低氧诱导星形胶质细胞血管内皮生长因子表达

目的探讨低氧环境对体外培养的胎鼠大脑星形胶质细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法采用孕16d的SD胎鼠大脑组织培养星形胶质细胞,实验分为正常组(正常培养,5%CO_2,95%空气,37℃,绝对湿度)和低氧组(低氧培养,5%CO_2,2%O_2,93%N_2,37℃、绝对湿度)。MTT实验观察细胞经2、4、6、8、10h低氧培养后细胞增殖情况,免疫荧光染色观察细胞经4、8、12、24、32h低氧培养后VEGF表达的变化。结果低氧组胶质细胞增殖除6h与正常组无差异外,2、4、8、10h较正常组均明显增高,差异有统计学意义(P0.05);低氧组8、12h VEGF表达明显高于正常组,24、32h VFGF表达明显低于正常组(P0.05)。结论低氧培养短期可促进星形胶质细胞增殖,VEGF表达升高,长期低氧可至星形胶质细胞损伤,VEGF表达下降。     

星形胶质细胞与阿尔茨海默病

阿尔茨海默病是老年人的常见病和多发病,它的发生,发展与包括星形胶质细胞在内的多种因素有关。近年来的研究发现,星形胶质细胞在阿尔茨海默病发病的早期被激活,增生并释放多种炎症细胞因子（IL－1,IL－6,INF等）和促生长因子S100以及诱导iNOS表达,在脑内开成反复的神经免疫反应和病理改变,导致神经毒性的β－淀粉样蛋白沉积加速,神经纤维缠结形成,神经元损伤及丢失。     

星形胶质细胞诱导维持血脑屏障特性

血脑屏障的结构、发生和诱导维持对神经系统的生理病理研究有重要意义。近年来对星形胶质细胞通过其分泌产物近距离参与对血脑屏障完整性的诱导维持的研究受到重视，对于指导临床实践具有重要作用。     

小鼠脑缺血后星形胶质细胞和小胶质细胞的活化规律比较

目的比较小鼠脑缺血后星形胶质细胞和小胶质细胞的活化规律。方法采用改良线栓法制备小鼠大脑中动脉阻塞再灌注局灶性脑缺血损伤模型。昆明小鼠48只,随机分为假手术组24只和脑缺血组24只。脑缺血组缺血3h后再分为再灌注1、3、7和14d,每个时间点6只。再灌注结束后,取脑作HE染色观察脑组织病理改变,免疫组织化学染色法检测星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和小胶质细胞离子钙接头蛋白1(Iba1)的表达。结果与缺血再灌注1d比较,脑缺血组缺血再灌注3、7、14d皮质缺血周边区的GFAP阳性产物显著增加[(699.22±160.82)μm2/HP,(1817.97±290.88)μm2/HP,(2831.64±481.38)μm2/HP vs(33.13±7.45)μm2/HP,P0.01]。脑缺血组缺血再灌注1d皮质缺血周边区出现以"分支状"为主的Iba1阳性小胶质细胞,3、7d活化的小胶质细胞显著增多并表现为"灌木样"细胞,14d后活化小胶质细胞呈现"阿米巴样"细胞。结论脑缺血再灌注损伤时,小胶质细胞和星形胶质细胞均出现活化,但小胶质细胞活化出现得更早;星形胶质细胞活化只出现在缺血周边区,而活化的小胶质细胞可从缺血周边区向缺血中央区迁移。     

成年大鼠神经元和星形胶质细胞细胞周期蛋白依赖激酶的表达

目的 研究成年大鼠细胞周期蛋白依赖激酶（CDK）在神经元和星型胶质细胞的表达.方法 应用免疫荧光和激光扫描共聚焦显微镜观察成年大鼠生理状态下大脑皮层或海马CA1区神经元和星型胶质细胞CDK1、CDK2、CDK4的表达.结果 成年大鼠大脑皮层和海马CA1区神经元的细胞核和细胞浆均有CDK1、CDK2和CDK4表达,以胞核为主;星形胶质细胞也有CDK1、CDK2和CDK4的表达,但表达细胞数目较少,且表达这些指标的星形胶质细胞多聚集在海马CA1区.结论 成年大鼠大脑皮层和海马区的神经元和星形胶质细胞均表达CDK,而神经元的CDK表达较星形胶质细胞更为普遍.     

大鼠星形胶质细胞Toll样受体表达谱

目的探索Toll样受体4(TLR4)表达定位,揭示星形胶质细胞(AS)参与阿尔茨海默病(AD)炎症机制的可能分子机制。方法取新生1³ d的SD大鼠皮层进行星形胶质细胞的培养,传代纯化。细胞免疫荧光双标法鉴定传代后的AS及其纯度。实时PCR检测正常AS中TLRs表达谱。细胞免疫荧光双标法鉴定TLR4在AS的表达定位。结果传代培养可以纯化AS;AS表达TLR13 d的SD大鼠皮层进行星形胶质细胞的培养,传代纯化。细胞免疫荧光双标法鉴定传代后的AS及其纯度。实时PCR检测正常AS中TLRs表达谱。细胞免疫荧光双标法鉴定TLR4在AS的表达定位。结果传代培养可以纯化AS;AS表达TLR1¹1,但不同的TLRs表达量不同,其中TLR4表达水平相对较高,并且TLR4表达定位于胞膜和胞质。结论 AS参与AD炎症机制的可能分子机制。     

星形胶质细胞诱导维持血脑屏障特性

血脑屏障的结构、发生和诱导维持对这神经系统的生理病理研究有重要意义。近年来对星形胶质细胞通过其分泌产物近距离参与对血脑屏障完整性的诱导维持的研究受到重现，对于指导临床实践具有重要作用。     

脑缺血时星形胶质细胞与谷氨酸的相互作用

星形胶质细胞是中枢神经系统的一大类细胞 ,具有重要的生理功能。脑缺血时神经细胞外兴奋性氨基酸 ,特别是谷氨酸浓度大大增高 ,而谷氨酸的兴奋毒性在神经元死亡中起重要作用。星形胶质细胞与谷氨酸的相互作用可保护神经元 ,从而减轻缺血性脑损伤。     

自身免疫性胶质纤维酸性蛋白星形胶质细胞病研究进展

<正>胶质纤维酸性蛋白免疫球蛋白G(glial fibrillary acidic protein-IgG,GFAP-IgG)存在于多种神经免疫疾病中,例如自身免疫性脑炎(autoimmune encephalitis,AE)、多发性硬化(multiple sclerosis,MS)、视神经脊髓炎谱系疾病(neuromyelitis optica spectrum disorders,NMOSD)等。部分病毒性脑炎、化脓性脑炎、肿瘤患者也可在血清及脑脊液中检出GFAP-IgG^[1-2]。随后的一些研究发现,GFAP-IgG阳性的患者在临床中具有一定的独特性。因此,2016年Fang等[3]根据这类疾病的脑膜脑脊髓炎样表现、病程可反复发作、易合并肿瘤、     

促红细胞生成素对星形胶质细胞损伤的保护作用

目的探讨促红细胞生成素（EPO）对体外培养的星形胶质细胞的作用。方法采用出生3 d内的SD大鼠大脑制成细胞悬液后,在含15%胎牛血清的DMEM培养液中培养,通过摇床和逐渐传代纯化星形胶质细胞,分为正常组、正常E组（正常细胞＋EPO 10 U/L）、损伤组（缺氧3 h）、损伤E组（损伤细胞＋EPO 10 U/L）。用免疫荧光技术鉴定星形胶质细胞,MTT法检测细胞活性和凋亡情况,PCR技术测定细胞纤维酸性蛋白（GFAP）。结果星形胶质细胞摇床后传至第3代,经鉴定其星形胶质细胞纯度达95%以上;缺营养3 h后部分细胞形态变圆甚至死亡,漂浮在正常细胞表面;正常E组和损伤E组细胞在分别加入EPO 3 d后,损伤E组细胞活性与GFAP表达均明显升高,正常E组则没有明显变化。结论EPO对缺营养损伤的星形胶质细胞有显著的保护作用,而对正常星形胶质细胞无保护作用。     

血清血管内皮生长因子及可溶性血管内皮生长因子受体1在系统性红斑狼疮患者中的表达及其意义

目的 研究血清中血管内皮生长因子(VEGF)及可溶性血管内皮生长因子受体1(sFlt-1)在活动期系统性红斑狼疮(SLE)及不同肾脏病理类型的狼疮肾炎(LN)患者中表达的意义. 方法 采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)对60例SLE患者及30名健康人血清中VEGF及sFlt-1的水平同时进行检测,结合临床资料及肾脏病理进行相关分析. 结果 活动期SLE患者血清VEGF及sFlt-1水平均明显升高;血清中VEGF/sFlt-1的比值健康对照组较活动期SLE、非活动期SLE及LN组患者降低(P＜0.01),Ⅴ型LN组该比值较Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型LN组升高(P＜0.05);血清sFlt-1的浓度与尿蛋白呈正相关(rs=0.6244,P＜0.01),血清VEGF的浓度与尿蛋白无明显相关(rs=0.1807,P＞0.05);血清sFlt-1的浓度与ESR正相关(rs=0.4235,P＜0.01),血清VEGF的浓度与ESR无明显相关(rs=0.0532,P＞0.05);血清VEGF及sFlt-1浓度与SLE疾病活动指数(SLEDAI)均呈正相关(rs=0.5046,P＜0.01,rs=0.5152,P＜0.01);血清VEGF浓度与肾组织活动指数(RAI)呈正相父(r=0.3386,P＜0.05),血清sFlt-1浓度与RAI无明显相关(rs=0.0240,P＞0.05);SLE患者中VEGF、sFlt-1水平与血压、血肌酐、尿素氮、C3、C4、C反应蛋白(CRP)无明显相关. 结论 血清VEGF及sFlt-1的水平可作为SLE病情活动评价指标,VEGF的高表达可能与增殖性肾小球病变相关,sFlt-1的表达与蛋白尿关系密切.     

脑源性神经营养因子在多发性骨髓瘤患者血浆中的表达

目的 :研究多发性骨髓瘤 (MM )患者血浆中脑源性神经营养因子 (BDNF)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达情况及与相应临床检测指标的关系 ,初步探讨BDNF在多发性骨髓瘤的发生与发展中的潜在作用。方法 :用酶联免疫吸附试验 (ELISA)测定MM患者与健康体检者血浆BDNF、VEGF的浓度 ,同时观察MM患者血常规、肾功能、电解质、影像学等指标。结果 :患者血浆BDNF浓度为 (4 .2 2± 0 .6 4 ) μg/L ,与健康体检者(2 .0 3± 0 .38) μg/L比较 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ;患者血浆VEGF浓度为 (79.35± 13.2 5 )ng/L ,与健康体检者 (34.4 1± 1.78)ng/L比较 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 1)。BDNF与VEGF水平间存在着相关性 (r =0 .4 30 ,P =0 .0 2 5 )。结论 :MM患者血浆BDNF和VEGF显著增高 ,BDNF可能是继VEGF后又一促进血管增殖活性的细胞因子     

激活素A异常表达与大肠癌血管生成的关系

目的探讨激活素A(ACTA)的表达与大肠癌血管生成的关系。方法应用免疫组化法检测56例大肠癌组织及癌旁组织中ACTA及血管内皮生长因子(VEGF)的表达及微血管密度(MVD)。结果56例大肠癌组织中ACTA阳性表达率为45.2%,明显高于癌旁组织的12.3%(P<0.01)。ACTA蛋白的表达在大肠癌淋巴结转移组高于无转移组(60.9%vs41.2%,P<0.01),DukesD期高于DukesA、B期,差异有显著性(分别为66.7%vs33.3%,66.7%vs44.4%,P均<0.01)。ACTA表达阳性组MVD值为84.0±10.8,明显高于阴性组的52.0±9.7(P<0.01)。大肠癌组织中ACTA的表达与VEGF的表达呈显著性正相关(r=0.712,P<0.01)。VEGF蛋白表达与MVD亦呈正相关(r=0.747,P<0.01)。结论ACTA与大肠癌的血管生成有关,可作为判断大肠癌侵袭和转移潜能的生物学指标。     

VEGF/VEGFR2信号转导通路在抗肿瘤血管生成中的作用

以肿瘤血管内皮细胞为靶点抑制肿瘤血管生成从而阻断肿瘤血液供应已成为当前抗肿瘤生长和转移的研究热点.其中,VEGF/VEGFR2信号转导通路在肿瘤周围血管生成起主要作用.阻断该信号通路,能够抑制实体瘤的生长和转移.本文就VEGF/VEGFR2信号通路在抗肿瘤生长和转移中的研究进展作一概述.     

NSCLC患者血清EGFR、VEGFA、VEGFR-2术前后变化及意义

目的探讨NSCLC患者手术前后血清中EGFR、VEGFA、VEGFR-2的变化及三者之间的关系。方法用ELISA方法检测38例NSCLC患者手术前后血清中EGFR、VEGFA、VEGFR-2的水平。结果 1.术前血清EGFR、VEGF-A、VEGFR-2水平与NSCLC患者的临床病理特征无相关性（P〉0.05）。2.术后一天血清EGFR、VEGF-A、VEGFR-2水平高于术前水平。3.术前EGFR血清水平与VEGFR-2呈正相关,与VEGFA无相关性;术后EGFR水平与VEGFA、VEGFR-2之间均无相关性。结论 NSCLC患者术前血清EGFR、VEGF-A、VEGFR-2水平不能成为临床病理特征的分子标志。术前、后EGFR、VEGF-A、VEGFR-2的表达受不同途径的调节。     

碘缺乏致甲状腺功能减退症大鼠肾脏损害的病理特点分析

目的 观察大鼠甲状腺功能减退时肾脏病理形态及血管内皮生长因子(VEGF)的改变.方法 将大鼠随机(随机数字表法)分为正常组及实验组,实验组随机分为模型组、左旋甲状腺素(L-T4)组,实验组建立碘缺乏甲减肾损害大鼠模型,21 d成模时及用药56 d后测定甲状腺功能(TT3、TT4及TSH)、血肌酐、血尿素氮(BUN)水平;光镜观察肾脏形态,免疫组化检测VEGF表达水平.结果 (1)用药56 d后与正常对照组相比L-T4组及模型组BUN均增高[(5.55±0.50,5.80±0.66对5.00±0.24)mmol/L,P＜0.05],血肌酐也均增高[(26.83±0.75,27.0±3.41对22.5±2.07)μmol/L,P＜0.05],L-T4组略低于模型组,但无统计学意义.(2)PAS染色比较:21d成模时,模型组肾小球部分区域系膜细胞增生,系膜区扩大,系膜基质增多.用药56 d后模型组整个肾小球轻至中度系膜增生,增生的系膜细胞连成片,毛细血管开放数量减少,可见明显扩张的毛细血管.L-T4组系膜增生较模型组明显减轻,毛细血管开放数量增多,仍可见毛细血管扩张.(3)肾脏VEGF蛋白表达:21 d成模时模型组VEGF积分光密度(IODA)明显高于正常组(44.64±14.99对29.05±9.14,P＜0.01).用药56 d时与正常组比各组IODA均无明显差异,L-T4组略高于模型组,但无统计学意义.结论 碘缺乏致甲减肾损害病理改变特点为系膜增生,肾毛细血管床减少和毛细血管扩张.VEGF在甲减肾损害的不同病程中表达不同,早期升高,后期下降.L-T4治疗未能逆转甲减肾损害大鼠的肾功能异常.     

Significance of vascular endothelial growth factor (VEGFA)-1154 G/A gene polymorphism (rs1570360) in rheumatoid arthritis patients

Aim of the workTo evaluate the association of the vascular endothelial growth factor (VEGF) 1154G/A single nucleotide polymorphism (SNP) with the risk of RA and its possible relation to different disease parameters.Patients and methodsFifty RA patients and 50 matched healthy controls were enrolled in the study. Disease activity score (DAS28) was assessed. VEGF 1154G/A was measured byreal time polymerized chain reaction (RT-PCR) for patients and controls.ResultsThe patients mean age was 44.2 ± 12.1 years (25–64 years) and they were 41 females and 9 males with a disease duration of 5 ± 3.6 years and DAS28 of 5.88 ± 1.06. None of the patients were in remission or had low disease activity. The VEGF-1154 AA genotype and A allele were significantly higher in controls (54%, 56%) compared to the patients (10%, 23%)(p < 0.001). The GG, GA genotypes and G allele tended to be higher in patients (64%, 26% and 77%) compared to the control (42%, 4% and 44% respectively (p < 0.001). As regards anti-cyclic citrullinated peptide (anti-CCP) and rheumatoid factor (RF), AA genotype was significantly higher in seronegative (93.1% and 96.5%) patients compared to seropositive (6.9% and 3.5%; p = 0.002 and p = 0.005 respectively). There was no significant difference in the genotype according to gender (p = 0.45) or DAS28 (p = 0.78). No significant association was found between the SNP with the age (p = 0.48), disease duration (p = 0.58), ESR (p = 0.97) and CRP (p = 1).ConclusionsThe minor A allele of VEGFA1154G/A might act as a protective factor against RA and might also be related to a better disease prognosis.     

VEGF-D expression correlates with colorectal cancer aggressiveness and is downregulated by cetuximab

AIM： To gain mechanistic insights into the role played by epidermal growth factor receptor （EGFR） in the regulation of vascular endothelial growth factors （VEGFs） in colorectal cancer （CRC）. METHODS： The impact of high-level expression of the growth factor receptors EGFR and VEGF receptor （VEGFR）3 and the VEGFR3 ligands VEGF-C and VEGF-D on disease progression and prognosis in human CRC was investigated in 108 patients using immu- nohistochemistry. Furthermore, the expression of the lymphangiogenic factors in response to the modulation of EGFR signalling by the EGFR-targeted monoclonal antibody cetuximab was investigated at the mRNA and protein level in human SW480 and SW620 CRC cell lines and a mouse xenograft model. RESULTS： Human CRC specimens and cell lines displayed EGFR, VEGF-C and VEGF-D expression with varying intensities. VEGF-C expression was associated with histological grade. Strong expression of VEGF-D was significantly associated with lymph node metas- tases and linked to a trend for decreased survival in lymph node-positive patients. EGFR blockade with cetuximab resulted in a significant decrease of VEGF-D expression in vitro and in vivo. CONCLUSION： In conclusion, the expression of VEGF-D in colorectal tumours is significantly associated with lymphatic involvement in CRC patients and such expression might be blocked effectively by cetuximab.     

非小细胞肺癌患者血清血管内皮生长因子水平的变化及与临床的关系

目的研究非小细胞肺癌患者血清血管内皮生长因子(VEGF)水平的变化及与临床分期和病理类型的关系。方法三组研究对象为非小细胞肺癌组患者96例,支气管、肺良性病变组40例,健康对照组30例,采用ELISA法进行血清VEGF的检测。结果非小细胞肺癌组的血清VEGF水平显著高于其它两组(P<0.01);非小细胞肺癌患者血清VEGF水平随临床分期的递增而逐步升高,各期间比较差异有显著性(P<0.05);不同病理类型非小细胞肺癌患者血清的VEGF水平之间无显著性差异(P>0.05)。结论非小细胞肺癌患者的血清VEGF水平升高和随临床分期递增而明显升高的改变对非小细胞肺癌的临床分期和预后产生了重要影响,而这种改变并不受病理类型的影响,有助于我们对非小细胞肺癌患者的治疗效果和预后进行判断。