化规律及临床意义。方法选取2012年9月-2014年3月在苏州大学附属第一医院住院治疗的38例HBV-ACLF患者、20例慢性乙型肝炎(CHB)患者及20例健康对照者,采用ELISA法动态监测血清IL-32和IL-10水平变化,同时比较HBV-ACLF早中晚期、感染组与非感染组、存活组与死亡组IL-32、IL-10水平。计量资料2组间比较采用t检验,多组间比较采用方差分析,进一步2组间比较采用SNK-q检验。结果 HBV-ACLF组IL-32水平[(500.98±152.33)pg/ml]显著高于CHB组[(281.72±99.28)pg/ml]及健康对照组[(178.16±50.54)pg/ml](P值均<0.05);HBV-ACLF组IL-10水平[(4.82±1.03)pg/ml]显著高于CHB组[(3.15±0.98)pg/ml]及健康对照组[(1.62±0.43)pg/ml](P值均<0.05)。动态监测HBV-ACLF组IL-32水平显示,HBV-ACLF早期高于中期[(540.69±155.71)pg/ml vs(498.43±135.56)pg/ml,P<0.05],中期高于晚期[(498.43±135.56)pg/ml vs(450.77±102.33)pg/ml,P<0.05];比较IL-10水平,HBV-ACLF早期低于中期[(1.94±0.44)pg/ml vs(2.83±0.97)pg/ml,P<0.05],中期低于晚期[(2.83±0.97)pg/ml vs(3.69±1.23)pg/ml,P<0.05]。HBV-ACLF感染组IL-32水平高于非感染组[(553.41±158.65)pg/ml vs(482.54±110.16)pg/ml,P=0.021];HBV-ACLF存活组IL-32水平低于死亡组[(481.95±100.67)pg/ml vs(540.62±112.45)pg/ml,P=0.011],存活组IL-10高于死亡组[(4.21±1.27)pg/ml vs(3.61±1.05)pg/ml,P=0.038]。结论细胞因子网络在HBV-ACLF发病机制中发挥重要作用,血清IL-32及IL-10参与疾病的进展过程,动态监测其水平有助于判断预后。     

原发性胆汁性肝硬化患者肝组织转化生长因子β-1表达水平变化

目的探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者肝组织转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的变化。方法 52例PBC患者接受超声引导下肝穿刺活检,选择病理科留取的正常肝组织20份作为对照,另选择20例健康人采集静脉血。采用免疫组化法检测肝组织TGFβ-1表达,采用ELISA法检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素6(IL-6)水平。结果正常肝组织不表达或仅有少量TGF-β1表达,而PBC患者肝实质细胞胞浆内呈TGF-β1高表达;PBC患者血清TNF-α和IL-6水平分别为(28.71±13.54)pg/ml和(21.3±9.4)pg/ml,显著高于健康人【分别为(21.3±15.4)pg/ml和(2.1±1.6)pg/ml,P0.01】;7例PBC肝组织肝纤维化S0期患者肝组织TGF-β1表达及血清TNF-α和IL-6水平分别为(0.5±0.2)10~(-2)、(7.1±4.1)pg/ml和(5.1±1.0)pg/ml,显著低于12例S1期【(4.2±1.3)10~(-2)、(18.6±6.2)pg/ml、(11.5±3.6)pg/ml,P0.01】、18例S2期【(6.9±1.2)10~(-2)、(27.3±9.9)pg/ml、(19.4±4.1)pg/ml,P0.01】、9例S3期【(13.3±15.1)10~(-2)、(39.7±15.18)pg/ml、(27.3±8.1)pg/ml,P0.01】和6例S4期【(21.2±17.1)10~(-2)、(53.4±17.3)pg/ml、(47.8±11.0)pg/ml,P0.01】;15例Child-Pugh A级患者肝组织TGF-β1表达及血清TNF-α和IL-6水平分别为(1.9±1.6)10~(-2)、(12.2±3.1)pg/ml和(7.3±2.5)pg/ml,显著低于25例Child-Pugh B级【(15.9±13.6)10~(-2)、(32.9±8.6)pg/ml、(21.8±6.3)pg/ml,P0.01】或12例C级患者【(22.6±18.5)10~(-2)、(49.1±19.3)pg/ml、(45.5±12.7)pg/ml,P0.01】。结论PBC患者肝组织TGFβ-1表达及血清TNF-α和IL-6水平显著升高,可能与肝组织纤维化增生和/或肝功能受损有关。     

刺激原诱导的华支睾吸虫感染大鼠淋巴细胞体外增殖和细胞因子的产生

目的　研究感染华支睾吸虫的大鼠T淋巴细胞对寄生虫抗原或促有丝分裂原植物血凝素刺激后的体外增殖及细胞因子产生的免疫效应。　方法　观察感染华支睾吸虫的大鼠脾淋巴细胞和肠系膜淋巴结细胞 ,在促有丝分裂原PHA ,华支睾吸虫分泌排泄抗原 ,华支睾吸虫成虫粗抗原和异尖线虫幼虫粗抗原刺激下 ,体外淋巴细胞增殖及细胞因子的水平 ,包括IFN γ ,IL 2 ,IL 4,IL 1 0。　结果　肠系膜淋巴结的淋巴细胞增殖高于脾淋巴细胞。淋巴细胞浓度为 3× 1 0 6或 9× 1 0 6 细胞/孔时 ,脾脏和肠系膜淋巴细胞增殖均显著高于对照组 (P <0 .0 1 )。淋巴细胞数为 5× 1 0 6 细胞 /孔 ,刺激原浓度为 5或 1 0 μg/ml时 ,淋巴细胞活化明显。肠系膜淋巴结细胞的细胞因子 ,IFN γ和IL 1 0的产生水平显著增加。　 结论　淋巴细胞浓度 5×1 0 6 细胞/孔和刺激原浓度 1 0 μg/ml的条件为激活T淋巴细胞增殖和细胞因子产生的最适培养条件。华支睾吸虫感染大鼠的成虫分泌排泄抗原在体内可能刺激淋巴细胞增殖和细胞因子产生     

中华分支睾虫感染对兔肝胆汁成分影响

本文报告兔华支睾吸虫感染后肝胆汁中总胆红、素胆固醇、磷脂、胆酸之含量以及细菌性β-葡萄糖醛酸苷酶活性。结果显示华支睾吸虫感染可使细菌性β-葡萄糖醛酸苷酶活性升高,感染组为52.6±31.6u/100ml胆汁,对照组为12.5±20.5u/100ml胆汁,t检验有非常显著性差异(P<0.001)。而胆红素,胆固醇、磷脂、胆酸含量则变化不     

丰宫并殖吸虫感染诱导大鼠Th1/Th2免疫应答的偏移模式研究

目的明确丰宫并殖吸虫感染后宿主(SD大鼠)Th1/Th2免疫偏移模式。方法自丰宫并殖吸虫流行区采集溪蟹,分离丰宫并殖吸虫后尾蚴,采用腹壁皮下注射的方法建立丰宫并殖吸虫感染大鼠动物模型,分别在0、3、7、14、28、70 d处死大鼠,取血,分离血清,采用双抗体夹心ELISA法检测I型免疫反应(IL-1、TNF-α、INF-γ)和II型免疫反应(IL-4、IL-5、IL13)相关细胞因子,结合肺组织病变情况,分析丰宫并殖吸虫大鼠肺吸虫病的Th1/Th2免疫偏移模式。结果大鼠感染丰宫并殖吸虫后,血清Th1型细胞因子(IL-1、TNF-α、INF-γ)水平迅速上升,感染7 d左右达到高峰,随后呈逐渐下降趋势,其中感染3 d、7 d与0 d、14 d、28 d、70 d时比较[IL-1:(3、7 d) vs.(0、14、28、70 d)=(25.25±2.26、23.00±8.38) pg/ml vs.(17.34±2.76、15.89±4.44、10.34±2.90、10.82±6.05) pg/ml; IFN-γ:(3、7 d) vs.(0、14、28、70 d)=(279.58±51.43、276.29±54.64) pg/ml vs.(173.64±43.36、190.74±34.10、142.57±35.10、170.56±26.53) pg/ml; TNF-α:(3、7 d) vs.(0、14、28、70 d)=(49.39±8.03、54.78±13.64) pg/ml vs.(33.10±4.75、37.64±19.53、25.01±11.91、23.12±9.05) pg/ml],差异均有统计学意义(均P0.05)。Th2型细胞因子(IL-4、IL-5、IL-13)呈逐渐上升趋势,14 d或28 d时达到高峰,之后逐渐下降,70 d时下降至感染早期水平,其中14 d、28 d与0 d、3 d、7 d时比较[IL-4:(14、28 d) vs.(0、3、7、70 d)=(20.27±3.31、19.71±2.41) pg/ml vs.(10.77±2.58、9.90±3.62、12.92±3.65、11.72±2.42) pg/ml; IL-5:(14、28 d) vs.(0、3、7、70 d)=(18.68±2.46、19.53±2.65) pg/mL vs.(9.60±1.58、9.38±2.24、10.76±2.85、8.10±1.69) pg/ml; IL-13:(14、28 d) vs.(0、3、7、70 d)=(13.57±0.94、13.38±1.10) pg/ml vs.(6.00±1.33、7.09±1.18、8.68±2.03、7.12±0.90) pg/ml],差异均有统计学意义(均P0.05)。肺部特征与细胞因子水平变化规律相一致。结论在丰宫并殖吸虫感染大鼠,Th1型及Th2型免疫反应共同存在,综合作用于宿主。早期(3 d和7 d)以I型免疫反应为主,诱导机体迅速产生大量Th1型细胞因子(IL-1、TNF-α、INF-γ);至感染中后期(14 d和28 d),机体产生Th2型细胞因子(IL-4、IL-5、IL-13),II型免疫反应逐渐取代I型免疫反应而占主导地位;进入慢性感染阶段后(70 d),两种免疫反应达到动态平衡。上述细胞因子的变化规律与肺组织大体观察特征吻合。     

调节性T细胞和辅助性T细胞17的平衡变化在慢性乙型肝炎病毒感染中的作用

目的 研究调节性T细胞(Treg)和辅助性T细胞17(Th17)的平衡变化在慢性HBV感染中的作用.方法 应用ELISA法和流式细胞术分别对34例慢性乙型肝炎(CHB)患者、20例HBV相关慢加急性肝功能衰竭(ACHBLF)患者和20例健康对照者外周血中Treg和Th17分化相关细胞因子及外周血Th17和Treg细胞水平进行检测.计数资料应用Fisher's确切概率法,计量资料应用单因素方差分析和Tukey's多重比较检验.结果 ACHBLF组Th17分化相关因子IL-1β为(3.97±2.85) pg/mL,IL-6为(12.75±8.87)pg/mL,IL-21为(360.0±335.7)pg/mL,比健康对照组的IL-1β[(1.87±0.94)pg/mL,q=4.559,P＜0.01)、IL-6[(5.28±o.72)pg/mL,q=7.309,P＜0.01)和IL-21[(46.68±20.17) pg/mL,q=6.946,P＜0.01)均明显上调.ACHBLF组外周血Th17细胞比例明显高于健康对照组(q=3.972,P＜0.05).与健康对照组和ACHBLF组相比,CHB组Treg细胞分化相关因子TGF-β明显升高(q=4.536、5.323,均P＜0.01),外周血Treg比例也明显升高.ACHBLF组Th17细胞效应因子IL-17A水平最高,ACHBLF患者外周血Th17细胞比例与血清TBil水平呈正相关(γ=0.74,P＜0.01).结论 慢性HBV感染中,宿主免疫存在Th17和Treg失衡,ACHBLF组以Th17细胞活动为主,CHB组以Treg细胞活动为主.     

CVB3m重复感染致小鼠血清TGF-β1与心肌TIMP-1变化及心脏胶原蛋白表达

目的 研究重复感染致病毒性心肌炎小鼠血清转化生长因子-β1(TGF-β1)与心肌基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMp-1)及胶原表达相关性.方法 连续4次经腹腔注射接种柯萨奇病毒B3m(CVB3m)感染小鼠,分别于末次感染后10、20、30、40、50、60 d处死实验动物,ELISA法检查血清中TGF-β1水平;Western Blot法测定心肌中TIMP-1;氯胺T氧化法检测心脏胶原蛋白.结果 血清中TGF-β1在末次感染后10 d即见增加(37.4±12.6)ng/L;30 d时实验组[(54.5±15.4)ng/L]明显高于对照组[(37.4±16.8)ng/L],P＜0.05;60 d时实验组[(123.6±28.5)ng/L]仍明显高于对照组[(38.8±13.5)ng/L],P＜0.05.心肌中TIMP-1则在末次感染后40 d升高(484±52);60 d时实验组(483±47)仍显著高于对照组(417±48),P＜0.05.心肌中胶原蛋白水平在末次感染后30 d升高(11.84±1.94)g/kg;60 d时实验组[(18.56±3.51)g/kg]仍明显高于对照组[(9.88±0.84)g/kg],P＜0.05.结论 CVB3m重复感染可导致血清中TGF-β1持续升高,增加的TGF-β1与TIMP-1的高表达有关,TGF-β1和TIMP-1都与病毒重复感染导致的心脏胶原异常增殖有密切关系.     

有氧运动对乳腺癌SD大鼠癌因性疲乏及荷瘤生长的影响

目的探讨有氧运动对乳腺癌SD大鼠癌因性疲乏及荷瘤生长的影响。方法 60只健康雌性SD大鼠随机分为对照组与研究组,均30例。常规饲养1 w后,两组均接种4T1大鼠乳腺癌细胞,给予研究组有氧运动,仅给予对照组常规饲养。8 w后,比较两组大鼠体重、鼠尾不动时间、血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-1β水平及荷瘤组织中转化生长因子(TGF)-β、IL-10表达情况及瘤重、瘤体积。结果与干预前相比,干预后两组大鼠体重均明显下降,鼠尾不动时间明显上升,且研究组上述观察指标均优于对照组(P<0.05);研究组血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平及TGF-β、IL-10阳性率、瘤重、瘤体积分别为(90.56±8.51)pg/ml、(134.75±10.36)pg/ml、(408.24±36.57)pg/ml、36.67%(11/30)、33.33%(10/30)、(3.75±1.53)g、(3 157.30±218.26)mm~3,均优于对照组[(60.36±4.25)pg/ml、(198.52±18.56)pg/ml、(685.25±52.24)pg/ml、66.67%(20/30)、70.00%(21/30)、(4.82±1.46)g、(3 589.36±223.01)mm~3](P<0.05)。结论采用有氧运动治疗乳腺癌SD大鼠,可缓解大鼠癌因性疲乏,其作用机制可能与上调血清IL-6、下调TNF-α及IL-1β有关;同时,有氧运动有效抑制乳腺癌SD大鼠荷瘤生长情况,其作用机制可能与下调荷瘤组织中TGF-β、IL-10阳性表达有关。     

华支睾吸虫PPMPⅠ型抗原重组Cs2蛋白免疫诊断价值的评价

目的应用华支睾吸虫PPMPⅠ型抗原重组Cs2蛋白(rCs2)建立2种华支睾吸虫病免疫学检测方法,并进行初步评价。方法以可溶性rCs2作为诊断抗原,建立间接ELISA检测方法,并研制胶体金免疫层析检测(GICA)动力流体型试条,检测血清中的特异性抗体。采用ELISA法和GICA试条共检测35例华支睾吸虫虫卵粪检阳性患者、15例日本血吸虫病患者、15例卫氏并殖吸虫病患者和13例猪囊尾蚴病患者的血清,以及33份健康人血清。为进一步评价诊断价值,8只新西兰兔各感染600个华支睾吸虫囊蚴,随机均分为感染组和治疗组,感染第56天,治疗组各兔给予吡喹酮治疗[150 mg/(kg.d)×2 d],用ELISA法和GICA法检测两组兔0~44周抗rCs2特异性抗体的消长。结果 ELISA法的敏感性为71.4%(25/35),特异性为93.4%(71/76),总符合率为86.5%(96/111),与日本血吸虫病、卫氏并殖吸虫病和猪囊尾蚴病患者血清的交叉反应阳性率分别为1/15、1/15和1/13。GICA试条检测法的敏感性为85.7%(30/35),特异性为92.1%(70/76),总符合率为90.1%(100/111)。经EL...     

同一鱼塘中3种鱼华支睾吸虫囊蚴感染度的调查

珠江三角洲是华支睾吸虫 (Clonorchis sinensis)的主要分布区。虽然随着人们防病意识的增强 ,使许多地区塘鱼的华支睾吸虫的感染有所降低 ,但由于当地人群独特的饮食习惯使华支睾吸虫的感染仍然普遍存在 [1 ]。本实验对广东顺德市杏坛镇同一鱼塘中的 3种鱼进行了华支睾吸虫囊蚴感染度的调查 ,以了解不同鱼类对华支睾吸虫囊蚴的感染情况。1　材料和方法1.1　鱼的来源　 3种鱼均来源于广东省顺德市杏坛镇某同一鱼塘。选择其中的草鱼 (Ctenopharygodon idellus) 5 0条 (平均体重 2 .8g/条 )、鳙鱼 (Aristichthys nobilis) 5 0条 (平均体重 9.…     

华支睾吸虫代谢抗原用于免疫诊断的试验研究

有人报道用华支睾吸虫成虫代谢抗原检测兔体内抗体取得了较满意的结果。本文应用了无血清1640培养液内活虫培养的代谢产物作为抗原与华支睾吸虫全虫抗原进行比较,评价代谢抗原在检测华支睾吸虫抗体中的价值。一、材料与方法(一)抗原制备1.代谢抗原:自人工感染华支睾吸虫囊蚴的猫肝脏中无菌取出华支睾吸虫成虫,用含双抗的无菌生理盐水漂洗后,分别装于100ml 含有1640培养液的三角烧     

华支睾吸虫cDNA文库的构建

目的　构建华支睾吸虫cDNA文库。方法　采集华支睾吸虫阳性鱼 ,分离囊蚴 ,感染实验动物兔 ,解剖兔收集华支睾吸虫成虫虫体。应用“一步法”提取华支睾吸虫总RNA ;经过mRNA纯化、cDNA合成 ,以PcDNA3(Amp +)质粒为载体构建文库。挑取 2 0个克隆进行扩增 ,选择 9个克隆进行DNA序列测定。序列结果与GenBank中相关基因进行比对。结果　获得含有 9 7× 10 5个重组子库容量的华支睾吸虫cDNA文库。其中PC6号克隆基因序列与华支睾吸虫半胱氨酸蛋白酶序列具有 93%的同源性。结论　已构建成华支睾吸虫cDNA文库。     

系统性红斑狼疮患者血清白细胞介素-1家族及白细胞介素-34水平

目的检测系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者血清白细胞介素(interleukin,IL)-1家族和IL-34水平,探讨其在SLE中的作用。方法采用蛋白芯片技术测定6例SLE患者及6名正常对照者血清IL-1家族成员水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定67例SLE组及86名正常对照组血清IL-34水平。结果与正常对照组相比,SLE组血清IL-1家族成员中IL-18和IL-36β水平升高[(21 405.00±3 098.96)pgml vs.(10 096.00±1 162.09)pgml,(275.50±78.75)pgml vs.(144.83±45.37)pgml,均P0.05];IL-36Ra水平降低[(902.00±361.29)pgml vs.(2 916.00±1489.56)pgml,P0.05];另外,SLE组血清IL-34水平明显高于正常对照组[(100.36±70.38)pgml vs.(41.90±6.89)pgml,P0.000 1],差异均有统计学意义。结论 SLE患者血清IL-18、IL-36β、IL-34水平升高,IL-36Ra水平降低,参与SLE发病。     

幼年特发性关节炎患儿基质金属蛋白酶及细胞因子的改变及意义

目的 探讨幼年特发性关节炎(JIA)多关节型患儿血清及关节液基质金属蛋白酶(MMP)-I、MMP-3、金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-1、白细胞介素(IL)-1、肿瘤坏死因子(TNF)-α,转化生长因子(TGF)-β水平的变化及临床意义.方法 酶联免疫吸附试验(ELISA)检测32例多关节型JIA患儿及28例对照组(外伤性关节炎患儿)血清及关节液中MMP-1、MMP-3、TIMP-1、IL-1、TNF-α、TGF-β的水平.同时检测血白细胞计数、C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)及类风湿因子(RF)水平.统计学方法采用两个独立样本的t检验及Pearson直线相关分析.结果 ①JIA组血清MMP-1、MMP-3、IL-1、TNF-α水平分别为(158±67) ng/ml、(212±89) ng/ml、(39±19) pg/ml、(26±10) pg/ml,明显高于对照组(P均＜0.05),MMP-3/TIMP-1为0.86±0.32,亦较对照组升高(P＜0.05),TIMP-1、TGF-β水平分别为(248±88)、(17±9)ng/ml,明显低于对照组(P均＜0.05);血清MMP-3、MMP-3/TlMP-1与白细胞计数、CRP、ESR呈正相关(P均＜0.05).②JIA组关节液MMP-1、MMP-3、IL-1、TNF-α水平分别为(216±78) ng/ml、(766±291) ng/ml、(56±21) pg/ml、(36±14) pg/ml,明显高于对照组(P均＜0.05),MMP-3/TIMP-1为2.68±0.89,亦较对照组明显升高(P＜0.05),TIMP-1、TGF-β水平分别为(286±88)、(12±4) ng/ml,明显低于对照组(P均＜0.05).③JIA组关节液MMP-1、MMP-3、TIMP-1、IL-1、TNF-α水平明显高于其血清水平(P均＜0.05),TGF-β水平则明显低于其血清水平(P＜0.05).结论 血清及关节液中MMP-1、MMP-3、IL-1、TNF-α水平升高,TIMP-1永平降低,参与了JIA多关节型的发病过程,TGF-β水平降低,在其发病中可能起保护作用.血清MMP-3/ⅡMP-1比值与JIA炎性指标呈正相关,有助于判断病情活动性.     

免疫细胞因子在2型糖尿病周围神经病变大鼠血清中的表达

目的观察免疫细胞因子在糖尿病周围神经病变(DPN)模型大鼠血清中的表达。方法实验大鼠分为正常对照组、糖尿病组和DPN组,每组各12只,腹腔注射STZ制备糖尿病大鼠模型。采用特殊染色及透射电镜法观察各组坐骨神经的组织病理学改变。ELISA法检测各组血清TNF-α、IL-1β及IL-6的表达,并分析其与DPN的相关性。结果组织染色及电镜结果显示,DPN大鼠组织病理学表现符合DPN表现。DPN组TNF-α[(1847.25±289.43)pg/ml]和IL-1β[(171.13±54.98)pg/ml]表达高于糖尿病组[(1430.58±255.56),(143.23±47.05)pg/ml,(P0.05)],而IL-6[(989.45±200.48)pg/ml]表达水平与糖尿病组[(914.23±165.45)pg/ml]比较差异无统计学意义(P0.05)。Pearson相关性分析发现,神经传导速度(NCV)与TNF-α呈直线负相关(r=—0.85,P=0.001)。结论细胞因子TNF-α及IL-1β在DPN大鼠血清中表达升高,且TNF-α是DPN发病的重要危险因素。     

慢性心力衰竭患者血浆BNP、IL-27水平及其临床意义

目的探讨血浆脑钠肽(BNP)、白介素-27(IL-27)的水平变化在慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)发生发展中的临床意义。方法选取50例CHF患者作为观察组,50例健康人作对照组。采用酶联免疫吸附法检测血浆中BNP、IL-27水平变化,观察不同程度CHF患者左心室射血分数(LVEF)与血浆BNP、IL-27的关系。结果观察组血浆BNP的表达水平[(512.42±324.43)pg/ml]明显高于对照组[(30.50±20.30)pg/ml](P0.05),血浆IL-27表达水平[(0.58±0.21)pg/ml]低于对照组[(0.89±0.43)pg/ml],且BNP与IL-27的表达水平呈负相关(r=-0.54,P0.05)。血浆BNP水平从心功能Ⅱ级[(756.45±184.82)pg/ml]、心功能Ⅲ级[(1090.78±220.32)pg/ml]、心功能Ⅳ级[(2130.26±265.89)pg/ml]依次上升,差异有统计学意义(P0.05);IL-27表达水平从心功能Ⅱ级[(0.51±0.18)pg/ml]、心功能Ⅲ级[(0.32±0.15)pg/ml]、心功能Ⅳ级[(0.18±0.10)pg/ml]依次降低,差异有统计学意义(P0.05);LVEF与血浆BNP、IL-27相关性分别为(r=-0.51,r=0.61,P0.05)。结论血浆BNP、IL-27水平变化均可反映CHF程度,而BNP表达的更为敏感,且两者之间有一定影响。